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猪卵母细胞玻璃化冷冻损伤的缓解策略 被引量：3
1
作者 孙雅雯 陈思颍 +3 位作者 李伉 冷璇 王栋 庞云渭 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第1期36-44,共9页
卵母细胞的冷冻保存是人类和动物辅助生殖中长期储存遗传资源的重要策略之一。然而,由于卵母细胞的表面积/体积比小、细胞渗透性差,在冷冻过程中极易受到冰晶形成、渗透性休克、氧化应激和冷冻保护剂毒性等损伤,严重降低其解冻后的发育... 卵母细胞的冷冻保存是人类和动物辅助生殖中长期储存遗传资源的重要策略之一。然而,由于卵母细胞的表面积/体积比小、细胞渗透性差,在冷冻过程中极易受到冰晶形成、渗透性休克、氧化应激和冷冻保护剂毒性等损伤,严重降低其解冻后的发育能力。与其他动物相比,猪卵母细胞中丰富的脂滴含量降低了其低温耐受性,冷冻保存难度更大。尽管可以从玻璃化未成熟卵母细胞中获得活仔猪,但与新鲜卵母细胞相比,玻璃化冷冻卵母细胞的发育能力还有待进一步提升。本文主要从玻璃化冷冻猪卵母细胞的损伤类型、受损机制、缓解冷冻损伤的策略等方面进行综述,为进一步建立和完善猪卵母细胞玻璃化冷冻保存方案提供参考。 展开更多
关键词 猪 卵母细胞 玻璃化冷冻 冷冻损伤
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体细胞克隆胚胎发育效率影响因素及其改进措施
2
作者 叶鸥颉 董亚铮 +1 位作者 洪林君 李紫聪 《中国畜禽种业》 2025年第10期16-26,共11页
动物体细胞克隆(体细胞核移植)技术克隆技术在复制扩繁优良种畜、保护濒危动物、制备基因修饰动物、治疗人类疾病等方面有着广泛的应用前景,但目前仍存在效率低、技术难度大等问题。该文简要回顾了动物体细胞克隆技术的主要发展历史,对... 动物体细胞克隆(体细胞核移植)技术克隆技术在复制扩繁优良种畜、保护濒危动物、制备基因修饰动物、治疗人类疾病等方面有着广泛的应用前景,但目前仍存在效率低、技术难度大等问题。该文简要回顾了动物体细胞克隆技术的主要发展历史,对动物体细胞克隆的总体操作流程做了简要介绍。随后通过总结现有科研成果,将影响动物体细胞克隆胚胎发育效率的主要因素分为“克隆操作技术复杂精细”、“卵母细胞质量有待提高”及“克隆胚胎表观遗传修饰和基因表达错误”三大层面,并归纳已研发出的解决方案,以使更多人了解该技术,并推动其创新发展与落地应用。 展开更多
关键词 动物 体细胞克隆 胚胎 发育效率
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哺乳动物合子基因组激活过程中表观遗传因子的表达模式研究
3
作者 陈笑薇 杨瑛楠 +3 位作者 田梦圆 张金豪 王锋 邓明田 《南京农业大学学报》 北大核心 2025年第5期1128-1140,共13页
[目的]哺乳动物合子基因组激活(zygotic genome activation,ZGA)是早期胚胎发育的一个关键阶段,标志着早期胚胎的发育调控由母源基因向合子基因转变。DNA甲基化和组蛋白修饰等表观遗传精确调控合子基因或母源基因的激活或抑制,在早期胚... [目的]哺乳动物合子基因组激活(zygotic genome activation,ZGA)是早期胚胎发育的一个关键阶段,标志着早期胚胎的发育调控由母源基因向合子基因转变。DNA甲基化和组蛋白修饰等表观遗传精确调控合子基因或母源基因的激活或抑制,在早期胚胎发育过程中发挥重要作用。本研究目的为探究表观遗传因子在哺乳动物ZGA过程中的表达变化,理解哺乳动物早期胚胎发育的调控方式。[方法]通过构建山羊早期胚胎发育不同时期胚胎RNA-seq文库,使用生物信息学方法联合分析小鼠、人和牛早期胚胎发育不同时期胚胎RNA-seq数据,分析重要表观遗传因子在哺乳动物ZGA过程中的表达模式。[结果]在人、小鼠、山羊、牛ZGA过程中分别检测到153、153、87、58个差异表达的表观遗传因子,其中KDM5B、SETD2、EED、MSL2、MTA2、ATXN7L3、YTHDF2、IGF2BP1、ALYREF在人、小鼠、牛和山羊ZGA时期均差异表达;DNA甲基化因子TET1在小鼠、人、牛ZGA时期表达存在显著差异,在山羊ZGA过程中不差异但表达水平逐渐升高;组蛋白甲基化因子STED2和KDM5B在人、小鼠、牛、山羊ZGA过程中发挥重要作用;组蛋白乙酰化因子MSL2和MTA2在人、小鼠、牛、山羊ZGA时期维持乙酰化的动态平衡发挥重要作用;RNA修饰因子中YTHDF2和IGF2BP1可能参与调控哺乳动物ZGA过程的转录过程。[结论]本试验解析了DNA甲基化、组蛋白甲基化、组蛋白乙酰化和RNA修饰等表观遗传调控因子在哺乳动物ZGA期间的变化规律,并比较了人、小鼠、牛和山羊的表达模式,为构建哺乳动物ZGA调控网络、剖析表观遗传因子的动态调控作用、预测胚胎发育潜能等提供科学依据。 展开更多
关键词 合子基因组激活 表观遗传 早期胚胎发育 哺乳动物 组蛋白修饰
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不同FBS及BSA产品对牛体外胚胎发育的影响
4
作者 李婧轩 王兆琛 +4 位作者 曹志棋 吕晴霁 张桢妮 安磊 席广银 《黑龙江动物繁殖》 2025年第3期8-12,共5页
试验旨在比较不同来源胎牛血清(FBS)及牛血清白蛋白(BSA)产品对牛体外胚胎发育效率的影响。选取2种品牌的FBS和3个货号的BSA产品,采用体外成熟、体外受精、胚胎培养方法,测定了卵母细胞成熟液和后期胚胎发育液中添加不同FBS及BSA产品后... 试验旨在比较不同来源胎牛血清(FBS)及牛血清白蛋白(BSA)产品对牛体外胚胎发育效率的影响。选取2种品牌的FBS和3个货号的BSA产品,采用体外成熟、体外受精、胚胎培养方法,测定了卵母细胞成熟液和后期胚胎发育液中添加不同FBS及BSA产品后的胚胎卵裂率和囊胚率。结果表明:在后期胚胎发育液(受精48 h后)中使用BSA-A7030的囊胚率显著高于BSA-A3311(P<0.05);在后期胚胎发育液中使用FBS-ExCell的囊胚率、孵化率显著高于FBS-VISTECH(P<0.05),囊胚形态明显优于FBS-VISTECH和BSA-A7030联合添加;在卵母细胞成熟液中使用BSA-A8806和FBS-ExCell的囊胚率显著高于BSA-A7030(P<0.05),BSA-A8806和FBS-ExCell相比囊胚率差异不显著(P>0.05)。综上所述,在卵母细胞成熟液和后期胚胎发育液中使用FBS-ExCell有助于改善卵母细胞成熟和胚胎发育,在成熟液中使用BSA-A8806可以起到与FBS-ExCell相当的作用。 展开更多
关键词 体外胚胎生产 后期胚胎发育液 卵母细胞成熟液 胎牛血清(FBS) 牛血清白蛋白(BSA)
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黄芩素通过抑制NLRP3炎性通路改善卵巢刺激后的子宫容受性
5
作者 王怡茹 王远 +6 位作者 杨洁 杨汶婧 殷静 叶博宣 潘树涛 安磊 王书敏 《黑龙江动物繁殖》 2025年第3期1-7,共7页
试验旨在探讨黄芩素在缓解卵巢刺激引起的胚胎丢失中的作用及机制。将6~8周龄雌性ICR小鼠随机分为5组,1组为自然周期组,2组为卵巢刺激组,3组为卵巢刺激+黄芩素10 mg/kg组,4组为卵巢刺激+黄芩素25 mg/kg组,5组为卵巢刺激+黄芩素100 mg/k... 试验旨在探讨黄芩素在缓解卵巢刺激引起的胚胎丢失中的作用及机制。将6~8周龄雌性ICR小鼠随机分为5组,1组为自然周期组,2组为卵巢刺激组,3组为卵巢刺激+黄芩素10 mg/kg组,4组为卵巢刺激+黄芩素25 mg/kg组,5组为卵巢刺激+黄芩素100 mg/kg组。首先筛选黄芩素最佳干预剂量,其后通过蛋白免疫印记试验、免疫荧光试验及酶联免疫吸附试验,测定子宫中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱天冬酶-1(Caspase-1)、消皮素D(GSDMD)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-18(IL-18)的表达情况;采用RT-qPCR检测子宫容受性标志物白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,Lif)和黏蛋白1(mucin 1,Muc1)mRNA的表达水平;并测定妊娠雌鼠所产仔鼠的初生重、平均窝产仔数。结果表明:与1组相比,2组胚胎附植率显著降低(P<0.05)。3个黄芩组中,3组小鼠胚胎附植率最高。3组的NLRP3、ASC、Cleaved-CASP-1(Caspase-1的活性形式)、GSDMD、IL-18和IL-1β水平均显著低于2组(P<0.05);仔鼠初生重和平均窝产仔数均显著高于2组(P<0.05)。综上所述,黄芩素可通过抑制NLRP3炎性通路,改善卵巢刺激诱发的子宫容受性下降,从而改善妊娠结局。 展开更多
关键词 促性腺激素 黄芩素 子宫容受性 NLRP3炎症小体 卵巢刺激 胚胎附植
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牛体外胚胎冷冻方法和冷冻损伤研究进展
6
作者 王鸽 张逸松 +5 位作者 张依 郭济源 王超冉 吕昕哲 赵和平 朱凯 《现代畜牧兽医》 2025年第1期85-90,共6页
体外胚胎生产是繁殖优良品种或稀有保护动物的重要技术。胚胎冷冻可保存多余的胚胎及其遗传物质,为随时随地进行胚胎移植提供技术支持,所以胚胎冷冻技术是体外胚胎生产后移植前的重要步骤之一,更是胚胎移植技术步入商业化阶段的关键。... 体外胚胎生产是繁殖优良品种或稀有保护动物的重要技术。胚胎冷冻可保存多余的胚胎及其遗传物质,为随时随地进行胚胎移植提供技术支持,所以胚胎冷冻技术是体外胚胎生产后移植前的重要步骤之一,更是胚胎移植技术步入商业化阶段的关键。但由于体外生产与自然孕育存在差异,如体外胚胎脂肪含量高、活性氧水平升高、具有物理损伤等特点,导致体外生产的胚胎冷冻效果不理想。文章主要就牛体外胚胎冷冻保存技术的发展、体外胚胎特性、冷冻保存后细胞分子特征及冷冻损伤等问题进行论述,以期为提高牛体外胚胎冷冻保存技术水平提供参考。 展开更多
关键词 冷冻保存 冷冻原理 体外胚胎特性 冷冻损伤
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那曲尼屋乡半农半牧区饲草复种增产技术研究
7
作者 谢文栋 严俊 +12 位作者 张海鹏 王有侠 马登科 高科 陈金林 嘎嘎 扎西吉姆 才珍 边巴拉姆 次仁曲珍 其米卓嘎 妹妹 旦久罗布 《西藏农业科技》 2025年第2期75-78,共4页
西藏自治区那曲绝大部分属于纯牧业区,牧区气候寒冷、热量不足,天然草地牧草生产力较低,仅有少部分区域温湿度较好。充分利用半农半牧区充足的水热条件,加大该区域的农牧耦合,在适宜人工种草区域探索牧草复种增产技术,选择早熟品种‘青... 西藏自治区那曲绝大部分属于纯牧业区,牧区气候寒冷、热量不足,天然草地牧草生产力较低,仅有少部分区域温湿度较好。充分利用半农半牧区充足的水热条件,加大该区域的农牧耦合,在适宜人工种草区域探索牧草复种增产技术,选择早熟品种‘青海444’与豆科牧草‘箭舌豌豆’混播种植第1茬,进行科学的田间管理,在‘青海444’灌浆期及时收割,复种第2茬,选择‘青海444’和油菜混播复种,实现了“一地双收”“一年两收”。结果显示:复种后,每667 m^(2)生产鲜草5 417.2 kg,比传统模式种植情况下多产出牧草3 417.2 kg,单位面积牧草增产显著,经济增收约2倍。 展开更多
关键词 饲草 半农半牧区 复种增产技术 那曲尼屋乡
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哺乳动物小卵泡卵母细胞体外成熟的研究进展
8
作者 李有为 程亚倬 +2 位作者 商继勇 张廷龙 孙铭菊 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期1171-1182,共12页
体外成熟是哺乳动物胚胎工程获得成熟卵母细胞的主要途径,卵母细胞质量直接影响早期胚胎发育,妊娠的建立及维持,胎儿的发育等。哺乳动物卵巢表面数量众多的小卵泡可以作为胚胎工程卵母细胞的来源,但从哺乳动物卵巢获取的卵母细胞成熟差... 体外成熟是哺乳动物胚胎工程获得成熟卵母细胞的主要途径,卵母细胞质量直接影响早期胚胎发育,妊娠的建立及维持,胎儿的发育等。哺乳动物卵巢表面数量众多的小卵泡可以作为胚胎工程卵母细胞的来源,但从哺乳动物卵巢获取的卵母细胞成熟差异较大,存在处于发育各个时期的卵母细胞,小卵泡卵母细胞体外成熟质量差,发育能力不足。如何提高小卵泡卵母细胞体外成熟的发育能力以充分挖掘优良母畜的遗传资源,提高胚胎工程效率成为研究热点。基于此,文章概述哺乳动物小卵泡卵母细胞体外成熟的研究进展,比较大、小卵泡卵母细胞物质积累差异、卵泡的卵泡液成分及含量差异以及卵泡颗粒细胞和卵丘细胞的差异,分析哺乳动物小卵泡卵母细胞体外成熟质量差的原因,分析总结提高哺乳动物小卵泡体外成熟卵母细胞发育能力的措施,包括抑制核成熟、成熟前培养、颗粒细胞及卵丘细胞与卵母细胞共培养,期望能够为小卵泡卵母细胞发育调控机制的研究及发育能力的提高提供理论指导。 展开更多
关键词 哺乳动物 小卵泡 卵母细胞 体外成熟
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外泌体调控胚胎发育的研究进展 被引量：1
9
作者 卢永昌 甘建宇 +1 位作者 黄思秀 洪林君 《家畜生态学报》 北大核心 2024年第2期91-96,共6页
外泌体是胚胎生长发育的重要调控因子之一,在胚胎和母体组织的交流过程中发挥主要作用,并对胚胎的生长发育有着至关重要的影响。不同来源的外泌体在母胚交流、胚胎发育等不同生理阶段中发挥着不同程度的介导作用。外泌体中的一些蛋白质... 外泌体是胚胎生长发育的重要调控因子之一,在胚胎和母体组织的交流过程中发挥主要作用,并对胚胎的生长发育有着至关重要的影响。不同来源的外泌体在母胚交流、胚胎发育等不同生理阶段中发挥着不同程度的介导作用。外泌体中的一些蛋白质、RNA或其他因子通过调节胚胎微环境影响胚胎的生长发育。该文综述了外泌体中RNA及蛋白影响胚胎生长发育的调控作用,为深入探究外泌体对胚胎发育的影响机制提供参考和借鉴。 展开更多
关键词 外泌体 胚胎发育 蛋白质 RNA
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德州驴发情周期中卵泡动力学和激素变化规律的研究 被引量：12
10
作者 葛利江 徐常林 +2 位作者 石瑞青 谭景和 罗明久 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1256-1263,共8页
本研究旨在揭示德州母驴发情季节的卵巢卵泡波变化特点以了解其卵泡的募集、选择、优势化、闭锁或者排卵,为驴人工授精和超数排卵提供可靠依据。本研究在德州驴发情季节(5～8月份)用直肠超声探查法每日检测5头德州母驴的10个排卵间隔的... 本研究旨在揭示德州母驴发情季节的卵巢卵泡波变化特点以了解其卵泡的募集、选择、优势化、闭锁或者排卵,为驴人工授精和超数排卵提供可靠依据。本研究在德州驴发情季节(5～8月份)用直肠超声探查法每日检测5头德州母驴的10个排卵间隔的卵泡发育动态。同时每日采血,用放免法(RIA)检测E2、FSH、LH和IGF-1浓度。研究结果发现:(1)驴的排卵间隔平均为(23.22±0.28)d,每个周期中存在2个卵泡波,其中有4个展示主-主卵泡波,有6个展示次-主卵泡波。(2)第1波和第2波开始出现募集的时间分别在排卵后的第1和第(10.2±1.4)天,募集的卵泡数分别为(5.2±1.2)和(4.0±0.3)个,选择的卵泡数分别是(2.3±0.5)和(2.5±0.4)个。第1和第2卵泡波开始优势化的时间分别在排卵后的第(5.8±0.6)和第(18.1±1.4)天。波峰平均出现时间分别为第(7.67±0.24)和第(23.22±0.28)天。波峰时优势卵泡平均最大直径分别为(26.44±2.37)和(40.7±2.45)mm。第1和第2波最大优势卵泡每日平均生长率分别为(2.01±0.5)和(3.15±0.6)mm.d-1。(3)黄体(CL)最大直径平均为(37.61±1.58)mm,CL平均持续时间为(17.30±1.62)d。(4)E2浓度从排卵前3d至排卵后2d的发情期内均很高,平均维持在(46.47±9.53)pg.mL-1,在排卵前2d达到峰值(62.84±4.89)pg.mL-1。(5)由于E2的负反馈作用,FSH浓度到优势卵泡最后阶段(即第7天闭锁或第23或24天排卵时)大幅度下降。(6)LH在排卵前几天迅速升高,在排卵后第2天达到峰值(4.69±0.43)mIU.mL-1。(7)IGF-1的升降状况与E2基本相同,在排卵前1d达到峰值(47.9±3.91)ng.mL-1。通过上述卵泡和激素动态学变化,本研究得出下述结论:驴的卵巢卵泡发育是以卵泡波形式进行的,每个发情周期中最常出现的是2个卵泡波;排卵发生于发情结束前2d;E2和IGF-1调节驴的发情活动;FSH调节小卵泡的募集;LH增高与排卵有关。 展开更多
关键词 德州驴 超声检查 卵泡波 生殖激素 黄体
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昆明小鼠早期胚胎发育时程 被引量：11
11
作者 李子义 谭景和 +4 位作者 孙兴参 刘忠华 李光鹏 周琪 贺桂馨 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期597-601,共5页
以昆明种小鼠为对象,在严格控光条件下,对交配后阴道栓形成时间、排卵时间、精子入卵与原核形成时间以及2-细胞至囊胚的发育时程等进行了系统研究。结果如下:(1)从注射hCG 当天(0 d)21:00(hCG后6 h)至次日(第1 天)1:00(hCG 后10 h),有84... 以昆明种小鼠为对象,在严格控光条件下,对交配后阴道栓形成时间、排卵时间、精子入卵与原核形成时间以及2-细胞至囊胚的发育时程等进行了系统研究。结果如下:(1)从注射hCG 当天(0 d)21:00(hCG后6 h)至次日(第1 天)1:00(hCG 后10 h),有84.2% 的超排小鼠形成阴道栓;(2)大部分小鼠(66% ～100% )排卵从hCG后第1 天2:00(hCG 后11 h)开始,至3:00～4:00(hCG后12～13 h)结束;(3)从hCG 后第1 天7:00(hCG后16 h)至11:00(hCG 后20 h),小鼠卵受精率为5.6% ～82.4% ;(4)从hCG后第1 天7:00(hCG 后16 h)至11:00(hCG 后20 h),原核形成率为4.4% ～67.5% ;(5)从hCG 后第1 天21:00(hCG 后30 h)至第2 天1:00(hCG后34 h),2-细胞形成率为14.9% ～83.1% ;hCG后第2 天19:00(hCG后52 h)至23:00(hCG后56 h),4-细胞形成率为12.9% ～85.7% ;hCG 后第3 天6:00(hCG后63 h)至10:00(hCG 后67 h),8-细胞形率为12.8% ～88.2% ;(6)从hCG 后第3 天10:00(hCG 后67 h)至24:00(hCG后81 h),8～16 细胞(早期桑葚胚)形成率由100% 下降到42.9% ;从hCG 后第3 天24:00(hCG 后81 h)至第4 天4:00(hCG后85 h),17～32 细胞(晚期桑葚胚)形成率由57.1% 增加到90.0% ;(7)从hCG 后第4 天6:00(hCG后87 h)至8:00(hCG后89 h),囊胚形成率从11.4% 上升到60.9% 。 展开更多
关键词 发育时程 早期胚胎 小鼠 胚胎发育
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影响体外培养兔胚发育和兔类ES细胞分离的若干因素 被引量：16
12
作者 赖良学 郑瑞珍 +1 位作者 秦鹏春 孙方臻 《中国兽医学报》 CAS CSCD 1996年第1期16-21,共6页
本试验系统地比较了影响兔囊胚体外培养和免类ＥＳ细胞系分离的几个主要因素。结果表明，３种不同糖浓度（４．５，１．０，０．２ｇ／Ｌ）在４８ｈ内对胚胎贴壁均无显著影响。在高糖ＤＭＥＭ中，早期胚胎内细胞团（ｉｎｎｅｒｃｅｌｌ... 本试验系统地比较了影响兔囊胚体外培养和免类ＥＳ细胞系分离的几个主要因素。结果表明，３种不同糖浓度（４．５，１．０，０．２ｇ／Ｌ）在４８ｈ内对胚胎贴壁均无显著影响。在高糖ＤＭＥＭ中，早期胚胎内细胞团（ｉｎｎｅｒｃｅｌｌｍａｓｓ，ＩＣＭ）增殖速度最快，分化也快；超低糖组，ＩＣＭ增殖缓慢，分化出现时间较晚；低糖组，ＩＣＭ既能保持较快的增殖速度，又能维持较长时间的未分化状。高糖组和低糖组的ＥＳ细胞样集落的传代能力相似，可达６～７代，超低糖组中不超过２代。胰岛素能促进ＩＣＭ的增殖，并可提高传代过程中ＥＳ细胞样克隆的形成率。在小鼠胚胎原代成纤维细胞（ＭＥＦ）和一种经白血病抑制因子转化了的小鼠成纤维细胞系（ＳＮＬ）上，ＩＣＭ都能维持较快的增殖速度，在家兔胚胎原代成纤维细胞（ＲＥＦ）中ＩＣＭ增殖较慢，无饲养细胞条件下，ＩＣＭ存活率低，生长状况不佳。传代能力，ＲＥＦ要比ＭＥＦ和ＳＮＬ低，且主要形成上皮样集落。作者根据以上实验结果认为，用低糖ＤＭＥＭ为基本培养基，再加入胰岛素，在ＭＥＦ或ＳＮＬ上培养切割胚胎和连续传代的技术路线是较为可行的。 展开更多
关键词 兔 ES细胞 葡萄糖 胰岛素 胚胎发育
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体外受精生产犏牛胚胎与移植试验研究 被引量：10
13
作者 孙永刚 徐惊涛 +1 位作者 才让东智 马志杰 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期719-726,共8页
旨在探讨牦牛和黄牛种间体外受精和胚胎发育效果。通过研究黄牛和牦牛卵母细胞体外成熟时间、卵母细胞质量、精子处理方式、受精卵培养体系及冷冻—解冻后胚胎活力。结果表明:随着体外培养时间的延长,卵母细胞第一极体排出率增加,A级卵... 旨在探讨牦牛和黄牛种间体外受精和胚胎发育效果。通过研究黄牛和牦牛卵母细胞体外成熟时间、卵母细胞质量、精子处理方式、受精卵培养体系及冷冻—解冻后胚胎活力。结果表明:随着体外培养时间的延长,卵母细胞第一极体排出率增加,A级卵母细胞培养24h第一极体的排出率显著高于B级和C级卵母细胞,但相同体外成熟时间和相同分级的黄牛和牦牛卵母细胞第一极体的排出率差异不显著。用Percoll液梯度离心法和BO液洗涤法分别处理牦牛精液和黄牛精液后通过种间体外受精,BO液洗涤法处理的精液受精后的卵裂率显著高于Per-coll液梯度离心法处理精液受精后的卵裂率,而2种方法处理精液受精后其囊胚率差异不显著。2种方法(黄牛♀×牦牛♂vs.牦牛♀×黄牛♂)生产的早期犏牛胚胎用输卵管上皮细胞共培养和卵丘细胞共培养其囊胚率和孵化囊胚率都显著高于SOF液培养,而3种培养方法培养的早期犏牛胚胎的卵裂率差异不显著。2种IVF胚胎冷冻解冻后形态正常胚(90.52%±5.94%vs.91.53%±7.34%)、24h的存活率(61.45%±8.44%vs.64.72%±11.82%)和48h的存活率(44.81%±6.21%vs.48.47%±10.04%)均差异不显著。将黄牛♀×牦牛♂IVF犏牛胚胎移植到自然发情4头受体黄牛和3头受体犏牛,4头牛怀孕并产犊,妊娠率为57.14%,平均妊娠期258d。 展开更多
关键词 体外成熟 种间受精 犏牛胚胎 胚胎移植
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组织蛋白酶对成年绵羊卵母细胞体外发育能力的影响 被引量：7
14
作者 刘志涛 田树军 +4 位作者 孙树春 陈晓勇 张艳普 胡媛媛 郭军艾 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1704-1711,共8页
本研究旨在观察绵羊卵丘细胞中组织蛋白酶(CTSS、CTSB)的mRNA在体外成熟过程中的表达规律,探明卵丘细胞中组织蛋白酶(CTSS、CTSB)mRNA的表达与卵母细胞体外发育能力之间的相关性。采用Rea-ltimePCR方法检测绵羊在体外成熟0、8、16和24h... 本研究旨在观察绵羊卵丘细胞中组织蛋白酶(CTSS、CTSB)的mRNA在体外成熟过程中的表达规律,探明卵丘细胞中组织蛋白酶(CTSS、CTSB)mRNA的表达与卵母细胞体外发育能力之间的相关性。采用Rea-ltimePCR方法检测绵羊在体外成熟0、8、16和24h的卵丘细胞中组织蛋白酶(CTSB、CTSS)的mRNA表达水平,以及在成熟液中添加组织蛋白酶抑制剂(E-64)后卵丘细胞中CTSB和CTSS的mRNA表达量在体外成熟前及体外成熟后的表达水平,并测定在成熟液中添加1、5、10μmol.L-1 E-64对卵母细胞成熟率、受精率及囊胚发育率的影响。结果,卵丘细胞中的CTSS和CTSB mRNA表达均随着体外成熟时间的增加(IVM 0h、IVM 8h和IVM 16h)呈下降的趋势(P<0.01)。添加5和10μmol.L-1 E-64组的卵丘细胞中CTSS和CTSB mRNA表达水平较对照组和1μmol.L-1组均显著性降低(P<0.01),而5和10μmol.L-1组间的CTSS和CTSB mRNA表达水平无显著差异(P>0.05)。成熟液中添加5和10μmol.L-1的E-64组的囊胚发育率(26.82%和30.95%)显著高于1μmol.L-1组和对照组(18.23%和15.63%,P<0.05),但5和10μmol.L-1组对卵母细胞的成熟率及卵裂率与1μmol.L-1组和对照组间无显著性差异(P>0.05)。结果表明,绵羊卵丘细胞中CTSS和CTSB的mRNA表达水平在体外成熟过程中呈下降趋势,其mRNA表达水平与胚胎的发育能力呈负相关;组织蛋白酶特异性抑制剂E-64可下调绵羊卵丘细胞中CTSS和CTSB的mRNA表达水平,并提高卵母细胞随后的体外发育能力。 展开更多
关键词 E-64 卵丘细胞 组织蛋白酶 体外发育 REAL-TIMEPCR
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酉州乌羊不同季节超数排卵的试验研究 被引量：7
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作者 高立芳 黄勇富 +5 位作者 任航行 周鹏 刘良佳 孙晓燕 黎年富 赵金红 《西南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期52-55,共4页
目的:探讨不同季节对酉州乌羊超数排卵的影响.方法:选择酉州乌羊作为供体,采用CIDR+PG+FSH法进行超数排卵处理,以快速获得酉州乌羊胚胎,统计胚胎回收数、可用胚数、退化胚数及可利用率.结果:5月、12月2次超排分别回收胚胎273枚、258枚,... 目的:探讨不同季节对酉州乌羊超数排卵的影响.方法:选择酉州乌羊作为供体,采用CIDR+PG+FSH法进行超数排卵处理,以快速获得酉州乌羊胚胎,统计胚胎回收数、可用胚数、退化胚数及可利用率.结果:5月、12月2次超排分别回收胚胎273枚、258枚,平均回收胚胎5月[(13.00±5.15)枚/只]略高于12月[(10.44±4.07)枚/只],但差异不具有统计学意义(p>0.05);可用胚胎分别为247枚、210枚,平均可用胚胎分别为5月[(11.76±5.73)枚/只]显著高于12月[(8.52±4.98)枚/只],差异具有统计学意义(p<0.05),胚胎可用率分别为90.48%和81.40%.结论:不同季节对酉州乌羊超数排卵的可用胚数量有一定影响. 展开更多
关键词 酉州乌羊 超数排卵 胚胎 不同季节
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孵化期间蛋内组成成分变化规律的研究 被引量：5
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作者 杨海明 王志跃 +2 位作者 朱小惠 于金成 刘蓓一 《扬州大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期77-79,83,共4页
通过测定鸡蛋蛋白、蛋黄及胚胎中钙、粗蛋白和粗脂肪含量,探讨孵化期间蛋内组成成分的变化规律。结果表明：胚胎发育过程中蛋白提供20.2%的钙,蛋黄提供10.0%的钙,蛋白和蛋黄钙含量的变化具有一定的互补性;胚胎中钙含量不断增加。蛋白中... 通过测定鸡蛋蛋白、蛋黄及胚胎中钙、粗蛋白和粗脂肪含量,探讨孵化期间蛋内组成成分的变化规律。结果表明：胚胎发育过程中蛋白提供20.2%的钙,蛋黄提供10.0%的钙,蛋白和蛋黄钙含量的变化具有一定的互补性;胚胎中钙含量不断增加。蛋白中粗蛋白含量高,粗脂肪含量低,粗蛋白与粗脂肪含量变化趋势基本相反。除12胚龄外,蛋黄中粗脂肪含量不断降低;18-21胚龄是脂肪代谢旺盛期。胚胎粗蛋白含量不断降低,粗脂肪含量不断增加,两者呈负相关。 展开更多
关键词 鸡 胚胎发育 钙 粗蛋白 粗脂肪
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春冬两季受体山羊同期发情和胚胎移植效果研究 被引量：6
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作者 陈静 黄勇富 +4 位作者 周鹏 刘良佳 黎年富 孙晓燕 赵金红 《西南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期36-39,共4页
采用放置CIDR结合注射PMSG方法分别在春季和冬季对154只受体山羊进行同期发情处理,并在发情后第7天进行胚胎移植.结果表明:处理羊只春冬两季的同期发情率分别为90.54%和75.00%;有效发情率分别为81.08%和60.00%;妊娠率分别为61.67%和45.8... 采用放置CIDR结合注射PMSG方法分别在春季和冬季对154只受体山羊进行同期发情处理,并在发情后第7天进行胚胎移植.结果表明:处理羊只春冬两季的同期发情率分别为90.54%和75.00%;有效发情率分别为81.08%和60.00%;妊娠率分别为61.67%和45.83%;产羔率分别为75.00%和54.17%,差异均极具有统计学意义(p<0.01);春季和冬季发情羊排卵并形成功能黄体的比率分别为89.55%和80.00%,差异不具有统计学意义(p>0.05).说明季节对山羊同期发情和胚胎植移效果有一定的影响,但对已发情的羊只形成功能黄体比率影响不明显. 展开更多
关键词 季节 山羊 同期发情 胚胎移植
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家兔桑椹胚和早期囊胚在饲养层表面的贴壁行为 被引量：7
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作者 赖良学 郑瑞珍 +1 位作者 秦鹏春 孙方臻 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第2期161-165,共5页
探讨了不同状态家兔３日龄桑椹胚和４日龄囊胚在饲养层上的贴壁规律。结果表明，去除或保留透明带和胶膜的全胚贴壁最晚，离散胚在培养２４ｈ内即可贴壁，切割胚贴壁大多数发生于体外培养２４～４８ｈ之间。离散胚和切割胚都可能在培养... 探讨了不同状态家兔３日龄桑椹胚和４日龄囊胚在饲养层上的贴壁规律。结果表明，去除或保留透明带和胶膜的全胚贴壁最晚，离散胚在培养２４ｈ内即可贴壁，切割胚贴壁大多数发生于体外培养２４～４８ｈ之间。离散胚和切割胚都可能在培养１２ｈ后重新聚集成中空的亚囊胚结构。亚囊胚的贴壁过程是某一部位首先附着于饲养层表面，然后滋胚层铺展形成向下的拉力，使其全部贴壁。 展开更多
关键词 兔 囊胚 桑椹胚 贴壁 饲养层
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猪胚胎附植部分因子研究进展 被引量：7
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作者 付言峰 方晓敏 +4 位作者 李碧侠 赵为民 王学敏 陈哲 任守文 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第9期2676-2682,共7页
产仔数性状是养猪业中一个重要的经济性状,而胚胎附植对猪产仔数的高低有重要的影响。胚胎附植的调控涉及到多个生物学过程,在其中发挥作用的物质(附植因子)很多。作者针对孕酮、孕酮受体、雌二醇、雌激素受体α(ESR1)和促红细胞生成素... 产仔数性状是养猪业中一个重要的经济性状,而胚胎附植对猪产仔数的高低有重要的影响。胚胎附植的调控涉及到多个生物学过程,在其中发挥作用的物质(附植因子)很多。作者针对孕酮、孕酮受体、雌二醇、雌激素受体α(ESR1)和促红细胞生成素产生肝细胞受体配体(Eph-ephrin)系统这几种附植因子的相关研究进行了归纳总结,重点阐述了这些因子在母胎对话过程中的时空表达、功能、突变、调控等方面的研究进展。其中,孕酮及其受体在猪胚胎附植活动中全程发挥着重要作用,黄体分泌的孕酮与母猪子宫内膜腔上皮、腺上皮、基质和肌细胞中的孕酮受体结合发挥作用,使这些组织细胞分泌多种附植因子,这些附植因子进一步参与胚胎附植过程。雌二醇是雌激素中含量最多、活性最强的一种激素,主要由卵巢颗粒细胞分泌,雌激素受体α是子宫内雌二醇的主要受体,二者结合可使母猪发情;此外,附植中处于游离状态的胚泡也分泌雌二醇,其是一个让母猪子宫内膜得以识别的信号,允许胚泡附植。Eph-ephrin系统作用广泛,其在人、小鼠和猪的胚胎附植过程中发挥着重要作用。系统中的EphA1、ephrin A1、EphA4等基因在猪的胚胎附植期表达量显著高于空怀猪,它们在子宫内膜附植点的表达量显著高于附植点间的部位,且ephrin A1的抑制表达会降低子宫内膜上皮细胞的迁移和黏附能力。这些附植因子都在猪胚胎附植活动中发挥着重要作用,对它们的深入研究将有利于明确猪胚胎附植调控机理,进一步揭示猪高繁机理。 展开更多
关键词 猪 胚胎附植 孕酮 雌激素 Eph-ephrin
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小鼠孵化囊胚细管法和OPS法玻璃化冷冻保存技术的研究 被引量：5
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作者 周崇 侯云鹏 +4 位作者 周光斌 吴通义 金方 洪琼花 朱士恩 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期26-31,共6页
利用小鼠孵化囊胚为模型 ,为猪孵化囊胚的冷冻保存摸索适宜的方法和条件 :在 2 5和 37℃条件下 ,用不同含量的玻璃化溶液 (EFS和EDFS) ,对小鼠孵化囊胚实施细管法和OPS法冷冻保存。在 2 5℃条件下 ,细管一步法冷冻保存后的囊胚恢复率仅... 利用小鼠孵化囊胚为模型 ,为猪孵化囊胚的冷冻保存摸索适宜的方法和条件 :在 2 5和 37℃条件下 ,用不同含量的玻璃化溶液 (EFS和EDFS) ,对小鼠孵化囊胚实施细管法和OPS法冷冻保存。在 2 5℃条件下 ,细管一步法冷冻保存后的囊胚恢复率仅为 32 5 %～ 74 4 % ,与对照组 (10 0 % )差异极显著 (P <0 0 1) ;而细管二步法冷冻组用方法C解冻后 ,孵化囊胚恢复率达 87 0 % ,为细管法最佳组 ,但仍与对照组有显著差异 (P <0 0 5 )。在 37℃条件下 ,改用OPS法冷冻后 ,以方法A脱出抗冻保护剂 ,孵化囊胚恢复率最高值为 87 2 % (P <0 0 5 )。当采用EDFS30和EDFS4 0对孵化囊胚冷冻保存后 ,以方法C脱出抗冻保护剂 ,恢复率分别高达 97 8%和 93 3% (P >0 0 5 )。利用细管法和OPS法 2种最佳冷冻 -解冻组获得的 133和 15 4枚胚胎 ,分别移植给 12和 10只假妊娠 3～4d的受体母鼠。使 2种冷冻方法均有 6只妊娠 ,各产仔 2 2和 36只 ,产仔率分别为 35 5 %和 39 1% ,与对照组(39 8% )差异均不显著 (P >0 0 5 )。证明 2种方法对胚胎冷冻后均起到了保护作用。 展开更多
关键词 小鼠 孵化囊胚 细管法 OPS法 玻璃化冷冻
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