Real-time PCR和常规PCR方法快速鉴定肉骨粉中的牛源性成份 被引量：12

1

作者 李林 陈继明 王志亮 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期50-54,共5页

疯牛病是一种严重危害动物和人类健康的疾病 ,其病原朊病毒可以通过食物链进行传播 ,因此建立准确的检测牛源性成份的方法非常重要。我们采用常规PCR和Real_timePCR中的TaqMan技术建立了快速鉴定牛源性成份的方法 ,使用Chelex_10 0提取... 疯牛病是一种严重危害动物和人类健康的疾病 ,其病原朊病毒可以通过食物链进行传播 ,因此建立准确的检测牛源性成份的方法非常重要。我们采用常规PCR和Real_timePCR中的TaqMan技术建立了快速鉴定牛源性成份的方法 ,使用Chelex_10 0提取肉骨粉中的DNA ,过程简单可靠仅需要 2 0min左右。对不同含量的牛肉骨粉进行检测 ,常规PCR能够检测到的最低含量是 0 0 0 1% ,而Real_timePCR对相同的样品进行检测所得到的灵敏度更高 ,最高可达到 0 0 0 0 1% ,两种PCR方法的鉴定过程都非常简单快速 ,各需要 2h左右。 展开更多

关键词 牛海绵状脑病 肉骨粉 Real—tinm PCR TAQMAN探针

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Dot-PAA-ELISA快速检测猪丹毒抗体方法的建立与应用 被引量：9

2

作者 肖国生 曹三杰 文心田 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期59-62,共4页

以猪丹毒CD30 0 4 (1a型 )和C4 3_12 (2型 )菌株为抗原提取菌株 ,EDTA渗透法提取的抗原作为膜载抗原 ,建立了Dot_PAA_ELISA检测猪丹毒血清抗体方法 ,经研究确定了Dot_PAA_ELISA的最佳工作条件。试验制备的诊断膜片特异性强 ,不与猪瘟、... 以猪丹毒CD30 0 4 (1a型 )和C4 3_12 (2型 )菌株为抗原提取菌株 ,EDTA渗透法提取的抗原作为膜载抗原 ,建立了Dot_PAA_ELISA检测猪丹毒血清抗体方法 ,经研究确定了Dot_PAA_ELISA的最佳工作条件。试验制备的诊断膜片特异性强 ,不与猪瘟、猪伪狂犬病、猪肺疫、猪链球菌病、猪大肠杆菌病、仔猪副伤寒、猪布氏杆菌病、猪衣原体病的阳性血清发生交叉反应 ;灵敏度高 ,能够最低检出猪血清中含 2 6 1× 10 -9g的猪IgG抗体 ;膜片保存期长 ,在室温可保存 4个月 ,4℃可保存 7个月其检测活性不变。用该方法检测了仔猪免疫后抗体变化 ,并通过猪丹毒三型混合强毒攻毒试验确定了猪能抗强毒攻击的抗体临界保护值为 1∶32。对 336份血清进行猪丹毒抗体检测 ,阳性检出率为 96 13%。试验结果表明 ,本试验方法操作简便、快速准确、结果可存档、重复性和稳定性好 ,所用试剂材料均可做到标准化 。 展开更多

关键词 Dot-PAA-ELISA 猪丹毒 抗体检测

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活的非可培养状态细菌生物学特性研究进展 被引量：10

3

作者 李影 王伟利 +1 位作者 段锐 钱爱东 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第4期68-71,共4页

活的非可培养状态(VBNC)细菌是一类利用现行培养技术无法分离得到的微生物群,对传统微生物学产生了重要影响。特别是一些处于VBNC状态下的病原菌,一直是最令人担忧且不可忽视的研究对象。论文从种类、形态、排列、组成、致病性、抗原性... 活的非可培养状态(VBNC)细菌是一类利用现行培养技术无法分离得到的微生物群,对传统微生物学产生了重要影响。特别是一些处于VBNC状态下的病原菌,一直是最令人担忧且不可忽视的研究对象。论文从种类、形态、排列、组成、致病性、抗原性、黏附性,以及复苏等方面综述了VBNC细菌的生物学特性,旨在更加深入了解和认识VBNC细菌,从而对VBNC病原菌的防控起到积极作用。 展开更多

关键词 细菌 活的非可培养状态 生物学特性

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Dot-PPA-ELISA检测仔猪副伤寒血清抗体方法的研究 被引量：2

4

作者 黄艳艳 曹三杰 文心田 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期63-66,共4页

以沙门氏菌的改良H E 抗原为膜载抗原 ,建立了检测仔猪副伤寒血清抗体的Dot_PPA_ELISA方法。研究选取了特异性良好的抗原 ,确定了Dot_PPA_ELISA的最佳工作条件 ,初步确定了感染仔猪副伤寒的Dot_PPA_ELISA抗体阳性标准为 1∶32。本研究... 以沙门氏菌的改良H E 抗原为膜载抗原 ,建立了检测仔猪副伤寒血清抗体的Dot_PPA_ELISA方法。研究选取了特异性良好的抗原 ,确定了Dot_PPA_ELISA的最佳工作条件 ,初步确定了感染仔猪副伤寒的Dot_PPA_ELISA抗体阳性标准为 1∶32。本研究制备的诊断膜片特异性强、敏感性高 ,能够检测到 1∶2 0 4 8稀释的动物试验阳性血清 ;该方法操作简便快捷、结果客观、易于判定、各种试剂材料均可做到标准化 ,适合规模化养猪场仔猪副伤寒的抗体监测以及流行病学调查之用。 展开更多

关键词 DOT-PPA-ELISA 仔猪副伤寒 抗体监测

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影响嗜水气单胞菌溶血素产生的因素 被引量：9

5

作者 熊焰 周煜 汪开毓 《中国兽医科技》 CSCD 1997年第7期25-25,共1页

影响嗜水气单胞菌溶血素产生的因素熊焰周煜汪开毓（四川农业大学动物科技学院雅安６２５０１４）嗜水气单胞菌广泛存在于淡水、污水及土壤中，常引起鱼类、中华鳖等水生动物的出血性败血病。嗜水气单胞菌能产生溶血素，溶血素是该菌的... 影响嗜水气单胞菌溶血素产生的因素熊焰周煜汪开毓（四川农业大学动物科技学院雅安６２５０１４）嗜水气单胞菌广泛存在于淡水、污水及土壤中，常引起鱼类、中华鳖等水生动物的出血性败血病。嗜水气单胞菌能产生溶血素，溶血素是该菌的重要致病因子。作者从患红脖子病的病... 展开更多

关键词 嗜水气单胞菌 溶血素

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青海省西宁地区弓形虫病的血清学调查 被引量：3

6

作者 牛小迎 陆艳 马利青 《中国动物检疫》 CAS 2009年第7期43-43,共1页

采用弓形虫间接血凝实验(IHA),对来自青海省西宁地区的四个藏獒养殖基地的118份藏獒血清,进行了针对弓形虫抗体的检测。结果共检出11份阳性血清样品,阳性率为9.32%,表明西宁地区部分藏獒养殖基地中存在弓形虫病的感染。

关键词 藏獒 弓形虫 IHA

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猪血清中游离CD_2对红细胞的溶解作用 被引量：4

7

作者 肖俊杰 陈德坤 《西北农业大学学报》 CSCD 1992年第2期63-66,共4页

猪血清中加入红细胞(RBC)后观察溶血的结果表明,正常猪血清对绵羊、山羊、牛、马、家兔、豚鼠及鸡RBC的溶血指数分别为72.10±22.84％,84.87±22.26％,7.66±4.77％,66.60±19.56％,16.40±7.40％,86.59±15.29... 猪血清中加入红细胞(RBC)后观察溶血的结果表明,正常猪血清对绵羊、山羊、牛、马、家兔、豚鼠及鸡RBC的溶血指数分别为72.10±22.84％,84.87±22.26％,7.66±4.77％,66.60±19.56％,16.40±7.40％,86.59±15.29％,88.45±26.76％;对同种RBC无溶解作用或具微弱的溶解作用。根据猪血清对RBC的溶解作用,经绵羊红细胞(SRBC)吸收或加入SRBC CD_(58)(淋巴细胞功能相关抗原-3,LFA-3)竞争结合后即显著降低或消失,提出了猪血清溶解RBC的作用与血清中游离CD_2的存在有关的论断。 展开更多

关键词 溶血 红细胞 血清学 猪 游离CD2

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不同途径接种卡介苗对仔猪血清补体溶血单位的影响 被引量：1

8

作者 王金宝 吕永艳 +5 位作者 张乐萃 王宝维 李庆怀 甘孟侯 卢正兴 刘曰才 《中国兽医科技》 CSCD 1996年第1期32-34,共3页

不同途径接种卡介苗对仔猪血清补体溶血单位的影响王金宝，吕永艳，张乐萃，王宝维，李庆怀，甘孟侯，卢正兴，刘曰才（莱阳农学院２６５２００）（中国农业大学动物医学院）（烟台农业学校）鉴于动物免疫中存在的一些问题，动物的免疫... 不同途径接种卡介苗对仔猪血清补体溶血单位的影响王金宝，吕永艳，张乐萃，王宝维，李庆怀，甘孟侯，卢正兴，刘曰才（莱阳农学院２６５２００）（中国农业大学动物医学院）（烟台农业学校）鉴于动物免疫中存在的一些问题，动物的免疫状态已引起人们的广泛重视，同时也加... 展开更多

关键词 仔猪 血清 补体溶血单位 卡介苗 免疫

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抗鸡补体C3抗体的制备及其应用 被引量：1

9

作者 马雪云 牛钟相 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期359-362,共4页

选取鸡源补体C3α链的21个氨基酸残基序列,人工合成模拟C3分子的21肽[741-761],与牛血清白蛋白载体偶联结合后,制成人工合成抗原复合物。将此人工合成抗原加弗氏佐剂制成油乳剂疫苗,免疫注射家兔制备成抗21肽抗体。从抗血清中提纯IgG,... 选取鸡源补体C3α链的21个氨基酸残基序列,人工合成模拟C3分子的21肽[741-761],与牛血清白蛋白载体偶联结合后,制成人工合成抗原复合物。将此人工合成抗原加弗氏佐剂制成油乳剂疫苗,免疫注射家兔制备成抗21肽抗体。从抗血清中提纯IgG,用以检测不同动物血清中C3含量。结果表明,人工合成的C3分子的21肽复合抗原具有很强的免疫原性,制成的抗血清的IgG效价达29,且能与不同动物血液的C3分子发生特异性结合;用该IgG对鸡、猪、山羊、牛和豚鼠体内的C3进行了检测,其含量分别为(0.34±0.005)、(1.47±0.008)、(1.70±0.005)、(1.78±0.007)、(4.18±0.008)g/L,发现鸡体内的C3含量明显低于其他几种动物,差异极显著(P<0.01),这可能是鸡体对细菌性疫苗免疫效果不佳的主要原因。 展开更多

关键词 C3 21肽 半抗原载体 抗体

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肌注PHA对猪血清中补体C3、C4的影响 被引量：2

10

作者 肖啸 何克灿 +2 位作者 沈学文 张荣华 杨东 《山东畜牧兽医》 2011年第1期1-4,共4页

本试验对各猪只肌注PHA,通过测定不同时期血清中补体C3、C4的浓度,来判定PHA是否对补体有影响作用,并测定有显著影响的PHA剂量。试验中,把PHA分成5个剂量组:低剂量组(0.4mg/kg)、中剂量组(0.8mg/kg)、高剂量组(1.2mg/kg)、超高剂量组(1.... 本试验对各猪只肌注PHA,通过测定不同时期血清中补体C3、C4的浓度,来判定PHA是否对补体有影响作用,并测定有显著影响的PHA剂量。试验中,把PHA分成5个剂量组:低剂量组(0.4mg/kg)、中剂量组(0.8mg/kg)、高剂量组(1.2mg/kg)、超高剂量组(1.6 mg/kg)、对照组(0.8mg/kg生理盐水)进行肌肉注射。各试验猪均按正常管理、饲喂,并在注射后的第1、7、14d对各组猪只采血,测定其血清中补体的含量。结果显示,不同剂量的PHA对猪只的补体系统刺激作用不同,其中中剂量组可以提高机体的补体水平,并保持一定时间的高水平,低剂量组的猪只补体水平稍有升高,而高剂量组和超高剂量组则使机体的补体水平有所降低。 展开更多

关键词 猪 植物凝集素 补体C3、C4

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怎样做好正向间接血凝试验 被引量：3

11

作者 邱立新 邱美珍 杜丽飞 《湖南畜牧兽医》 2010年第6期36-39,共4页

间接血凝实验(IHA)是最简单、快速、适用的血清学诊断技术,但实验结果受操作技术影响较大,为规范操作,本文就实验中器材、试剂、样品、过程和判定标准等方面的优化做一综述,以期作为本实验的借鉴。

关键词 间接血凝试验

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布氏杆菌病微量温热感作补体结合试验与常规补体结合试验的比较

12

作者 陈乃昌 刘玉梅 《中国畜禽传染病》 CSCD 1989年第2期105-108,共4页

应用微最温热感作补体结合试验(微量法)对1599份牛血清和482头羊血清进行了检测,并与农林部颁发的补体结合反应试管法(简称常规法)作了比较,符合率分别达到96.93％和97.09％。微量法除要求添置一些分装器材外。主要优点是节省试剂、可... 应用微最温热感作补体结合试验(微量法)对1599份牛血清和482头羊血清进行了检测,并与农林部颁发的补体结合反应试管法(简称常规法)作了比较,符合率分别达到96.93％和97.09％。微量法除要求添置一些分装器材外。主要优点是节省试剂、可进行不同程度的机械化操作、节省时间、减轻劳动强度、提高工效,有条件的实验室可用以替代常规法。 展开更多

关键词 布氏杆菌 补体结合试验 微量温热感

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野木瓜水溶性多糖的分离纯化及抗补体活性研究 被引量：14

13

作者 王文平 郭祀远 +2 位作者 李琳 孙黔云 唐维媛 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第5期120-124,共5页

采用水提醇沉工艺获得了水溶性野木瓜粗多糖(CCP),经过Sevag法脱蛋白,大孔树脂脱色及透析,得到野木瓜精多糖,再经DEAE-纤维素和Sepharose Cl-6B柱层析,从野木瓜中分离得到多糖组分CCP1,经过高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)鉴定为均一组分,测... 采用水提醇沉工艺获得了水溶性野木瓜粗多糖(CCP),经过Sevag法脱蛋白,大孔树脂脱色及透析,得到野木瓜精多糖,再经DEAE-纤维素和Sepharose Cl-6B柱层析,从野木瓜中分离得到多糖组分CCP1,经过高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)鉴定为均一组分,测定其相对分子量(MW)为2.879×106D。高效液相法测定CCP1的单糖组成为:鼠李糖、阿拉伯糖、果糖、甘露糖、葡萄糖,其摩尔比为0.034:0.228:0.045:0.055:0.638。补体结合实验表明,多糖CCP1在体外具有一定抗补体活性,并呈一定的剂量效应关系。 展开更多

关键词 野木瓜 多糖 分离 纯化 抗补体活性

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猪红细胞免疫黏附功能与CR1-like表达水平的研究 被引量：3

14

作者 张静静 王春 +5 位作者 贾瑞璞 尹伟 范阔海 孙娜 孙耀贵 李宏全 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期593-604,共12页

本研究旨在探讨不同长白猪红细胞CR1-like表达量的差异性,以及CR1-like表达量与免疫黏附功能的关系,为后期研究猪红细胞CR1-like的免疫机理提供理论数据。运用流式细胞术检测长白猪红细胞免疫黏附荧光大肠杆菌的水平及红细胞CR1-like表... 本研究旨在探讨不同长白猪红细胞CR1-like表达量的差异性,以及CR1-like表达量与免疫黏附功能的关系,为后期研究猪红细胞CR1-like的免疫机理提供理论数据。运用流式细胞术检测长白猪红细胞免疫黏附荧光大肠杆菌的水平及红细胞CR1-like表达量,运用单因素方差分析、单样本Kolmogorov-Smirnov检验等多种统计方法分析红细胞CR1-like表达量的特点及其与免疫黏附功能之间的相关性。结果,猪红细胞免疫黏附功能在个体水平上分为低,中和高三种类型,各种类型的平均荧光值依次为33.897±3.294（34.483%）、68.076±12.145（46.552%）和129.232±8.143（18.966%）;CR1-like表达量在个体水平上分为低,中和高三种类型,各种类型的平均荧光值依次为21.479±0.865（14.583%）、27.984±2.218（81.034%）和36.690±0.058（6.897%）;相关性分析结果显示,红细胞免疫黏附水平与CR1-like表达水平达到显著相关程度（r=0.835,P〈0.01）,通过回归分析,获得二者符合典型的S曲线（lny=7.817-102.911x,r2=0.729,P〈0.01）。上述结果表明,不同的长白猪个体的红细胞CR1-like表达量具有差异性,且该特点与猪红细胞免疫黏附水平具有相关性。 展开更多

关键词 猪 红细胞CR1-like 免疫黏附 表达量 差异性 相关性

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猪红细胞类补体受体Ⅰ型膜结合蛋白的筛选 被引量：2

15

作者 张琪琪 凌小雅 +5 位作者 孙雨晨 尹伟 范阔海 孙娜 孙耀贵 李宏全 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期42-48,共7页

本研究旨在鉴定猪红细胞类补体受体Ⅰ型(complement receptor 1-like,CR1-like)的膜结合蛋白,以期为探讨CR1-like在膜上分布的分子基础提供理论数据。采用免疫磁珠沉淀的方法纯化猪红细胞CR1-like,利用还原性SDS-PAGE电泳及Western-blo... 本研究旨在鉴定猪红细胞类补体受体Ⅰ型(complement receptor 1-like,CR1-like)的膜结合蛋白,以期为探讨CR1-like在膜上分布的分子基础提供理论数据。采用免疫磁珠沉淀的方法纯化猪红细胞CR1-like,利用还原性SDS-PAGE电泳及Western-blot试验,得出猪红细胞CR1-like的分子大小;利用质谱技术对纯化的CR1-like免疫沉淀复合物进行鉴定,并对质谱数据进行相关分析。CR1-like免疫沉淀复合物的还原性SDS-PAGE和Western-blot的鉴定结果显示,CR1-like分子大小约为50 ku;CR1-like免疫沉淀复合物的质谱鉴定筛选出117个候选蛋白,根据肽段数、特异肽段数、序列覆盖率、分值等及对候选蛋白的生物信息学分析筛选出FERMdomain-containing protein作为候选蛋白进行下一步试验。上述结果表明,本研究成功建立了免疫磁珠沉淀CR1-like方法,并筛选出CR1-like的膜结合候选蛋白。 展开更多

关键词 猪红细胞 CR1-like 膜结合蛋白

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MHC四聚体技术研究进展 被引量：1

16

作者 邓阳 高顺平 +1 位作者 吴国华 张强 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第9期74-79,共6页

主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)-四聚体(tetramer)技术是模拟生物体内抗原提呈原理,将4分子的生物素化的MHC-抗原肽单聚体与1分子荧光标记的链霉亲合素连接成四聚体复合物,定向、定量对抗原特异性T细胞进... 主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)-四聚体(tetramer)技术是模拟生物体内抗原提呈原理,将4分子的生物素化的MHC-抗原肽单聚体与1分子荧光标记的链霉亲合素连接成四聚体复合物,定向、定量对抗原特异性T细胞进行分析及检测。该技术已被用于疾病诊断、疾病防控和相关科学研究,尤其在病毒、癌症、自身免疫疾病方面具有广阔的应用前景,是当今免疫学和分子生物学领域研究的热点之一。文章就MHC的分子结构基础,四聚体的制备、优化及其应用做一综述。 展开更多

关键词 MHCⅠ类分子 MHCⅡ类分子 抗原特异性T细胞 抗原肽 四聚体

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念珠菌型小鼠乳房炎组织损伤程度与C_(3c)补体激活水平相关性的研究 被引量：1

17

作者 落智荣 帖菊霞 +1 位作者 曹文斌 王文魁 《中国畜牧兽医》 CAS 2007年第1期92-93,共2页

本试验将36只父母代分娩后4～5d的母鼠通过人工乳腺注射念珠菌感染分别构建正常小鼠、裸鼠和免疫缺陷型小鼠乳房炎模型，并分别建立未用药组和对照组（用药组）（n=6），通过对血清中C3c水平的检测以及乳腺病理组织切片的观察，结果表... 本试验将36只父母代分娩后4～5d的母鼠通过人工乳腺注射念珠菌感染分别构建正常小鼠、裸鼠和免疫缺陷型小鼠乳房炎模型，并分别建立未用药组和对照组（用药组）（n=6），通过对血清中C3c水平的检测以及乳腺病理组织切片的观察，结果表明乳腺型念珠菌感染可以激活补体旁路，且C3c水平与感染后炎症的程度呈正相关，各处理组差异显著；外源性抗真菌药物的治疗可降低C3c水平，与C3c水平呈负相关。 展开更多

关键词 念珠菌型乳房炎 组织损伤 C3c补体激活 小鼠

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肠炎沙门菌感染对蛋鸡肝脏ATP5G3、ND2基因表达的影响 被引量：1

18

作者 李宇 冯忠义 +5 位作者 任艳茹 彭亚南 刘龙 杨光会 苗秀秀 李显耀 《山东畜牧兽医》 2023年第4期1-4,共4页

肠炎沙门菌是引起急性胃肠炎的主要病原菌,感染后会出现发热、腹泻和呕吐等症状,属于无宿主特异性但是具有侵害性的病原菌。该病原菌不仅能使家禽死亡造成严重的经济损失,还会使人食物中毒,引发公共卫生安全。为探讨ATP5G3和ND2基因对... 肠炎沙门菌是引起急性胃肠炎的主要病原菌,感染后会出现发热、腹泻和呕吐等症状,属于无宿主特异性但是具有侵害性的病原菌。该病原菌不仅能使家禽死亡造成严重的经济损失,还会使人食物中毒,引发公共卫生安全。为探讨ATP5G3和ND2基因对蛋鸡肠炎沙门菌感染后的表达调控,本试验选取17周龄海兰褐蛋鸡50只,随机分为2组,试验组接种0.3 ml肠炎沙门菌菌液,对照组接种等量PBS。感染后1、3、5、7、14 d分别采集照组和试验组肝脏组织,检测ATP5G3和ND2在肝脏中的表达变化。结果表明,海兰褐鸡感染肠炎沙门菌后,试验组ATP5G3和ND2的表达量均在5 dpi开始高于对照组,表现为差异极显著(P<0.01)。初步揭示了肠炎沙门菌在宿主感染后影响ATPase基因的表达,进而影响机体能量代谢。 展开更多

关键词 肠炎沙门菌 ATP5G3 ND2 基因表达 能量代谢

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牛全血水解液的制备及在细胞培养上的应用

19

作者 林长生 李惠芳 +1 位作者 刘凤华 刘瑞凝 《中国畜禽传染病》 CSCD 1991年第2期54-56,共3页

为提供来源广、较经济、适于细胞生长的营养液,我们试用牛全血制备水解液对仔猪肾细胞、乳兔肾细胞、鸡胚细胞进行培养试验,取得满意结果。材料和方法一、抗凝牛全血:为10%枸椽酸钠抗凝血,于4～8℃冰箱保存。二、离子交换树脂:多乙烯多... 为提供来源广、较经济、适于细胞生长的营养液,我们试用牛全血制备水解液对仔猪肾细胞、乳兔肾细胞、鸡胚细胞进行培养试验,取得满意结果。材料和方法一、抗凝牛全血:为10%枸椽酸钠抗凝血,于4～8℃冰箱保存。二、离子交换树脂:多乙烯多胺环氧型阴离子交换树脂(弱碱性,701型)。用前。 展开更多

关键词 牛全血水解液 制备 细胞培养

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应用3种检验方法测定马传贫免疫抗体的效果观察

20

作者 张继 于秀英 +3 位作者 李艳军 白芙蓉 刘彩红 张志明 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2000年第11期27-28,共2页

关键词 马传贫 免疫抗体 检验方法

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