-
题名蜻蜓凤梨AfFT3基因克隆及功能鉴定
- 1
-
-
作者
荆永琳
王小冰
李俊国
陈浪欣
杨庆全
徐立
-
机构
中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所
农业农村部华南作物基因资源与种质创制重点实验室
海南省热带作物资源遗传改良与创新重点实验室
-
出处
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第2期411-421,共11页
-
基金
国家自然科学基金项目(31372106)
海南省自然科学基金项目(809195749021)。
-
文摘
【目的】克隆蜻蜓凤梨成花素基因AfFT3,并鉴定其生物学功能,为深入解析凤梨科植物开花分子机制提供理论依据。【方法】克隆AfFT3基因,利用生物信息学软件进行序列分析,并通过实时荧光定量PCR探究其在低温(18℃)、常温(25℃)和高温(35℃)及外源乙烯处理下的表达情况,采用农杆菌浸花法将AfFT3基因转入拟南芥,观察转基因植株表型,通过异源表达预测其生物学功能。通过酵母单杂交试验初步鉴定其启动子与AfEIN3蛋白的互作关系。【结果】从蜻蜓凤梨中克隆获得AfFT3基因全长570 bp,编码区(CDS)序列为465 bp,编码154个氨基酸残基,蛋白分子量为17.3 kD,为稳定的亲水性蛋白,无跨膜螺旋区,含有PKC、PKA、cdc2、INSR和GSK3等多个蛋白激酶磷酸化位点。同源序列比对发现,AfFT3蛋白中有2个氨基酸残基^(138)Trp和^(140)Gln突变为^(138)Met和^(140)Glu。系统发育分析结果显示,该蛋白属于PEBP家族的FT-like蛋白亚家族,与TFL-like亚家族的亲缘关系较近。与对照(大棚正常条件下栽培植株)相比,高温和低温处理下AfFT3基因在蜻蜓凤梨中的相对表达量显著(P<0.05,下同)或极显著(P<0.01,下同)升高。在高温、常温和低温条件下,使用外源乙烯处理后,AfFT3基因在蜻蜓凤梨中的相对表达量均较对照显著或极显著升高,在常温处理下其相对表达量最高。共获得6个转基因拟南芥株系(L_(1)~L_(6)),其中转基因株系L_(3)和L_(6)较转空载体拟南芥和野生型拟南芥延迟抽薹8 d。通过分段扩增获得AfFT3基因启动子3段序列(AfFT3-P1、AfFT3-P2和AfFT3-P3),长度分别为390、1077和552 bp,通过酵母单杂试验推测启动子序列AfFT3-P1和AfFT3-P3可与AfEIN3蛋白发生互作。【结论】高温、低温胁迫和乙烯均不同程度诱导AfFT3基因的高效表达,但在高温和低温条件下乙烯对AfFT3基因的表达诱导效果较常温有所降低,其转基因株系延迟抽薹,说明AfFT3基因参与调控蜻蜓凤梨开花过程,且响应温度和乙烯信号。
-
关键词
蜻蜓凤梨
AfFT3基因
开花
温度
乙烯
功能鉴定
启动子
-
Keywords
Aechmea fasciata(Lindl.)Baker
AfFT3 gene
flowering
temperature
ethylene
functional identifica‐tion
promoter
-
分类号
S668.303.6
[农业科学—果树学]
-
-
题名观赏凤梨嫩吸芽离体培养中褐化防止的初步研究
被引量：28
- 2
-
-
作者
周俊辉
王国彬
曾浩森
-
机构
仲恺农业技术学院园艺系
-
出处
《仲恺农业技术学院学报》
2000年第1期5-9,共5页
-
文摘
把观赏凤梨的嫩吸芽置于防褐剂中浸泡切割成薄片 ,于消毒剂中消毒 8～ 10min后置于防褐剂中浸泡 30min ,再接种到MS +BA 0 5mg/L +NAA 0 5mg/L的培养基上 ,置于黑暗条件下培养 试验结果表明 :质量分数为 0 0 2的NaClO消毒处理有加剧观赏凤梨嫩吸芽褐变的趋势 ,质量分数为 0 0 0 1的HgCl2 消毒处理对褐变的影响不大 观赏凤梨依据褐变的程度从重到轻排列为 :粉菠萝、水塔花、红星凤梨、七彩凤梨 所用防褐变药剂中AB1和AB2 对防止红星凤梨嫩吸芽褐变最有效 ,AB1浓度以 6 0 0～ 80 0mg/L防褐效果最好 ;AB2 则以 50 0 0mg/L防褐效果最好 ,2 0 0
-
关键词
观赏凤梨
嫩吸芽
离体培养
褐化防止
防褐剂
-
Keywords
ornamental pineapple
sucker
in vitro culture
browning
anti-browning
-
分类号
S668.303.6
[农业科学—果树学]
S682.04
[农业科学—观赏园艺]
-
