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刚地弓形虫NT株MIC3基因的克隆和原核表达 被引量：2
1
作者 白昀 刘茂军 +5 位作者 冯志新 白方方 熊祺琰 孔猛 吴叙苏 邵国青 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2011年第6期1295-1299,共5页
为构建刚地弓形虫微线体蛋白3(MIC3)原核表达体系,获得高纯度MIC3蛋白用于制备单克隆抗体,评价MIC3蛋白在临床诊断方面的应用价值,根据刚地弓形虫MIC3基因编码的已知序列设计引物,应用PCR技术从刚地弓形虫NT株的基因组DNA中扩增出去除... 为构建刚地弓形虫微线体蛋白3(MIC3)原核表达体系,获得高纯度MIC3蛋白用于制备单克隆抗体,评价MIC3蛋白在临床诊断方面的应用价值,根据刚地弓形虫MIC3基因编码的已知序列设计引物,应用PCR技术从刚地弓形虫NT株的基因组DNA中扩增出去除信号肽的MIC3基因,将该基因克隆入pET-32a(+)表达载体,构建pET-32a(+)表达载体,并转化入大肠杆菌(Escherichia.coli)Trans 5α感受态细胞。扩增的MIC3基因与GenBank中相应基因序列(AF509564.1)的同源性达99.9%。将阳性重组表达质粒转化入E.coli BL21-codon plus,经IPTG20℃低温诱导表达,SDS-PAGE分析结果显示,MIC3融合蛋白分子量约为56 000。Western-blotting分析鉴定结果表明,MIC3融合蛋白可被猪抗弓形虫免疫血清所识别。获得的MIC3融合蛋白具有一定的反应原性,为下一步利用重组蛋白建立弓形虫的诊断方法和研制弓形虫的亚单位疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 刚地弓形虫 MIC3基因 克隆 原核表达
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刚地弓形虫RH株SAG3蛋白抗体检测的ELISA方法建立 被引量：2
2
作者 马亮 任保彦 +5 位作者 左绍志 宫鹏涛 李建华 张国才 杨举 张西臣 《安徽农业科学》 CAS 2012年第15期8527-8528,8550,共3页
[目的]利用纯化的刚地弓形虫RH株表面蛋白SAG3的原核重组蛋白为基础,建立抗体间接ELISA检测方法。[方法]采用棋盘滴定法,确定间接ELISA的最佳条件。采用鼠抗新孢子虫阳性血清、鼠抗安氏隐孢子虫阳性血清、鼠抗柔嫩艾美尔球虫阳性血清、... [目的]利用纯化的刚地弓形虫RH株表面蛋白SAG3的原核重组蛋白为基础,建立抗体间接ELISA检测方法。[方法]采用棋盘滴定法,确定间接ELISA的最佳条件。采用鼠抗新孢子虫阳性血清、鼠抗安氏隐孢子虫阳性血清、鼠抗柔嫩艾美尔球虫阳性血清、鼠抗蓝氏贾第虫阳性血清以及鼠抗微小隐孢子虫阳性血清和健康小鼠阴性血清作对照,检测血清之间是否有交叉反应。[结果]最佳包被条件为:抗原包被浓度0.25μg/孔,被检血清稀释度1∶400,酶标二抗稀释度1∶3 000,封闭剂5%脱脂奶粉的PBST溶液;血清之间没有交叉反应。该方法的灵敏度为1∶1 600。[结论]该方法灵敏度高,特异性较强,可重复性较好,可用于对弓形虫感染的检测及流行病学调查。 展开更多
关键词 刚地弓形虫 SAG3 表面蛋白 间接ELISA
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《动物寄生虫病学》实践教学改革 被引量：3
3
作者 杨萍萍 董元杰 +3 位作者 李宏梅 赵孝民 王方昆 崔言顺 《实验科学与技术》 2014年第1期82-84,共3页
针对《动物寄生虫病学》实践教学中存在的内容分散、缺乏综合性以及新颖性差等问题,以科研项目的形式对实践教学进行了改革,结果表明实现了实践教学内容的体系化,培养了学生多领域的实验操作技能,同时也激发了学生的科研热情,可为其他... 针对《动物寄生虫病学》实践教学中存在的内容分散、缺乏综合性以及新颖性差等问题,以科研项目的形式对实践教学进行了改革,结果表明实现了实践教学内容的体系化,培养了学生多领域的实验操作技能,同时也激发了学生的科研热情,可为其他课程实践教学体系的改革提供借鉴。 展开更多
关键词 动物寄生虫病学 实践教学 改革 创新型人才培养
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动物肉类感染人的几种常见寄生虫病鉴定处理及其预防措施 被引量：1
4
作者 李建世 《畜牧兽医杂志》 2011年第5期126-127,共2页
动物的寄生虫病有些可通过肉类传染给人,所以凡有寄生虫的肉类不准以鲜肉供给,须经冷冻、腌制、辐射或烧煮等法将虫杀死后可供食用,患虫严重的肉类需化制或销毁。
关键词 寄生虫病 肉类 动物 预防 鉴定 感染
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三种检测法调查河池市屠宰猪旋毛虫感染状况 被引量：1
5
作者 黄爱民 韦建华 刘杰标 《广西农学报》 2010年第3期63-65,共3页
采用镜检、集样消化和ELISA法三种方法对屠宰猪旋毛虫进行检测。2001年至2003年共采集9 196份肉样和9 003份血清样品进行检验,结果镜检法阳性检出率为0;集样消化法检出阳性13份,阳性率为0.14%(13/9 196);ELISA法检出阳性1 350份,阳性率1... 采用镜检、集样消化和ELISA法三种方法对屠宰猪旋毛虫进行检测。2001年至2003年共采集9 196份肉样和9 003份血清样品进行检验,结果镜检法阳性检出率为0;集样消化法检出阳性13份,阳性率为0.14%(13/9 196);ELISA法检出阳性1 350份,阳性率15%(1 350/9 003)。三种检测方法检测结果有较大的差异。临床上要根据实际情况灵活掌握。 展开更多
关键词 旋毛虫病 ELISA 镜检 集样消化
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犬贾第虫病的诊治
6
作者 王云令 《河北北方学院学报（自然科学版）》 2007年第5期29-29,55,共2页
2007年3月,饲养的大白熊犬发生了贾第虫病,经实验室检查结合临床症状诊断为犬贾第虫病,经采取有效的综合防治措施很快控制了病情,1周后康复.
关键词 犬贾 第虫病 诊治
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