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抗菌肽Cecropin AD在毕赤酵母中的组成型表达的研究 被引量：3
1
作者 王珍 姜建阳 +2 位作者 祝发明 李丽 谯仕彦 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2010年第5期51-54,共4页
为了利用组成型表达方法在Pichia pastoris SMD1168中表达抗菌肽Cecropin AD,利用化学方法合成编码抗菌肽Cecropin AD的基因片段SH,将基因片段SH插入到载体pGAPZa-A中命名为pGAPZa-ASH,将pGAPZa-ASH电转至Pichia pastoris SMD1168中,Zec... 为了利用组成型表达方法在Pichia pastoris SMD1168中表达抗菌肽Cecropin AD,利用化学方法合成编码抗菌肽Cecropin AD的基因片段SH,将基因片段SH插入到载体pGAPZa-A中命名为pGAPZa-ASH,将pGAPZa-ASH电转至Pichia pastoris SMD1168中,Zecion抗性筛选阳性重组子。用Tricine-SDS-PAGE分析表达状况,琼脂扩散法检测蛋白的抑菌活性。结果表明:在3.0ku处有目的条带,并且表达产物抗菌肽Cecropin AD有生物活性。研究利用组成型表达方法在毕赤酵母菌株成功表达了抗菌肽Cecropin AD。组成型表达方法在本研究中成功的应用,为以后的实验研究奠定了理论基础。 展开更多
关键词 抗菌肽CECROPIN AD PICHIA PASTORIS pGAPZa-A 组成型
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液相色谱-串联质谱法同时测定生鲜乳中四环素类和β-内酰胺类药物残留 被引量：11
2
作者 范志影 刘庆生 +2 位作者 石冬冬 田园 马书宇 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2013年第9期74-77,共4页
试验旨在建立了反相液相色谱一串联质谱法同时测定生鲜乳中四环素类和β-内酰胺类药物残留的方法，可用于生鲜乳中四环素、金霉素、土霉素和强力霉素等4种四环素类和阿莫西林、苄青霉素、氨苄青霉素、苯唑西林、氯唑西林、头孢氨苄、头... 试验旨在建立了反相液相色谱一串联质谱法同时测定生鲜乳中四环素类和β-内酰胺类药物残留的方法，可用于生鲜乳中四环素、金霉素、土霉素和强力霉素等4种四环素类和阿莫西林、苄青霉素、氨苄青霉素、苯唑西林、氯唑西林、头孢氨苄、头孢噻呋等7种口一内酰胺类药物残留的同时测定。结果表明：11种化合物溶液浓度在1-80μg／L有较好的线性关系，γ〉0．99，方法的检出限在0．1—1μg／L。苄青霉素的回收率较低，只有60％左右，其他化合物的回收率均在81％～119％、相对标准偏差在1．23％～14．80％。方法的灵敏度较高，且简便、快速，可以较好的解决目标物极性差别大及牛奶中蛋白质对检测结果的干扰等问题，能够很好的满足生鲜乳中抗生素残留检测的需要。 展开更多
关键词 液相色谱-串联质谱 生鲜乳 四环素 Β-内酰胺 残留
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应用发光细菌法检测饲用抗生素单一及联合毒性的研究 被引量：16
3
作者 任皓 王金荣 +2 位作者 陈行杰 刘俊功 娄鹏 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2011年第21期49-53,共5页
以HgCl2为毒性参照,以等毒性配比法研究了饲用盐酸金霉素、吉他霉素、盐霉素和黄霉素对发光细菌的单一及联合毒性。结果表明：盐酸金霉素、吉他霉素、盐霉素、黄霉素对明亮发光杆菌的急性毒性EC50分别为9.21、146.13、4.24 mg/L和134.68... 以HgCl2为毒性参照,以等毒性配比法研究了饲用盐酸金霉素、吉他霉素、盐霉素和黄霉素对发光细菌的单一及联合毒性。结果表明：盐酸金霉素、吉他霉素、盐霉素、黄霉素对明亮发光杆菌的急性毒性EC50分别为9.21、146.13、4.24 mg/L和134.68 mg/L,发光细菌的相对发光强度（RLU）随着抗生素浓度的提高而降低,并分别在2~16、25~200、1~8 mg/L和25~200 mg/L范围内呈良好线性关系;多元饲用抗生素对发光细菌具有联合毒性的作用,吉他霉素与盐酸金霉素、盐霉素和黄霉素3种抗生素的二元组合对发光细菌的联合毒性表现为较强的协同作用,而盐酸金霉素、盐霉素和黄霉素两两分别组合对发光细菌的联合毒性表现为拮抗作用;三元及四元抗生素混合体系对发光细菌的联合毒性均表现为拮抗作用。 展开更多
关键词 发光细菌 等毒性 抗生素 联合毒性
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多壁碳纳米管分散固相萃取结合LC-MS/MS测定饲料中11种β-受体激动剂 被引量：7
4
作者 应永飞 朱聪英 +3 位作者 陈慧华 韦敏珏 周炜 汪以真 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2013年第9期68-73,共6页
本研究建立了采用多壁碳纳米管(MWCNTs)为吸附剂的分散固相萃取(dSPE)净化、液相色谱串联质谱测定饲料中11种β-受体激动剂(克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、苯乙醇胺A、氯丙那林、妥布特罗、西马特罗、特布他林、马布特罗、班布特罗... 本研究建立了采用多壁碳纳米管(MWCNTs)为吸附剂的分散固相萃取(dSPE)净化、液相色谱串联质谱测定饲料中11种β-受体激动剂(克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、苯乙醇胺A、氯丙那林、妥布特罗、西马特罗、特布他林、马布特罗、班布特罗和喷布特罗)的方法。饲料样品经甲酸水溶液提取后,调节pH值至10,加入50 mgMWCNTs进行分散固相萃取,被吸附的化合物经1.0%甲酸水甲醇(91)洗脱,洗脱液过滤膜后进行LC-MS/MS分析。采用Acquity UPLC BEH C18色谱柱分离,以0.1%甲酸水溶液和甲醇为流动相进行梯度洗脱,电喷雾正电子(ESI+)模式电离,多反应监测(MRM)模式监测,内标法校准进行定量。结果表明:11种β-受体激动剂在0.1～20μg/L浓度范围内呈良好的线性,线性相关系数均大于0.997,猪配合饲料样品中最低定量限为0.05～0.48μg/kg。猪配合饲料中添加0.5～500μg/kgβ-受体激动剂的回收率在89.6%～112.9%,相对标准偏差RSD均小于15%。 展开更多
关键词 β-受体激动剂 多壁碳纳米管 分散固相萃取 液相色谱串联质谱法
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磺胺二甲嘧啶药物残留ELISA检测试剂盒的研制及初步应用 被引量：2
5
作者 李君华 米振杰 +3 位作者 李志平 金世清 陈宝明 吴萌 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2013年第9期78-81,共4页
本试验旨在采用重氮化法合成的免疫抗原通过免疫BALB/c小鼠进行融合,获得高特异、高灵敏度的单克隆抗体。在建立磺胺二甲嘧啶单克隆抗体(SM2 mAb)杂交瘤细胞株和阻断ELISA的基础上,初步研制出一种一步法检测磺胺二甲嘧啶(SM2)的ELISA快... 本试验旨在采用重氮化法合成的免疫抗原通过免疫BALB/c小鼠进行融合,获得高特异、高灵敏度的单克隆抗体。在建立磺胺二甲嘧啶单克隆抗体(SM2 mAb)杂交瘤细胞株和阻断ELISA的基础上,初步研制出一种一步法检测磺胺二甲嘧啶(SM2)的ELISA快速检测试剂盒(SM2-Kit)。结果表明:SM2-Kit检测范围为0.5～40.5μg/L,检测时间为30 min,IC50为1.4μg/L,最低检测限达0.1μg/L。经大量现场试验,猪肉组织最低检测限为1μg/kg,猪饲料最低检测限为1μg/kg,猪尿最低检测限为1.8μg/L,牛奶最低检测限为1.5μg/L,测试的回收率平均在70%～110%。 展开更多
关键词 SM2 ELISA 优化 样品处理 回收率
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