不同胎次、泌乳阶段及体细胞水平的蒙荷杂交牛泌乳性能变化规律研究 被引量：2

1

作者 陈坤琳 夏淑雯 +5 位作者 沈阳阳 丁强 徐亮亮 仲跻峰 田雨 王慧利 《南京农业大学学报》 CAS 北大核心 2025年第1期197-205,共9页

[目的]本文旨在通过比较不同胎次、泌乳阶段和体细胞水平的蒙荷杂交牛泌乳性能差异,分析其相关性和变化规律,为蒙荷杂交牛的精细化管理和乳品质提升提供理论依据。[方法]以蒙贝利亚为父本、自繁荷斯坦牛为母本的杂交一代泌乳牛为研究对... [目的]本文旨在通过比较不同胎次、泌乳阶段和体细胞水平的蒙荷杂交牛泌乳性能差异,分析其相关性和变化规律,为蒙荷杂交牛的精细化管理和乳品质提升提供理论依据。[方法]以蒙贝利亚为父本、自繁荷斯坦牛为母本的杂交一代泌乳牛为研究对象,提取其生产性能测定(dairy herd improvement,DHI)数据,分别按胎次(1 胎次、2 胎次)、泌乳阶段(0~99 d、100~199 d、200~299 d和≥300 d)、体细胞数(somatic cell count,SCC)(低SCC,0~1×10^(5) mL^(-1);中SCC,>1×10^(5)~2×10^(5) mL^(-1);高SCC,>2×10^(5) mL^(-1))进行分类和分组,采用Duncan's多重比较和Pearson相关性分析等方法进行比较研究。[结果]不同胎次蒙荷杂交牛产奶量存在极显著差异(P<0.01),第1胎次的产奶量显著低于第2胎次;产奶量与乳脂率呈显著负相关(P<0.05),脂蛋比与乳脂率呈极显著正相关(P<0.01)。不同泌乳阶段蒙荷杂交牛产奶量、乳脂率、乳蛋白率、脂蛋比、尿素氮、体细胞数和体细胞评分均存在显著差异(P<0.05),泌乳阶段在0~99 d时产奶量最高、体细胞数最低。不同SCC水平蒙荷杂交牛泌乳天数、产奶量、乳脂率和脂蛋比存在显著差异(P<0.05),产奶量在低SCC时最高。在不同的SCC水平,总乳脂量和总乳蛋白量呈极显著正相关(P<0.01),在低、中SCC水平,乳脂率与脂蛋比呈显著正相关(P<0.05);在高SCC水平,乳脂率与乳蛋白率、脂蛋比呈显著正相关(P<0.05)。[结论]不同胎次、泌乳阶段和SCC水平的蒙荷杂交牛产奶量和乳成分存在显著差异,随着泌乳天数的增加,产奶量呈现先上升后下降的变化规律,第2胎次、泌乳早期和低SCC水平时的产奶量最高,并随着泌乳天数的增加产奶量呈现先上升后下降的变化规律,乳脂率、乳蛋白率和脂蛋比呈现先下降后上升的变化趋势。因此,针对不同胎次、泌乳阶段和体细胞水平制定相应的饲养管理方案,以充分发挥蒙荷杂交牛的生产潜力及杂种优势,提高经济效益。 展开更多

关键词 蒙荷杂交牛 胎次 泌乳阶段 体细胞水平 泌乳性能 变化规律

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G1P[7]型猪轮状病毒的分离鉴定及其全基因组分析

2

作者 王建新 马润超 +5 位作者 周金柱 卞贤宇 朱雪蛟 李昱辰 张雪寒 李彬 《南方农业学报》 北大核心 2025年第3期932-943,共12页

[目的]分离鉴定G1P[7]型猪轮状病毒(PoRV)并进行全基因组分析,为仔猪腹泻病防控及疫苗研发提供理论依据。[方法]腹泻仔猪粪便样本由南京农业大学动物医学院提供,对样本进行猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪德尔塔... [目的]分离鉴定G1P[7]型猪轮状病毒(PoRV)并进行全基因组分析,为仔猪腹泻病防控及疫苗研发提供理论依据。[方法]腹泻仔猪粪便样本由南京农业大学动物医学院提供,对样本进行猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)及PoRV PCR检测。向PCR检测结果为阳性的样本上清液中加入胰蛋白酶,随后接种到MA104细胞进行病毒分离和纯化。通过PCR检测、电镜观察、间接免疫荧光检测和RAN-PAGE检测鉴定毒株。通过绘制病毒增殖曲线和检测病毒对MA104、Vero、IPEC-J2、HT-29、HRT-18和Caco-2细胞的易感性探究毒株生物学特性。利用生物信息学软件分析分离毒株的11个基因与国内外各基因型轮状病毒的同源性并构建病毒全基因组系统发育树。[结果]粪便样本PCR检测结果显示,粪便样本中仅PoRV呈阳性。成功分离出1株PoRV,将该毒株命名为JSNJ2023,病毒在MA104细胞上能稳定增殖和传代,经3次克隆,筛选出适合的克隆株,在第3次克隆中,选择病毒滴度最高的克隆株进行扩大培养,最终成功获得高滴度的单克隆毒株。病毒颗粒呈明显的球形结构,具有清晰的双层衣壳特征,直径约70 nm。间接免疫荧光检测结果显示,JSNJ2023毒株能感染MA104细胞。RNA-PAGE检测结果显示,JSNJ2023毒株具有A群轮状病毒特征性的11条电泳图谱,排列方式为4∶2∶3∶2。病毒增殖曲线显示,接种病毒18 h后JSNJ2023毒株在MA104细胞中的病毒滴度达峰值,随着感染时间的延长,病毒滴度逐渐降低。JSNJ2023毒株对细胞的易感性依次为MA104、IPEC-J2、HRT-18、HT-29、Caco2和Vero细胞。基因同源性分析与系统发育树构建结果显示,JSNJ2023毒株属于猪A群G1P[7]型轮状病毒,其基因型为G1-P[7]-I5。[结论]成功分离获得PoRV JSNJ2023毒株,其属于A群G1P[7]型轮状病毒,基因型为G1-P[7]-I5。JSNJ2023毒株与人、猪及牛轮状病毒存在高度同源性,其进化过程中可能受到人轮状病毒、PoRV与牛轮状病毒的影响,发生了基因重组或交换,形成了独特的基因型(R1-C1-M1-A8-N1-T7-E1-H1)。 展开更多

关键词 猪轮状病毒(PoRV) 全基因组测序 遗传进化分析 基因重组

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尼帕病毒研究进展

3

作者 王洋洋 《中国兽药杂志》 2025年第8期45-51,共7页

尼帕病毒(NiV)是一种人畜共患病原体,天然宿主为狐蝠科果蝠,传播途径多样,包括动物传人及有限的人传人等。该病毒于1998年在马来西亚首次被发现,此后在孟加拉国等地频发疫情,中国存在传入风险。2024年,中国团队在自组装蛋白纳米颗粒疫... 尼帕病毒(NiV)是一种人畜共患病原体,天然宿主为狐蝠科果蝠,传播途径多样,包括动物传人及有限的人传人等。该病毒于1998年在马来西亚首次被发现,此后在孟加拉国等地频发疫情,中国存在传入风险。2024年,中国团队在自组装蛋白纳米颗粒疫苗研发上取得突破,但临床应用仍需进一步推进。本文聚焦NiV研究进展,从病原学、流行病学、临床症状及病理变化、实验室诊断、疫苗研发等维度进行综述,为该病的防控、诊断及疫苗临床应用提供参考。 展开更多

关键词 尼帕病毒 病原学 流行病学 研究进展

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合生元组合筛选及对仔猪生产性能和腹泻的影响 被引量：17

4

作者 戴兆来 董红军 +2 位作者 林勇 黄瑞华 朱伟云 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期81-85,共5页

利用体外法对4种化学益生素和4株乳酸菌(S1、L7、L17和L18)进行了合生元组合的筛选,并在仔猪上进行了饲养试验。结果表明:4株乳酸菌均能利用菊粉(inulin)和果寡糖(FOS)产生乳酸,只有S1和L18能利用低聚木糖(XOS),低聚异麦芽糖(IMO)只能... 利用体外法对4种化学益生素和4株乳酸菌(S1、L7、L17和L18)进行了合生元组合的筛选,并在仔猪上进行了饲养试验。结果表明:4株乳酸菌均能利用菊粉(inulin)和果寡糖(FOS)产生乳酸,只有S1和L18能利用低聚木糖(XOS),低聚异麦芽糖(IMO)只能被S1利用。当以果寡糖和菊粉混合物(FOS+inulin,质量比为2∶8)为底物时,各株乳酸菌生长良好,产乳酸量高,其次为果寡糖和低聚木糖混合物(FOS+XOS,质量比为1∶1)。当以FOS+inulin为底物,4株乳酸菌混合培养时,24 h产乳酸量最高,为(23.49±0.67)mmol.L-1。以FOS+inulin为底物时,S1和混合乳酸菌均能很好地抑制肠毒素大肠杆菌K88和混合大肠杆菌的生长,混合乳酸菌的抑菌效果优于单菌S1。饲养试验结果表明,添加乳酸菌、化学益生素或合生元均可降低哺乳期、断奶期仔猪腹泻率,增加断奶后仔猪平均日增重,降低料重比,其中合生元作用效果最优,其次为混合化学益生素,最后为乳酸菌,混合乳酸菌组优于单独使用S1组。结果提示,混合乳酸菌与FOS+inulin组合以及与FOS+XOS组合具有减少腹泻,提高生长性能的作用,可用于断奶期仔猪饲料。 展开更多

关键词 乳酸菌 化学益生素 合生元 肠毒素大肠杆菌 仔猪

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20味中药提取物对无乳链球菌的体外抑菌活性研究 被引量：14

5

作者 彭练慈 殷中琼 +5 位作者 贾仁勇 李莉 代如意 曲径 刘明辉 陈萍 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期22-25,共4页

【目的】筛选对无乳链球菌Streptococcus agalactiae具有良好体外抑菌效果的中药．【方法】通过乙醇回流、超声波方法提取20味中药的抗菌活性部位，采用试管二倍稀释法测定黄连Coptis chinensis等20味中药提取物对无乳链球菌的最低抑菌... 【目的】筛选对无乳链球菌Streptococcus agalactiae具有良好体外抑菌效果的中药．【方法】通过乙醇回流、超声波方法提取20味中药的抗菌活性部位，采用试管二倍稀释法测定黄连Coptis chinensis等20味中药提取物对无乳链球菌的最低抑菌浓度（ Minimal inhibitory concentration ，MIC）和最低杀菌浓度（ Minimal bactericidal concentration ， MBC），并评价抗菌活性较强的几味中药的体外联合抑菌效果．【结果和结论】乌梅Prunus mume、黄连、黄芩Scutel-laria baicalensis、虎杖Polygonum cuspidatum和地榆Sanguisorba officinalis 5味中药提取物对无乳链球菌的MIC范围为7.80～31.25 mg/mL．蒲公英Taraxacum mongolicum、茵陈Artemisia scoparia、秦皮Fraxinus rhynchophylla、艾叶Arte-misia argyi、黄柏 Phellodendron chinense、鱼腥草 Houttuynia cordata、紫花地丁 Violae yedoensis 和白头翁 Pulsatilla chinensis 8味中药提取物的MIC范围为62.50～125.00 mg/mL．何首乌Po．multiflorum、苦参Sophora flavescens、穿心莲Andrographis paniculata、杜仲Eucommia ulmoides、连翘Forsythia suspensa、金银花Lonicera japonica和夏枯草Prunel-la vulgaris 7味中药提取物的MIC范围为250.00～500.00 mg/mL．联合抑菌试验结果表明，黄芩、虎杖、地榆和黄连的联合抑菌指数（FICI）≤1，虎杖、黄芩和地榆的FICI＞2．黄连、黄芩、虎杖和地榆对无乳链球菌均具有很强的体外抗菌活性，地榆、黄连为相加作用，黄连、黄芩和虎杖为协同作用，地榆与黄芩、虎杖为拮抗作用． 展开更多

关键词 无乳链球菌 中药提取物 抗菌活性

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鼠伤寒沙门菌oppCDF基因缺失株的构建及生物学特性分析

6

作者 杨婉 张家莉 +4 位作者 陈世雄 武绍碧 叶景芬 潘永 杨琦 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期491-498,共8页

利用λ-Red同源重组技术构建鼠伤寒沙门菌oppCDF基因缺失株,并检测其生长特性、运动性、生物被膜形成能力、胞内存活能力及LD50毒力。结果显示,与野生型菌株相比,oppCDF基因缺失株的生长特性无明显变化;oppCDF基因缺失株可降低鼠伤寒沙... 利用λ-Red同源重组技术构建鼠伤寒沙门菌oppCDF基因缺失株,并检测其生长特性、运动性、生物被膜形成能力、胞内存活能力及LD50毒力。结果显示,与野生型菌株相比,oppCDF基因缺失株的生长特性无明显变化;oppCDF基因缺失株可降低鼠伤寒沙门菌的运动性;oppC与oppF基因缺失后可提高鼠伤寒沙门菌生物被膜形成能力;同时,oppC基因缺失可降低在RAW267.4细胞内的存活能力和其在小鼠体内的毒力,oppF基因缺失可显著增强在RAW267.4内的存活能力和对小鼠毒力的影响,而oppD基因缺失后其在小鼠体内的毒力和RAW267.4内的存活率均无显著变化。研究表明,oppCDF基因与鼠伤寒沙门菌的运动性、生物被膜形成和毒力密切相关,为进一步揭示鼠伤寒沙门菌致病作用中的复杂调控和机制提供了理论基础。 展开更多

关键词 鼠伤寒沙门菌 λ-Red同源重组 oppCDF基因 生物学特性

原文传递

牛分枝杆菌特异性PCR检测方法的建立及初步应用 被引量：37

7

作者 刘思国 王春来 +6 位作者 宫强 王牟平 彭永刚 张秀华 郭洋 郭设平 邵美丽 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期80-83,共4页

根据已发表的牛分枝杆菌的pncA的基因序列,设计和合成了一对可扩增294 bp目的片段的引物,建立了特异性检测牛分枝杆菌的PCR方法。对牛分枝杆菌国际参考株和国内分离株成功扩增出294bp的特异性基因片段;对人结核分枝杆菌、副结核分枝杆... 根据已发表的牛分枝杆菌的pncA的基因序列,设计和合成了一对可扩增294 bp目的片段的引物,建立了特异性检测牛分枝杆菌的PCR方法。对牛分枝杆菌国际参考株和国内分离株成功扩增出294bp的特异性基因片段;对人结核分枝杆菌、副结核分枝杆菌、鸟胞内分枝杆菌和草分枝杆菌DNA的PCR扩增结果均为阴性。本PCR方法检测的敏感度可达到50 pg。对10份牛分枝杆菌培养阳性和10份阴性样品的DNA分别进行了PCR检测,结果10份阳性样品中有9份样品为PCR扩增阳性,阳性符合率为90%(9/10);而10份阴性样品则PCR扩增全部为阴性,阴性符合率为100%(10/10)。本方法可做为牛分枝杆菌的快速检测和流行病学调查的工具。 展开更多

关键词 牛分枝杆菌 检测技术 PCR

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H5亚型禽流感重组鸡痘病毒活载体疫苗的免疫效力 被引量：9

8

作者 贾立军 张艳梅 +6 位作者 李军伟 韦栋平 刘红旗 陈素娟 彭大新 张如宽 刘秀梵 《扬州大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 2003年第2期11-13,共3页

利用表达H5亚型禽流感病毒血凝素基因的重组鸡痘病毒疫苗免疫SPF鸡和无母源抗体的商品鸡,通过比较免疫后血凝抑制(HI)抗体应答水平、攻毒后发病率和死亡率等指标评价其免疫保护作用。免疫后21d,重组鸡痘病毒免疫组仅有13%～20%鸡的HI抗... 利用表达H5亚型禽流感病毒血凝素基因的重组鸡痘病毒疫苗免疫SPF鸡和无母源抗体的商品鸡,通过比较免疫后血凝抑制(HI)抗体应答水平、攻毒后发病率和死亡率等指标评价其免疫保护作用。免疫后21d,重组鸡痘病毒免疫组仅有13%～20%鸡的HI抗体检测呈阳性。在同亚型禽流感病毒攻击后,重组鸡痘病毒疫苗免疫组产生了100%的保护率,而未免疫组全部死亡。结果表明:重组鸡痘病毒疫苗不能激发高滴度HI抗体应答,但可抵御同亚型禽流感病毒致死性攻击,保护效果达到或优于目前应用的灭活苗,显示出良好的应用前景。 展开更多

关键词 重组鸡痘病毒 禽流感 血凝素基因 免疫效力

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一株新城疫重组强毒的分离鉴定与分子特性分析 被引量：4

9

作者 谭雷涛 秦卓明 +2 位作者 马保臣 徐怀英 崔治中 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1217-1223,共7页

从患病蛋鸡中分离出1株新城疫病毒（NDV）SRZ/03,经蚀斑纯化后接种40日龄SPF鸡可诱发典型ND病变。蚀斑纯化前、后,MDT分别为55.2和51 h,ICPI为1.7和2.0,IVPI为1.91和2.79,表明属强毒。对其F和HN基因分别克隆测序,进行F基因分型。结果表... 从患病蛋鸡中分离出1株新城疫病毒（NDV）SRZ/03,经蚀斑纯化后接种40日龄SPF鸡可诱发典型ND病变。蚀斑纯化前、后,MDT分别为55.2和51 h,ICPI为1.7和2.0,IVPI为1.91和2.79,表明属强毒。对其F和HN基因分别克隆测序,进行F基因分型。结果表明SRZ/03属基因Ⅱ型,F蛋白氨基酸裂解位点的序列为^112R-R-Q-K-R-F^117,与强毒基序完全相同。结合GenBank中发表的其他NDV参考株序列,对F和HN基因推导氨基酸序列进行比较。SRZ/03株与基因Ⅱ型LaSota/46、B1/47、Bingham/87和Texas/48的同源性分别为93.1%、93.0%、94.4%和94.4%;与基因Ⅶ型Taiwan/95、SGM/01和SKY/03的同源性分别为92.2%、92.8%和92.8%;与基因Ⅲ型F48E9/48的同源性为91.2%。然而,SRZ/03株F蛋白前210个氨基酸与基因Ⅱ型LaSota/46和Texas/48的同源性较高,达96.7%和98.1%,后343个氨基酸则与Taiwan/95、SGM/01等毒株的同源性较高,达95.7%-97.4%,推测该株为重组株。此外,SRZ/03株与Taiwan/95、SGM/01等毒株的HN氨基酸同源性高达95.8%-97.6%,显著高于与LaSota/46、B1/47、Bingham/87、Texas/48和F48E9/48的87.2%-89.2%。 展开更多

关键词 新城疫病毒 毒力 F基因 HN基因 重组株

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B亚型禽偏肺病毒逆转录套式PCR检测方法的建立与应用 被引量：6

10

作者 薛聪 刁有祥 +4 位作者 唐熠 陈琳 鞠小军 崔京腾 欧全宾 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期171-174,180,共5页

根据GenBank发布的B亚型禽偏肺病毒Fusion(F)基因的保守序列设计2对引物,建立了一种适用于B亚型禽偏肺病毒的逆转录套式PCR检测方法。采用该方法对B亚型禽偏肺病毒山东分离株进行检测,可以特异性地扩增出415bp的目的片段。此方法具有高... 根据GenBank发布的B亚型禽偏肺病毒Fusion(F)基因的保守序列设计2对引物,建立了一种适用于B亚型禽偏肺病毒的逆转录套式PCR检测方法。采用该方法对B亚型禽偏肺病毒山东分离株进行检测,可以特异性地扩增出415bp的目的片段。此方法具有高度特异性和敏感性,以H9亚型禽流感病毒、新城疫病毒、传染性支气管炎病毒、传染性喉气管炎病毒作为模板进行扩增,结果均为阴性。经检测,该方法第1次PCR扩增的敏感性为107copies/μL,第2次扩增的敏感性为102copies/μL,第2次扩增敏感性比第1次高105倍。应用本方法对采自山东省不同地区的64份可疑临床病料进行检测,最终从64份疑似病料中检测出37份为阳性。结果表明,所建立的套式PCR检测方法具有特异、敏感、实用等优点,为B亚型禽偏肺病毒的快速诊断以及深入研究奠定了基础。 展开更多

关键词 B亚型禽偏肺病毒 F基因 逆转录套式PCR

原文传递

流感病毒PA蛋白与宿主SSR4蛋白的相互作用研究 被引量：4

11

作者 王倩 李俊平 +9 位作者 梁立滨 赵玉辉 温霞 孔凡迪 王广文 石文军 李奇兵 姜丽 陈化兰 李呈军 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期1029-1033,共5页

PA蛋白是流感病毒聚合酶复合体的重要组成部分,在病毒基因组的转录和复制过程中发挥重要功能,而流感病毒在宿主细胞内的有效复制离不开大量宿主因子的协助。本研究团队前期利用酵母双杂交(Y2H)系统从人源cDNA文库中筛选到大量与流感病... PA蛋白是流感病毒聚合酶复合体的重要组成部分,在病毒基因组的转录和复制过程中发挥重要功能,而流感病毒在宿主细胞内的有效复制离不开大量宿主因子的协助。本研究团队前期利用酵母双杂交(Y2H)系统从人源cDNA文库中筛选到大量与流感病毒PA蛋白可能存在相互作用的宿主因子,其中之一为Signal sequence receptor subunit 4(SSR4)。为研究流感病毒PA蛋白与宿主蛋白SSR4的相互作用,本研究采用酵母回交试验验证二者之间是否存在相互作用,结果显示PA蛋白与SSR4之间存在相互作用;在真核细胞中利用免疫共沉淀(Co-IP)试验检测,结果进一步证实了PA蛋白与SSR4蛋白之间的相互作用。利用慢病毒包装系统构建SSR4蛋白的过表达细胞系,并感染病毒后进行噬斑滴定,结果显示SSR4过表达可以抑制流感病毒的复制。瞬时转染过表达SSR4后再转染流感病毒聚合酶复合体表达质粒及荧光素酶报告质粒,利用双荧光素酶报告系统检测SSR4蛋白对聚合酶活性的影响,结果显示SSR4过表达后可以显著抑制流感病毒的聚合酶活性。本研究首次证实SSR4可以抑制流感病毒复制,并可使流感病毒RNP聚合酶活性显著降低,上述结果进一步完善了PA蛋白与宿主因子的互作网络,丰富了对宿主因子参与流感病毒复制周期的认识。 展开更多

关键词 流感病毒 PA蛋白 SSR4蛋白 相互作用

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猪源肠毒素性大肠杆菌菌毛基因多重PCR检测方法的建立 被引量：11

12

作者 华荣虹 张书霞 何孔旺 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期162-164,共3页

为了对猪源产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)的4种主要菌毛(K 88、K 99、F 41和987p)进行快速检测和分型,建立了检测4种菌毛的多重PCR方法。首先设计合成4对4种菌毛特异性的引物,然后用4种菌毛参考ETEC菌株优化了多重PCR方法。该方法对K 88、K... 为了对猪源产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)的4种主要菌毛(K 88、K 99、F 41和987p)进行快速检测和分型,建立了检测4种菌毛的多重PCR方法。首先设计合成4对4种菌毛特异性的引物,然后用4种菌毛参考ETEC菌株优化了多重PCR方法。该方法对K 88、K 99、F 41和987p 4种菌毛的扩增产物分别为201,314,380和459 bp。对4种扩增产物分别进行酶切鉴定,结果均得到与预期一致的2个片段。对各个参考菌株不同组合的检测结果为100%符合。结果表明,该多重PCR方法具有很好的特异性和敏感性,可用于ETEC性腹泻的辅助诊断及ETEC菌毛抗原分型检测。 展开更多

关键词 肠毒素性大肠杆菌(ETEC) 菌毛基因 多重PCR

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绵羊肺腺瘤病毒致瘤机制研究进展 被引量：5

13

作者 刘畅 敖威华 +4 位作者 李磊 于立新 么宏强 周建华 马学恩 《动物医学进展》 北大核心 2015年第1期79-82,共4页

绵羊肺腺瘤(OPA)是由绵羊肺腺瘤病毒(OPAV)引起的一种慢性、传染性绵羊肺脏肿瘤性疾病,该病对养羊业,特别是种羊的发展有重大影响,世界动物卫生组织将其列为必须通报的动物疫病。论文就近年来国内外关于OPAV致瘤机制的相关研究进行了综... 绵羊肺腺瘤(OPA)是由绵羊肺腺瘤病毒(OPAV)引起的一种慢性、传染性绵羊肺脏肿瘤性疾病,该病对养羊业,特别是种羊的发展有重大影响,世界动物卫生组织将其列为必须通报的动物疫病。论文就近年来国内外关于OPAV致瘤机制的相关研究进行了综述,包括OPAV的转录特异性和囊膜蛋白的致瘤作用和OPAV受体等。这对深入研究OPAV的致瘤机制及确定相应的防控靶点,具有重要的理论意义和潜在的应用价值。 展开更多

关键词 绵羊肺腺瘤病毒 绵羊肺腺瘤 致瘤机制 囊膜蛋白

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鸡传染性法氏囊病病毒(ZJ2000)基因组B节段全长的克隆及其毒力位点的分析预测 被引量：2

14

作者 魏永伟 郑江涛 +2 位作者 王连胜 李龙 于涟 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期252-256,共5页

将本实验室保存的ZJ2000株囊毒加生理盐水研磨后接种9～10日龄鸡胚增殖病毒,收集尿囊液透析纯化,用蛋白酶K法提取病毒基因组dsRNA。通过RT-PCR获得基因组B节段全长的cDNA,并将其克隆到PUC18-T载体中进行测序。同时,本研究对GenBank中登... 将本实验室保存的ZJ2000株囊毒加生理盐水研磨后接种9～10日龄鸡胚增殖病毒,收集尿囊液透析纯化,用蛋白酶K法提取病毒基因组dsRNA。通过RT-PCR获得基因组B节段全长的cDNA,并将其克隆到PUC18-T载体中进行测序。同时,本研究对GenBank中登录的IBDV基因组B节段进行了大量分析,发现B节段的5′-NCR存在1个基因高突变区,并且ZJ2000株的5′-NCR可形成独特的二级结构。经过对VP1一级结构的大量分析,筛选出B节段中17个可能对IBDV毒力产生影响的候选毒力位点,并在此基础上又对这些位点氨基酸的特性进行统计分析,进一步探讨了这些位点对VP1功能影响的可能性,为深入研究IBDV基因组B节段对其毒力的影响作了有益的探索。 展开更多

关键词 鸡传染性法氏囊病病毒 基因组B节段全长 克隆

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羊干扰素α和γ融合表达及抗病毒活性分析 被引量：2

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作者 韩颖 李秀丽 +4 位作者 豆子航 郭笑然 雷白时 袁万哲 赵款 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期660-667,共8页

为进一步探究羊干扰素α和γ的抗病毒活性效果,根据GenBank羊IFN-α和IFN-γ基因序列,使用Linker连接合成目的序列,成功构建了3种重组表达质粒pET28a-OviIFN-γ、pET28a-OviIFN-α、pET28a-OviIFN-γ/α并进行原核表达。用细胞病变抑制... 为进一步探究羊干扰素α和γ的抗病毒活性效果,根据GenBank羊IFN-α和IFN-γ基因序列,使用Linker连接合成目的序列,成功构建了3种重组表达质粒pET28a-OviIFN-γ、pET28a-OviIFN-α、pET28a-OviIFN-γ/α并进行原核表达。用细胞病变抑制法和RT-qPCR测定重组蛋白rOviIFN-α、rOviIFN-γ和rOviIFN-α/γ的抗病毒活性。结果表明,rOviIFN-α、rOviIFN-γ和rOviIFN-α/γ在牛肾细胞(MDBK)以及非洲绿猴肾细胞(Vero)细胞中有抗病毒活性,且rOviIFN-α/γ的抗病毒效果最优;rOviIFN-α、rOviIFN-γ和rOviIFN-α/γ能够显著上调MDBK以及Vero细胞中4种干扰素刺激基因(IFN stimulated genes,ISGs)的mRNA转录水平,且rOviIFN-α/γ对干扰素刺激基因的上调水平最显著。综上所述,本试验表达的重组蛋白都具有抗病毒作用,其中串联表达的重组蛋白抗病毒活性以及干扰素刺激基因转录水平较高。 展开更多

关键词 羊干扰素α和γ 细胞病变抑制 融合表达 抗病毒活性 干扰素刺激基因

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稳定表达绵羊肺腺瘤病毒表面蛋白A549细胞系的建立 被引量：1

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作者 刘霄卉 罗军荣 +2 位作者 斯日古楞 周建华 马学恩 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期395-398,共4页

为研究绵羊肺腺瘤病病毒(JSRV)表面蛋白(SU)的致瘤机制,本研究构建稳定表达SU的羊肺细胞A549细胞系。采用PCR方法从含su基因的pGEX-4T-1-SU重组质粒中扩增SU编码序列,将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)中,转染A549细胞。通过G418筛选,... 为研究绵羊肺腺瘤病病毒(JSRV)表面蛋白(SU)的致瘤机制,本研究构建稳定表达SU的羊肺细胞A549细胞系。采用PCR方法从含su基因的pGEX-4T-1-SU重组质粒中扩增SU编码序列,将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)中,转染A549细胞。通过G418筛选,对转染阳性细胞进行纯化,获得稳定表达JSRVSU蛋白的A549细胞系。以间接免疫荧光及westernblot鉴定SU的表达状况,并运用共聚焦显微镜确认SU蛋白的亚细胞定位。结果表明,重组蛋白SU在A549细胞中有效表达,而且主要分布于细胞质中。该细胞系的建立为SU生物学功能的体外研究提供了平台。 展开更多

关键词 绵羊肺腺瘤病毒 表面蛋白 真核表达 细胞内定位

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泰州地区仔猪大肠杆菌的分离鉴定及药物敏感性 被引量：1

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作者 王帅兵 王婧 +3 位作者 陈海峰 张龙 陈晓兰 王妲妲 《贵州农业科学》 CAS 2017年第10期95-98,共4页

为有效防治大肠杆菌病及控制其耐药性,从江苏泰州地区不同猪场腹泻猪粪便中分离细菌,经镜检、培养特性、生化试验和血清型鉴定,采用攻菌试验确定其致病性,获得6株致病性大肠杆菌,并进行药敏试验。结果表明:6株致病性大肠杆菌对氨苄西林... 为有效防治大肠杆菌病及控制其耐药性,从江苏泰州地区不同猪场腹泻猪粪便中分离细菌,经镜检、培养特性、生化试验和血清型鉴定,采用攻菌试验确定其致病性,获得6株致病性大肠杆菌,并进行药敏试验。结果表明:6株致病性大肠杆菌对氨苄西林、阿莫西林、羧苄西林、氟苯尼考和四环素全部耐药;对头孢呋辛、头孢曲松、红霉素、复方新诺明、链霉素、阿奇霉素普遍不敏感;对头孢他啶、头孢噻肟、多西环素、庆大霉素敏感性差异明显,部分耐药,部分敏感;对头孢吡肟、丁胺卡那霉素、环丙沙星和氧氟沙星均表现敏感;对氨苄西林、阿莫西林和阿奇霉素等20种常用抗菌药均表现6~15耐的多重耐药。 展开更多

关键词 猪大肠杆菌 分离鉴定 药物敏感性 泰州

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猪瘟病毒E2蛋白重复多表位基因的融合表达及其兔体免疫保护研究 被引量：1

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作者 刘思国 涂长春 +3 位作者 余兴龙 张茂林 刘伯华 李作生 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期127-133,共7页

目的 :研究猪瘟病毒 (CSFV)E2蛋白重复多抗原表位基因的融合表达及其免疫攻毒保护作用。方法 :应用PCR方法扩增猪瘟病毒E2蛋白重复多抗原表位基因 ,构建重复多表位基因的原核重组表达质粒PGEX-3E ,进行融合蛋白的表达和纯化。ELISA和Wes... 目的 :研究猪瘟病毒 (CSFV)E2蛋白重复多抗原表位基因的融合表达及其免疫攻毒保护作用。方法 :应用PCR方法扩增猪瘟病毒E2蛋白重复多抗原表位基因 ,构建重复多表位基因的原核重组表达质粒PGEX-3E ,进行融合蛋白的表达和纯化。ELISA和Westernblot方法测定单表位融合蛋白GST-E和多表位融合蛋白GST-3E与猪抗CSFV的阳性血清和兔抗E2阳性血清的反应性 ,并进行融合蛋白的兔体免疫及免疫攻毒保护的比较研究。结果 :分子克隆和构建了原核重组表达质粒pGEX-3E ,表达和纯化了融合蛋白GST-3E ;单表位融合蛋白与重复多表位融合蛋白均能够与猪抗CSFV的阳性血清反应和兔抗E2的阳性血清产生免疫反应。在刺激兔体产生抗体方面 ,单表位融合蛋白刺激兔体产生抗体的能力较弱 ,而多表位融合蛋白则能够使兔体产生高效价的抗体。接种 10 0MID50 剂量猪瘟兔化弱毒 (HCLV)进行的兔体免疫攻毒保护试验表明 ,空白对照组和载体蛋白GST免疫组无保护作用 ,单表位融合蛋白免疫组具有一定的免疫保护作用 ,而重复多表位融合蛋白免疫组则完全能够抵抗猪瘟病毒的攻击。结论 :猪瘟病毒E2蛋白重复多表位的融合表达具有免疫保护作用 。 展开更多

关键词 猪瘟病毒 E2蛋白 蛋白质的融合表达

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佩兰挥发油治疗轮状病毒性仔猪腹泻的疗效观察研究 被引量：1

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作者 张福寿 王鹤鸣 王利 《商丘职业技术学院学报》 2022年第3期92-96,共5页

为研究佩兰对轮状病毒引起的仔猪腹泻的治疗效果,将40头仔猪平均随机分为4个处理组,分别为轮状病毒对照组、佩兰挥发油低剂量组、中剂量组和高剂量组.于32日龄时,对佩兰挥发油低、中、高剂量组仔猪分别饲喂25 mg/kg/d、50 mg/kg/d、100 ... 为研究佩兰对轮状病毒引起的仔猪腹泻的治疗效果,将40头仔猪平均随机分为4个处理组,分别为轮状病毒对照组、佩兰挥发油低剂量组、中剂量组和高剂量组.于32日龄时,对佩兰挥发油低、中、高剂量组仔猪分别饲喂25 mg/kg/d、50 mg/kg/d、100 mg/kg/d剂量的佩兰挥发油饲料.试验结果表明:使用低、中、高剂量的佩兰挥发油对轮状病毒引起的仔猪腹泻具有明显的保护作用.低、中、高剂量组与病毒感染对照组相比,人工感染轮状病毒后,仔猪腹泻指数均表现差异显著,这说明佩兰挥发油对仔猪感染轮状病毒引起的腹泻有较好的疗效. 展开更多

关键词 佩兰 挥发油 猪轮状病毒 仔猪腹泻

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重组猪干扰素α的原核表达及抗病毒活性

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作者 李秀丽 韩颖 +5 位作者 赵款 张武超 梁飞 杨欢 雷白时 袁万哲 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期245-252,共8页

为了探究重组猪干扰素(PoIFN-α)在体内外的抗病毒活性,利用pET-32a载体系统,构建了PoIFN-α的原核表达体系。在体外,MTT法在猪肾细胞(PK-15)和猪睾丸细胞(ST)上测定了其细胞毒性,并利用细胞病变抑制法测定其抗水泡性口炎病毒(VSV)、猪... 为了探究重组猪干扰素(PoIFN-α)在体内外的抗病毒活性,利用pET-32a载体系统,构建了PoIFN-α的原核表达体系。在体外,MTT法在猪肾细胞(PK-15)和猪睾丸细胞(ST)上测定了其细胞毒性,并利用细胞病变抑制法测定其抗水泡性口炎病毒(VSV)、猪脑心肌炎病毒(EMCV)和猪伪狂犬病病毒(PRV)的活性,同时测定了重组蛋白作用PK-15细胞后干扰素刺激基因(ISGs)的转录水平;之后通过小鼠攻毒保护试验,测定了rPoIFN-α治疗后各组织器官的病毒载量,ELISA测定了小鼠血清中细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-10和IL-6的动态变化,并对整个试验期间小鼠出现的临床症状进行打分。结果显示,成功获得了原核表达的特异性重组蛋白rPoIFN-α,在细胞上抗病毒比活性达到1.67×10^(6)IU,对细胞没有损害作用,且显著上调了Mx1、OAS等因子的转录水平;在小鼠体内能明显拮抗EMCV和PRV的增殖,减少促炎因子的产生,延缓临床症状的出现。结果表明,原核表达重组蛋白rPoIFN-α在体内外均具有抗病毒活性,为进一步推进蛋白药物在临床上的应用奠定了基础。 展开更多

关键词 重组猪干扰素α 大肠杆菌表达 干扰素刺激基因 细胞毒性 抗病毒活性

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