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2020—2023年西安地区猫病毒性鼻气管炎流行病学调查
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作者 郝媛婕 杨丁凡 +2 位作者 陈冰洁 张欣珂 杜涛峰 《动物医学进展》 北大核心 2025年第4期136-140,共5页
猫病毒性鼻气管炎(FVR)是由猫疱疹病毒1型(FHV-1)感染引起的一种急性、高度接触性呼吸道传染性疾病。论文对2020年6月至2023年6月期间在西北农林科大西安动物医院进行猫疱疹病毒抗体检测的112只猫的数据和211例猫上呼吸道疾病病例进行分... 猫病毒性鼻气管炎(FVR)是由猫疱疹病毒1型(FHV-1)感染引起的一种急性、高度接触性呼吸道传染性疾病。论文对2020年6月至2023年6月期间在西北农林科大西安动物医院进行猫疱疹病毒抗体检测的112只猫的数据和211例猫上呼吸道疾病病例进行分析,在抗体检测数据中,抗体水平为低、中、高的猫的数量分别为59只、37只和16只,分别占比为52.68%、33.04%和14.29%。总体抗体水平较低,进一步分析免疫完全猫的抗体水平优于免疫未完全猫。FHV-1抗原和核酸检测在该动物医院总检出率为20.38%,其发病随时间波动,但不具有季节性,与年龄、品种具有相关性,与性别无相关性。论文为了解西安地区猫病毒性性鼻气管炎的发病情况以及该病的防控提供了参考依据。 展开更多
关键词 猫病毒性鼻气管炎 猫疱疹病毒 抗体水平 流行病学调查
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经典型和新型鹅呼肠孤病毒的双重RT-qPCR检测方法的建立和应用
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作者 尹政浩 魏无缺 +5 位作者 梁昭平 李雨泽 徐杭 陆泳锟 梅堃 黄淑坚 《广东畜牧兽医科技》 2025年第3期96-104,共9页
鹅呼肠孤病毒(Goose reovirus, GRV)包括经典型(GRV)和新型鹅呼肠孤病毒(Novel Goose reovirus, NGRV),两者在流行病学特征和病毒基因序列上存在差异。目前针对这两种类型病毒的敏感、特异的检测方法尚未完善,使得准确诊断和及时干预变... 鹅呼肠孤病毒(Goose reovirus, GRV)包括经典型(GRV)和新型鹅呼肠孤病毒(Novel Goose reovirus, NGRV),两者在流行病学特征和病毒基因序列上存在差异。目前针对这两种类型病毒的敏感、特异的检测方法尚未完善,使得准确诊断和及时干预变得十分困难。为了区分GRV和NGRV,建立了一种基于染料法(SYBR Green I)的双重RT-qPCR检测方法。结果显示:该方法通过熔解曲线可区分GRV(79.5℃)和NGRV(86.5℃),对常见的水禽流行疫病均未出现扩增,最低检出为6.466×10^(1)拷贝/μLGRV和4.979×10^(1)拷贝/μLNGRV,组内与组间变异系数均小于0.55%。结果表明,这个研究所建立基于染料法的双重RT-qPCR检测方法可以快速准确地确定感染鹅群中不同型的GRV,为疾病的早期诊断、流行病学监测和有效防控提供支持。 展开更多
关键词 鹅呼肠孤病毒 GRV和NGRV 染料法 RT-qRCR 熔解曲线
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血清4型禽腺病毒W株的分离鉴定和全基因组序列分析 被引量:12
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作者 赵玉杰 刘建勋 +5 位作者 陈田田 王赛楠 何春辉 陈盼盼 刘琳 李新生 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第7期2059-2068,共10页
为了解血清4型禽腺病毒(fowl adenovirus genotype 4,FAdV-4)W株全基因序列、结构特征及遗传变异情况,本试验采集发病鸡肝脏和肾脏进行PCR鉴定、SPF鸡胚和鸡胚肝细胞分离、电镜观察证明该病毒为FAdV-4,TCID50为10-7.2/0.1 mL;电镜观察可... 为了解血清4型禽腺病毒(fowl adenovirus genotype 4,FAdV-4)W株全基因序列、结构特征及遗传变异情况,本试验采集发病鸡肝脏和肾脏进行PCR鉴定、SPF鸡胚和鸡胚肝细胞分离、电镜观察证明该病毒为FAdV-4,TCID50为10-7.2/0.1 mL;电镜观察可见70 nm左右的二十面体无囊膜病毒颗粒;经绒毛尿囊膜途径接种10日龄SPF鸡胚后能明显抑制鸡胚发育出现侏儒胚,接种10 d内死亡率达100%;进一步对W株进行全基因组扩增及序列分析。病毒序列分析结果显示,其全基因组长为43 591 bp,共有60个开放阅读框,W株与GenBank中公布的FAdV-4参考毒株全基因组核苷酸序列同源性为98.4%~100%,其中与标准株非致病性毒株ON1(登录号:GU188428.1)的同源性为98.4%,主要缺失ORF19(脂肪酶基因)和ORF27;通过对病毒主要结构蛋白Hexon、Fiber-1和Fiber-2基因分析发现,W株与近几年国内分离株亲缘关系较近,与ON1株及其他国外分离株差异较大。综上说明,该分离株具有高致病性,与国外分离株存在较大差异,为进一步分析FAdV-4的毒力增强机制提供了基础依据。 展开更多
关键词 禽腺病毒 分离 鉴定 Fiber基因
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5种常见犬腹泻病毒基因芯片检测方法的建立 被引量:6
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作者 苏霞 周宏专 +5 位作者 常彦嫣 齐颀 林路路 张进 徐福洲 杨兵 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第8期2211-2219,共9页
为建立一种简便、快速、高效的可同时区分犬腺病毒1型(canine adenovirus type 1,CAV-1)、犬腺病毒2型(canine adenovirus type 2,CAV-2)、犬冠状病毒(canine coronavirus,CCV)、犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)、犬细小病毒(ca... 为建立一种简便、快速、高效的可同时区分犬腺病毒1型(canine adenovirus type 1,CAV-1)、犬腺病毒2型(canine adenovirus type 2,CAV-2)、犬冠状病毒(canine coronavirus,CCV)、犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)、犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)5种常见犬腹泻病毒的基因芯片诊断方法,本研究以CAV-1、CAV-2、CCV、CDV、CPV 5种犬腹泻病毒为靶病毒,根据NCBI上收录的病毒基因序列在其保守区域内设计引物,在此基础上根据变异区域设计针对每种病毒的探针2~3条,优化检测体系的各反应条件,确定该检测方法的特异性与敏感性,建立可同时区分5种病毒的基因芯片检测方法。结果显示,建立的基因芯片检测方法可同时检测以上述5种犬腹泻病毒,其中PCR的退火温度为55℃、延伸时间为1 min 15 s;探针与PCR产物的杂交温度40℃、杂交时间2.5 h时,该方法对CAV-1、CAV-2、CCV、CDV和CPV 5种病毒标准品的检测限分别为0.2 fg/μL、2 fg/μL、2 fg/μL、20 pg/μL和0.02 fg/μL,具有较高的灵敏性;同时对犬副流感病毒进行特异性试验,发现无阳性信号出现,具有较强的特异性;对14份临床腹泻样品检测结果显示,基因芯片方法对CAV-1、CAV-2、CCV、CDV和CPV 5种病毒的阳性检出率分别为28.57%、50.00%、64.28%、14.28%和85.71%,并且基因芯片检测方法的敏感性较PCR要高10~100倍。以上结果表明,本研究建立的基因芯片检测方法具有特异、敏感等特点,对临床中犬类混合感染病毒检测具有一定的诊断意义。 展开更多
关键词 犬腹泻病毒 基因芯片 诊断
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鸡胚不同接种途径对鸡安卡拉病毒徐州株增殖的影响 被引量:3
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作者 迟兰 任士飞 +2 位作者 李心海 张林吉 王玉燕 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第5期81-83,共3页
为了探寻鸡安卡拉病毒徐州株(FAdV-4 SN2016株)接种SPF鸡胚不同部位后的增殖规律,从而明确该病毒最为适合的接种途径及病毒收获组织,试验采用6~8日龄卵黄囊、9~10日龄尿囊腔以及9~10日龄尿囊膜3种接种途径对SPF鸡胚分别接种,培养数日后... 为了探寻鸡安卡拉病毒徐州株(FAdV-4 SN2016株)接种SPF鸡胚不同部位后的增殖规律,从而明确该病毒最为适合的接种途径及病毒收获组织,试验采用6~8日龄卵黄囊、9~10日龄尿囊腔以及9~10日龄尿囊膜3种接种途径对SPF鸡胚分别接种,培养数日后均收集接种鸡胚的尿囊液、尿囊膜及肝脏组织,采用实时荧光定量PCR方法测定尿囊液、尿囊膜及肝脏组织中的病毒载量。结果表明:FAdV-4 SN2016株在所收集的鸡胚各组织中均有病毒复制,3种接种途径获得的病毒载量最高的组织是卵黄囊途径接种后收获的肝脏组织,经尿囊腔途径接种鸡胚后在肝脏组织中的病毒载量也相对较高,而经尿囊膜途径接种鸡胚后在尿囊膜上的病毒载量也相对较高。说明不同接种途径对FAdV-4 SN2016株在SPF鸡胚中的增殖影响比较大,该病毒经卵黄囊途径接种鸡胚后在鸡胚肝脏组织中的增殖效果最好。 展开更多
关键词 安卡拉病 禽腺病毒Ⅰ群 病毒增殖 鸡胚接种 卵黄囊接种
原文传递
重组杆状病毒载体在哺乳动物细胞中的表达 被引量:2
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作者 尤蓓 李彪 +6 位作者 陆盈 曹文俊 尹桂芝 张一帆 赵龙 贾世海 于金德 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2004年第10期806-809,832,共5页
目的 探讨重组杆状病毒作为哺乳动物基因转导载体的可行性及其转导特点。方法 应用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统制备重组杆状病毒Bac-GFP,以不同MOI的病毒和不同终浓度丁酸钠感染各哺乳动物细胞系。通过荧光倒置相差显微镜和流式细胞仪... 目的 探讨重组杆状病毒作为哺乳动物基因转导载体的可行性及其转导特点。方法 应用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统制备重组杆状病毒Bac-GFP,以不同MOI的病毒和不同终浓度丁酸钠感染各哺乳动物细胞系。通过荧光倒置相差显微镜和流式细胞仪观察检测细胞转导率和绿色荧光蛋白(GFP)表达强度。结果 发现HEK293细胞中,Bac-GFP转导率和GFP表达强度随着MOI和丁酸钠浓度的提高而显著增高(P<0.01),报告基因GFP的表达第2d最高,至少可持续9d。Bac-GFP可感染不同种属不同组织的哺乳动物细胞系,但转导率有差异。结论 重组杆状病毒可以用于体外基因转导。 展开更多
关键词 表达 重组杆状病毒 基因转导 丁酸钠 哺乳动物细胞 感染 钠浓度 绿色荧光蛋白(GFP) 报告基因 载体
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猪伪狂犬病毒基因分型PCR检测方法的建立 被引量:5
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作者 胡铭哲 董伟仁 +2 位作者 颜焰 顾金燕 周继勇 《中国兽医科学》 CSCD 北大核心 2021年第8期983-992,共10页
为建立一种基因Ⅰ型和Ⅱ型猪伪狂犬病毒(PRV)鉴定方法,对PRV全基因组序列进行生物信息学分析,在Ⅱ型PRV gC基因上鉴定到一段不同于Ⅰ型PRV的47 bp长的多位点稳定差异基序。该方法能特异性区分基因Ⅰ型和Ⅱ型PRV,检测猪瘟病毒、猪德尔塔... 为建立一种基因Ⅰ型和Ⅱ型猪伪狂犬病毒(PRV)鉴定方法,对PRV全基因组序列进行生物信息学分析,在Ⅱ型PRV gC基因上鉴定到一段不同于Ⅰ型PRV的47 bp长的多位点稳定差异基序。该方法能特异性区分基因Ⅰ型和Ⅱ型PRV,检测猪瘟病毒、猪德尔塔冠状病毒、猪流行性腹泻病毒、猪蓝耳病病毒、猪圆环病毒2型及3型时呈阴性。两种分型方法针对Ⅰ、Ⅱ型PRV的最低检测限均为1×10^(4)copies/L。44份猪组织病料的单重及双重PCR检测均显示,5份样品为Ⅰ型PRV,1份样品为Ⅱ型PRV。结果表明,本研究建立的单重和双重PRV分型检测方法均能准确鉴定PRV基因型,双重PCR分型方法更便捷,本研究为PRV流行病学调查及持续性感染猪的清群净化提供有效技术手段。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病毒 基因分型 双重PCR
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黔北麻羊Tβ4基因多态性及生物信息学分析 被引量:4
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作者 罗铮 翁吉梅 +3 位作者 艾锦新 龙安炬 罗卫星 蔡惠芬 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第8期2406-2414,共9页
本研究旨在对黔北麻羊胸腺素β4(thymosin beta 4,Tβ4)基因的多态位点进行筛选及生物信息学分析。根据GenBank中山羊Tβ4基因序列(登录号:NC_030810和NW_017189516),应用Primer Premier 5.0软件设计引物,运用混合DNA池结合PCR产物直接... 本研究旨在对黔北麻羊胸腺素β4(thymosin beta 4,Tβ4)基因的多态位点进行筛选及生物信息学分析。根据GenBank中山羊Tβ4基因序列(登录号:NC_030810和NW_017189516),应用Primer Premier 5.0软件设计引物,运用混合DNA池结合PCR产物直接测序获得黔北麻羊Tβ4基因X染色体第1、2、3外显子和3号染色体第1外显子序列进行多态性分析,利用生物信息学分析软件对黔北麻羊Tβ4基因进行同源性、系统进化树、理化性质、疏水性、卷曲螺旋、跨膜结构、信号肽、亚细胞定位、结构域、磷酸化位点、糖基化位点、二级结构和三级结构分析。结果显示,共筛选出10个SNPs,分别为:G55C、C82T、G112A、C129T、G216A、G431A、G551T、T579A、A609G和A619G。同源性比对分析结果显示,黔北麻羊与黄牛、马、野猪、人、裸滨鼠、褐家鼠、小家鼠和原鸡Tβ4基因核苷酸序列同源性分别为97.8%、96.3%、95.6%、94.1%、94.8%、91.1%、92.6%和86.7%。蛋白理化性质分析显示,黔北麻羊Tβ4蛋白理论等电点为5.02,亲水值最小为-3.011,无疏水性氨基酸,无卷曲螺旋,不是跨膜蛋白,无信号肽存在,分布在细胞核(60.9%)、线粒体(4.3%)、细胞骨架(17.4%)和细胞质(17.4%),有1个THY结构域,有1个苏氨酸磷酸化位点,无N糖基化位点,有4个O糖基化位点。二级结构分析显示,C129T突变使其蛋白质二级结构中α-螺旋增加,无规则卷曲减少。本研究成功筛选出黔北麻羊Tβ4基因多态位点,为研究黔北麻羊育种的分子遗传标记辅助选择提供了参考依据。 展开更多
关键词 黔北麻羊 Tβ4基因 生物信息学
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