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2009～2013年我国活禽市场环境样本中禽流感病毒的检测 被引量：60
1
作者 张烨 李晓丹 +5 位作者 邹淑梅 薄洪 董丽波 高荣保 王大燕 舒跃龙 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期615-619,共5页
为了解中国活禽市场环境样本中禽流感病毒分布情况,对全国2009~2013年采自活禽市场的环境样本进行流感病毒核酸检测,并利用无特殊致病原鸡胚（SPF鸡胚）对A型流感病毒核酸阳性标本进行病毒分离。结果显示,环境标本中禽流感病毒核酸阳性... 为了解中国活禽市场环境样本中禽流感病毒分布情况,对全国2009~2013年采自活禽市场的环境样本进行流感病毒核酸检测,并利用无特殊致病原鸡胚（SPF鸡胚）对A型流感病毒核酸阳性标本进行病毒分离。结果显示,环境标本中禽流感病毒核酸阳性率的波动呈明显的季节性趋势,冬春季节核酸检测阳性率较高;我国南方地区活禽市场环境样本的禽流感病毒核酸阳性率高于北方。市场中清洗禽类的污水和宰杀或摆放禽肉案板表面的擦拭样本核酸阳性率高于其它类型的样本。2009~2013年环境样本中分离到的禽流感病毒以H5和H9亚型为主,2013年之前H5亚型多于H9亚型,而2013年H9亚型超过了H5亚型。本研究表明,对城乡活禽市场中禽流感病毒的实时监测具有重要的公共卫生意义,可为我国人感染禽流感病毒的防控和预测预警提供依据。 展开更多
关键词 禽流感病毒 流行 活禽市场
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葡萄糖氧化酶制剂对肉鸡肠道pH及盲肠微生物的影响 被引量：29
2
作者 赵国先 宋海彬 +3 位作者 马可为 张振红 计成 马秋刚 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期83-87,共5页
通过探讨葡萄糖氧化酶(Glucose oxidase,GOD)对肉鸡肠道环境的影响,为其在肉鸡生产中的应用提供理论依据。本研究选取300只1日龄罗斯308肉鸡,随机分为5组,每组6个重复,每个重复10只鸡。分别饲喂添加0、0.15%、0.3%、0.4%、0.5%GOD的日粮... 通过探讨葡萄糖氧化酶(Glucose oxidase,GOD)对肉鸡肠道环境的影响,为其在肉鸡生产中的应用提供理论依据。本研究选取300只1日龄罗斯308肉鸡,随机分为5组,每组6个重复,每个重复10只鸡。分别饲喂添加0、0.15%、0.3%、0.4%、0.5%GOD的日粮,研究了其对肉鸡肠道pH及盲肠微生物的影响。结果表明:日粮中添加GOD,不同程度的降低了空肠、回肠pH,但未能显著影响胃和十二指肠pH;GOD具有明显抑制大肠杆菌生长,促进盲肠中乳酸杆菌和双歧杆菌增殖的作用。 展开更多
关键词 葡萄糖氧化酶 肉鸡 肠道PH 盲肠微生物
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传染性法氏囊病病毒反向遗传技术发展及其应用 被引量：10
3
作者 祁小乐 王永强 +3 位作者 高立 高宏雷 高玉龙 王笑梅 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期326-331,共6页
传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)是双股双节段RNA病毒科的主要代表,其主要侵害鸡的中枢免疫器官法氏囊,引起的传染性法氏囊病(Infectious bursal disease,IBD)是危害养禽业健康发展的重要免疫抑制病。IBDV反... 传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)是双股双节段RNA病毒科的主要代表,其主要侵害鸡的中枢免疫器官法氏囊,引起的传染性法氏囊病(Infectious bursal disease,IBD)是危害养禽业健康发展的重要免疫抑制病。IBDV反向遗传技术诞生的近20年来,病毒拯救技术不断完善,病毒基因功能研究更为深入,而且基于此的新型疫苗的研究也有较大进展。本实验室在该领域也做了比较系统和深入的工作。本综述对IBDV致病机制和防控研究具有重要启示意义。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病病毒 反向遗传 细胞嗜性 毒力 疫苗
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利用高光谱图像技术检测鸡胴体内部粪便污染物 被引量：11
4
作者 赵进辉 涂冬成 +2 位作者 欧阳静怡 刘木华 沈杰 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期573-577,共5页
以鸡胴体为研究对象,探讨基于高光谱图像技术的鸡胴体内部粪便污染物检测方法。首先采集400～1 000 nm的鸡胴体高光谱图像;然后应用主成分分析(PCA)获得主成分图像,由第1主成分图像得到3个特征波长518.59,562.64,700.67 nm,并以700.67 n... 以鸡胴体为研究对象,探讨基于高光谱图像技术的鸡胴体内部粪便污染物检测方法。首先采集400～1 000 nm的鸡胴体高光谱图像;然后应用主成分分析(PCA)获得主成分图像,由第1主成分图像得到3个特征波长518.59,562.64,700.67 nm,并以700.67 nm特征波长下的图像作为鸡胴体内部粪便污染物检测特征图像;最后构建掩膜以消除特征图像背景噪声并将其置为白色,并运用阈值分割和数学形态学完成粪便污染物的提取。试验结果表明,对100个鸡胴体样本进行检测,检测总正确率为93%。应用高光谱图像技术结合主成分分析等数据处理方法能较好地完成对鸡胴体内部粪便污染物检测,为鸡胴体内部粪便污染物在线快速检测提供重要的理论依据。 展开更多
关键词 高光谱图像 粪便污染物 鸡胴体 检测
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肉鸡安全生产质量监控可追溯系统的实现 被引量：25
5
作者 白云峰 陆昌华 +4 位作者 李秉柏 孙希民 周东 董泰丽 王诗民 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2006年第3期281-284,共4页
结合肉鸡生产日常管理,运用现代网络信息技术,对鸡肉产品生产过程诸环节中影响终端食品安全关键因素进行分析。采用基于产品批次记录与逐级编码方式,将肉鸡生产、产品加工、物流销售等与鸡肉产品安全有关的信息串连起来,建立电子文档记... 结合肉鸡生产日常管理,运用现代网络信息技术,对鸡肉产品生产过程诸环节中影响终端食品安全关键因素进行分析。采用基于产品批次记录与逐级编码方式,将肉鸡生产、产品加工、物流销售等与鸡肉产品安全有关的信息串连起来,建立电子文档记录,构建肉鸡安全生产质量监控可追溯系统,通过该系统消费者可逆向追溯肉鸡饲养管理信息、疾病防治与免疫情况等多项可追溯内容,达到监控肉禽食品安全目的。该系统已在山东民和集团实现。 展开更多
关键词 肉鸡生产 质量监控 可追溯系统 实现
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检测坦布苏病毒病抗体 NS1-ELISA方法的建立与初步应用 被引量：8
6
作者 谢星星 李祥瑞 +5 位作者 李银 赵冬敏 黄欣梅 韩凯凯 刘宇卓 游园 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第1期135-140,共6页
为建立快速检测鸭坦布苏病毒病抗体的血清学方法,本研究利用鹅坦布苏病毒JS804株非结构蛋白NS1基因序列将其克隆至原核表达载体pET32a上,建立重组表达pET32a-NS1,转化至BL21(DE3)中。经IPTG诱导得到NS1融合蛋白,融合蛋白均以包涵体形式... 为建立快速检测鸭坦布苏病毒病抗体的血清学方法,本研究利用鹅坦布苏病毒JS804株非结构蛋白NS1基因序列将其克隆至原核表达载体pET32a上,建立重组表达pET32a-NS1,转化至BL21(DE3)中。经IPTG诱导得到NS1融合蛋白,融合蛋白均以包涵体形式存在,包涵体经过变性和复性,纯化的坦布苏病毒NS1蛋白作为包被抗原,在最佳检测条件基础上,建立了检测坦布苏病毒病(Tembusu virus disease,简称TVD)抗体的间接ELISA方法。结果在条件优化后抗原最适包被量为1.925μg·孔-1,抗原最佳包被条件为37℃放置1 h后4℃过夜,血清的最佳稀释度为1∶200,最佳封闭时间为1 h,酶标二抗最适稀释度为1∶1 000,显色时间10 min。阴阳性临界值判定标准为0.346。用建立的间接ELISA方法检测禽流感、新城疫、传染性支气管炎、TVD阳性血清样品均无交叉反应,表明该方法具有良好的特异性。板内和板间重复试验的最大变异系数分别为6.7%和8.2%,显示该方法具有很好的稳定性。用间接NS1-ELISA方法对81份疑似鸭坦布苏病毒病血清样品进行检测,有43份样品呈现阳性,E-ELISA有48份呈阳性结果,证明该方法具有较高的敏感性。NS1-ELISA方法的建立为TVB的诊断和流行病学调查提供了一种新的方法。 展开更多
关键词 坦布苏病毒 NS1蛋白 间接ELISA 抗体
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鹅源坦布苏病毒 RT-LAMP快速检测方法的建立 被引量：8
7
作者 韩凯凯 李银 +4 位作者 黄欣梅 赵冬敏 刘宇卓 谢星星 游园 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第1期29-33,共5页
坦布苏病毒是新发现的一种可引起家禽产蛋和采食量下降及死亡的黄病毒属病毒。根据GenBank中登录的鹅源坦布苏病毒NS5基因序列,利用Primer Explorer V4软件在序列保守区域设计1套特异识别NS5基因序列中6个不同区段的环介导等温扩增(loop... 坦布苏病毒是新发现的一种可引起家禽产蛋和采食量下降及死亡的黄病毒属病毒。根据GenBank中登录的鹅源坦布苏病毒NS5基因序列,利用Primer Explorer V4软件在序列保守区域设计1套特异识别NS5基因序列中6个不同区段的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)引物,并以此套引物建立一种基于LAMP技术的鹅源坦布苏病毒检测方法。结果表明,该方法灵敏度极高,是普通PCR方法的100倍,只能特异性扩增坦布苏病毒的RNA,对于其他常见禽RNA病毒均无特异性扩增。在反应体系中加入SYBR GreenⅠ染料后,通过肉眼观察有无绿色荧光可直接判定结果。该方法特异性强,灵敏度高,无需特殊仪器,简便,快速,适用于鹅源坦布苏病毒的临床快速检测。 展开更多
关键词 鹅源坦布苏病毒 NS5基因 环介导等温扩增
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鸡传染性法氏囊病病毒的分离与鉴定 被引量：13
8
作者 胡晓苗 张丹俊 +1 位作者 汪丽 李克勇 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2006年第23期6205-6206,共2页
从安徽省合肥郊县疑似传染性法氏囊痛的维鸡体内，分离到4株病毒。经血清学、人工感染、鸡胚接种、分子生物学试验鉴定．结果表明，分离物为传染性法氏囊病病毒（IBDV）。人工感染易感鸡试验表明，4株中有2株具有超强毒株的致病特点。... 从安徽省合肥郊县疑似传染性法氏囊痛的维鸡体内，分离到4株病毒。经血清学、人工感染、鸡胚接种、分子生物学试验鉴定．结果表明，分离物为传染性法氏囊病病毒（IBDV）。人工感染易感鸡试验表明，4株中有2株具有超强毒株的致病特点。将其接种36日龄鸡后第2天精神沉郁，拉白色或绿色稀粪，发病率为100％。第3-4天出现死亡高峰，死亡率达80％。剖检可见全身性出血素质，法氏囊呈“紫葡萄”样外观。接种鸡胚后72～96h引起鸡胚全部死亡。另外2株接种易感鸡后，发病率和死亡率都较低，临床症状不典型．出现亚临床传染性法氏囊病，剖检病理变化不明显，表明此2株毒力较弱。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病病毒 分离 鉴定
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从芦花鸡分离的J亚群ALV病毒及其gp85基因演化 被引量：7
9
作者 秦卓明 徐怀英 +5 位作者 马秀丽 黄兵 李玉峰 李福伟 于可响 崔治中 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第5期1180-1185,共6页
采用RT-PCR方法直接从芦花鸡肿瘤中进行禽白血病病毒（Avian leucosis virus,ALV）的核酸扩增,经测序证实为ALV。将上述病料接种DF1细胞（C/E）进行盲传,并对其感染细胞上清进行ALV P27抗原检测,结果为阳性,证实获得了一株病毒,命名为SD... 采用RT-PCR方法直接从芦花鸡肿瘤中进行禽白血病病毒（Avian leucosis virus,ALV）的核酸扩增,经测序证实为ALV。将上述病料接种DF1细胞（C/E）进行盲传,并对其感染细胞上清进行ALV P27抗原检测,结果为阳性,证实获得了一株病毒,命名为SDJN2012。用PCR方法扩增其囊膜蛋白gp85基因并测序,与GenBank中的ALV参考毒株进行核苷酸或氨基酸同源性比较。结果表明：SDJN2012与山东较早发现的J亚群ALV代表株SD0001的核苷酸（氨基酸）同源性最高,达93.4%（92.6%）,与J亚群不同年代的代表株同源性为88.6%～93.3%（88.2%～90.6%）,而与A,C,D,E亚群ALV毒株的同源性仅为19.7%～32.2%（10.2%～32.2%）,进一步确证分离到的病毒为J亚群ALV。对种蛋的跟踪监测证实：ALV蛋清P27抗原阳性率为37.6%,而血清学监测则呈现多样性的变化：鸡群发病前J亚群ALV抗体检测为阴性,发病后阳性率仅为9.35%,而A/B亚群阳性率则由发病前的9.8%,攀升到发病后的75.4%,彰显出ALV病原学、血清学和分子流行病学的复杂性。 展开更多
关键词 禽白血病病毒 GP85基因 J亚群
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弥渡县牛肝片吸虫病流行调查 被引量：4
10
作者 胡小九 李石友 +3 位作者 李文学 施忠芬 申时先 李秀枝 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2012年第1期286-289,共4页
为了解弥渡县牛肝片吸虫感染情况,采用粪便虫卵检查法进行牛肝片吸虫病的流行调查。结果表明,在检查的960头牛中,阳性牛220头,阳性率为22.92%。其中坝区阳性率为14.06%,半山区为28.75%,山区为25.94%;黄牛阳性率为24.58%,水牛为21.25%;... 为了解弥渡县牛肝片吸虫感染情况,采用粪便虫卵检查法进行牛肝片吸虫病的流行调查。结果表明,在检查的960头牛中,阳性牛220头,阳性率为22.92%。其中坝区阳性率为14.06%,半山区为28.75%,山区为25.94%;黄牛阳性率为24.58%,水牛为21.25%;阳性牛最小年龄为1.5岁,最大为13岁,阳性率随年龄增长而提高;阳性牛的每克粪便虫卵数(EPG)最高216枚,最低3枚。该调查研究揭示了肝片吸虫病在弥渡县的牛中感染较广泛,尤其是半山区、山区较高。 展开更多
关键词 弥渡县 牛 肝片吸虫病 流行调查
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磷酸替米考星在肉鸡体内的药代动力学研究 被引量：9
11
作者 赵艳红 沈向荣 +6 位作者 刘彩 张晓辉 杨迪 宗昕茹 辛凌翔 王文超 鲍恩东 《江苏农业科学》 北大核心 2013年第7期207-210,共4页
为了探讨磷酸替米考星在肉鸡体内的药物代谢动力学过程并阐明其药动学特征,本试验给受试鸡分别口服不同剂量,以及静脉注射一定剂量的10%磷酸替米考星可溶性粉,利用HPLC方法分析不同时间点受试鸡血浆中磷酸替米考星的药物浓度。试验结果... 为了探讨磷酸替米考星在肉鸡体内的药物代谢动力学过程并阐明其药动学特征,本试验给受试鸡分别口服不同剂量,以及静脉注射一定剂量的10%磷酸替米考星可溶性粉,利用HPLC方法分析不同时间点受试鸡血浆中磷酸替米考星的药物浓度。试验结果显示,口服高(16 mg/kg)、中(8 mg/kg)、低(4 mg/kg)剂量的10%磷酸替米考星可溶性粉与对照药10%替米考星可溶性粉(7.16 mg/kg),4组药物投服受试鸡体内的药物浓度-时间曲线下面积(AUC)分别为5.616 3±0.958 4、2.608 2±0.266 5、1.471 6±0.086 9、2.331 4±0.195 6(μg/mL).h,与喂药量成正比,说明10%磷酸替米考星可溶性粉在鸡体内的药物动力学呈一级动力学过程;口服中剂量10%磷酸替米考星可溶性粉和对照药10%替米考星可溶性粉后,受试鸡体内的Cmax分别为(0.265 8±0.020 5)、(0.233 6±0.033 7)μg/mL,处于生物等效性范围之内(0.80～1.25),说明口服10%磷酸替米考星可溶性粉后,鸡体内替米考星的血药分布与口服对应量的对照药10%替米考星可溶性粉相类似,二者的差异不显著。试验结果表明,10%磷酸替米考星可溶性粉口服后吸收极为迅速,达峰快,消除缓慢。此外,静脉注射10%磷酸替米考星可溶性粉(5 mg/kg),所有试验鸡均迅速出现死亡,因此,临床不推荐使用磷酸替米考星静脉注射肉鸡。 展开更多
关键词 磷酸替米考星 药代动力学 肉鸡
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我国部分地方鸡种禽白血病流行病学调查 被引量：9
12
作者 范建华 戴有理 +7 位作者 俞燕 高明燕 韦玉勇 屠云洁 陈彤 苏一军 徐步 崔治中 《安徽农业科学》 CAS 2016年第4期133-135,共3页
[目的]了解我国地方鸡种禽白血病的自然感染状态,为今后该病的净化提供依据。[方法]采用ELISA法和病毒分离方法,对国内10个地方鸡种开展了ALV-AB和ALV-J主要外源性禽白血病流行病学调查,并进一步对其中4个品系的F_2代鸡群进行ALV跟踪监... [目的]了解我国地方鸡种禽白血病的自然感染状态,为今后该病的净化提供依据。[方法]采用ELISA法和病毒分离方法,对国内10个地方鸡种开展了ALV-AB和ALV-J主要外源性禽白血病流行病学调查,并进一步对其中4个品系的F_2代鸡群进行ALV跟踪监测,同时对饲养过程中使用的弱毒活疫苗也进行了ALV抽样检测。[结果]ALV-P27抗原阳性率为0~62.1%,ALV-AB抗体阳性率为0~25.0%,ALV-J抗体阳性率为0~59.0%,病毒分离阳性率为0~22.0%。4个品系的F_2代鸡群1日龄胎粪ALV-P27抗原阳性率为6.0%~67.0%,6周龄病毒分离检测阳性率为2.0%~34.3%;国内有1个厂家2个种类2个批次的疫苗分离有ALV。[结论]我国地方鸡种普遍存在ALV感染,不同地方鸡种间差异较大,可能与不同地方鸡种对ALV的遗传抗性有关;某些品系种群的F_2代雏鸡ALV阳性率甚至略有提高,可能与疫苗接种污染有关。 展开更多
关键词 地方鸡种 禽白血病 流行病学调查
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H9亚型禽流感病毒间接免疫荧光检测方法的建立与比较 被引量：4
13
作者 白泉阳 孙颖杰 +5 位作者 郑腾 张伯强 赵兴存 王武军 张志灯 张体银 《福建农业学报》 CAS 2008年第2期146-148,共3页
将禽流感病毒(AIV)接种犬肾上皮细胞(MDCK),24h后以鸡抗禽流感抗体和兔抗鸡荧光抗体进行间接免疫荧光试验(IFA),结果于细胞核、细胞质内观察到特异性的荧光。利用96孔细胞板培养MDCK细胞,以间接免疫荧光作为判定指标对禽流感病毒进行毒... 将禽流感病毒(AIV)接种犬肾上皮细胞(MDCK),24h后以鸡抗禽流感抗体和兔抗鸡荧光抗体进行间接免疫荧光试验(IFA),结果于细胞核、细胞质内观察到特异性的荧光。利用96孔细胞板培养MDCK细胞,以间接免疫荧光作为判定指标对禽流感病毒进行毒力测定,并与禽流感病毒通用荧光反转录-聚合酶链反应(荧光RT-PCR)检测方法进行比较。结果表明间接IFA、荧光RT-PCR对同一样品检测的最高稀释度分别为10-5.25TCID50和10-6,Ct<30,两种方法对禽流感病毒的检测敏感性均很高。但由于荧光RT-PCR仅对抽提的RNA进行检测,而间接IFA是对禽流感活病毒进行检测,因此在临床样品检测和动物产品检疫中间接IFA更具准确性和实用性。 展开更多
关键词 H9亚型禽流感病毒 荧光反转录-聚合酶链式反应 间接免疫荧光试验
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草鸡J亚群禽白血病病毒的PCR检测 被引量：4
14
作者 张敬峰 张晓勇 +3 位作者 赵毓郎 魏雪涛 李银 刘宇卓 《江西农业学报》 CAS 2010年第3期5-7,共3页
通过对GenBank发表的ALV的基因序列的分析,针对J型ALV保守区设计并合成1对特异性引物。通过对反应条件的优化,确定了检测ALV的PCR检测方法,对来源于江苏地区不同草鸡养殖基地的10份病料组织样本提取DNA进行PCR扩增。结果对疑似J亚群ALV... 通过对GenBank发表的ALV的基因序列的分析,针对J型ALV保守区设计并合成1对特异性引物。通过对反应条件的优化,确定了检测ALV的PCR检测方法,对来源于江苏地区不同草鸡养殖基地的10份病料组织样本提取DNA进行PCR扩增。结果对疑似J亚群ALV病料和正常鸡肝脏组织的病原核酸检出率分别为90%和0,同时将扩增的目的基因进行克隆测序,并与GenBank中的参考毒株进行比较,结果表明目的基因片段序列长300 bp左右,与参考毒株核苷酸序列同源性为97%以上。试验表明,江苏地区草鸡群中确实存在J亚群鸡白血病病毒感染的情况。 展开更多
关键词 鸡白血病病毒 PCR 检测
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鸡肾型传染性支气管炎病毒的分离鉴定与防治 被引量：2
15
作者 沙依兰古丽 汪萍 +5 位作者 巴特力 成进 易忠 柏庆 齐小亮 冉多良 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期812-817,共6页
【目的】对新疆疑似肾型传染性支气管炎发病鸡病料进行病毒分离和鉴定。【方法】采用3种不同的治疗方案对发病鸡群进行治疗。【结果】经过处理的病料组织在SPF鸡胚上盲传至第3～4代后，鸡胚出现尿囊绒毛膜增厚，鸡胚卷缩变小、侏儒胚等... 【目的】对新疆疑似肾型传染性支气管炎发病鸡病料进行病毒分离和鉴定。【方法】采用3种不同的治疗方案对发病鸡群进行治疗。【结果】经过处理的病料组织在SPF鸡胚上盲传至第3～4代后，鸡胚出现尿囊绒毛膜增厚，鸡胚卷缩变小、侏儒胚等鸡传染性支气管炎的特征性病变。将收获的病毒液进行电镜观察、病毒中和试验、病毒干扰试验、动物回归试验等证实，分离的3株病毒均属于鸡肾型传染性支气管炎病毒。【结论】电解多维＋肾肿散（中药）＋阿莫西林组合的治疗效果最好，治愈率达到80％～90％。 展开更多
关键词 鸡肾型传染性支气管炎病毒 分离 鉴定 治疗
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J亚群禽白血病病毒跨膜蛋白gp37基因克隆与表达 被引量：2
16
作者 王晓伟 刘青 +4 位作者 徐晴晴 蔡黎明 王真真 王桂花 成子强 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期178-184,共7页
禽白血病病毒(ALV)跨膜蛋白(TM)在病毒-细胞融合过程中起关键作用,其蛋白内部存在的许多高度保守序列有可能成为抗病毒的重要靶点。对TM结构和功能的深入研究将为抗禽白血病病毒乃至其它反转录病毒相关制剂的研制提供科学的理论基础。... 禽白血病病毒(ALV)跨膜蛋白(TM)在病毒-细胞融合过程中起关键作用,其蛋白内部存在的许多高度保守序列有可能成为抗病毒的重要靶点。对TM结构和功能的深入研究将为抗禽白血病病毒乃至其它反转录病毒相关制剂的研制提供科学的理论基础。本研究通过PCR从本实验室分离的ALV-J山东汶上毒株获得表达TM的gp37基因,克隆连接pMD18-T载体并测序,从已构建的质粒pMD18-T-gp37中酶切回收gp37基因,构建重组转移载体pFastBacHTb-gp37。利用昆虫杆状病毒表达系统对gp37基因进行表达,通过间接免疫荧光和Western blot检测gp37基因表达产物,间接免疫荧光显示,重组杆状病毒感染的sf9细胞呈现明显的强阳性反应;Western blot分析,重组病毒感染的sf9细胞蛋白显示出约21kD的阳性条带。结果表明,gp37基因在sf9细胞内表达成功。 展开更多
关键词 J亚群禽白血病病毒 gp37基因 跨膜蛋白 真核表达
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氟苯尼考在黄羽肉鸡体内的残留消除规律
17
作者 许燕 李克动 +6 位作者 陈茜 刘彦英 任安 黄小雨 侯亚飞 赵成仕 程莹 《安徽农业科学》 2025年第8期194-199,共6页
[目的]研究氟苯尼考在黄羽肉鸡体内的残留消除规律,确定休药期。[方法]选用36只健康鸡(体重约1.2 kg),随机分为6组。第一组作为空白对照组,其余5组按照剂量为30 mg/kg每天2次集中饮水给药,连续给药5 d,分别于给药后6 h、1 d、3 d、5 d、... [目的]研究氟苯尼考在黄羽肉鸡体内的残留消除规律,确定休药期。[方法]选用36只健康鸡(体重约1.2 kg),随机分为6组。第一组作为空白对照组,其余5组按照剂量为30 mg/kg每天2次集中饮水给药,连续给药5 d,分别于给药后6 h、1 d、3 d、5 d、7 d采集黄羽肉鸡肌肉、肝脏、肾脏、皮脂,采用高效液相色谱-串联质谱法测定组织样品中氟苯尼考和氟苯尼考胺的残留量,并利用WT1.4软件计算休药期。[结果]氟苯尼考和氟苯尼考胺在停药后迅速残留于黄羽肉鸡肝脏、肌肉、肾脏和皮脂中,且在6 h残留量达到峰值,其中肾脏组织中的残留量最大。氟苯尼考在黄羽肉鸡肌肉、肝脏、肾脏、皮脂中的休药期分别为4.75、3.46、4.16和4.68 d。[结论]按照农业农村部《兽药残留消除试验指导原则》中以最高的残留限量拟定休药期的规定,推荐受试药物氟苯尼考在鸡体内的休药期为5 d。 展开更多
关键词 氟苯尼考 黄羽肉鸡 残留消除 休药期
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番鸭呼肠孤病毒致病机理研究进展 被引量：4
18
作者 陆英杰 王舍玉 +2 位作者 马春全 邓桦 赵佳荣 《湖北农业科学》 北大核心 2010年第8期1993-1994,共2页
番鸭呼肠病毒病是近几年流行的一种侵害番鸭为主的急性传染病,该病主要以脏器出现白色坏死为主要临床症状,给养殖业的预防治疗带来极大困难。为了减少该病造成的经济损失,从阐述该病的致病机理入手,为进一步明确和研究该病提供了思路。
关键词 番鸭呼肠孤病毒(MDR) 致病机理 免疫机理
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禽类艾美耳球虫生物学和免疫生物学的研究进展 被引量：3
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作者 初冬 王承民 +1 位作者 曹晓燕 何宏轩 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2007年第29期9273-9276,共4页
[目的]介绍禽类艾美耳球虫生物学和免疫生物学的研究进展,减少其对养禽业造成的经济损失。[方法]从禽类球虫的生活史、遗传学、生物化学、种类鉴定和诊断、免疫生物学、球虫病的控制及未来发展方向和亟待解决的问题等方面,阐述了近年来... [目的]介绍禽类艾美耳球虫生物学和免疫生物学的研究进展,减少其对养禽业造成的经济损失。[方法]从禽类球虫的生活史、遗传学、生物化学、种类鉴定和诊断、免疫生物学、球虫病的控制及未来发展方向和亟待解决的问题等方面,阐述了近年来的发展情况。[结果]禽类的艾美耳球虫的生活史包括有性生殖阶段和无性生殖阶段;球虫的生物学发育也比较清楚;在外界环境中进行孢子生殖;目前其种类主要为7类;在球虫感染的免疫学方面研究有很大进展;在了解以上生物学和免疫生物学的研究进展后,提出了防治措施。[结论]该研究为防治养禽业球虫病提供了依据。 展开更多
关键词 禽类艾美耳球虫 生物学 免疫生物学
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鹅坦布苏病毒E蛋白质结构域I和Ⅱ在大肠杆菌中的表达及鉴定 被引量：1
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作者 赵冬敏 黄欣梅 +4 位作者 刘宇卓 韩凯凯 谢星星 刘晓燕 李银 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第3期590-594,共5页
为了实现鹅坦布苏病毒E蛋白质结构域I和II在大肠杆菌中的表达。利用PCR方法扩增得到目的片段,并引入FLAG标签序列(DYKDDDDK),构建重组表达质粒pET28a-E-I/II。转化至BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达目的蛋白质,并对其进行SDS-PAGE分析和West... 为了实现鹅坦布苏病毒E蛋白质结构域I和II在大肠杆菌中的表达。利用PCR方法扩增得到目的片段,并引入FLAG标签序列(DYKDDDDK),构建重组表达质粒pET28a-E-I/II。转化至BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达目的蛋白质,并对其进行SDS-PAGE分析和Western-blot鉴定。结果显示,PCR扩增得到约900 bp的目的片段,经鉴定成功构建重组表达载体pET28a-E-I/II。重组菌在IPTG诱导4 h后在37 000处出现目的蛋白质并且表达量达到高峰。经超声波破碎后SDS-PAGE分析显示,融合蛋白质以包涵体形式存在。Western-blot结果显示,重组蛋白质与FLAG单抗和E蛋白质阳性血清均可发生特异性反应。表明鹅坦布苏病毒E蛋白质结构域Ⅰ和Ⅱ在大肠杆菌中成功表达,经鉴定重组蛋白质具有良好的免疫反应性。 展开更多
关键词 鹅坦布苏病毒 E蛋白质 结构域Ⅰ和Ⅱ 大肠杆菌 DOMAINS Ⅰ and Ⅱ
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