旨在研究中国本土槐猪和引入瘦肉型猪(杜洛克猪、大约克夏猪、长白猪)在生长育肥相关基因MC4R和MSTN、脊椎数量相关基因NR6A1和VRTN、肉质性状相关基因PHKG1和PRKAG3以及病原感染相关基因SYNGR2和FUT1这8个基因9个SNP位点的遗传变异特...旨在研究中国本土槐猪和引入瘦肉型猪(杜洛克猪、大约克夏猪、长白猪)在生长育肥相关基因MC4R和MSTN、脊椎数量相关基因NR6A1和VRTN、肉质性状相关基因PHKG1和PRKAG3以及病原感染相关基因SYNGR2和FUT1这8个基因9个SNP位点的遗传变异特征。利用竞争性等位基因特异性PCR(KASP)和聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)方法对突变位点进行基因分型,根据原始文献对各位点进行有利等位基因判定,并制作各猪种在各位点有利等位基因和不利等位基因的百分比示意图。结果:槐猪在NR6A1基因突变位点存在一定多态性,有利等位基因频率为0.24,其他位点表现为单一基因型,其中,PHKG1、PRKAG3突变位点为有利等位基因,而在MC4R、MSTN、VRTN、SYNGR2和FUT1突变位点为不利等位基因;杜洛克猪在MC4R、NR6A1、VRTN、SYNGR2和FUT1突变位点有利等位基因占优,然而,PHKG1基因不利等位基因仍有一定的比例;大约克夏猪在MC4R、SYNGR2、NR6A1和VRTN基因突变位点有利等位基因占优,而其他位点为不利等位基因;长白猪在MC4R、MSTN、PRKAG3(p.Val249Ile)和SYNGR2这4个基因突变位点不利基因占优;杜洛克猪在VRTN基因、长白猪在MC4R基因突变位点处于遗传不平衡状态(P<0.05)。以上结果为槐猪品种保护与利用以及瘦肉型猪种分子遗传标记选育提供了有益的信息。展开更多
本文旨在探究富含天冬氨酸尾1的单通道膜蛋白(Single-pass Membrane Protein With Aspartate Rich Tail1,Smdt1)对C3H10T1/2细胞增殖和成脂分化的调控效应。本研究将Smdt1基因的过表达和干扰载体转染至C3H10T1/2细胞模型,采用qPCR方法...本文旨在探究富含天冬氨酸尾1的单通道膜蛋白(Single-pass Membrane Protein With Aspartate Rich Tail1,Smdt1)对C3H10T1/2细胞增殖和成脂分化的调控效应。本研究将Smdt1基因的过表达和干扰载体转染至C3H10T1/2细胞模型,采用qPCR方法量化了增殖和成脂分化关键基因的表达水平变化,利用EdU染色检测细胞增殖活力,油红O染色方法鉴定脂滴积累的状态;进一步通过String database、Bio GRID、Int Act、GeneMANIA、DAVID和Genecard数据库构建Smdt1蛋白互作网络图。结果显示,在C3H10T1/2细胞中过表达Smdt1,极显著提升了增殖标志基因Pcna、Ki67、Cdk1及Cdk4的表达,EdU阳性细胞比例反映了细胞增殖速率加快;Smdt1极显著促进成脂分化关键基因Pparγ、Fabp4、-Adipoq的表达量,显著促进了Cebpα、Cebpβ的表达量,脂滴数量变多。在C3H10T1/2细胞体系中,干扰Smdt1,与增殖紧密相关的标志基因,包括Ki67、Pcna及Cdk1,其表达水平极显著降低,Cdk4的表达也呈现显著降低的趋势,反映在EdU增殖检测中,阳性细胞数量明显减少,细胞增殖活性受到抑制。进一步干扰Smdt1后,成脂分化途径的关键调控基因Cebpα、Pparγ、Cebpβ、Fabp4、Adipoq的表达均极显著降低,细胞内脂滴的数量也显著减少,细胞成脂分化能力削弱。蛋白功能预测发现,Smdt1能够与Mcu相互作用,参与线粒体钙离子转运、摄取和稳态。本研究发现Smdt1可以促进C3H10T1/2细胞增殖和成脂分化,为脂肪沉积的研究提供了新的方向。展开更多
文摘旨在研究中国本土槐猪和引入瘦肉型猪(杜洛克猪、大约克夏猪、长白猪)在生长育肥相关基因MC4R和MSTN、脊椎数量相关基因NR6A1和VRTN、肉质性状相关基因PHKG1和PRKAG3以及病原感染相关基因SYNGR2和FUT1这8个基因9个SNP位点的遗传变异特征。利用竞争性等位基因特异性PCR(KASP)和聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)方法对突变位点进行基因分型,根据原始文献对各位点进行有利等位基因判定,并制作各猪种在各位点有利等位基因和不利等位基因的百分比示意图。结果:槐猪在NR6A1基因突变位点存在一定多态性,有利等位基因频率为0.24,其他位点表现为单一基因型,其中,PHKG1、PRKAG3突变位点为有利等位基因,而在MC4R、MSTN、VRTN、SYNGR2和FUT1突变位点为不利等位基因;杜洛克猪在MC4R、NR6A1、VRTN、SYNGR2和FUT1突变位点有利等位基因占优,然而,PHKG1基因不利等位基因仍有一定的比例;大约克夏猪在MC4R、SYNGR2、NR6A1和VRTN基因突变位点有利等位基因占优,而其他位点为不利等位基因;长白猪在MC4R、MSTN、PRKAG3(p.Val249Ile)和SYNGR2这4个基因突变位点不利基因占优;杜洛克猪在VRTN基因、长白猪在MC4R基因突变位点处于遗传不平衡状态(P<0.05)。以上结果为槐猪品种保护与利用以及瘦肉型猪种分子遗传标记选育提供了有益的信息。
文摘本文旨在探究富含天冬氨酸尾1的单通道膜蛋白(Single-pass Membrane Protein With Aspartate Rich Tail1,Smdt1)对C3H10T1/2细胞增殖和成脂分化的调控效应。本研究将Smdt1基因的过表达和干扰载体转染至C3H10T1/2细胞模型,采用qPCR方法量化了增殖和成脂分化关键基因的表达水平变化,利用EdU染色检测细胞增殖活力,油红O染色方法鉴定脂滴积累的状态;进一步通过String database、Bio GRID、Int Act、GeneMANIA、DAVID和Genecard数据库构建Smdt1蛋白互作网络图。结果显示,在C3H10T1/2细胞中过表达Smdt1,极显著提升了增殖标志基因Pcna、Ki67、Cdk1及Cdk4的表达,EdU阳性细胞比例反映了细胞增殖速率加快;Smdt1极显著促进成脂分化关键基因Pparγ、Fabp4、-Adipoq的表达量,显著促进了Cebpα、Cebpβ的表达量,脂滴数量变多。在C3H10T1/2细胞体系中,干扰Smdt1,与增殖紧密相关的标志基因,包括Ki67、Pcna及Cdk1,其表达水平极显著降低,Cdk4的表达也呈现显著降低的趋势,反映在EdU增殖检测中,阳性细胞数量明显减少,细胞增殖活性受到抑制。进一步干扰Smdt1后,成脂分化途径的关键调控基因Cebpα、Pparγ、Cebpβ、Fabp4、Adipoq的表达均极显著降低,细胞内脂滴的数量也显著减少,细胞成脂分化能力削弱。蛋白功能预测发现,Smdt1能够与Mcu相互作用,参与线粒体钙离子转运、摄取和稳态。本研究发现Smdt1可以促进C3H10T1/2细胞增殖和成脂分化,为脂肪沉积的研究提供了新的方向。
