牛双芽巴贝斯虫GST-HSP20(exon)融合蛋白间接ELISA检测方法的建立 被引量：8

1

作者 简子健 马素贞 +3 位作者 孙其喆 沈炯玉 苗中秋 吕伟 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期980-985,共6页

【目的与方法】以纯化的牛双芽巴贝斯虫GST-HSP20(exons)融合蛋白作为检测抗原,通过优化ELISA反应条件,建立了检测牛双芽巴贝斯虫血清特异性抗体的新型间接ELISA方法。【结果】方阵试验确定的GST-HSP20抗原的最适包被浓度为5μg/mL,血... 【目的与方法】以纯化的牛双芽巴贝斯虫GST-HSP20(exons)融合蛋白作为检测抗原,通过优化ELISA反应条件,建立了检测牛双芽巴贝斯虫血清特异性抗体的新型间接ELISA方法。【结果】方阵试验确定的GST-HSP20抗原的最适包被浓度为5μg/mL,血清最佳稀释倍数为40倍,ELISA阳性反应的临界值为OD450≥0.292,批内和批间重复试验的变异系数均小于10%。HSP20间接ELISA方法能排除GST的干扰,与其它梨形虫病无交叉反应,与巢式PCR检测方法的阳性符合率为96%。【结论】所建立的ELSIA检测法重复性好、特异性强、灵敏度高。这是国内首次利用重组蛋白建立的牛双芽巴贝斯病血清学诊断方法,为大规模地进行牛巴贝斯虫病的流行病学调查和血清学诊断提供有效的技术手段。 展开更多

关键词 牛双芽巴贝斯虫 热休克蛋白20 重组抗原间接ELISA 比对

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牛病毒性腹泻病毒的分离与鉴定 被引量：11

2

作者 牛国辉 季新成 +1 位作者 段晓东 晁群芳 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期986-991,共6页

【目的】为了解牛病毒性腹泻/黏膜病在新疆的流行现状,对疑似该病病料进行地方毒株的分离,并对其进行鉴定。【方法】将采自新疆不同地区疑似牛病毒性腹泻的病料接种MDBK细胞,并盲传2-4代;对分离株进行毒力测定及中和试验,应用RT-PCR方... 【目的】为了解牛病毒性腹泻/黏膜病在新疆的流行现状,对疑似该病病料进行地方毒株的分离,并对其进行鉴定。【方法】将采自新疆不同地区疑似牛病毒性腹泻的病料接种MDBK细胞,并盲传2-4代;对分离株进行毒力测定及中和试验,应用RT-PCR方法扩增分离株的5’UTR基因片段并克隆测序分析。【结果】分离到的8株病毒可发生细胞病变,在MDBK细胞上的TCID50为103-106。毒株血清中和实验结果,RT-PCR反应结果,克隆后重组质粒经BamHI、HindIII双酶切鉴定、重组质粒PCR鉴定结果均得到预计扩增片段。重组质粒测序结果与GenBank中已发表的牛病毒性腹泻病毒NADL株序列同源性为82.0%-94.8%。【结论】证实所分离到的病毒为BVDV,命名为B-S-1、B-S-2、B-S-3、B-S-4、B-S-5、B-S-6、B-G-1和B-G-2。 展开更多

关键词 牛病毒性腹泻病毒 血清中和试验 RT-PCR 基因序列分析

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牛病毒腹泻病毒(BVDV)E2重组蛋白ELISA检测方法的初步建立 被引量：4

3

作者 钟发刚 黄新 +1 位作者 王新华 李娜 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期761-764,共4页

【目的】为牛病毒性腹泻病毒抗体快速检测提供敏感、特异检测方法。【方法】重组质粒pET-(1-345)转化宿主菌BL21(DE),以IPTG进行诱导表达,使外源基因获得了较高水平的表达;Westem一blot检测表达产物反应原性,同时进行特异性检测;将收集... 【目的】为牛病毒性腹泻病毒抗体快速检测提供敏感、特异检测方法。【方法】重组质粒pET-(1-345)转化宿主菌BL21(DE),以IPTG进行诱导表达,使外源基因获得了较高水平的表达;Westem一blot检测表达产物反应原性,同时进行特异性检测;将收集的纯培养物进行超声波裂解后以His bind kit蛋白质纯化试剂盒纯化回收目的蛋白,再以纯化后的目的蛋白作为包被抗原进行方阵滴定试验,确定目的蛋白作为包被抗原的最佳稀释度。【结果】重组蛋白表达可达菌体蛋白总量的19.7%,且具有较好的反应原性和特异性,以此方法建立的间接ELISA方法对收集的约43头份血清样品进行检测,检测阳性结果与进口试剂盒检测结果符合率达到93.55%。【结论】以BVDV E2重组蛋白作为抗原建立的间接ELISA检测方法是可行的,为其进一步的标准化莫定基础。 展开更多

关键词 牛病毒性腹泻病毒 E2重组蛋白 ELISA

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牛双芽巴贝斯虫巢式PCR诊断方法的建立 被引量：2

4

作者 简子健 马素贞 +3 位作者 孙其吉吉 沈炯玉 苗中秋 吕伟 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期803-807,共5页

【目的与方法】根据Genbank上登陆的双芽巴贝斯虫HSP20基因设计两对引物,SHSP-P1与SHSP-P2和SHSP-P3与SHSP-P4,以其建立牛双芽巴贝斯虫巢式PCR快速检测方法。【结果】第一次、第二次扩增的退火温度均为57℃,分别扩增出约631和409 bp的条... 【目的与方法】根据Genbank上登陆的双芽巴贝斯虫HSP20基因设计两对引物,SHSP-P1与SHSP-P2和SHSP-P3与SHSP-P4,以其建立牛双芽巴贝斯虫巢式PCR快速检测方法。【结果】第一次、第二次扩增的退火温度均为57℃,分别扩增出约631和409 bp的条带,与预期的大小相符,而作为对照样本的牛巴贝斯虫、牛环形泰勒虫基因组DNA均无此扩增目的条带出现。将感染双芽巴贝斯虫的全血基因组DNA做10倍递减稀释到106倍扩增时,巢式PCR还能见到目的条带,其灵敏度相当于4.6 pg/mL全血基因组DNA。在对50份疫区牛全血DNA样本检测中,阳性检出率分别为22%(11/50)。【结论】所建立的牛双芽巴贝斯虫巢式PCR方法准确、敏感、特异,可以用于牛双芽巴贝斯虫病的快速检测和小范围的流行病学调查,具有重要的临床意义。 展开更多

关键词 牛双芽巴贝斯虫 HSP20外显子基因 巢式PCR 检测

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牛双芽巴贝斯虫新疆株HSP20基因的克隆和真核表达质粒的构建 被引量：2

5

作者 简子健 孙其喆 +1 位作者 马素贞 王晓萍 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期359-363,共5页

通过设计牛双芽巴贝斯虫热休克蛋白HSP20基因序列的特异性引物,采用PCR方法从疑似"牛焦虫病"的患牛全血基因组中扩增得到699 bp的HSP20基因,将其连入pMD18-T测序、鉴定,再将验证的699 bp的HSP20基因克隆至真核表达载体pcDNA3.... 通过设计牛双芽巴贝斯虫热休克蛋白HSP20基因序列的特异性引物,采用PCR方法从疑似"牛焦虫病"的患牛全血基因组中扩增得到699 bp的HSP20基因,将其连入pMD18-T测序、鉴定,再将验证的699 bp的HSP20基因克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建真核载体PCDNA3.1-HSP20。经再次测序、鉴定后,尾静脉注射小白鼠进行HSP20基因的瞬时表达,取其肝脏提取总RNA,经RT-PCR方法扩增出一条534bp的目的条带,表明真核表达质粒构建成功。 展开更多

关键词 牛双芽巴贝斯虫 HSP20基因 PCDNA3.1(+) 真核表达

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应用电导率测定猪肉新鲜度的试验研究 被引量：8

6

作者 宋华宾 马成林 高晓伟 《吉林畜牧兽医》 1990年第5期4-5,共2页

多年来,有许多从不同方面探索肉新鲜度检查方法的报道。目前,我国食品卫生标准中以感官检查和挥发性盐基总氮(TVBN)测定作为肉新鲜度指标。虽然TVBN测定是评定肉品质量(新鲜度)的重要客观指标,但由于TVBN测定操作较复杂,时间长,故不适... 多年来,有许多从不同方面探索肉新鲜度检查方法的报道。目前,我国食品卫生标准中以感官检查和挥发性盐基总氮(TVBN)测定作为肉新鲜度指标。虽然TVBN测定是评定肉品质量(新鲜度)的重要客观指标,但由于TVBN测定操作较复杂,时间长,故不适于农贸市场等基层单位快速、简便判定肉新鲜度的需求。为此,我们应用电导仪进行了猪肉新鲜度的测定试验,现报道如下。 展开更多

关键词 猪肉 新鲜度 试验 电导率

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开展畜禽产品安全性监控刻不容缓 被引量：1

7

作者 邓云波 郭永琰 段苏华 《中国牧业通讯》 2001年第10期41-42,共2页

近年来我省养殖业持续稳定发展,已成为农村经济的支柱产业和农民增收的主要来源之一。2000年全省出栏猪6299万头、牛131.6万头、山羊519.2万只,家禽4.19亿羽,养殖业产值已占全省农业总产值的45％。为了有效地解决畜禽产品安全问题,本文... 近年来我省养殖业持续稳定发展,已成为农村经济的支柱产业和农民增收的主要来源之一。2000年全省出栏猪6299万头、牛131.6万头、山羊519.2万只,家禽4.19亿羽,养殖业产值已占全省农业总产值的45％。为了有效地解决畜禽产品安全问题,本文主要对我省畜禽产品的安全情况、产生的原因与措施进行了分析。 展开更多

关键词 畜禽产品 安全监控 动物食品检验

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开展畜禽产品安全性监控刻不容缓

8

作者 邓云波 郭永琰 段苏华 《湖南畜牧兽医》 2001年第5期3-4,共2页

关键词 畜禽产品 安全性 监控 产品质量

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肉检时坏死性猪囊虫与肉孢子虫的鉴别

9

作者 潘耀谦 《吉林畜牧兽医》 1990年第4期7-9,共3页

近来,在农贸市场的肉品检验过程中,不时可在酮体的臀部、腰背部等肌肉中见到一种灰白色,长纺锤状,略小于大米粒的包囊,很易将其误诊为肉孢子虫。其实这是坏死性猪囊虫的包囊。众所周知,典型的猪囊虫外观为近圆形,有黄豆粒大,呈乳白色半... 近来,在农贸市场的肉品检验过程中,不时可在酮体的臀部、腰背部等肌肉中见到一种灰白色,长纺锤状,略小于大米粒的包囊,很易将其误诊为肉孢子虫。其实这是坏死性猪囊虫的包囊。众所周知,典型的猪囊虫外观为近圆形,有黄豆粒大,呈乳白色半透明水泡, 展开更多

关键词 肉类检验 猪囊虫 肉孢子 鉴别

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畜牧生产中增重剂的使用及其动物体内残留量的测定

10

作者 仝宝生 张志文 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 1990年第1期58-59,共2页

50年代以后的大量研究和实践表明,利用激素类物质是提高家畜,特别是反刍家畜的生产率的一项经济而有效的措施。这就使得美国和英国广泛使用已烯雌酚和已雌酚等作为肉牛的增重剂,以后又推出许多高效商品性产品。因为它们确能使牛日增重提... 50年代以后的大量研究和实践表明,利用激素类物质是提高家畜,特别是反刍家畜的生产率的一项经济而有效的措施。这就使得美国和英国广泛使用已烯雌酚和已雌酚等作为肉牛的增重剂,以后又推出许多高效商品性产品。因为它们确能使牛日增重提高10—25％,饲料转化效率也相应提高,胴体品质(瘦肉与脂肪的比例)有所改善,所以在许多国家得到了广泛的应用,并取得了巨大的经济效益。然而,随着激素活性增重剂的使用日益增多,反对的呼声也愈来愈高。因为从理论上讲,可食组织中的残留物可能会危及消费者的健康。笔者认为,许多人对此产生了误解。的确,在经过增重剂处理的家畜产品中发现有激素,但其是否会危及消费者的健康还需分别研究。这需借助于毒理学的估计确定各种增重剂化合物的耐受度或可接受日摄取量(ADI)。因为从许多植物中发现有激素。 展开更多

关键词 畜牧生产 增重剂 动物 残留量 测定

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公、母猪肉的鉴别 被引量：2

11

作者 许崇波 《动物检疫》 1992年第3期45-45,39,共2页

农贸市场上常常可以见到一些公、母猪肉,这类肉肉质粗硬、皮厚,烹调时不易煮烂、香昧差或有异味,食用价值低,所以无论从感官特征上或是食用方面,都给人以不良印象,因此,人们一般不愿食用这类肉。近年来又有人证明,公、母猪肉因含有较多... 农贸市场上常常可以见到一些公、母猪肉,这类肉肉质粗硬、皮厚,烹调时不易煮烂、香昧差或有异味,食用价值低,所以无论从感官特征上或是食用方面,都给人以不良印象,因此,人们一般不愿食用这类肉。近年来又有人证明,公、母猪肉因含有较多的性激素,给人的生长发育带来不良影响。 展开更多

关键词 公猪 母猪 猪肉 鉴别

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动物性食品中抗生素的残留与检测 被引量：4

12

作者 赵月兰 《中国动物检疫》 CAS 1994年第3期14-16,共3页

关键词 动物 食品 抗生素残留 检疫

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应用E—15微量快速生化鉴定系统检测鱼粉沙门氏菌 被引量：3

13

作者 朱其太 马维礼 王维志 《动物检疫》 1990年第5期13-14,共2页

本文报道了应用E—15微量快速生化鉴定系统,对进口鱼粉中沙门氏菌及志贺氏菌进行检疫,试验检测结果与常规法基本相符。而E—15微量法缩短了检疫时间、同时也为进出口其它畜禽及其产品肠道致病菌的检疫,提供了一种新的可靠的快速检疫方法。

关键词 鱼粉 沙门氏菌 生化鉴定

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从进口鱼粉中分离出两种不同生化型的亚利桑那菌 被引量：1

14

作者 秦贞奎 侯艳梅 薛振源 《动物检疫》 1990年第4期17-18,共2页

1989年6—8月期间,中国粮油食品进出口公司等九个单位,先后经天津港进口秘鲁、智利鱼粉15批次,47934吨,我所抽样检疫发现亚利桑那菌(Arizona)7批次共24607吨,并分离出了该菌的两种不同的生化型。

关键词 鱼粉 生化型 分离 亚利桑那菌 细菌

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把握入世机遇加快绿色畜禽产品基地建设

15

作者 桑学波 姚建群 +2 位作者 张新宇 汪瑛 于平 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2002年第2期51-51,共1页

关键词 绿色畜禽产品 绿色食品 基地建设 良种 饲料 加工

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冷冻肉检验和卫生管理

16

作者 陈瑞熙 《畜牧与兽医》 北大核心 1990年第3期131-133,共3页

由于我省猪源不足,每年要从省外调进大量冷冻猪肉及副产品等,为了防止牲畜疫病传播,保障消费者食肉安全,今年我们开展了对冷冻猪肉的检验工作,现将具体做法简介如下供参考:1 冷冻肉的检验1.1 查证调入我省的冷冻猪肉,一般先贮藏在市区... 由于我省猪源不足,每年要从省外调进大量冷冻猪肉及副产品等,为了防止牲畜疫病传播,保障消费者食肉安全,今年我们开展了对冷冻猪肉的检验工作,现将具体做法简介如下供参考:1 冷冻肉的检验1.1 查证调入我省的冷冻猪肉,一般先贮藏在市区冷库内,为此,我们在冷库进驻卫生检验人员,负责查证、验印工作,并对冻肉数量、产地、宰杀时间、进库日期进行登记。凡是没有检验证明的。 展开更多

关键词 冷冻肉 检验 卫生管理

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试谈肉类批发市场的兽医卫生监督

17

作者 文丹风 邹民发 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1997年第1期52-52,共1页

关键词 肉类 兽医卫生监督

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散养动物产地检疫存在的问题及措施

18

作者 郭进安 谷石榜 赵明宽 《中国牧业通讯》 2001年第10期34-35,共2页

散养动物产地检疫是整个动物检疫工作的重点,同时也是难点,在实施过程中存在着种种局限因素,严重影响着产地检疫的全面开展.

关键词 散养动物 检疫 检疫力疫 产地检疫 产地检疫证明

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我们对市场水盆鸡、鸭及饭店的监督与管理措施

19

作者 李常挺 《广西畜牧兽医》 2001年第6期39-40,共2页

关键词 水盆鸡 水盆鸭 肉食品检疫 管理措施 饭店

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冷库贮存加工畜禽产品的兽医卫生管理

20

作者 潘光瑞 《动物检疫》 1992年第4期41-43,共3页

近年来随着商品经济的发展和需要,我市沿海的乡(镇)村陆续建立起了很多冷库,大部分以经营海产品为主,但也有相当一部份代储和加工经营畜禽产品的,且产品调出调入比较频繁。为了防止畜禽疫病的传播,保障消费者的安全。

关键词 冷库 畜禽产品 兽医 卫生 管理

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