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鸭短喙矮小综合征病毒单克隆抗体制备及竞争ELISA检测方法的建立
1
作者 朱小丽 王劭 +5 位作者 董慧 程晓霞 江丹丹 肖世峰 陈少莺 陈仕龙 《中国畜牧兽医》 北大核心 2026年第2期948-958,共11页
【目的】建立一种快速检测鸭短喙矮小综合征病毒(Short beak and dwarfism syndrome virus,SBDSV)抗体的血清学方法,为SBDSV抗体检测及诊断试剂盒研发提供技术支撑。【方法】本研究用纯化的SBDSV M15株灭活毒免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠... 【目的】建立一种快速检测鸭短喙矮小综合征病毒(Short beak and dwarfism syndrome virus,SBDSV)抗体的血清学方法,为SBDSV抗体检测及诊断试剂盒研发提供技术支撑。【方法】本研究用纯化的SBDSV M15株灭活毒免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞和骨髓瘤细胞(SP2/0)进行融合,利用间接ELISA筛选可分泌SBDSV单克隆抗体的杂交瘤细胞株。用筛选出的杂交瘤细胞接种小鼠制备腹水。通过间接ELISA测定单克隆抗体效价,通过间接免疫荧光试验(indirect immunofluorescence assay,IFA)和胶乳凝集(latex particle agglutination,LPA)试验鉴定单克隆抗体特性。通过中和试验测定单克隆抗体中和活性,使用试剂盒鉴定单克隆抗体亚类。运用棋盘滴定法优化反应体系,建立基于SBDSV单克隆抗体的竞争ELISA检测方法。通过检测阴性血清确定该方法的临界值。对建立的竞争ELISA检测方法进行特异性、灵敏性和重复性测定。用该方法检测临床血清样品,并与胶乳凝集抑制(latex particle agglutination inhibition,LPAI)试验结果进行比对。【结果】经间接ELISA筛选,获得3株稳定分泌SBDSV单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为D5-3、G11-23和H2-27。间接ELISA结果显示,3株杂交瘤细胞D5-3、G11-23和H2-27培养上清的抗体效价分别为1∶2~6、1∶2~5和1∶2~6,腹水的抗体效价分别为1∶10~5、1∶10~4和1∶10~6。IFA结果显示,单克隆抗体D5-3、G11-23和H2-27均具有较好的结合活性,可用于IFA检测。LPA试验结果显示,仅单克隆抗体H2-27具有致敏胶乳的特性。中和试验结果显示,3株单克隆抗体均具有中和SBDSV的能力,其中单克隆抗体H2-27的中和活性最强。单克隆抗体亚类鉴定结果显示,单克隆抗体D5-3和G11-23均为IgG1,H2-27为IgM。以纯化的SBDSV(M15株)灭活毒作为包被抗原,单克隆抗体H2-27为竞争抗体,建立了一种检测SBDSV抗体的竞争ELISA方法,当抑制率(PI)≥23.70%时,判定为SBDSV抗体阳性;PI≤15.91%时判定为阴性。该方法特异性好,与番鸭细小病毒(Muscovy duck parvovirus,MDPV)、番鸭呼肠孤病毒(Muscovy duck reovirus,MDRV)、鸭源副黏病毒(Duck paramyxovirus,DPMV)、鸭肝炎病毒1型(Duck hepatitis virus-1,DHV-1)和鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu virus,DTMUV)阳性血清均无交叉反应;敏感性高,高免血清(LPAI效价1∶2~8)1∶25600稀释时仍为阳性;批间、批内重复性好,变异系数均<6%。竞争ELISA检测结果与LPAI结果具有良好的正相关性,二者的符合率为89.10%(188/211)。【结论】本研究成功制备3株SBDSV单克隆抗体,基于单克隆抗体H2-27建立的竞争ELISA方法特异性强、灵敏度高、重复性好,可高通量检测SBDSV抗体,为监测SBDSV在中国的流行情况及雏鸭母源抗体水平评价提供技术支撑。 展开更多
关键词 鸭 短喙矮小综合征病毒(SBDSV) 单克隆抗体 竞争ELISA
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口蹄疫病毒3D蛋白与宿主互作蛋白的筛选及鉴定
2
作者 刘永杰 兰喜 +4 位作者 李玉星 张勇 何继军 尚佑军 郑海学 《中国兽医科学》 北大核心 2026年第1期13-19,共7页
口蹄疫是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的猪、牛、羊等偶蹄类动物急性、热性,高度接触性传染病。FMDV 3D蛋白是病毒编码RNA的RNA依赖性聚合酶(3D^(pol)),是病毒RNA复制的重要蛋白,有关3D蛋白与宿主蛋白相互作用的报道较少。本研究应用PK-15细... 口蹄疫是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的猪、牛、羊等偶蹄类动物急性、热性,高度接触性传染病。FMDV 3D蛋白是病毒编码RNA的RNA依赖性聚合酶(3D^(pol)),是病毒RNA复制的重要蛋白,有关3D蛋白与宿主蛋白相互作用的报道较少。本研究应用PK-15细胞cDNA酵母表达文库,利用酵母双杂交技术,最终获得与3D有潜在相互作用的15个宿主潜在蛋白,通过免疫共沉淀和共聚焦试验进一步验证,鉴定出宿主ataxin-3和voltage-dependent anion channel 1(VDAC1)与3D具有相互作用,研究结果为宿主蛋白与3D蛋白相互作用在病毒复制中的功能提供了数据支撑。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 3D蛋白 酵母双杂交技术 蛋白质相互作用
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猫杯状病毒感染性克隆的构建及拯救病毒的鉴定
3
作者 朱雪敏 李鑫基 +7 位作者 华炯钢 陈柳 叶伟成 张传亮 朱寅初 付媛 张存 云涛 《中国兽医科学》 北大核心 2026年第1期20-26,共7页
旨在建立猫杯状病毒(FCV)反向遗传系统,以探究FCV的致病机制,为后续疫苗研发提供科学依据。以FCV HZ2024株为对象,构建DNA-launched感染性克隆系统。FCV全基因组的4个片段被依次插入pAY-CHS重组质粒后转染F81细胞并传代鉴定。结果显示,F... 旨在建立猫杯状病毒(FCV)反向遗传系统,以探究FCV的致病机制,为后续疫苗研发提供科学依据。以FCV HZ2024株为对象,构建DNA-launched感染性克隆系统。FCV全基因组的4个片段被依次插入pAY-CHS重组质粒后转染F81细胞并传代鉴定。结果显示,FCV HZ2024基因片段扩增后插入DNA-launched系统质粒,成功构建DNA-launched系统拯救病毒rFCV HZ2024-RE,转染细胞24 h后出现细胞病变效应,病毒滴度稳定在10^(7)~10^(8T)CID_(50)/m L。间接免疫荧光检测证实VP1蛋白抗原表位完全保留,重组病毒的衣壳蛋白成功表达。且重组病毒与亲本毒株的复制动力学高度相似,蚀斑形态无显著差异。Eco R V酶切及测序验证表明,突变位点(C7183T、A7186C)被精准引入且稳定遗传。总之,构建的DNA-launched系统实现了FCV高效拯救与精准遗传。 展开更多
关键词 猫杯状病毒 感染性克隆 反向遗传学 病毒拯救
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奶山羊源反刍链球菌的分离鉴定
4
作者 刘萍 李美文 +5 位作者 德珍 王敏 曹小安 刘志杰 何继军 尚佑军 《中国兽医科学》 北大核心 2026年第2期235-240,共6页
为明确陕西省某奶山羊养殖场羔羊关节炎的病因,取发病羔羊关节积液和主要脏器组织进行了病原菌检测和细菌分离培养、生化试验、药敏试验及小鼠致病性试验。结果显示,羔羊关节液和脾组织中链球菌属细菌核酸呈阳性,从关节积液中成功分离出... 为明确陕西省某奶山羊养殖场羔羊关节炎的病因,取发病羔羊关节积液和主要脏器组织进行了病原菌检测和细菌分离培养、生化试验、药敏试验及小鼠致病性试验。结果显示,羔羊关节液和脾组织中链球菌属细菌核酸呈阳性,从关节积液中成功分离出1株链球菌,经形态学观察、生化试验和16S rRNA基因序列比对,鉴定为反刍链球菌。药敏试验表明,该分离株对链霉素、阿米卡星、妥布霉素、多黏菌素B、万古霉素和诺氟沙星高度敏感,对红霉素中度敏感,但对青霉素G、头孢类、四环素和复方新诺明等多种常用抗生素存在耐药性。致病性试验证实该分离株对小鼠具有较强致病性,可致感染小鼠死亡。本研究为反刍链球菌的实验室诊断、抗菌药物合理选用以及后续研究其耐药机制和防控技术奠定了基础。 展开更多
关键词 反刍链球菌 关节炎 耐药性 奶山羊
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鸭星状病毒1型信阳株全基因组扩增及遗传进化分析
5
作者 张敏 李迎晓 +5 位作者 张璐璐 何书海 曲哲会 秦东升 刘纪成 焦凤超 《中国畜牧兽医》 北大核心 2026年第2期959-972,共14页
【目的】了解信阳地区鸭星状病毒1型(Duck astrovirus type 1,DAstV1)流行株基因组的演化特征,为进一步研究信阳地区DAstV1的流行、遗传进化及致病特性提供参考依据。【方法】对某养殖场送检的病鸭进行禽腺病毒、禽星状病毒和鸭甲型肝... 【目的】了解信阳地区鸭星状病毒1型(Duck astrovirus type 1,DAstV1)流行株基因组的演化特征,为进一步研究信阳地区DAstV1的流行、遗传进化及致病特性提供参考依据。【方法】对某养殖场送检的病鸭进行禽腺病毒、禽星状病毒和鸭甲型肝炎病毒等12种常见病毒的PCR/RT-PCR筛查。采集病鸭肝脏组织,无菌处理后经卵黄囊途径接种10日龄SPF鸭胚,连续传代4次,并逐代收集尿囊液进行DAstV RT-PCR鉴定。对分离到的病毒进行全基因组测序,并对ORF1a、ORF1b和ORF2基因序列及其编码蛋白的氨基酸变异位点进行比对分析。【结果】送检病料筛查结果显示,禽星状病毒呈阳性。第1~4代鸭胚尿囊液中均呈DAstV1阳性,将该病毒命名为HN24XY06。第4代接种鸭胚全部死亡,死亡胚体发育不良且体表出血。HN24XY06基因组全长7 755 nt,包含ORF1a、ORF1b和ORF2 3个开放阅读框。序列比对和系统发育分析表明,HN24XY06属于DAstV1毒株,与山东分离株DAstV-SDZZ和DAstV-SDWF亲缘关系较近。ORF1a、ORF1b和ORF2蛋白的氨基酸序列分析显示,存在不同程度的突变,多发生在ORF1a编码的氨基酸序列中。【结论】本研究分离到了1株DAstV1,丰富了信阳地区DAstV1的分子流行病学资料,并为进一步研究DAstV1的致病机制奠定了基础。 展开更多
关键词 鸭星状病毒1型(DAstV1) 病毒分离与鉴定 全基因组扩增 遗传进化分析
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新疆地区奶牛乳腺炎肺炎克雷伯菌的分离鉴定与耐药性分析
6
作者 蔡扩军 徐敏 +2 位作者 孙鹏亮 夏利宁 赵红琼 《畜牧兽医学报》 北大核心 2026年第1期464-475,共12页
旨在了解新疆地区奶牛乳腺炎肺炎克雷伯菌的流行情况与耐药特性。本研究从新疆奶牛集约化养殖集中的9个地区采集15个规模奶牛养殖场奶牛2083份临床乳腺炎和隐性乳腺炎奶样,对样品中的肺炎克雷伯菌进行分离培养、革兰染色,并采用PCR及16S... 旨在了解新疆地区奶牛乳腺炎肺炎克雷伯菌的流行情况与耐药特性。本研究从新疆奶牛集约化养殖集中的9个地区采集15个规模奶牛养殖场奶牛2083份临床乳腺炎和隐性乳腺炎奶样,对样品中的肺炎克雷伯菌进行分离培养、革兰染色,并采用PCR及16S rRNA测序进行鉴定,对分离菌株采用微量肉汤稀释法检测耐药情况。结果表明,从奶样中分离出266株肺炎克雷伯菌,分离率为12.8%(266/2083),临床乳腺炎和隐性乳腺炎奶样肺炎克雷伯菌分离率无显著差异(P>0.05)。采用微量肉汤稀释法测定266个分离株对16种抗菌药物的敏感性及产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)情况,结果显示分离株对四环素、头孢噻呋、头孢吡肟、头孢噻肟和头孢唑林的耐药率较高(23.7%~41.0%)。16.9%(45/266)的分离株为多重耐药菌,6.4%(17/266)的分离株产ESBLs。结果提示,新疆15家规模化奶牛场乳腺炎肺炎克雷伯菌平均分离率在全国处于相对较低水平。分离株对四环素和头孢类抗菌药物具有较强的耐药性,本研究为掌握奶牛乳腺炎肺炎克雷伯菌的流行特征及指导临床用药提供了依据。 展开更多
关键词 奶牛乳腺炎 肺炎克雷伯菌 分离鉴定 耐药特性
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四川肉牛源疣状毛癣菌的分离鉴定、系统发育分析与药敏试验
7
作者 王娅 李志国 +3 位作者 罗荣艳 刘瑞国 左之才 马晓平 《中国畜牧兽医》 北大核心 2026年第1期459-468,共10页
【目的】探究四川肉牛真菌性皮肤病的病原,为该病的防治提供参考。【方法】采集四川各地疑似皮肤癣病的患畜皮屑,用三点接种法将采集的样本接种于皮肤癣菌鉴别培养基,将分离得到的菌株经内部转录间隔区(ITS)序列扩增后通过NCBI数据库BL... 【目的】探究四川肉牛真菌性皮肤病的病原,为该病的防治提供参考。【方法】采集四川各地疑似皮肤癣病的患畜皮屑,用三点接种法将采集的样本接种于皮肤癣菌鉴别培养基,将分离得到的菌株经内部转录间隔区(ITS)序列扩增后通过NCBI数据库BLAST分析基因相似性并构建系统发育树,以10^(7) CFU/mL分离菌孢子悬液感染免疫抑制小鼠,观察临床症状和病理学特征,微量二倍稀释法探究分离菌耐药表型。【结果】从24个样本中分离到10株真菌(rntv01~rntv10)。PCR扩增结果显示,分离株均得到大小为681 bp的扩增片段;BLAST比对结果显示,分离株与疣状毛癣菌相似性为97%~100%;动物试验结果显示,免疫抑制小鼠感染该菌后皮肤出现被毛脱落、结痂、皮屑增多等症状,HE染色后观察到表皮角质层角化不全、炎性细胞增生,PAS染色后观察到大量菌丝侵染;药敏试验结果显示,除rntv10外,其余菌株对两性霉素B中介;分离菌对伊曲康唑敏感性不同,rntv09、rntv10敏感,rntv01、rntv04~rntv08中介,rntv02、rntv03耐药;rntv10对酮康唑敏感、对5-氟胞嘧啶中介,其余菌株均为耐药株;所有菌株对环吡酮胺中介,对氟康唑和特比萘芬耐药。【结论】四川肉牛真菌性皮肤病主要病原是疣状毛癣菌,该菌可引起小鼠皮肤的侵袭性感染,患病牛可用两性霉素B、伊曲康唑或环吡酮胺进行治疗。 展开更多
关键词 肉牛 疣状毛癣菌 分离鉴定 ITS序列 系统发育分析 药敏试验
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广深地区3种常见猫病毒的分离鉴定及遗传进化分析
8
作者 孙媛 梁爽爽 +2 位作者 罗志莹 王婷 马静云 《华南农业大学学报》 北大核心 2026年第1期11-20,共10页
【目的】猫杯状病毒(Feline calicivirus,FCV)、猫细小病毒(Feline parvovirus,FPV)和猫疱疹病毒1型(Feline herpesvirus-1,FHV-1)是常见的高传染性、高致病性病原体,本文针对广深地区的这3种病毒开展研究,以期明确本地FCV、FPV和FHV-1... 【目的】猫杯状病毒(Feline calicivirus,FCV)、猫细小病毒(Feline parvovirus,FPV)和猫疱疹病毒1型(Feline herpesvirus-1,FHV-1)是常见的高传染性、高致病性病原体,本文针对广深地区的这3种病毒开展研究,以期明确本地FCV、FPV和FHV-1的流行情况、遗传变异和演化方向。【方法】本研究于2021年10月至2022年6月收集了广州、深圳地区的动物医院、动物收容所和华南农业大学病猫的眼鼻口拭子、肛拭子样本,通过提取临床样本核酸、one step RT-PCR、常规PCR技术检测FCV、FPV及FHV-1;对阳性样品进行基因扩增及测序,利用DNAStar分析核苷酸序列相似性,使用MEGA 7.0构建系统发育树;使用克兰德尔−里斯猫肾(Crandell-Reese feline kidney,CRFK)细胞接种FCV、FHV-1阳性样品进行病毒分离,连续盲传至出现细胞病变,利用PCR、电子显微镜等技术鉴定分离毒株。【结果】379例具有临床症状的病猫中,FPV、FCV、FHV-1感染率分别为22.16%、19.00%和3.17%;病毒阳性率与猫只性别无关,6月龄及以下患猫中FCV、FPV检出率最高,分别为63.89%、58.33%,FHV-1在12月龄及以上患猫中阳性占比最高,为66.67%。已免疫“妙三多”疫苗的患猫中FCV、FHV-1、FPV均有检出,阳性率分别为75.00%、75.00%、20.24%。成功分离到7株FCV、1株FHV-1和2株FPV。7株FCV分离株全基因组与参考株的核苷酸相似性为75.0%~87.5%,7株FCV分离株形成了两大分支,GZ-1-249和GZ-1-184属于GI分支,而其他5株分离株均属于GII分支。14条FPV VP2基因序列与参考株的核苷酸相似性为97.4%~100.0%,14条序列与“妙三多”疫苗株M38246.1(FPV USA Cu4)等序列共同归属于一大分支。【结论】研究结果丰富了FCV、FPV和FHV-1相关流行病学数据,增强了对本地流行毒株的认识,为未来本土疫苗的研发和优化提供了重要支持。 展开更多
关键词 猫杯状病毒 猫细小病毒 猫疱疹病毒1型 分离 鉴定 遗传进化
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宏基因组测序技术在蜱媒病原体检测中的应用研究进展
9
作者 彭永帅 王梦迪 宋予震 《中国兽医杂志》 北大核心 2026年第1期38-44,共7页
蜱可传播多种病原体,引发一系列蜱媒疾病,对动物和人类健康构成严重威胁。传统检测方法(如聚合酶链式反应)在多病原体同步检测中存在明显局限。近年来,宏基因组测序(mNGS)技术在蜱媒病原体检测中展现出独特的优势,已成为发现和鉴定新发... 蜱可传播多种病原体,引发一系列蜱媒疾病,对动物和人类健康构成严重威胁。传统检测方法(如聚合酶链式反应)在多病原体同步检测中存在明显局限。近年来,宏基因组测序(mNGS)技术在蜱媒病原体检测中展现出独特的优势,已成为发现和鉴定新发病原体、解析复杂微生物群落的有力工具。随着mNGS的不断发展和完善,该技术有望在蜱媒疾病的早期诊断、监测预警和综合防控中发挥更加重要的作用。本文对蜱媒病原体的特点及mNGS技术在蜱媒病原体检测领域的研究进展进行综述,以期为蜱媒疾病的诊断和防控提供技术思路。 展开更多
关键词 宏基因组测序(mNGS) 蜱媒病原体 快速检测 应用
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基于转录组学探究PCV2引起宿主细胞免疫抑制的作用机制
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作者 柏晶晶 陈奇 +6 位作者 黄昌巧 袁海峰 何颖 于美玲 韦英益 杨剑 胡庭俊 《动物医学进展》 北大核心 2026年第1期55-64,共10页
旨在通过转录组学技术筛选出猪圆环病毒感染宿主细胞的差异表达基因(DEGs),为揭示猪圆环病毒2型(PCV2)引起猪宿主免疫细胞产生免疫抑制的分子机制提供理论依据。以断奶仔猪脾脏为试验材料,制成猪脾淋巴细胞悬液,PCV2体外感染细胞,通过... 旨在通过转录组学技术筛选出猪圆环病毒感染宿主细胞的差异表达基因(DEGs),为揭示猪圆环病毒2型(PCV2)引起猪宿主免疫细胞产生免疫抑制的分子机制提供理论依据。以断奶仔猪脾脏为试验材料,制成猪脾淋巴细胞悬液,PCV2体外感染细胞,通过转录组学测序技术筛选DEGs,进行基因本体论(GO)、京都基因与基因组百科全书(KEGG)功能分析,对关键通路采用基因集富集分析(GSEA)和进行通路标色,挑选差异表达的基因,通过RT-qPCR验证转录组测序结果的准确性,使用Western blot技术检测重要基因的蛋白表达水平。转录组测序结果显示,PCV2感染后共捕获到15926个差异基因,其中305个差异基因表达显著上调,163个差异基因表达显著下调;GO和KEGG富集结果显示,差异基因与免疫应答等相关,主要富集在细胞因子-细胞因子受体相互作用、IL-17信号通路、风湿性关节炎、TNF信号通路、趋化因子信号通路、JAK-STAT、Toll样受体信号通路等;GSEA富集分析发现,IL-17信号通路富集于78个基因,主要包括AMCF-II、IL17F、IL13、CXCL10、CCL17等34个显著不同的基因,整体通路发生上调,TNF信号通路富集于95个基因,主要包括LTA、CXCL10、MMP9、CXCL2、CCL2等40个显著不同的基因,整体通路发生上调;RT-qPCR结果与测序结果一致,表明测序可靠;Western blot检测结果显示,PCV2感染后IL-17、TNF-α水平显著升高(P<0.05),CXCL2、IL-6水平也有所升高。转录组测序结果及后续试验结果表明,PCV2能通过上调宿主细胞IL-17、TNF等信号通路基因和蛋白表达水平影响下游炎症通路,进而引起机体产生免疫抑制。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 免疫抑制 转录组学 差异表达基因
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绵羊肺炎支原体人工感染湖羊模型的建立
11
作者 高文元 袁律峰 +6 位作者 鲁强生 贾尚东 胥万有 刘颖 储岳峰 曾巧英 彭婕 《畜牧与兽医》 北大核心 2026年第1期122-127,共6页
旨在利用绵羊肺炎支原体(Mo)临床分离菌株Mo349建立湖羊感染模型。挑选12只9周龄、体重相近的纯种湖羊,分为对照组和感染组,感染组采用第1、2天滴鼻,第3天气管内注射的方式进行攻毒,3次剂量均为1×107 CCU/mL,每只每次接种1 mL,对... 旨在利用绵羊肺炎支原体(Mo)临床分离菌株Mo349建立湖羊感染模型。挑选12只9周龄、体重相近的纯种湖羊,分为对照组和感染组,感染组采用第1、2天滴鼻,第3天气管内注射的方式进行攻毒,3次剂量均为1×107 CCU/mL,每只每次接种1 mL,对照组接种同体积空白培养基;末次攻毒后再持续观察饲养15 d,监测体温和临床表现;在攻毒前1 d及攻毒后多个时间点采集颈静脉血,检测中性粒细胞和Mo特异性抗体水平;15 d后解剖所有羊,观察病理变化,采集肺脏组织制作HE染色切片并检测肺脏组织Mo载量。结果:对照组绵羊无明显症状,肺脏组织正常且未检出Mo。感染组绵羊在末次感染后2~3 d出现咳嗽,部分羊精神沉郁;第3天体温上升,第5~7天达40.5℃左右,呈持续性伴随波动性体温升高;血清Mo抗体水平第4天显著升高,第7天达峰值后波动变化;中性粒细胞百分比第4天达峰值;肺脏出现充血、出血等病变,肺淋巴结平均重量高于对照组,肺组织有炎性细胞浸润且所有羊肺脏组织均能检测到Mo。综上,本试验成功建立了Mo人工感染湖羊模型,为研究Mo致病机制、开发诊断方法和评价防控措施提供了重要工具。 展开更多
关键词 绵羊肺炎支原体 湖羊 感染模型
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新农科背景下《动物生理学》实验课程教学改革探索
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作者 刘洋 杨彦宾 +5 位作者 郭爽 李和平 钟凯 朱河水 王月影 韩立强 《畜牧兽医杂志》 2026年第1期110-113,共4页
采用新型数字化数据采集与处理系统,以参与《动物生理学》实验课程的2届学生为研究对象,比较两者的学习过程、实验成绩和学生满意度,并分析该系统的应用与教学效果提升的关联性。结果显示:(1)引入新型数字化教学设备提高了学生实践和协... 采用新型数字化数据采集与处理系统,以参与《动物生理学》实验课程的2届学生为研究对象,比较两者的学习过程、实验成绩和学生满意度,并分析该系统的应用与教学效果提升的关联性。结果显示:(1)引入新型数字化教学设备提高了学生实践和协作能力及实验效果;(2)激发了学生学习兴趣、增强学生现场认知感和满意度;(3)有利于人文情怀的培养。研究认为,高校在数字化建设过程中,适当引入数字化设备有助于提高教师的教学效果和学生的学习能力,对教学目标的提升有重要作用。 展开更多
关键词 动物生理学 实验课程 数字化 教学改革 人才培养
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2株猪源产肠毒素型大肠杆菌的分离鉴定及毒力因子和耐药性分析
13
作者 马欣 刘博 +6 位作者 魏津 张效斌 朱良全 李霆 王琦 王雨雨 姚文生 《中国兽药杂志》 2026年第2期42-53,共12页
从湖南某猪场断奶后腹泻仔猪粪便中分离到2株疑似大肠杆菌,命名为H株和J株。为鉴定其致病性大肠杆菌类型,本研究将H株和J株分别接种伊红美蓝琼脂平板鉴别培养基和大肠杆菌IMViC生化鉴定试剂,并采取分子鉴定技术对其进行微生物种属鉴定;... 从湖南某猪场断奶后腹泻仔猪粪便中分离到2株疑似大肠杆菌,命名为H株和J株。为鉴定其致病性大肠杆菌类型,本研究将H株和J株分别接种伊红美蓝琼脂平板鉴别培养基和大肠杆菌IMViC生化鉴定试剂,并采取分子鉴定技术对其进行微生物种属鉴定;同时采取PCR扩增技术分析其携带大肠杆菌的肠毒素、黏附素以及α-溶血素、志贺样毒素2型变异体(Stx2e)、耶尔森氏菌毒力岛(HPI)等毒力因子情况。为了解H株和J株的耐药性,本研究使用微量肉汤稀释法对其进行最低抑菌浓度(MIC)测定,并参照CLSI M100-S33抗微生物药物敏感性试验执行标准进行耐药性分析。结果显示,H株、J株的伊红美蓝琼脂平板培养特性、大肠杆菌IMViC生化鉴定试验结果、分子鉴定结果均符合大肠杆菌典型特征;毒力因子分析结果为:H株为LT^(+)+STa^(+)+STb^(+)+EAST-1^(+)+F18^(+)+Stx2e^(+)+α-溶血素+,J株为STa^(+)+STb^(+)+HPI^(+);耐药性分析结果为:H、J株均对氨苄西林、四环素、氟苯尼考、磺胺异噁唑、复方新诺明耐药和对阿莫西林/克拉维酸、庆大霉素、头孢他啶、恩诺沙星、美罗培南敏感;不同的是H株对大观霉素、粘杆菌素耐药和头孢噻呋中介,而J株对大观霉素、头孢噻呋敏感和粘杆菌素中介。本研究上述结果表明H株、J株均为产肠毒素型大肠杆菌(ETEC),但携带的毒力因子各不相同,且均存在多重耐药,与浙江、河北、江西、福建和广西的猪源ETEC耐药情况的比较分析表明养殖环节大肠杆菌耐药性具有复杂性。本研究既为大肠杆菌毒力因子研究和猪场防控大肠杆菌感染引起的仔猪断奶后腹泻病(PWD)提供了参考,也为如何减少兽用抗菌药的使用提供了新思路:兽用抗菌药+疫苗+益生菌+噬菌体+益生元的综合防控手段。 展开更多
关键词 猪源 产肠毒素型大肠杆菌 分离鉴定 毒力因子 耐药性
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狐源兔脑炎微孢子虫实验室检测技术
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作者 庄金秋 梅建国 +2 位作者 付石军 王建军 王玉茂 《山东畜牧兽医》 2026年第1期60-63,共4页
兔脑炎微孢子虫病是由兔脑炎微孢子虫引起的一种微孢子虫寄生虫病,是危害严重的一种人兽共患疾病,狐狸是本病最易感的物种之一。幼狐感染本病后,主要表现为生长停滞、腹泻消瘦形成“僵狐”;患病后期多以神经症状、肾脏肿大为主要病症,... 兔脑炎微孢子虫病是由兔脑炎微孢子虫引起的一种微孢子虫寄生虫病,是危害严重的一种人兽共患疾病,狐狸是本病最易感的物种之一。幼狐感染本病后,主要表现为生长停滞、腹泻消瘦形成“僵狐”;患病后期多以神经症状、肾脏肿大为主要病症,曾被称为“大肾病”。目前本病尚无特效治疗药物。加强养殖环节对该病的预防控制措施,提高兔脑炎微孢子虫的检测技术水平,是防控该病的关键。本文综述了狐源兔脑炎微孢子虫最新实验室检测技术,以期为更好地防治本病提供参考。 展开更多
关键词 兔脑炎微孢子虫 僵狐 检测 研究进展
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猴痘病毒荧光定量PCR检测方法的建立
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作者 孙健 赵柏林 《山东畜牧兽医》 2026年第1期8-12,共5页
猴痘病毒(Monkeypox virus,MPXV)作为一种重要的人畜共患病毒,其在全球范围内传播和蔓延引起了广泛关注,尤其是在近年来的疫情中,及时有效的检测方法显得尤为重要。为建立一种快速诊断MPXV的检测方法,根据2022年公布的MPXV的靶基因片段F... 猴痘病毒(Monkeypox virus,MPXV)作为一种重要的人畜共患病毒,其在全球范围内传播和蔓延引起了广泛关注,尤其是在近年来的疫情中,及时有效的检测方法显得尤为重要。为建立一种快速诊断MPXV的检测方法,根据2022年公布的MPXV的靶基因片段F3L(462 bp,GenBank登录号AF380138.1)保守区域,设计了1对特异性的引物和1条探针,建立了猴痘病毒荧光定量PCR检测方法。结果显示,本方法仅能有效检测MPXV,与牛结节皮肤病病毒、非洲猪瘟病毒VP72片段质粒、圆环病毒Ⅱ型标准品均无交叉反应;对重组质粒标准品的最低检测限为5.1 copies/μL;批内与批间的重复试验变异系数均小于6%。结果表明,本试验方法具有较强的敏感性、特异性和稳定性,可以用于猴痘病毒的快速鉴别诊断。 展开更多
关键词 猴痘病毒 荧光定量 PCR 检测方法
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福建省部分地区规模化猪场沙门氏菌检出及耐药性情况调查
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作者 赖宝色 薛雨菲 +3 位作者 谢开春 刘秉珲 熊文杰 陈玉红 《福建畜牧兽医》 2026年第1期23-26,共4页
为明确福建省规模化猪场沙门氏菌污染现状及耐药情况,为临床用药与疫病防控提供科学依据,于2025年3~8月采集福建省南平、三明、漳州、宁德和龙岩等地区部分猪场的水样、粪便样、泥土样等共计643份样品,进行沙门氏菌分离鉴定,并采用药敏... 为明确福建省规模化猪场沙门氏菌污染现状及耐药情况,为临床用药与疫病防控提供科学依据,于2025年3~8月采集福建省南平、三明、漳州、宁德和龙岩等地区部分猪场的水样、粪便样、泥土样等共计643份样品,进行沙门氏菌分离鉴定,并采用药敏贴片法测定分离菌株对7种常用抗菌药物的敏感性。结果显示:猪场沙门氏菌总检出率为59.7%,样品类型中粪便样检出率64.4%、泥土样检出率75.0%,高于水样49.1%的检出率;药敏试验表明,分离菌株对诺氟沙星、庆大霉素敏感性最高(敏感率均>90%),对抗革兰阴性菌的链霉素、卡那霉素存在一定耐药性(中介及耐药率分别为68.3%、42.5%),对抗革兰阳性菌的红霉素不敏感(中介率100%),对广谱的抗菌药物头孢曲松耐药率达12.2%。结论:福建省部分地区规模化猪场沙门氏菌污染较为普遍,且已出现部分常用抗菌药物耐药现象,需加强耐药性监测与科学用药管理,避免抗菌药物滥用。 展开更多
关键词 猪场 沙门氏菌 检出率 耐药性 药敏试验
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产教融合背景下动物医学高水平专业建设与实践
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作者 李学钊 《畜牧兽医杂志》 2026年第1期136-139,共4页
产教融合是“新双高”背景下推进高水平专业建设的重要途径。通过对接产业发展、工作岗位、生产过程落实3个对接,建设实践教学、技能竞赛、技术创新、社会服务4个平台,开展模块化、理实一体、实训课堂、师徒学制四项改革等产教融合举措... 产教融合是“新双高”背景下推进高水平专业建设的重要途径。通过对接产业发展、工作岗位、生产过程落实3个对接,建设实践教学、技能竞赛、技术创新、社会服务4个平台,开展模块化、理实一体、实训课堂、师徒学制四项改革等产教融合举措,推进动物医学高水平专业建设,提高职业兽医、乡村兽医人才培养质量,助力现代畜牧业发展、乡村振兴和技能型社会建设。 展开更多
关键词 产教融合 动物医学 高水平专业 专业建设
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牛支原体热休克蛋白GrpE的表达及黏附功能分析 被引量：1
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作者 张梦婷 尚小粉 +8 位作者 马海云 张立 杨永宁 何肖肖 邢小勇 权国梅 武小椿 包世俊 张志雄 《微生物学报》 北大核心 2026年第1期267-283,共17页
【目的】分析牛支原体(Mycoplasma bovis,Mb)热休克蛋白GrpE的进化保守性与结构特征,解析其亚细胞定位及在介导黏附过程中的生物学特性。【方法】参照Mb PG45株GrpE基因序列(GenBank登录号为CP002188.1)设计引物,构建原核表达载体pET-G... 【目的】分析牛支原体(Mycoplasma bovis,Mb)热休克蛋白GrpE的进化保守性与结构特征,解析其亚细胞定位及在介导黏附过程中的生物学特性。【方法】参照Mb PG45株GrpE基因序列(GenBank登录号为CP002188.1)设计引物,构建原核表达载体pET-GrpE。基于基因测序结果,利用生物信息学方法分析GrpE的同源性、遗传进化、理化性质及结构特征。将重组质粒转化后诱导表达,经镍亲和层析纯化获得重组GrpE蛋白,采用SDS-PAGE分析结果。以重组蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,采用ELISA测定抗体效价,通过Western blotting检测其免疫原性。利用间接免疫荧光(indirect fluorescent antibody assay,IFA)、ELISA及Western blotting分析GrpE的亚细胞定位;采用IFA和ELISA结合试验验证GrpE的黏附功能。【结果】成功构建原核表达载体pET-GrpE,生物信息学分析发现GrpE序列在Mb内高度保守(相似性达95%以上),该序列编码的蛋白由341个氨基酸组成,无信号肽和跨膜结构,含有潜在N-糖基化位点及磷酸化位点。SDS-PAGE分析显示GrpE成功表达且以可溶性形式存在。利用重组蛋白制备多克隆抗体测得其效价为1:16000,Western blotting结果表明GrpE蛋白具有良好的免疫原性。IFA、ELISA及Western blotting结果显示GrpE定位于菌体胞膜与胞质,但主要分布于膜表面。IFA显示GrpE蛋白多抗血清可抑制Mb对胎牛肺(embryonic bovine lung,EBL)细胞的黏附。结合试验结果表明GrpE蛋白以剂量依赖性方式结合宿主细胞膜蛋白,且该结合可被GrpE蛋白多抗抑制(P<0.001)。【结论】GrpE蛋白是Mb的一种高度保守的新型黏附素,直接参与Mb对宿主细胞的黏附过程,为阐明牛支原体致病机制提供了关键分子靶标。 展开更多
关键词 牛支原体 GrpE蛋白 原核表达 亚细胞定位 黏附特性
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电磁场复合暴露对小鼠神经行为和星形胶质细胞的影响
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作者 杨镁楹 崔智琳 +4 位作者 常晨旭 李杨 邓桦 左红艳 杨鸿 《中国兽医杂志》 北大核心 2026年第2期59-68,共10页
为了探究电磁场复合暴露对小鼠神经行为和星形胶质细胞的影响及其机制,本试验将C57BL/6N小鼠随机分为4个组:对照组、微波组、静磁场组、复合组(微波+静磁场),建立电磁场复合暴露动物模型,采用Y迷宫、悬尾和旷场试验进行神经行为学评价,... 为了探究电磁场复合暴露对小鼠神经行为和星形胶质细胞的影响及其机制,本试验将C57BL/6N小鼠随机分为4个组:对照组、微波组、静磁场组、复合组(微波+静磁场),建立电磁场复合暴露动物模型,采用Y迷宫、悬尾和旷场试验进行神经行为学评价,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清水通道蛋白4(AQP4)、神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、CXC趋化因子配体10(CXCL10)含量,通过放射免疫分析法检测血清S100钙结合蛋白β(S100β)含量,利用免疫荧光法检测海马CA1区星形胶质细胞N-myc下游调节基因2(NDRG2)和GFAP表达。结果显示,与对照组相比,电磁场复合暴露后7 d,小鼠空间探索能力降低,未发生抑郁和焦虑样情绪行为;电磁场复合暴露后6 h、7 d、14 d、21 d,复合组小鼠血清GFAP、CXCL10和S100β含量均显著升高(P<0.01或P<0.001),AQP4含量显著降低(P<0.01或P<0.001);电磁场复合暴露后7 d,复合组小鼠海马CA1区星形胶质细胞NDRG2表达极显著下调(P<0.001)。结果表明,微波和静磁场复合暴露可引起小鼠空间探索能力下降,血清中星形胶质细胞相关因子含量异常,海马CA1区星形胶质细胞NDRG2表达下调。本试验结果为阐明星形胶质细胞在电磁辐射神经生物学效应中的作用提供了依据。 展开更多
关键词 电磁场复合暴露 微波 静磁场 神经行为 星形胶质细胞
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高铜对哺乳动物卵母细胞质量和凋亡的影响及其作用途径的研究进展
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作者 康生 陈觅 +3 位作者 桑木旦 董海龙 吴庆侠 常振宇 《畜牧与兽医》 北大核心 2026年第2期141-145,共5页
卵母细胞质量是决定受精成败和胚胎发育的关键因素,对动物遗传改良和繁殖效率具有重要意义。尽管铜是机体组织构成和生命活动维持不可或缺的微量元素,参与多种生理过程,但过量摄入则会引发毒性效应,严重时可导致动物死亡。高铜暴露可通... 卵母细胞质量是决定受精成败和胚胎发育的关键因素,对动物遗传改良和繁殖效率具有重要意义。尽管铜是机体组织构成和生命活动维持不可或缺的微量元素,参与多种生理过程,但过量摄入则会引发毒性效应,严重时可导致动物死亡。高铜暴露可通过多种机制诱导卵母细胞凋亡,包括氧化应激、线粒体功能障碍等机制。活性氧(ROS)、细胞色素c(Cyt-c)、一些抗氧化酶等可能是这些机制中的关键调控因子。这些因子相互作用,共同参与高铜诱导的卵母细胞凋亡过程。近年来,虽然已有研究探讨了高铜对卵母细胞凋亡的影响,但影响凋亡的相关途径仍需进一步探索。本文综述了高铜对哺乳动物卵母细胞质量和凋亡的影响及其作用途径的研究进展,旨在深入了解高铜损害生殖健康的机制,并为预防和治疗高铜暴露引起的生殖毒性提供理论基础。 展开更多
关键词 高铜 哺乳动物 卵母细胞凋亡 作用途径
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