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犬脓皮病和外耳炎相关细菌的分离鉴定和耐药性调查
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作者 梅晓婷 赵艳兵 +2 位作者 张炜 王丽平 周振雷 《畜牧与兽医》 北大核心 2026年第1期135-142,共8页
旨在调查犬脓皮病和外耳炎相关细菌的种类及其对抗生素的敏感性,为犬脓皮病和外耳炎的临床诊疗提供科学依据。2023年12月—2024年12月期间,从95只脓皮病和外耳炎患犬中共分离鉴定出157株致病菌,采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱法... 旨在调查犬脓皮病和外耳炎相关细菌的种类及其对抗生素的敏感性,为犬脓皮病和外耳炎的临床诊疗提供科学依据。2023年12月—2024年12月期间,从95只脓皮病和外耳炎患犬中共分离鉴定出157株致病菌,采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱法进行细菌种属鉴定,并通过纸片扩散法和微量肉汤稀释法开展抗生素药物敏感性试验。结果:伪中间葡萄球菌是犬脓皮病和外耳炎的主要致病菌,检出率分别为48.72%和39.24%;分离菌的多重耐药率高达83.08%,对青霉素(90.63%)、甲氧苄啶/磺胺异噁唑(81.48%)、四环素(76.92%)、克林霉素(75.38%)、红霉素(75.38%)、阿奇霉素(75.38%)、多西环素(67.69%)和马波沙星(51.85%)均表现出较高耐药率,但对利福平、呋喃妥因和万古霉素保持敏感。研究表明,犬脓皮病和外耳炎相关的致病菌具有明显的多样性,且不同菌种间的耐药性差异较大,其中,伪中间葡萄球菌的耐药形势尤为严峻,提示临床兽医师在治疗过程中应开展病原学检测和药物敏感性试验,合理选择抗菌药物,以提升治疗效果并遏制耐药菌株的产生和传播。 展开更多
关键词 脓皮病 外耳炎 细菌 耐药性
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2024—2025年河北省犊牛源腹泻大肠杆菌流行病学调查
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作者 张晓禹 张洪军 +5 位作者 李云泰 苏硕青 李树静 张志强 史秋梅 吴同垒 《中国兽医杂志》 北大核心 2026年第1期56-63,共8页
为了解河北省犊牛腹泻大肠杆菌的流行病学特征,本试验于2024—2025年采集240份犊牛腹泻粪便样品进行大肠杆菌的分离鉴定,并对其毒力基因、药物敏感性、耐药基因和生物被膜形成能力进行检测,同时进行系统进化群分型和多位点序列分型(MLST... 为了解河北省犊牛腹泻大肠杆菌的流行病学特征,本试验于2024—2025年采集240份犊牛腹泻粪便样品进行大肠杆菌的分离鉴定,并对其毒力基因、药物敏感性、耐药基因和生物被膜形成能力进行检测,同时进行系统进化群分型和多位点序列分型(MLST)。结果显示,240份犊牛腹泻粪便样品中分离鉴定出214株大肠杆菌,分离率为89.17%;毒力基因检测结果显示,分离菌株的毒力基因crl(100%)、fliC(92.99%)和ompA(87.85%)检出率较高,而tsh、afa和traB基因未检出;系统进化群分型结果显示,分离菌株以B1群(54.21%)和A群(33.18%)为主;药敏试验结果显示,分离菌株对链霉素(65.89%)和环丙沙星(50.47%)耐药率较高,多重耐药率达51.40%,且24.77%的菌株对10种以上抗生素耐药;耐药基因检测发现,四环素类耐药基因tet(A)(31.78%)、β内酰胺类耐药基因blaTEM(28.97%)和磺胺类耐药基因sul2(28.97%)的检出率较高;生物被膜形成能力检测结果显示,60.75%的分离菌株可形成生物被膜,其中B2群菌株均具有生物被膜形成能力。MLST结果显示,选取的40株多重耐药菌株中有38种序列型(ST),包括15种新型ST,优势ST为ST20和ST1140。本试验为河北省奶牛和肉牛养殖场针对性制定由大肠杆菌引起犊牛腹泻病的防控策略提供了理论依据。 展开更多
关键词 大肠杆菌 犊牛腹泻 毒力基因 耐药性
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马链球菌兽疫亚种BifA蛋白的表达及增强血脑屏障通透性活性评价
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作者 张筱雯 潘飞 +2 位作者 吴志慧 范红结 马喆 《畜牧与兽医》 北大核心 2026年第1期128-134,共7页
BifA蛋白源自马链球菌兽疫亚种(Streptococcus equi ssp.zooepidemicus,SEZ)高致病力菌株,该蛋白已被证实能够促进SEZ穿透血脑屏障。为了高效表达BifA蛋白并评价BifA的生物学活性和功能,本研究基于不同载体(包括pGEX和pCold I)构建了Bif... BifA蛋白源自马链球菌兽疫亚种(Streptococcus equi ssp.zooepidemicus,SEZ)高致病力菌株,该蛋白已被证实能够促进SEZ穿透血脑屏障。为了高效表达BifA蛋白并评价BifA的生物学活性和功能,本研究基于不同载体(包括pGEX和pCold I)构建了BifA蛋白的原核表达系统,使用IPTG诱导蛋白表达并纯化,成功获得纯化后的BifA-GST和BifA-His重组蛋白。分别将2种BifA重组蛋白以10μg尾静脉注射C57BL/6小鼠,并以10μg/mL处理人脑微血管内皮细胞(hBMEC),结果表明2种BifA重组蛋白对小鼠和细胞均无毒性作用。通过构建体外血脑屏障模型评价2种表达系统获取BifA蛋白的生物学活性,结果表明BifA-GST蛋白不具有增强血脑屏障通透性的能力,而复性后的BifA-His蛋白在48 h内具有增强体外血脑屏障通透性的能力。综上,本研究建立了能够高效表达有增强血脑屏障通透性活性BifA蛋白的原核表达体系,为深入研究其作为增强血脑屏障通透性药物提供了重要的材料基础。 展开更多
关键词 马链球菌兽疫亚种 BifA蛋白 原核表达 增强血脑屏障通透性
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icaB基因对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌N315株生物被膜及耐药性的影响
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作者 金炳甜 杜鹏程 +3 位作者 杨馨郁 吉尔叁也 杨峰 董鹏程 《中国畜牧兽医》 北大核心 2026年第1期439-447,共9页
【目的】探讨icaB基因对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)生物被膜形成能力及耐药性的影响。【方法】本研究以MRSA N315标准株为研究对象,利用同源重组技术构建icaB基因敲除株N315ΔicaB,... 【目的】探讨icaB基因对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)生物被膜形成能力及耐药性的影响。【方法】本研究以MRSA N315标准株为研究对象,利用同源重组技术构建icaB基因敲除株N315ΔicaB,比对分析N315ΔicaB株与野生株(N315 WT)在生长趋势、菌落形态和颜色、细胞壁厚度、生物被膜形成能力及耐药性方面的差异。【结果】生长曲线和菌落形态观察发现,N315ΔicaB株生长趋势、菌落形态和颜色与N315 WT株相比无差异。细胞壁厚度测定结果显示,与N315 WT株相比,N315ΔicaB株细胞壁厚度无显著变化(P>0.05)。生物被膜形成能力检测结果显示,N315ΔicaB株生物被膜形成能力与N315 WT相比无显著差异(P>0.05)。药物敏感性检测结果显示,青霉素、苯唑西林、庆大霉素、环丙沙星和呋喃妥因对N315ΔicaB株的最小抑菌浓度均低于N315 WT株。【结论】敲除icaB基因不影响MRSA的生长状态及生物被膜形成能力,但能提高其对部分抗菌药的敏感性。本研究成功构建了icaB基因敲除株N315ΔicaB,为挖掘icaB基因新功能提供了理想的细胞模型,为从基因水平深入研究生物被膜调控网奠定了基础,也为以icaB基因为靶点提升抗菌药物对MRSA的疗效提供了科学依据。 展开更多
关键词 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 基因敲除 生物被膜 最小抑菌浓度
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1株2型猪链球菌的分离鉴定、耐药性及致病性分析
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作者 康伟超 黄璟昇 +6 位作者 李涵 戴德嘉 朱树馨 杨云梅 梁园茜 卢可 梁正敏 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2026年第1期133-141,共9页
为了明确引起广西南宁地区某规模化猪场保育仔猪咳嗽、高烧、呼吸急促并死亡的病原及其生物学特征,试验对病死猪肺脏进行大体病变与组织病理学观察、病毒检测和细菌的分离培养,并对分离菌进行形态学观察、革兰氏染色、16S r DNA基因序... 为了明确引起广西南宁地区某规模化猪场保育仔猪咳嗽、高烧、呼吸急促并死亡的病原及其生物学特征,试验对病死猪肺脏进行大体病变与组织病理学观察、病毒检测和细菌的分离培养,并对分离菌进行形态学观察、革兰氏染色、16S r DNA基因序列分析、血清型鉴定、耐药性分析、小鼠致病性试验及半数致死量(LD_(50))的测定。结果表明:病死猪肺脏结构不清晰;肺小叶间隙增宽,被膜紧张,体积增大,边缘钝圆;部分区域呈片状实变、暗红色,质地较硬,与周围未发生病变的组织分界清晰;肺泡结构严重受损,肺泡间隔变宽,肺泡壁血管扩张充血,肺间质、支气管腔内和肺泡腔内可见大量炎性细胞浸润;猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)、猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的核酸检测结果均为阴性。从肺脏组织中分离出1株细菌,分离菌株在含5%新生牛血清的胰酪大豆胨琼脂(TSA)培养基上培养12~16 h后呈圆形、灰白色、半透明、表面光滑、边缘整齐的菌落,革兰氏染色、镜检可见蓝紫色、圆形、呈链状或成对排列的革兰氏阳性球菌,形态特征与猪链球菌相符,命名为SY2。该菌株与猪链球菌菌株ATCC 43765(NR_117504.1)、S735(NR_036918.1)、682/03(NR_108477.1)的相似性较高,分别为99.5%、98.8%和98.2%;与猪链球菌菌株ATCC 43765(NR_117504.1)处于同一分支,亲缘关系最近;血清型鉴定为2型猪链球菌。猪链球菌SY2对四环素类、林可酰胺类、大环内酯类和氨基糖苷类抗生素耐药,对氯霉素类抗生素中介,对喹诺酮类、头孢类和青霉素类抗生素敏感。猪链球菌SY2可引起Balb/c小鼠呼吸急促、被毛凌乱和扎堆聚集,剖检可见肺脏肿大、出血;H.E.染色、镜检可见肺泡结构受损严重,肺脏可见大量炎性渗出物,血管和支气管腔内可见炎性细胞浸润;肺脏指数及肺泡灌洗液中TNF-α和IL-1β质量浓度均极显著升高(P<0.01)。猪链球菌SY2对Balb/c小鼠的LD_(50)为1.51×10^(8)cfu/m L。说明该猪场病死猪感染了2型猪链球菌,可选用喹诺酮类、青霉素类和头孢类抗生素进行治疗,该菌株对小鼠具有较强的致病性。 展开更多
关键词 2型猪链球菌 细菌分离 细菌鉴定 耐药性 致病性 半数致死量
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1株野生绿头鸭源耐盐芽孢杆菌BH2的分离鉴定及安全性评价
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作者 王旭翔 吕蕊雪 +8 位作者 林峻 石蕊 谢怀茹 靳茜 地丽热巴·地里夏提 阿依乔丽凡·沙汉 戴宗茂 肖莹 王金泉 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2026年第1期106-113,共8页
为了从新疆野生绿头鸭粪便中分离筛选出对药物不敏感的耐盐芽孢杆菌(Bacillus halophilus),并评价其体外益生特性和体内安全性,试验于新疆博乐、伊犁地区采集野生、成年、健康的绿头鸭粪便样品70份,通过平板涂布法分离芽孢杆菌,结合革... 为了从新疆野生绿头鸭粪便中分离筛选出对药物不敏感的耐盐芽孢杆菌(Bacillus halophilus),并评价其体外益生特性和体内安全性,试验于新疆博乐、伊犁地区采集野生、成年、健康的绿头鸭粪便样品70份,通过平板涂布法分离芽孢杆菌,结合革兰氏染色、生化鉴定及16S rRNA基因序列分析,并进行BLAST比对鉴定筛选菌株。对分离鉴定的耐盐芽孢杆菌菌株进行体外耐酸、耐胆盐、耐盐、溶血活性、抑菌活性试验并绘制生长曲线,进行药敏试验。将28只昆明小鼠随机分为4组,Ⅰ(雄性)组与Ⅱ(雌性)组灌胃PBS(0.2 mL/只),Ⅲ(雄性)组与Ⅳ(雌性)组灌胃1×10^(8)cfu/m L的耐盐芽孢杆菌(0.2 mL/只),持续灌胃7 d。试验结束后称重并检测血细胞常规指标,计算脏器指数。结果表明:从70份粪便样品中分离出6株(B2、B4、B6、B10、B12、B14)菌落形态近似芽孢杆菌的单菌落,菌株B2经16S rRNA基因PCR扩增及测序分析,与NCBI数据库中已公布的耐盐芽孢杆菌(登录号为MZ485342.1)核苷酸相似性为98%,鉴定为耐盐芽孢杆菌,并命名为BH2。该菌株在pH值为3.0的强酸性环境中OD600值达0.95,显著低于pH值为6.0时(P<0.05),与pH值为4.0,5.0,7.4时差异不显著(P>0.05);在胆盐浓度为0.5%时OD600值最高,显著高于胆盐浓度为1%时(P<0.05);在Na Cl质量分数为10%时生长最佳,菌落直径显著大于其他Na Cl质量分数(P<0.05),超过10%后,菌落生长明显受抑制,且浓度越高抑制越强;对13种常用抗生素均表现敏感,且无溶血活性,为γ溶血;能抑制金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门菌的生长。试验期间,各组小鼠均表现正常,Ⅰ组与Ⅲ组雄性小鼠体重差异不显著(P>0.05),而Ⅳ组雌性小鼠在2~4 d内体重显著低于Ⅱ组(P<0.05)。血常规指标及脏器指数均无显著性变化(P>0.05)。说明菌株BH2具有较好的耐酸、耐胆盐、耐盐能力,能够有效抑制有害菌生长,具备良好的益生特性,对多种抗生素具有抗性,且无溶血现象,在小鼠体内安全性较好。 展开更多
关键词 耐盐芽孢杆菌 野生绿头鸭 益生菌 分离鉴定 安全性
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坏死梭杆菌对奶牛真皮成纤维细胞线粒体动力学与自噬的影响
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作者 刘梦 张安池 +2 位作者 丁如欣 葛延松 郑家三 《中国畜牧兽医》 北大核心 2026年第1期418-426,共9页
【目的】探究坏死梭杆菌(Fusobacterium necrophorum subsp.necrophorum,Fnn)感染对奶牛真皮成纤维细胞(bovine dermal fibroblasts,BDFs)线粒体动力学与自噬的影响及其潜在机制。【方法】从奶牛趾间皮肤中分离培养BDFs,与1×10^(8)... 【目的】探究坏死梭杆菌(Fusobacterium necrophorum subsp.necrophorum,Fnn)感染对奶牛真皮成纤维细胞(bovine dermal fibroblasts,BDFs)线粒体动力学与自噬的影响及其潜在机制。【方法】从奶牛趾间皮肤中分离培养BDFs,与1×10^(8) CFU/mL的Fnn共培养12 h建立感染模型组(Fnn),以未感染的细胞作为对照组(CON),观察Fnn感染后BDFs形态变化,通过CCK-8试剂盒检测BDFs细胞活性,实时荧光定量PCR检测线粒体动力学、生物合成以及线粒体自噬相关基因表达的变化,免疫荧光法检测相关蛋白表达的变化。【结果】与CON组相比,Fnn组细胞出现肿胀、体积增大的变形现象,Fnn感染可极显著抑制BDFs活性(P<0.01)。实时荧光定量PCR结果显示,与CON组相比,Fnn感染后BDFs的过氧化物酶体增殖受体γ辅激活因子α(PGC-1α)、核呼吸因子-1(Nrf1)、线粒体转录因子A(Tfam)、线粒体融合素基因-2(Mfn-2)、磷酸酶及张力蛋白同源物诱导的蛋白激酶1(PINK1)、E3泛素连接酶(Parkin)基因相对表达量显著或极显著下降(P<0.05;P<0.01),视神经萎缩蛋白1(Opa1)、Mfn-1、Sequestosome 1(P62)基因相对表达量有下降的趋势(P>0.05),线粒体裂变蛋白1(Fis1)、微管相关蛋白1轻链3α(LC3α)和LC3β基因相对表达量极显著升高(P<0.01)。免疫荧光法检测结果显示,与CON组相比,Fnn感染后,BDFs线粒体动力蛋白相关蛋白1(Drp1)、PINK1、Parkin、P62荧光信号增强,Opa1、Mfn-1、LC3荧光信号减弱。【结论】Fnn感染可破坏BDFs线粒体生物合成,扰乱线粒体融合与分裂进程,诱导线粒体自噬的发生。本研究结果可为深入理解腐蹄病的发病机制提供新的理论依据。 展开更多
关键词 腐蹄病 坏死梭杆菌 线粒体生物合成 线粒体动力学 线粒体自噬
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畜牧业中沙门氏菌耐药性现状、产生机制及防治措施研究进展
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作者 张梓莹 杨沁婷 +4 位作者 罗晓玲 马傲 符天剑 程国强 罗杰 《畜禽业》 2026年第1期5-8,共4页
沙门氏菌(salmonella)是全球重要的食源性致病菌,其耐药性日益严重,对公共健康和畜牧业发展构成威胁。旨在系统梳理动物源沙门氏菌耐药性类型、分子机制及防控对策。通过检索国内外相关研究与监测数据,对沙门氏菌耐药基因分布、主要耐... 沙门氏菌(salmonella)是全球重要的食源性致病菌,其耐药性日益严重,对公共健康和畜牧业发展构成威胁。旨在系统梳理动物源沙门氏菌耐药性类型、分子机制及防控对策。通过检索国内外相关研究与监测数据,对沙门氏菌耐药基因分布、主要耐药机制及检测方法进行归纳与比较。结果表明:动物源沙门氏菌对β-内酰胺类、氟喹诺酮类、四环素类、磺胺类等常用药物的耐药率普遍偏高,多重耐药株比例持续上升,耐药性主要由质粒介导的耐药基因、药物外排泵及靶点突变等机制驱动。需通过强化监测预警、规范抗菌药物使用、推动替代疗法等措施,减缓耐药性扩散,保障临床治疗与食品安全。 展开更多
关键词 沙门氏菌 耐药性 耐药机制 检测方法 防控措施
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牛源肺炎克雷伯菌的研究进展
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作者 龚雪 徐敏 +1 位作者 蔡扩军 徐晶晶 《中国畜牧业》 2026年第1期53-55,共3页
肺炎克雷伯菌是一种条件性人兽共患致病菌,常引发奶牛乳腺炎、败血症、创伤感染以及细菌性肺炎等疾病,影响养牛业的健康发展,对畜牧业和公共卫生构成严重威胁。近年来,牛源肺炎克雷伯菌的研究取得了诸多进展。在致病机制方面,该菌的毒... 肺炎克雷伯菌是一种条件性人兽共患致病菌,常引发奶牛乳腺炎、败血症、创伤感染以及细菌性肺炎等疾病,影响养牛业的健康发展,对畜牧业和公共卫生构成严重威胁。近年来,牛源肺炎克雷伯菌的研究取得了诸多进展。在致病机制方面,该菌的毒力因子如荚膜、菌毛、脂多糖等协同作用,使其能够黏附并侵袭宿主细胞,进而引发炎症反应;耐药性研究表明,牛源肺炎克雷伯菌已对多种抗生素产生不同程度的耐药性,β-内酰胺酶的产生、生物被膜的形成、主动外排泵系统的激活以及抗菌作用靶点的改变都是导致耐药性增加的重要因素;在诊断技术上,传统的细菌分离培养鉴定方法仍是基础,而分子生物学方法如PCR、基因测序等则具有快速、准确的特点。 展开更多
关键词 乳腺炎 创伤感染 败血症 细菌性肺炎
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蓝孔雀源致病性大肠杆菌的分离鉴定和耐药性分析
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作者 连凯琪 王宇航 +2 位作者 孟祥凤 张明亮 周玲玲 《中国畜牧兽医》 北大核心 2026年第1期448-458,共11页
【目的】为确诊安阳动物园一起蓝孔雀急性死亡病例,本研究开展了临床诊断与实验室检测。【方法】观察病死孔雀临床症状和病理变化,通过鉴别培养基、革兰染色、生化鉴定、16S rRNA基因PCR扩增及构建系统发育树、动物试验等方法分离鉴定... 【目的】为确诊安阳动物园一起蓝孔雀急性死亡病例,本研究开展了临床诊断与实验室检测。【方法】观察病死孔雀临床症状和病理变化,通过鉴别培养基、革兰染色、生化鉴定、16S rRNA基因PCR扩增及构建系统发育树、动物试验等方法分离鉴定病原菌,利用结晶紫染色法对分离菌进行生物被膜形成能力检测,采用K-B纸片法进行药敏试验,通过PCR检测耐药基因。【结果】死亡孔雀体表无明显症状,对孔雀进行剖检观察发现,其心包积液增多、浑浊,肝脏肿大,肾脏有尿酸盐沉积,肠道出血。无菌采集死亡孔雀肝脏组织,划线接种于麦康凯培养基,分离出粉红色菌落,镜检观察到病原菌呈红色短杆状,单个或成对散在分布,疑似肠杆菌科细菌。生化鉴定结果显示,分离菌吲哚、MR、戊糖、山梨醇等为阳性,西蒙氏枸橼酸盐、V-P、尿素、硫化氢等为阴性;16S rRNA基因PCR扩增片段经测序得到大小约为1500 bp的序列(GenBase登录号:C_AA110994.1)。系统发育树显示,分离菌株与大肠杆菌相似性最高,为100%,确定该分离菌为大肠杆菌;分离菌比标准菌株被膜形成能力强,且能导致BALB/c小鼠肝脏和脾脏肿大、肺脏淤血、肠壁变薄、肠道出血、肠绒毛脱落等。分离菌对左氧氟沙星、诺氟沙星等药物敏感,对四环素、链霉素等耐药。耐药基因PCR扩增结果显示,分离菌检测到tetA、ampC、blaTEM、Sul1、Sul2和strA-strB 6个耐药基因。【结论】本研究分离到1株蓝孔雀源致病性大肠杆菌。药敏试验结果显示,该大肠杆菌菌株对左氧氟沙星、诺氟沙星等药物敏感,对四环素、链霉素等耐药,并携带6种耐药基因。本研究结果可为蓝孔雀大肠杆菌病的诊断和临床用药提供借鉴。 展开更多
关键词 蓝孔雀 大肠杆菌 分离鉴定 耐药性
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食品中单核细胞增生李斯特氏菌现行检测标准方法进展
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作者 李晴 李俊玲 +3 位作者 王英英 朱良智 薛琦 兰凤洁 《山东畜牧兽医》 2026年第1期133-136,共4页
随着国民经济生活水平的不断提高,人民对食品安全问题的重视程度越来越高。其中单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes, LM)是常见的食源性致病菌之一,能够引起李斯特菌病,感染严重者甚至会出现致死现象。传统的单增李斯特菌... 随着国民经济生活水平的不断提高,人民对食品安全问题的重视程度越来越高。其中单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes, LM)是常见的食源性致病菌之一,能够引起李斯特菌病,感染严重者甚至会出现致死现象。传统的单增李斯特菌检测方法耗时长,步骤繁琐。因此,特异性强、高效且简便的检测手段已成为研究热点。本文对食品中单核细胞增生李斯特氏菌现有的检测标准方法进行了分析概括,总结了四类现行的检测方法,分析了其优缺点并对其在实际检测工作中的应用提出了建议,同时对相关检测技术未来发展趋势进行了展望。 展开更多
关键词 食品安全 单核细胞增生李斯特氏菌 标准方法 优缺点
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一株鸭源粪肠球菌的分离鉴定和致病性研究
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作者 徐凤霞 王振 +5 位作者 许明清 汪建华 刘晓钰 沈扬扬 王田 于菲菲 《山东畜牧兽医》 2026年第1期13-17,共5页
本研究针对山东省泰安市某养殖场樱桃谷肉鸭死亡病例,通过细菌分离培养、革兰氏染色、生化特性鉴定及16S rRNA基因序列分析,鉴定出导致肉鸭死亡的病原为粪肠球菌。该菌在营养琼脂上形成光滑球菌,Baird-Parker琼脂培养板上呈黑色菌落,革... 本研究针对山东省泰安市某养殖场樱桃谷肉鸭死亡病例,通过细菌分离培养、革兰氏染色、生化特性鉴定及16S rRNA基因序列分析,鉴定出导致肉鸭死亡的病原为粪肠球菌。该菌在营养琼脂上形成光滑球菌,Baird-Parker琼脂培养板上呈黑色菌落,革兰氏染色为阳性,生化特性符合粪肠球菌标准,16S rRNA基因序列与GenBank中参考序列(登录号ON745463.1)同源性高达99.86%。药敏试验结果显示,该菌对氨苄西林、阿莫西林等敏感,但对替米考星、盐酸大观林可霉素等耐药。致病性试验结果显示,该菌株对肉鸭有显著致病性,感染鸭只表现出精神萎靡、脚垫红肿等症状,死亡率高达50%,并在病鸭肝脏、脑组织和跗关节处分离到该菌。本研究为粪肠球菌的快速鉴定、防控策略制定及合理用药提供了重要依据。 展开更多
关键词 粪肠球菌 分离鉴定 致病性
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基于CRISPR-Cas系统的多重耐药菌防治技术研究进展 被引量:1
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作者 周倩 唐梦君 +4 位作者 张小燕 陆俊贤 唐修君 杨星星 高玉时 《生物技术通报》 北大核心 2025年第5期42-51,共10页
动物源细菌耐药性影响动物养殖安全,同时对人类公共卫生和食品安全产生重要威胁。抗生素的滥用加剧了耐药细菌的传播,而新型抗菌药物研发日益困难,动物源细菌耐药污染已成为全球范围内的公共危机,一旦耐药菌从动物向人类扩散,将极大地... 动物源细菌耐药性影响动物养殖安全,同时对人类公共卫生和食品安全产生重要威胁。抗生素的滥用加剧了耐药细菌的传播,而新型抗菌药物研发日益困难,动物源细菌耐药污染已成为全球范围内的公共危机,一旦耐药菌从动物向人类扩散,将极大地威胁人类健康,亟须新的方法和策略应对细菌耐药。CRISPR-Cas(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR-associated)是第三代“基因组定点编辑技术”,该技术能够靶向剪切外源性核酸,保护微生物遗传物质遗传稳定性。与传统的多重耐药菌防治策略相比,CRISPR-Cas系统具备独特的DNA序列的靶向性和灵敏度,通过精准、简便和高效的基因编辑技术,与核酸扩增技术、比色技术等相结合,可以提高灵敏度和检测时效性等性能指标。本文介绍了CRISPR-Cas系统的由来、系统分类、基因编辑的作用机理,在此基础之上,聚焦于该系统在多重耐药菌防治领域的研究进展和应用,在耐药致病菌消除、耐药基因消除以及致病菌诊断检测方面给出案例分析以及目前存在的挑战。总的来说,基于CRISPR-Cas系统的序列特异性抗菌剂能够降低细菌多重耐药性,结合核酸扩增技术和实时监控设备提升检测的精准性和效率,为动物源细菌耐药防控和监测研究提供了新思路。 展开更多
关键词 CRISPR-Cas系统 基因编辑 多重耐药菌 耐药基因 防治技术
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鸡毒支原体与鸡滑液囊支原体双重TaqMan荧光定量PCR方法的建立与应用 被引量:1
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作者 董志民 王利丽 +3 位作者 田向学 路超 张莉 鄢明华 《中国兽医学报》 北大核心 2025年第5期987-993,1025,共8页
为快速检测与鉴别鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)和鸡滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS),本研究根据NCBI数据库中2种病原的16S rRNA基因序列的保守区,分别设计引物和TaqMan探针,通过优化反应条件,建立了一种可同时检测MG... 为快速检测与鉴别鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)和鸡滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS),本研究根据NCBI数据库中2种病原的16S rRNA基因序列的保守区,分别设计引物和TaqMan探针,通过优化反应条件,建立了一种可同时检测MG和MS的双重TaqMan荧光定量PCR方法,并对其特异性、敏感性、重复性和可靠性进行了验证。结果显示,该方法可特异性扩增MG和MS,与21种病原无交叉反应;对MG与MS阳性标准品的检测限分别为5.40×10^(1)、6.60×10^(1)拷贝/μL,敏感性较已知方法提高10~100倍;组内和组间的变异系数均小于1%;与NY/T 553-2015中的单一PCR扩增方法相比,阳性样品、阴性样品及总样品检测符合率均为100.00%;利用该方法检测84份疑似支原体感染的鸡病料样品,结果显示,单一感染MG的病鸡样品阳性率32.14%(27/84)、单一感染MS的样品阳性率22.62%(19/84)、混合感染MG和MS的样品阳性率16.67%(14/84);此外,检测182份健康鸡泄殖腔拭子样品、118份健康鸡鼻拭子样品及74份养鸡场环境样品,结果显示,各类样品中均可检测出支原体阳性样本。结果表明,该方法可适用于多种类型临床样品的检测。综上所述,本研究建立的双重TaqMan荧光定量PCR方法具有特异性强、敏感性高、重复性好等优点,可用于MG和MS感染的临床鉴别检测、流行病学调查及病原的净化。 展开更多
关键词 鸡毒支原体 鸡滑液囊支原体 荧光定量PCR 鉴别检测
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热休克蛋白100家族ClpL对猪链球菌2型应激和致病性的影响 被引量:1
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作者 祝昊丹 王锐 +4 位作者 周俊明 王丹丹 胡屹屹 倪艳秀 李彬 《微生物学通报》 北大核心 2025年第2期668-678,共11页
【背景】酪蛋白水解蛋白酶L(caseinolytic protease L,ClpL)是热休克蛋白100(heat shock protein 100,HSP100)家族成员,参与多种细胞内生物学过程包括应激耐受反应、长期存活、毒力和抗生素抗性等,在病原菌的致病过程中发挥重要作用。... 【背景】酪蛋白水解蛋白酶L(caseinolytic protease L,ClpL)是热休克蛋白100(heat shock protein 100,HSP100)家族成员,参与多种细胞内生物学过程包括应激耐受反应、长期存活、毒力和抗生素抗性等,在病原菌的致病过程中发挥重要作用。【目的】阐明HSP100/ClpL对猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2)强毒株的应激耐受和毒力的影响。【方法】利用温敏自杀质粒pSET4s构建了SsClpL基因缺失株ΔclpL;利用大肠杆菌-猪链球菌穿梭质粒pSET2构建了互补株CΔclpL;比较亲本株SS2-1、ΔclpL和CΔclpL在各种应激环境(高温、氧化性应激和酸应激)和血液中的生存能力;利用小鼠感染模型和体内竞争试验评价clpL缺失前后细菌的毒力变化。【结果】clpL缺失后,SS2在各种应激环境中的生存能力明显减弱;同时在猪全血中的存活能力也显著降低;对BALB/c小鼠的致病力有所降低,在体内的定殖能力明显降低。【结论】SsClpL与猪链球菌的应激耐受和致病性密切相关。 展开更多
关键词 猪链球菌2型 热休克蛋白100家族ClpL 应激耐受 致病性
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一株羊源马肠链球菌的分离鉴定及生物学特性分析 被引量:1
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作者 王海丽 尹秀升 +5 位作者 贾琪 张峰源 莫玲 李林 董婧 王金良 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第6期641-647,共7页
目的对山东东营某育肥羊场发病绵羊的病原菌进行分离鉴定和提供治疗方案。方法采集病死羊肝脏组织,通过细菌分离、革兰氏染色、药敏试验、小鼠敏感性试验、细菌生化试验以及全基因组测序对分离的菌株进行鉴定和分析。结果分离的菌株(命... 目的对山东东营某育肥羊场发病绵羊的病原菌进行分离鉴定和提供治疗方案。方法采集病死羊肝脏组织,通过细菌分离、革兰氏染色、药敏试验、小鼠敏感性试验、细菌生化试验以及全基因组测序对分离的菌株进行鉴定和分析。结果分离的菌株(命名为SdDy)为革兰氏阳性链球菌,经全基因组测序和生物信息学分析确定为马肠链球菌。该菌株主要参与到代谢过程,对昆明白小鼠具有一定的致病性,对青霉素、氨苄西林、头孢噻呋钠、头孢曲松钠等4种抗生素敏感,对链霉素、阿莫西林、四环素、庆大霉素等4种抗生素耐药,经头孢噻呋钠对发病羊群进行针对性治疗,病情在2 d后得到有效控制。结论本研究成功分离了一株羊源马肠链球菌,并利用全基因组测序技术对其基因组特征进行分析,为羊源马肠链球菌生物学特性、公共卫生及疾病防治与流行病学调查提供参考资料。 展开更多
关键词 绵羊 马肠链球菌 分离鉴定 药敏试验 基因组分析
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鸭疫里默氏杆菌血清2型的分离鉴定及商品化疫苗免疫保护效果研究 被引量:1
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作者 张蓉蓉 汪最 +8 位作者 郭云清 李国红 程伊洛 卢琴 罗聪 张腾飞 张文婷 胡巧 罗青平 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第9期4273-4283,共11页
【目的】本研究拟对从发病雏鸭中分离获得的鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)进行生物学特性研究,并通过动物攻毒试验评估当前市售的3种鸭传染性浆膜炎商品化疫苗对新分离菌株的保护效果,以期为鸭传染性浆膜炎的防控提供参... 【目的】本研究拟对从发病雏鸭中分离获得的鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)进行生物学特性研究,并通过动物攻毒试验评估当前市售的3种鸭传染性浆膜炎商品化疫苗对新分离菌株的保护效果,以期为鸭传染性浆膜炎的防控提供参考。【方法】采集病死雏鸭肝脏、脑组织分离病原菌,通过形态学观察、16S rRNA基因PCR鉴定和测序、系统进化树构建、血清型分型等方法对分离菌株进行鉴定。通过分光光度法和平板计数法测定分离菌株生长曲线,利用纸片扩散法分析其药物敏感性,通过动物试验测定其半数致死量(LD_(50))和组织载菌量,最后通过攻毒试验评估3种商品化灭活疫苗对分离菌株的免疫保护效果。【结果】试验分离获得1株RA,其为血清2型。药敏试验结果显示,分离株对氨苄西林、头孢他啶和卡那霉素等10种药物均表现耐药,对阿莫西林、头孢噻肟、氟苯尼考和链霉素表现敏感。生长曲线测定结果显示,培养6~10 h,分离株进入对数生长期,培养8 h后活菌数可达到10^(9) CFU/mL;对雏鸭的LD_(50)为7.65×10^(4.7)CFU,雏鸭感染后心脏组织载菌量最高。3种商品化灭活疫苗免疫7日龄雏鸭后2周用分离菌株进行攻毒,结果显示,1+2+7型多价RA灭活疫苗保护效果最好,保护率可达70%,而另外2种疫苗保护率<50%。【结论】本研究分离获得1株多重耐药、高致病性血清2型RA,当前市售RA商品化疫苗对其免疫保护效果有限。研究结果为当前鸭传染性浆膜炎的防控提供理论依据。 展开更多
关键词 鸭疫里默氏杆菌 血清2型 生物学特性 商品化疫苗
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信阳地区鹅源大肠杆菌的分离鉴定、系统进化分群与耐药性分析 被引量:1
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作者 李迎晓 方燕子 +2 位作者 武娴 曲哲会 焦凤超 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2025年第1期82-93,共12页
为了解信阳地区鹅源大肠杆菌的系统进化分群、毒力基因携带情况和耐药情况,试验从信阳地区部分养殖户送检的46只疑似大肠杆菌感染病鹅的肝脏、脾脏等组织中进行大肠杆菌的分离、鉴定,并对分离菌株进行系统进化分群、毒力基因检测、耐药... 为了解信阳地区鹅源大肠杆菌的系统进化分群、毒力基因携带情况和耐药情况,试验从信阳地区部分养殖户送检的46只疑似大肠杆菌感染病鹅的肝脏、脾脏等组织中进行大肠杆菌的分离、鉴定,并对分离菌株进行系统进化分群、毒力基因检测、耐药性分析、耐药基因检测。结果表明:共分离到23株大肠杆菌,分别命名为GE1~GE23。23株大肠杆菌在4种系统进化群中均有一定比例的分布,其中A群有3株(GE11、GE12、GE19,占比为13.04%),B1群有3株(GE4、GE15、GE23,占比为13.04%),B2群有9株(GE1、GE2、GE8、GE10、GE14、GE16、GE17、GE20、GE21,占比为39.13%),D群有8株(GE3、GE5、GE6、GE7、GE9、GE13、GE18、GE22,占比为34.78%)。在毒力基因检测中,23株大肠杆菌marA、fimC、fyuA、iroN、iss、hlyF、ompT、iutA和irp2基因的检出率分别为100%、95.65%、52.17%、47.83%、43.48%、39.13%、34.78%、30.43%和17.39%。23株分离菌对阿莫西林/克拉维酸钾的耐药率最高,为65.22%;然后依次为磺胺甲口恶唑/甲氧苄啶、强力霉素、氟苯尼考、多黏毒素B、头孢噻呋和左氧氟沙星、环丙沙星,耐药率分别为56.52%、52.17%、47.83%、34.78%、17.39%和17.39%、8.70%。23株分离菌对亚胺培南的敏感率最高,为100%;然后依次为丁胺卡那、链霉素、新霉素、环丙沙星和左氧氟沙星、头孢噻呋、氟苯尼考、多黏菌素B、强力霉素、磺胺甲口恶唑/甲氧苄啶,敏感率分别为82.61%、82.61%、47.83%、47.83%和47.83%、34.78%、26.09%、21.74%、17.39%、8.70%。23株分离菌中有12株表现为多重耐药,其中6,7耐菌株各有1株,占比为4.35%;4,5耐菌株各有3株,占比为13.04%;3耐菌株有4株,占比为17.39%。在耐药基因检测中,tetA基因的检出率最高,为82.61%;然后依次为folR、sul2、aadA、bla_(TEM)、bla_(CTX-M)、aphA1、clmA、sul3、sul1、aphA2,检出率分别为73.91%、65.22%、56.32%、52.17%、47.83%、47.83%、43.48%、26.09%、13.04%和13.04%。说明信阳地区鹅源大肠杆菌B2群和D群占比较大,携带多种毒力基因和耐药基因,且多表现为多重耐药。 展开更多
关键词 大肠杆菌 系统进化分群 毒力基因 耐药性 耐药基因
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2012—2024年我国部分地区禽源沙门氏菌耐药情况研究进展 被引量:2
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作者 罗丹丹 鲁志平 +3 位作者 文永平 邬旭龙 吴翠蓉 俞宁 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第2期178-193,共16页
沙门氏菌是肠杆菌科中具有重要公共卫生意义的人兽共患病原菌,受沙门氏菌污染的禽类制品是人感染沙门氏菌最主要的来源之一。在农业和医疗领域,随着抗菌药物长期使用甚至滥用、沙门氏菌耐药基因的传播以及环境和宿主因素的变化,导致沙... 沙门氏菌是肠杆菌科中具有重要公共卫生意义的人兽共患病原菌,受沙门氏菌污染的禽类制品是人感染沙门氏菌最主要的来源之一。在农业和医疗领域,随着抗菌药物长期使用甚至滥用、沙门氏菌耐药基因的传播以及环境和宿主因素的变化,导致沙门氏菌的耐药性每年都在发生变化。因此,本文就2012—2024年国内外发表的关于我国禽源沙门氏菌耐药性文献作一综述,以期了解沙门氏菌在不同地区不同年份耐药性变化情况,从而为指导临床合理用药和控制疾病流行提供科学依据。 展开更多
关键词 沙门氏菌 禽源 耐药性
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猪源致病性大肠杆菌bla_(CTX-M-123)基因的传播特性和适应性代价研究 被引量:1
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作者 李琼 胡紫微 +4 位作者 金钢铸 陈峥 刘伟成 韩生义 许春燕 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第6期2884-2892,共9页
【目的】阐明猪源大肠杆菌中bla_(CTX-M-123)基因的位置,同时探究其携带的移动遗传元件的传播能力与适应性代价。【方法】通过化学转化试验评估bla_(CTX-M-123)基因的种内转移能力,并利用全基因组测序确定bla_(CTX-M-123)基因的位置,分... 【目的】阐明猪源大肠杆菌中bla_(CTX-M-123)基因的位置,同时探究其携带的移动遗传元件的传播能力与适应性代价。【方法】通过化学转化试验评估bla_(CTX-M-123)基因的种内转移能力,并利用全基因组测序确定bla_(CTX-M-123)基因的位置,分析大肠杆菌中bla_(CTX-M-123)基因的遗传环境;使用微量肉汤稀释法测定大肠杆菌911菌株、大肠杆菌DH5α感受态细胞及转化子的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)。此外,通过竞争试验评估携带bla_(CTX-M-123)基因质粒的适应性代价,并使用大蜡螟感染模型进行致病性评价。【结果】通过转化试验得到了1株转化子DH5α-pL1,其对头孢噻呋的MIC值为256μg/mL,生长速率高于受体菌大肠杆菌DH5α感受态细胞,但低于野生型菌株911。DH5α-pL1在培养7 d后,质粒留存率逐渐下降,培养24 h后表现出一定的适应性代价,相对竞争指数<1。致病性试验结果显示,对照组及大肠杆菌DH5α感受态细胞组大蜡螟幼虫存活率为100%;注射菌株911和DH5α-pL1 120 h后,幼虫存活率分别为50%和70%。【结论】携带bla_(CTX-M-123)基因的质粒可在种内转移并介导转化子耐药,且该质粒的稳定性弱,具有一定的适应性代价。此外,携带bla_(CTX-M-123)基因的质粒具有增强受体菌致病力的作用,增加了感染的几率和治疗难度。研究结果为细菌的耐药机制研究和防控提供理论依据。 展开更多
关键词 大肠杆菌 bla_(CTX-M-123)基因 转化试验 适应性代价 致病性
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