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miR-144-5p在不同体型双峰驼血浆外泌体中的表达及靶基因验证 被引量：1
1
作者 斯日古楞 于雯 +3 位作者 降晓薇 李子怡 金君健 白浩宇 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第3期1022-1032,共11页
【目的】探讨双峰驼血浆外泌体中miR-144-5p在脂质代谢中的潜在调控机制。【方法】采用超速离心法分离不同肥瘦程度的两组双峰驼血浆外泌体后,运用透射电子显微镜和纳米颗粒跟踪分析技术对分离的外泌体进行形态学观察与鉴定。提取外泌体... 【目的】探讨双峰驼血浆外泌体中miR-144-5p在脂质代谢中的潜在调控机制。【方法】采用超速离心法分离不同肥瘦程度的两组双峰驼血浆外泌体后,运用透射电子显微镜和纳米颗粒跟踪分析技术对分离的外泌体进行形态学观察与鉴定。提取外泌体总RNA后,进行高通量测序,鉴定筛选出在两组双峰驼血浆外泌体中差异表达的miRNA。应用TargetScan和miRWalk在线软件预测差异表达miRNA的靶基因,并利用DAVID和KEGG在线分析系统对靶基因进行GO功能和KEGG通路富集分析。构建含靶位点的野生型载体和突变型表达质粒载体,通过miR-144-5p与293T细胞共转染进行双荧光素酶相对活性检测,验证miR-144-5p与其候选基因的作用关系,探讨其在脂质代谢调控中的作用机制。【结果】双峰驼血浆外泌体呈杯状或圆形,直径约100 nm,粒径分布范围为30~150 nm;两组双峰驼外泌体间共有40个差异表达miRNAs,miR-144-5p是差异最显著的miRNA(P<0.01);miR-144-5p序列在不同物种间高度保守;预测其靶基因是过氧化物酶体增殖受体γ辅激活因子α(PGC-1α),该基因主要参与胆固醇平衡和脂质磷酸化等过程,富集于甘油酯代谢、胆固醇代谢和动脉粥样硬化等信号通路;miR-144-5p对野生型PGC-1α-3′-UTR载体的荧光素酶相对活性具有极显著抑制作用(P<0.01),而在突变型PGC-1α重组质粒组中,转染后48 h时,miR-144-5p的荧光素酶活性与阴性对照组相比无显著差异(P>0.05),表明miR-144-5p通过结合PGC-1α基因种子序列来抑制PGC-1α的表达。【结论】本研究揭示了miR-144-5p在不同体型双峰驼血浆外泌体中的表达差异,并证实其通过调控PGC-1α在脂质代谢中发挥重要作用。 展开更多
关键词 双峰驼 外泌体 miR-144-5p 脂质代谢 靶基因 双荧光素酶报告系统
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支链氨基酸在肉鸡低蛋白质饲粮中应用的研究进展
2
作者 李彬 陈柳 +1 位作者 虞洁 梅绍锋 《动物营养学报》 北大核心 2025年第7期4201-4208,共8页
维持支链氨基酸(BCAA)平衡对于调节肉鸡的糖、脂代谢和蛋白质合成具有重要作用。低蛋白质饲粮容易引起BCAA比例失衡,对肉鸡生长性能产生负面影响。肉鸡的BCAA需要量受饲粮组成、生长发育阶段及生产效率等因素的影响。本文结合国内外的... 维持支链氨基酸(BCAA)平衡对于调节肉鸡的糖、脂代谢和蛋白质合成具有重要作用。低蛋白质饲粮容易引起BCAA比例失衡,对肉鸡生长性能产生负面影响。肉鸡的BCAA需要量受饲粮组成、生长发育阶段及生产效率等因素的影响。本文结合国内外的研究进展,系统阐述了BCAA在肉鸡体内的代谢途径及其推荐比例,并基于BCAA的拮抗效应以及不同形式氨基酸的消化动力学差异,对不同饲料原料的BCAA组成特征及其在肉鸡低蛋白质饲粮中的应用进行了综述,旨在为精准评估促进肉鸡生长以及肌肉蛋白质沉积的BCAA需要量提供参考。 展开更多
关键词 肉鸡 支链氨基酸 低蛋白质饲粮 代谢机制 平衡比例
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动物蛋白序列中的尘封抗菌肽及其获取方法
3
作者 杭柏林 刘保国 +3 位作者 隋伊林 乃吉麦·努尔沙提 高春宇 李杰 《现代农业科技》 2025年第8期152-155,共4页
抗生素滥用导致的细菌耐药性影响了人与动物细菌性疾病的治疗。寻找抗生素替代物是解决细菌耐药性的一项重要举措。抗菌肽是一种有潜力的抗生素替代物,对解决细菌耐药性问题具有重要意义。开发新抗菌肽可为临床提供更多可用抗菌物质备... 抗生素滥用导致的细菌耐药性影响了人与动物细菌性疾病的治疗。寻找抗生素替代物是解决细菌耐药性的一项重要举措。抗菌肽是一种有潜力的抗生素替代物,对解决细菌耐药性问题具有重要意义。开发新抗菌肽可为临床提供更多可用抗菌物质备选物。尘封抗菌肽是“尘封”在宿主蛋白氨基酸序列中的具有抗菌活性的片段多肽,市场潜力巨大,具有重要的开发价值。基于此,就目前在尘封抗菌肽方面的研究进展进行了简要综述,以期为深入开发尘封抗菌肽提供参考。 展开更多
关键词 尘封抗菌肽 动物蛋白 氨基酸序列 耐药性 获取方法
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慢性冷刺激条件下Ogt基因缺失对小鼠肝脏线粒体稳态的影响
4
作者 姚睿智 牛春雨 +2 位作者 韩世哲 樊宏超 李士泽 《内蒙古民族大学学报(自然科学版)》 2025年第4期22-30,共9页
为探索慢性冷刺激条件下O-连接的β-N-乙酰葡糖胺修饰(O-linkedβ-N-acetylglucosamine modification,O-GlcNAc)糖基化在调节线粒体稳态中的作用,以野生型(WT)和肝脏特异性敲除Ogt(Ogt lKO)C57BL/6J小鼠为实验动物,将其随机分为WT对照组... 为探索慢性冷刺激条件下O-连接的β-N-乙酰葡糖胺修饰(O-linkedβ-N-acetylglucosamine modification,O-GlcNAc)糖基化在调节线粒体稳态中的作用,以野生型(WT)和肝脏特异性敲除Ogt(Ogt lKO)C57BL/6J小鼠为实验动物,将其随机分为WT对照组、WT冷刺激组、Ogt lKO对照组和Ogt lKO冷刺激组,采用Westernblot方法检测慢性冷刺激前后WT和OgtlKO小鼠肝脏组织中O-GlcNAc糖基化修饰和OGT表达水平,线粒体中动力相关蛋白1(Dynamin-related protein 1,DRP1)、线粒体融合素1(Mitofusin-1,MFN1)、PTEN诱导假定激酶1(PTEN induced putative kinase 1,PINK1)、帕金森病蛋白(Parkin protein,Parkin)及过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1alpha(Peroxisome proliferator-activated receptorγcoactivator 1-alpha,PGC-1α)表达水平。结果显示:慢性冷刺激可导致WT型小鼠肝脏内OGT表达水平及O-GlcNAc糖基化修饰水平显著升高(P<0.05),线粒体中DRP1、MFN1表达水平显著升高(P<0.05),PINK1、Parkin及PGC-1α表达水平无显著差异;而与WT型小鼠相比,Ogt lKO小鼠在慢性冷刺激后,线粒体中DRP1、MFN1及PINK1表达水平显著升高(P<0.05),而Parkin和PGC-1α表达水平无显著差异。该结果提示在慢性冷刺激条件下,小鼠肝脏组织中线粒体功能稳态失衡,进而导致线粒体自噬,而Ogt基因缺失可加速这一进程。 展开更多
关键词 O-GLCNAC 冷刺激 肝脏 线粒体稳态
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甩舌行为牛血液生化变化及其与口腔菌群变化的相关性 被引量：1
5
作者 赛波拉·卡马力 孙磊 +6 位作者 冯强 王新皓 马雪连 李娜 孙亚伟 钟旗 姚刚 《中国兽医学报》 北大核心 2025年第4期825-835,共11页
研究甩舌行为(tongue rolling,TR)牛的血液生化变化及其与口腔菌群变化的相关性,为进一步探索动物口腔菌群、生化以及行为变化之间的关系奠定基础,通过调控口腔菌群防治TR提供理论依据。拟对具有TR牛与无TR临床症状的健康牛(healthy con... 研究甩舌行为(tongue rolling,TR)牛的血液生化变化及其与口腔菌群变化的相关性,为进一步探索动物口腔菌群、生化以及行为变化之间的关系奠定基础,通过调控口腔菌群防治TR提供理论依据。拟对具有TR牛与无TR临床症状的健康牛(healthy control,H)的血液生化指标和口腔菌群变化进行分析比较,以期探讨TR牛的血液生化及其与口腔菌群变化的相关性。采集各组牛尾静脉血样品用于检测血液生化指标及应激相关激素指标。采集各组牛口腔拭子进行16S rRNA基因测序,分析其口腔菌群组成结构和功能变化。H组和TR组牛的血液生化指标检测结果显示,TR组牛白蛋白(ALB)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、钙离子(Ca2+)和皮质醇(Cortisol)浓度显著高于H组牛(P<0.05)。TR与H组牛口腔菌群Beta多样性具有显著性差异(P<0.05)。在属水平上,TR组牛口腔菌群中假单胞菌属(Pseudomonas)、肠杆菌属(Enterobacter)、黄单胞菌属(Xanthomonas)等菌属的相对丰度显著高于H组牛(P<0.05)。然而,TR组牛口腔菌群中四合球菌属(Tessaracoccus)、苏黎世杆菌属(Turicibacter)、单球菌属(Monoglobus)、迪茨氏菌属(Dietzia)、双歧杆菌属(Bifidobacterium)等菌属的相对丰度显著低于H组牛(P<0.05)。在KEGG新陈代谢功能三级通路中,TR组牛口腔菌群的硫胺素代谢通路、硫辛酸代谢通路、半胱胺和蛋氨酸代谢通路相对丰度显著低于H组牛(P<0.05)。斯皮尔曼相关性表明,白蛋白浓度(ALB)、AST与假单胞菌属(Pseudomonas)、寡养单胞菌属(Stenotrophomonas)等菌属相对丰度呈显著正相关。假单胞菌属(Pseudomonas)、寡养单胞菌属(Stenotrophomonas)和鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas)等菌属相对丰度与脂肪酸代谢通路、磷酸和磷酸盐代谢通路以及硫辛酸代谢通路相对丰度呈显著正相关。白蛋白(ALB)与肌醇磷酸代谢、磷酸和磷酸盐代谢通路呈显著正相关。研究发现,TR组与H组牛的血液生化指标和口腔菌群存在显著性差异。此外,口腔菌群的组成结构、菌群功能与宿主的生化功能之间存在一定的相关性。这表明TR可能与宿主的生化指标变化以及口腔菌群的组成结构和功能变化相关联。 展开更多
关键词 安格斯肉牛 甩舌行为 生化 口腔菌群
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表达GoAstV-2 Cap蛋白的重组FAdV-4的构建与鉴定 被引量：1
6
作者 李星雨 李岩 +14 位作者 杨盼盼 刘俊杰 相梦佳 朱玉涛 邱路遥 乔麒龙 张伯顺 卜德新 韩城昊 于春梅 丛雁方 王增 李建丽 王白玉 赵军 《中国兽医学报》 北大核心 2025年第3期443-448,513,共7页
为构建表达鹅星状病毒基因2型(GoAstV-2)衣壳蛋白(Cap)的重组禽腺病毒4型(FAdV-4),本研究将GoAstV-2的Cap基因表达盒插入到含有FAdV-4感染性克隆p15A-cm-FAdV4-HNJZ中FAdV4基因组的1966 bp自然缺失区,将获得的重组感染性克隆p15A-cm-FAd... 为构建表达鹅星状病毒基因2型(GoAstV-2)衣壳蛋白(Cap)的重组禽腺病毒4型(FAdV-4),本研究将GoAstV-2的Cap基因表达盒插入到含有FAdV-4感染性克隆p15A-cm-FAdV4-HNJZ中FAdV4基因组的1966 bp自然缺失区,将获得的重组感染性克隆p15A-cm-FAdV4-HNJZ-Cap/GoAstV-2利用限制性内切酶线性化后转染鸡肝癌细胞系(chicken hepatoma cell line,LMH),拯救出表达Cap蛋白的重组病毒rFAdV4-Cap/GoAstV-2。将重组病毒在LMH细胞中连续传至第15代,提取重组病毒基因组DNA,用插入位点两侧的鉴定引物进行PCR和利用抗Cap蛋白多克隆抗体进行间接免疫荧光试验和Western blot对重组病毒进行鉴定,同时对重组病毒在LMH细胞中的复制动态进行了研究。结果显示,GoAstV-2的Cap基因能够稳定存在于重组病毒rFAdV4-Cap/GoAstV-2基因组中,而且获得稳定表达;重组病毒具有良好的体外复制能力。本研究所制备的重组病毒rFAdV4-Cap/GoAstV-2为研制防控鹅FAdV-4和GoAstV-2混合感染的新型高效二联灭活疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 鹅星状病毒基因2型 禽病毒4型 CAP蛋白 二联灭活疫苗
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m^(6)A甲基化在骨骼肌发育中的生物学作用及调控机制研究进展 被引量：1
7
作者 何思琦 陈倩 +4 位作者 张贺春 陈红艳 马月辉 周胜花 赵倩君 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第4期1511-1521,共11页
N6-甲基腺苷修饰(N6-methyladenosine, m^(6)A),即RNA腺嘌呤A碱基的第6位氮原子发生甲基化,是真核生物细胞中最普遍和最丰富的RNA修饰。动态可逆的m^(6)A修饰由甲基转移酶样3(METTL3)及其辅助因子组成的甲基转移酶复合物催化,脂肪质量... N6-甲基腺苷修饰(N6-methyladenosine, m^(6)A),即RNA腺嘌呤A碱基的第6位氮原子发生甲基化,是真核生物细胞中最普遍和最丰富的RNA修饰。动态可逆的m^(6)A修饰由甲基转移酶样3(METTL3)及其辅助因子组成的甲基转移酶复合物催化,脂肪质量和肥胖相关基因(FTO)、ALKB同源基因5(ALKBH5)等去甲基化酶消除RNA甲基化修饰信号,并通过m^(6)A结合蛋白识别RNA m^(6)A修饰位点。m^(6)A修饰能够调控RNA的剪接、出核、翻译和稳定性等分子调节作用,已成为表观遗传学领域的研究热点。骨骼肌是动物机体重要的组成部分,其发育涉及成肌细胞增殖、迁移、分化和融合形成肌管细胞,进而形成肌肉纤维等多个过程,受多种转录因子及表观遗传调控。其中,m^(6)A甲基化修饰参与调控肌肉干细胞的维持、成肌细胞增殖及分化。越来越多研究表明,由m^(6)A甲基化修饰介导的转录及转录后调控在骨骼肌生长发育中起着至关重要的调控作用。作者介绍了m^(6)A甲基化修饰酶的种类及作用,重点综述了m^(6)A甲基化修饰在骨骼肌生长发育及相关疾病中的调控机制,为解析肌肉发育表观调控机制及发现潜在的骨骼肌疾病治疗靶点等研究提供新思路。 展开更多
关键词 m^(6)A甲基化 m^(6)A甲基化修饰酶 骨骼肌 调控机制
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β-防御素的生物学特性及其在调控动物肠道屏障中的研究进展 被引量：1
8
作者 王卓 赵雨薇 +2 位作者 屠焰 刁其玉 崔凯 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第3期995-1005,共11页
肠道黏膜屏障是阻止外来病原性物质入侵的第一道防线,其完整性对维持肠道健康至关重要。β-防御素是广泛分布于哺乳动物上皮细胞的小分子多肽,具有抗微生物、抗肿瘤、抗炎及免疫调节等生物学特性,且抗菌广谱、分子量小、不易产生耐药性... 肠道黏膜屏障是阻止外来病原性物质入侵的第一道防线,其完整性对维持肠道健康至关重要。β-防御素是广泛分布于哺乳动物上皮细胞的小分子多肽,具有抗微生物、抗肿瘤、抗炎及免疫调节等生物学特性,且抗菌广谱、分子量小、不易产生耐药性。β-防御素可以通过调节肠道菌群、肠上皮细胞紧密连接表达、肠上皮细胞抑菌物质的分泌以及肠黏膜免疫作用从而调控肠道屏障功能,维护肠道内环境的稳态。本文就β-防御素的生物学特性及作用机制、β-防御素在调控动物肠道屏障上的作用、饲料添加剂对肠道β-防御素的调节作用三大方面进行综述,以期为β-防御素在动物肠道中的应用提供参考。 展开更多
关键词 Β-防御素 生物学特性 畜禽 肠道屏障
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基于转录组学分析Vero悬浮细胞并用表皮生长因子改善细胞自噬水平 被引量：1
9
作者 李木子 孙娜 +5 位作者 彭润生 马芳芳 王家敏 乔自林 陈建国 阿依木古丽·阿不都热依木 《生物工程学报》 北大核心 2025年第4期1671-1689,共19页
目前悬浮驯化的Vero细胞存在细胞活率低和倍增时间长等问题。为了探究Vero悬浮细胞生长缓慢且活率低的主要原因,本研究对Vero悬浮细胞(命名为Vero-XF)和Vero贴壁细胞(命名为Vero-AD)进行转录组学分析,筛选悬浮培养时影响细胞生长的差异... 目前悬浮驯化的Vero细胞存在细胞活率低和倍增时间长等问题。为了探究Vero悬浮细胞生长缓慢且活率低的主要原因,本研究对Vero悬浮细胞(命名为Vero-XF)和Vero贴壁细胞(命名为Vero-AD)进行转录组学分析,筛选悬浮培养时影响细胞生长的差异基因,并通过外源添加表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)改善Vero-XF生长。结果表明,与Vero-AD组相比,Vero-XF组有7376个显著变化的差异基因。京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)富集分析发现细胞自噬和线粒体自噬最为显著。选择11个差异表达基因,进行实时荧光定量PCR(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)验证,在Vero-XF中ATG9B、WIPI2、LAMP2、OPTN、Rab7a和DEPTOR显著上调,ATG4D显著下调,与转录组分析结果一致;另外ATG101、ATG2A和STX17显著上调,NBR1则差异不显著。Western blotting检测Vero-XF与Vero-AD中自噬标志蛋白LC3和P62的表达,其中Vero-XF的LC3Ⅱ/Ⅰ表达量显著上调,P62表达量显著下调,自噬水平较高。最后通过外源添加EGF改善Vero-XF自噬。结果表明,10、20、30μg/L的EGF使得Vero-XF自噬水平分别降低了22.35%、48.15%、71.29%;比生长速率增加了15.48%、33.33%、57.14%;细胞凋亡率下降了2.84%、15.46%、16.23%。本研究结果初步揭示了Vero-XF自噬机制的激活是导致其生长缓慢的原因之一,为后续Vero细胞的悬浮培养提供了参考。 展开更多
关键词 VERO细胞 细胞悬浮培养 转录组学 表皮生长因子 细胞自噬
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肠道共生生物对肠道干细胞的调节机制研究进展 被引量：1
10
作者 丁莹莹 张嘉芸 +5 位作者 唐龙轩 张少华 郭小腊 蒲丽霞 牟文杰 王帅 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第3期1019-1026,共8页
肠道干细胞(intestinal stem cells,ISCs)在维持肠道稳态中起重要作用。已有研究表明,肠道共生生物(如微生物和寄生虫及其代谢产物)对宿主的干细胞调节至关重要,可通过直接或间接作用影响肠道干细胞的更新分化。本文重点阐述了肠道菌群... 肠道干细胞(intestinal stem cells,ISCs)在维持肠道稳态中起重要作用。已有研究表明,肠道共生生物(如微生物和寄生虫及其代谢产物)对宿主的干细胞调节至关重要,可通过直接或间接作用影响肠道干细胞的更新分化。本文重点阐述了肠道菌群和蠕虫及其代谢产物对ISCs的影响,并侧重总结了相关的细菌、代谢产物等对ISCs增殖分化的研究进展,旨在为未来肠道损伤治疗提供新的思路。 展开更多
关键词 肠道菌群 肠道蠕虫 肠道干细胞
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代谢组学技术及其在动物生产中的应用 被引量：1
11
作者 马春芳 张金宝 +3 位作者 张慧宁 陈海燕 杨奇 张巧娥 《动物医学进展》 北大核心 2025年第2期120-124,共5页
代谢组学(Metabolomics)为系统生物学的重要分支学科,其基础是组群指标分析,手段是高通量检测和数据处理,目标是信息建模与系统整合,是生物体发育和生理状态在代谢水平的表现,是基因组与表型组之间的桥梁。代谢组学广泛应用于毒理学、... 代谢组学(Metabolomics)为系统生物学的重要分支学科,其基础是组群指标分析,手段是高通量检测和数据处理,目标是信息建模与系统整合,是生物体发育和生理状态在代谢水平的表现,是基因组与表型组之间的桥梁。代谢组学广泛应用于毒理学、环境学、疾病诊断、营养食品科学、医药研制开发、动植物学等相关领域。论文介绍了代谢组学流程,常用检测平台和数据库,以及与其他组学的关系等,在此基础上综述了代谢组学在动物育种、营养调控、疾病诊断、肉品分析和动物生长发育等5个方面的应用研究,为探讨其在动物生产中应用提供参考。 展开更多
关键词 代谢组学 动物生产 分析技术
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根皮苷改善鼠伤寒沙门菌诱导的小鼠盲肠炎症以及肠道屏障损伤 被引量：1
12
作者 李童 孔丽娟 +7 位作者 冯艳丽 成基 鞠天缘 韩佳雯 付守鹏 柳巨雄 胡桂秋 张昊龙 《中国兽医学报》 北大核心 2025年第3期587-593,共7页
将40只成年雄性C57BL/6小鼠随机分为4组(10只/组),分别为对照组、鼠伤寒沙门菌(Salmonella typhimurium,S.typhimurium)组(ST组)、根皮苷(phlorizin,PHZ)+S.typhimurium组(PHZ+ST组)、PHZ组(80 mg/kg),通过形态学观察、HE染色、ELISA、... 将40只成年雄性C57BL/6小鼠随机分为4组(10只/组),分别为对照组、鼠伤寒沙门菌(Salmonella typhimurium,S.typhimurium)组(ST组)、根皮苷(phlorizin,PHZ)+S.typhimurium组(PHZ+ST组)、PHZ组(80 mg/kg),通过形态学观察、HE染色、ELISA、免疫荧光和Western blot方法进行相关指标检测。结果显示,PHZ能够显著增加S.typhimurium诱导的小鼠盲肠指数,而降低小鼠的脾脏指数(P<0.05),并减少小鼠盲肠病理损伤。同时,PHZ也能够显著减少S.typhimurium在盲肠、脾脏、肠系膜淋巴结和肝脏中的定植(P<0.05)。通过ELISA检测S.typhimurium诱导的小鼠盲肠炎性因子的变化,结果显示PHZ也能够显著抑制由S.typhimurium诱导的IL-1β、INF-γ、TNF-α以及IL-6表达的升高(P<0.05)。免疫荧光和Western blot结果显示,PHZ能够显著增加S.typhimurium诱导的小鼠盲肠屏障Occludin、Claudin-3和ZO-1蛋白表达水平(P<0.05)。结果表明,根皮苷能够改善S.typhimurium感染引起的小鼠盲肠炎症以及肠道屏障受损。 展开更多
关键词 根皮苷 S.typhimurium 炎性因子 肠道屏障
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基于RTCPA-CRISPR/Cas12a的牛病毒性腹泻病毒检测方法的建立及应用
13
作者 蒙琦 常亮 +2 位作者 杨明 曹映辉 贺泂杰 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第2期80-88,共9页
本研究旨在建立一种检测牛病毒性腹泻病毒的RT-CPA-CRISPR/Cas12a方法。选取BVDV的E0蛋白基因序列为基础,设计CPA特异性引物。同时,依据CRISPR/Cas12a的设计原则,设计了crRNA靶向RT-RAA扩增产物,并优化了RT-CPA-CRISPR/Cas12a反应体系,... 本研究旨在建立一种检测牛病毒性腹泻病毒的RT-CPA-CRISPR/Cas12a方法。选取BVDV的E0蛋白基因序列为基础,设计CPA特异性引物。同时,依据CRISPR/Cas12a的设计原则,设计了crRNA靶向RT-RAA扩增产物,并优化了RT-CPA-CRISPR/Cas12a反应体系,此外,借助建立的该方法,开展了临床样品的检测。结果显示:所建立的检测方法对BVDV的最低检出限为8.0 copies/μL,并具有高度特异性,对42份临床样品检测显示,该方法与传统PCR方法的一致性好,符合率能达到92.86%。该研究建立了牛病毒性腹泻病毒的RT-CPA-CRISPR/Cas12a检测方法,为该病的诊断提供了技术手段。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 交叉引物恒温扩增技术 CRISPR/Cas12a 灵敏度 特异性
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硫酸乙酰肝素生物合成及修饰过程中关键酶的功能研究进展
14
作者 黄磊 袁红 +7 位作者 宫晓华 包慧芳 李冬 李平花 孙普 卢曾军 刘在新 白兴文 《动物医学进展》 北大核心 2025年第7期104-109,共6页
硫酸乙酰肝素(HS)是一类由多个高度硫酸化的糖醛酸和葡糖胺二糖重复单元组成的线性异构多糖。HS可作为细胞表面受体,与细胞因子和包括口蹄疫病毒(FMDV)在内的多种病毒粒子结合,发挥重要且广泛的生物学功能。功能性HS大分子的合成包括胞... 硫酸乙酰肝素(HS)是一类由多个高度硫酸化的糖醛酸和葡糖胺二糖重复单元组成的线性异构多糖。HS可作为细胞表面受体,与细胞因子和包括口蹄疫病毒(FMDV)在内的多种病毒粒子结合,发挥重要且广泛的生物学功能。功能性HS大分子的合成包括胞内的生物合成过程以及胞外的合成后修饰过程,涉及多种酶的参与。通过概述HS的多糖聚合以及蛋白修饰,分析HS生物合成及修饰过程,总结参与其中的关键酶及功能,以期为HS的生物学功能研究和化学酶学合成提供理论参考。 展开更多
关键词 硫酸乙酰肝素 生物合成 合成后修饰 生物学功能
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多能性干细胞概述及其在家畜上的研究进展
15
作者 王佳美 黄永震 +8 位作者 高晨 李俊良 陈燕 朱波 张路培 王泽昭 高会江 李俊雅 高雪 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第4期1473-1483,共11页
多能性干细胞具有无限增殖潜力和分化成多种类型组织细胞的能力,是当前干细胞研究的热点和焦点,家畜多能性干细胞的研究不仅具有基础理论意义,在家畜繁殖育种、生物医学、食品生产等领域具有重要的应用价值。本文以胚胎干细胞和诱导性... 多能性干细胞具有无限增殖潜力和分化成多种类型组织细胞的能力,是当前干细胞研究的热点和焦点,家畜多能性干细胞的研究不仅具有基础理论意义,在家畜繁殖育种、生物医学、食品生产等领域具有重要的应用价值。本文以胚胎干细胞和诱导性多能干细胞为例,对多能性干细胞的多能性状态及培养条件、鉴定方法进行概述,综述了家畜多能性干细胞的研究进展,并对其应用前景进行了展望,以期为家畜多能性干细胞的研究提供参考。 展开更多
关键词 多能性 干细胞 胚胎干细胞 诱导性多能干细胞
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不同牛血浆外泌体提取方法的比较
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作者 黄国梁 王爽 +3 位作者 张智慧 孙世琪 郭慧琛 蔺国珍 《中国兽医科学》 北大核心 2025年第9期1248-1253,共6页
为筛选提取牛血浆外泌体的高效方法,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳、动态光散射分析仪、BCA蛋白浓度定量、透射电子显微镜观察及Western-blot等分析超速离心法、蔗糖垫超速离心法、蔗糖密度梯度离心法及免疫磁珠法4种方法提取的牛血浆外泌体... 为筛选提取牛血浆外泌体的高效方法,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳、动态光散射分析仪、BCA蛋白浓度定量、透射电子显微镜观察及Western-blot等分析超速离心法、蔗糖垫超速离心法、蔗糖密度梯度离心法及免疫磁珠法4种方法提取的牛血浆外泌体形态、大小及标志蛋白的表达相关指数。结果表明:用超速离心法提取的外泌体浓度高但纯度低;用蔗糖密度梯度离心法提取的外泌体粒径大小、形态、纯度均比超速离心法高但浓度低;用30%蔗糖垫离心法提取的外泌体粒径大小、形态、纯度比前2种方法有不同程度的提高,浓度也较蔗糖密度梯度离心法高,同时外泌体的形态比前2种方法也更完整;用免疫磁珠法提取的外泌体粒径偏大。结论,使用30%蔗糖垫超速离心法提取外泌体的效果最好。 展开更多
关键词 牛 血浆外泌体 提取 超速离心 免疫磁珠
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前列腺素D_(2)和TLR2/TLR4/NLRP3在大肠杆菌感染奶牛骨髓源巨噬细胞中的作用
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作者 杨效林 龚鹏飞 +7 位作者 郭莉莉 吴敬泽 于嘉辉 钱英红 张双翼 刘博 曹金山 毛伟 《中国兽医学报》 北大核心 2025年第8期1727-1734,共8页
运用RNA测序(RNA-seq)技术解析大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)感染奶牛骨髓源巨噬细胞的mRNA表达谱,并通过基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析,鉴定差异表达基因的生物学功能及其参与的信号通路。结果显示,E.col... 运用RNA测序(RNA-seq)技术解析大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)感染奶牛骨髓源巨噬细胞的mRNA表达谱,并通过基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析,鉴定差异表达基因的生物学功能及其参与的信号通路。结果显示,E.coli感染诱导了4522个差异表达基因,其中2141个基因表达上调,2381个基因表达下调。这些基因主要涉及炎症反应,且TLR2、TLR4、NLRP3及PTGS2在其中发挥重要作用;使用PGD_(2)抑制剂处理E.coli染奶牛骨髓源巨噬细胞进行转录组测序显示TLR2和TLR4的基因表达显著下调。q-PCR验证结果与RNA-seq数据一致。结果表明,TLR2、TLR4和NLRP3与PGD_(2)的相互调控共同影响奶牛子宫内膜炎,这为深入理解奶牛子宫内膜炎的病理机制及其防治提供了重要的分子依据。 展开更多
关键词 E.coli 奶牛骨髓源巨噬细胞 转录组 模式识别受体 前列腺素D_(2)
原文传递
oar-miR-103和oar-miR-107通过靶向IL-1β基因区域调节其表达
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作者 高之煜 顾兰英 +7 位作者 范文雨 曹鑫艳 陈创夫 肖非 易继海 盛金良 张彦兵 孙延鸣 《动物医学进展》 北大核心 2025年第6期31-35,共5页
为确定oar-miR-103和oar-miR-107靶向IL-1β基因的区域及结合能力,验证绵羊oar-miR-103和oar-miR-107对绵羊IL-1β表达的调控作用,用miRanda软件分析oar-miR-103、oar-miR-107靶向IL-1β基因的具体区域和结合能力;将IL-1β基因插入PGL3-... 为确定oar-miR-103和oar-miR-107靶向IL-1β基因的区域及结合能力,验证绵羊oar-miR-103和oar-miR-107对绵羊IL-1β表达的调控作用,用miRanda软件分析oar-miR-103、oar-miR-107靶向IL-1β基因的具体区域和结合能力;将IL-1β基因插入PGL3-promoter荧光素酶报告基因载体XbaⅠ酶切位点,分别将miR-NC、miR-103和miR-107模拟物与荧光素酶质粒共转染,通过双荧光素酶报告试验分析oar-miR-103和oar-miR-107与IL-1β基因区域靶向关系;分离原代绵羊肺泡巨噬细胞,miR-NC、miR-103和miR-107模拟物分别转染原代肺泡巨噬细胞,转染36 h后,通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测各组细胞中IL-1β表达水平。结果显示,oar-miR-103和oar-miR-107分别靶向IL-1β基因2个、3个区域;成功构建了荧光素酶报告载体pGL3-promoter-IL-1β;双荧光素酶试验显示,与miR-NC组相比,oar-miR-103和oar-miR-107两组均使pGL3-promoter-IL-1β活性显著下降(P<0.01);与miR-NC组相比,oar-miR-107显著抑制了巨噬细胞IL-1βmRNA转录表达(P<0.05)。说明oar-miR-103和oar-miR-107可通过靶向IL-1β基因区域调节其表达,为解析IL-1β表达机理积累了资料。 展开更多
关键词 白介素1Β MICRORNAS MIRANDA 荧光素酶报告基因
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冷应激介导的动物能量代谢稳态与采食行为调控互作机制研究进展
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作者 姜敏 张学凯 +2 位作者 王哲奇 金晓 徐元庆 《中国畜牧杂志》 北大核心 2025年第9期52-59,共8页
冷应激是制约北方寒冷地区畜牧养殖业发展的重要因素之一,长期处于低温环境会严重危害动物的生理健康和生产性能,极端情况下会导致动物死亡。动物在寒冷环境中会通过增加采食量来维持能量平衡,而能量平衡是摄食行为、能量消耗与脂肪组... 冷应激是制约北方寒冷地区畜牧养殖业发展的重要因素之一,长期处于低温环境会严重危害动物的生理健康和生产性能,极端情况下会导致动物死亡。动物在寒冷环境中会通过增加采食量来维持能量平衡,而能量平衡是摄食行为、能量消耗与脂肪组织能量储存相互作用的结果。本文从下丘脑神经元、瘦素变化水平、脂肪酸和瘤胃挥发性脂肪酸(VFA)4个方面综述了冷应激如何通过能量稳态影响动物采食,旨在深入理解冷应激对动物采食的影响机制,并为今后的相关研究提供参考。 展开更多
关键词 冷应激 能量稳态 下丘脑 采食 瘦素 脂肪酸
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微菌素的构效关系、生物合成及应用研究进展
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作者 杨娌 苏国旗 +1 位作者 黄金秀 杨飞云 《动物营养学报》 北大核心 2025年第2期812-825,共14页
抗生素在畜牧业中的大量使用给畜禽和人类的健康造成严重威胁,迫切需要新型抗生素替代品。微菌素(microcins)是一类由革兰氏阴性菌所产生的小分子多肽,能够介导发炎肠道中肠杆菌的种间和种内竞争,可以作为窄谱疗剂来抑制肠道病原体并减... 抗生素在畜牧业中的大量使用给畜禽和人类的健康造成严重威胁,迫切需要新型抗生素替代品。微菌素(microcins)是一类由革兰氏阴性菌所产生的小分子多肽,能够介导发炎肠道中肠杆菌的种间和种内竞争,可以作为窄谱疗剂来抑制肠道病原体并减轻耐药性风险,在替代抗生素领域表现出独特的应用潜力。本文综述了微菌素的构效关系和生物合成机制,并探讨了其在畜牧业中的应用,旨在为微菌素及其类似物的开发与利用提供参考。 展开更多
关键词 微菌素 抗菌肽 饲料添加剂 构效关系 生物合成
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