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八棱海棠中转录因子基因MrDREBA6的克隆及表达分析 被引量:14
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作者 付晓燕 彭日荷 +8 位作者 章镇 乔玉山 周军 朱波 高峰 田永生 赵伟 熊爱生 姚泉洪 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期761-768,共8页
DREB类基因是植物中重要的一类转录因子基因,其编码的产物广泛参与生长发育和各类生理过程。根据拟南芥和水稻DREB类基因序列,设计2个兼并引物,利用RACE法从八棱海棠cDNA文库中扩增出一编码DREB类转录因子的cDNA序列,命名为MrDREBA6。从... DREB类基因是植物中重要的一类转录因子基因,其编码的产物广泛参与生长发育和各类生理过程。根据拟南芥和水稻DREB类基因序列,设计2个兼并引物,利用RACE法从八棱海棠cDNA文库中扩增出一编码DREB类转录因子的cDNA序列,命名为MrDREBA6。从cDNA序列、推测的氨基酸序列、进化树、功能域和分子结构模型进行预测和较为全面的分析,表明MrDREBA6属于DREB类转录因子的A6亚族,蛋白质三级结构与AtRAP2.4和AtERF1相似。荧光定量PCR分析MrDREBA6在各种处理下表达水平显示,MrDREBA6受到PEG、ABA、高盐和低温的诱导表达。另外,组织表达特异性检测表明,正常生长条件下MrDREBA6基因在叶中表达较高,在根和茎中的表达量略低。 展开更多
关键词 八棱海棠 转录因子 RACE DREB类 荧光定量PCR
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珠美海棠叶片离体培养与植株再生 被引量:7
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作者 柴慈江 孙世海 +1 位作者 王玉 彭立新 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期124-128,共5页
将珠美海棠试管苗叶片接种于附加NAA 0.3 mg·L-1和不同体积分数的6-BA(1.0~6.0 mg·L-1)的MS培养基中进行离体培养,结果表明,6-BA为1.0~3.0 mg·L-1的处理芽再生率为6.7%~31.8%,而根的再生率为26.7%~28.3%。6-BA为4.5... 将珠美海棠试管苗叶片接种于附加NAA 0.3 mg·L-1和不同体积分数的6-BA(1.0~6.0 mg·L-1)的MS培养基中进行离体培养,结果表明,6-BA为1.0~3.0 mg·L-1的处理芽再生率为6.7%~31.8%,而根的再生率为26.7%~28.3%。6-BA为4.5和6.0 mg·L-1处理芽再生率分别高达80.0%和60.0%,根的再生率小于5%。继代培养60 d的珠美海棠试管苗叶片的芽再生率显著低于继代培养30 d的叶片。采用横切主脉的叶片切伤方式,其切口处芽的再生率及整个叶片芽的再生率均显著高于纵切主脉两侧叶片、横切主脉两侧叶片及横剪主脉两侧叶片等切伤方式。 展开更多
关键词 珠美海棠 叶片 离体培养 再生
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湖北海棠种内遗传变异的SRAP分析 被引量:9
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作者 郭大勇 徐育海 +1 位作者 张靖国 罗正荣 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期886-890,共5页
应用12对引物对33份湖北海棠样本进行了SRAP分析,每对引物产生4~13条谱带,多态性条带占总带数的91.225%;33个基因型的相似系数在0.5104~0.9271,表明湖北海棠种下具有较丰富的遗传多样性。应用UPGMA法聚类分析表明,在L=0.69时,33份供... 应用12对引物对33份湖北海棠样本进行了SRAP分析,每对引物产生4~13条谱带,多态性条带占总带数的91.225%;33个基因型的相似系数在0.5104~0.9271,表明湖北海棠种下具有较丰富的遗传多样性。应用UPGMA法聚类分析表明,在L=0.69时,33份供试材料分为5个组,在L=0.63时,分为3个组。主坐标分析显示,33种供试材料分为5个组,除一份材料外,其余材料分组与聚类分析L=0.69时分组情况相同。在聚类的同一组里,有不同来源地的湖北海棠样品,而在同一来源地的湖北海棠又有的不能聚在同一组,主坐标分析亦获得基本相同的结果,表明湖北海棠的遗传多样性与分布地域间没有对应关系,平邑甜茶或起源于神农架地区。部分材料相似系数较大,有几对甚至难以区分,而兴山35号却与其他类型差别明显大。 展开更多
关键词 湖北海棠 SRAP 亲缘关系
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树莓品种与牛叠肚及茅莓种间杂交研究 被引量:9
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作者 张莹莹 代汉萍 刘镇东 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期899-901,共3页
以5份树莓栽培品种(Rubus idaeus L.)和2份野生树莓牛叠肚(Rubus cratae gifoliusBge.)SM5、SM6及1份茅莓(R. parvifolius L.)SM2为亲本进行杂交试验,共配置12个杂交组合。结果表明,不同杂交组合的杂交结实率差异很大,Fall Golden×... 以5份树莓栽培品种(Rubus idaeus L.)和2份野生树莓牛叠肚(Rubus cratae gifoliusBge.)SM5、SM6及1份茅莓(R. parvifolius L.)SM2为亲本进行杂交试验,共配置12个杂交组合。结果表明,不同杂交组合的杂交结实率差异很大,Fall Golden×SM5、Fall Golden×SM6、Royalty×SM5、Royalty×SM6、SM2×Royalty、SM2×AutumnBliss、SM2×Heritage、V×SM6等8个杂交组合杂交结实率均为0,组合V×SM5、Heritage×SM2、Royalty×SM2、Autumn Bliss×SM2亲和性较好,杂交结实率分别为40.76%、53.06%、70.83%、100.00%,播种后,均得到杂种实生苗,但出苗率低于2.5%;重复授粉的方法可以提高树莓种间杂交结实率,延迟授粉则杂交结实率低。 展开更多
关键词 树莓 悬钩子属 种间杂交 杂交结实
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八棱海棠肌动蛋白基因(MrACT)的克隆及分析 被引量:5
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作者 徐锦涛 章镇 +7 位作者 彭日荷 熊爱生 刘金戈 周军 蔡斌 高峰 付晓燕 姚泉洪 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期289-292,共4页
以八棱海棠(Malus micromalus Makino)为材料,抽取RNA,反转录成cDNA。采用cDNA末端快速扩增(RACE)方法,5’-RACE获得长度1121bp的片段、3’-RACE获得883bp的片段,再通过设计引物扩增得到八棱海棠中一种肌动蛋白基因的cDNA的全长序列。... 以八棱海棠(Malus micromalus Makino)为材料,抽取RNA,反转录成cDNA。采用cDNA末端快速扩增(RACE)方法,5’-RACE获得长度1121bp的片段、3’-RACE获得883bp的片段,再通过设计引物扩增得到八棱海棠中一种肌动蛋白基因的cDNA的全长序列。该序列全长1134bp,推测其编码377个氨基酸,等电点为5.16,其编码的氨基酸与拟南芥(Arabidopsis thaliana)actin7编码的氨基酸只有2个氨基酸差别。通过对八棱海棠MrACT基因的表达分析,发现在不同组织中,该基因的表达水平没有明显差异,本文为进一步利用RT-PCR技术,以MrACT基因为内标,研究八棱海棠其他基因的丰度打好基础。 展开更多
关键词 八棱海棠 肌动蛋白基因 RACE 内标
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平邑甜茶后代双胚苗的倍性鉴定及核型分析 被引量:3
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作者 王颖 周攀 +2 位作者 魏鑫 王玉霞 董文轩 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期129-134,共6页
为了确定平邑甜茶双胚苗的倍性特征和核型特点,采用压片和流式细胞仪观测的方法对平邑甜茶后代中双胚苗进行染色体倍性观察和核型分析。结果表明:4株供试材料均为三倍体,2n=3x=51,染色体为小型,染色体长度比差异不大;核型组成由中部着... 为了确定平邑甜茶双胚苗的倍性特征和核型特点,采用压片和流式细胞仪观测的方法对平邑甜茶后代中双胚苗进行染色体倍性观察和核型分析。结果表明:4株供试材料均为三倍体,2n=3x=51,染色体为小型,染色体长度比差异不大;核型组成由中部着丝点染色体(m)和亚中部着丝点染色体(sm)组成;株系8-1、8-2、12-1和12-2的核型公式分别为2n=3x=45m+6sm,2n=3x=48m+3sm,2n=3x=27m+24sm,2n=3x=33m+18sm;染色体相对长度和着丝点指数的变异范围分别为1.21%~2.68%和34.19%~42.37%,1.44%~2.63%和35.59%~44.08%,1.36%~3.02%和32.85%~42.18%,1.43%~2.87%和34.23%~44.02%;核型分别属于1B、1A、2B和1B类型,表现为株系之间的核型不完全相同。本研究为丰富无融合生殖型砧木的育种理论,获得新的苹果无融合生殖型砧木提供有益的借鉴。 展开更多
关键词 平邑甜茶 双胚苗 染色体倍性 核型分析
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平邑甜茶MhWRKY15基因cDNA克隆及其生物信息学分析 被引量:3
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作者 孙晓莉 冉昆 +2 位作者 杨洪强 李强 姜倩倩 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期949-952,共4页
以平邑甜茶为材料,通过RT-PCR和RACE技术,获得平邑甜茶WRKY15基因的全长cDNA,命名为Mh-WRKY15(GenBank登陆号:GU576874)。生物信息学分析表明,该基因全长1 091 bp,包含810 bp的完整开放读码框,编码269个氨基酸,属于WRKY类转录因子的第II... 以平邑甜茶为材料,通过RT-PCR和RACE技术,获得平邑甜茶WRKY15基因的全长cDNA,命名为Mh-WRKY15(GenBank登陆号:GU576874)。生物信息学分析表明,该基因全长1 091 bp,包含810 bp的完整开放读码框,编码269个氨基酸,属于WRKY类转录因子的第II组,为WRKY15家族成员;其编码蛋白为可溶性蛋白,分子式为C1263H1941N365O425S12,相对分子量为29 423.2 ku,理论等电点为5.30;含有一个WRKY保守结构域,定位于细胞核,存在磷酸化、N糖基化和O糖基化位点,其二级结构主要以无规则卷曲为主。 展开更多
关键词 平邑甜茶 WRKY15 CDNA 生物信息学
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干旱胁迫下八棱海棠PCD特征检测及类caspase基因片段的克隆与分析 被引量:3
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作者 曹慧 程姣姣 +3 位作者 刘春香 李媛媛 邹岩梅 束怀瑞 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期525-529,I0001,共6页
【目的】为了探明类caspase蛋白酶参与植物PCD的机制,【方法】以八棱海棠(Malus robusta Rehd.)实生苗为试验材料,对植株进行轻度干旱胁迫,检测叶片PCD的发生,并应用RT-PCR技术克隆类caspase基因。【结果】结果表明,轻度干旱胁迫后3周... 【目的】为了探明类caspase蛋白酶参与植物PCD的机制,【方法】以八棱海棠(Malus robusta Rehd.)实生苗为试验材料,对植株进行轻度干旱胁迫,检测叶片PCD的发生,并应用RT-PCR技术克隆类caspase基因。【结果】结果表明,轻度干旱胁迫后3周的叶片出现细胞染色质凝聚、胞质皱缩、细胞核变形等细胞凋亡的形态学特征。提取叶片DNA,观察到DNA呈现明显的"DNA Ladder",表现出典型的细胞程序性死亡的生化特征。在此基础上提取叶片RNA,采用RT-PCR获得长度为555 bp的类caspase基因片段。【结论】经同源性分析该片段与其他果树的同源序列相似性超过80%,提示该区段为保守序列。比对苹果基因组,八棱海棠基因组中存在半胱氨酸蛋白酶基因,该基因为单拷贝,并且存在2个同源基因,这为揭示干旱胁迫下八棱海棠调控PCD的机理及环境适应的分子机制奠定了基础。 展开更多
关键词 八棱海棠 干旱胁迫 细胞程序性死亡 类caspase
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套袋对两个苹果品种果实香气成分的影响 被引量:6
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作者 刘珩 卢明艳 +4 位作者 王涛 孙守文 赵蕾 古丽米热 张东亚 《湖北农业科学》 2017年第20期3889-3893,共5页
为了解套袋对苹果品种新富1号(Malus domestica Borkh.cv.Xinfu No.1)、长富2号(M.domestica cv.Fuji Nagafu No.2)果实香气成分的影响。利用顶空固相微萃取和气相色谱-质谱联用技术,分别测定了套袋后2个苹果品种的香气成分。结果表明,... 为了解套袋对苹果品种新富1号(Malus domestica Borkh.cv.Xinfu No.1)、长富2号(M.domestica cv.Fuji Nagafu No.2)果实香气成分的影响。利用顶空固相微萃取和气相色谱-质谱联用技术,分别测定了套袋后2个苹果品种的香气成分。结果表明,2个富士苹果品种果实香气成分均以酯类和醇类化合物为主。在酯类化合物相对含量上,未套袋果实>套袋果实;在醇类化合物相对含量上,套袋果实>未套袋果实。新富1号果实香气成分以乙酸乙酯、乙酸丁酯、2-甲基乙酸丁酯、丁酸乙酯、乙酸己酯为主,长富2号果实香气成分以2-甲基乙酸丁酯、乙酸己酯、正戊酸己酯、2-甲基-1-丁醇、丁酸乙酯、丁酸丙酯、乙酸丁酯、2-甲基丁酸乙酯、丙酸乙酯为主,2个苹果品种的果实主要香气成分基本一致。不过套袋果实乙酸酯型香气成分相对含量均低于未套袋果实。 展开更多
关键词 苹果(Malus domestica Borkh.) 套袋 香气成分 品种比较
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小金海棠实生后代耐缺铁性状分离分析 被引量:7
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作者 徐连生 王磊 +4 位作者 王然 王忆 张新忠 许雪峰 韩振海 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期770-775,I0001,共7页
【目的】采用直接鉴定的方法,对四倍体小金海棠(高耐缺铁,兼性无融合生殖)×山定子(不耐缺铁)杂交后代实生群体中杂种、重组型无融合生殖及非重组型无融合生殖等不同倍性的后代单株的耐缺铁性状进行评价,对筛选高耐缺铁新种质和培... 【目的】采用直接鉴定的方法,对四倍体小金海棠(高耐缺铁,兼性无融合生殖)×山定子(不耐缺铁)杂交后代实生群体中杂种、重组型无融合生殖及非重组型无融合生殖等不同倍性的后代单株的耐缺铁性状进行评价,对筛选高耐缺铁新种质和培育抗缺铁砧木有重要的指导意义。【方法】通过观察叶片黄化情况以及测定铁含量和SPAD(土壤、作物分析仪器开发,Soil and Plant Analyzer Development)值,比较沙培-滴灌条件下小金海棠无融合生殖后代与小金海棠×山定子杂种后代的耐缺铁能力,并分析其分离情况。【结果】结果表明,小金海棠无融合生殖后代耐缺铁能力基本保持,但仍表现出与倍性相关的多样性分离;杂种后代耐缺铁能力不及无融合生殖后代,杂种后代中三倍体分离更广泛,出现耐缺铁后代比率更高;小金海棠耐缺铁性状为多基因控制的隐性性状。并筛选出若干优异的个体。【结论】小金海棠实生后代耐缺铁性状分离复杂,通过杂交育种得到兼有小金海棠与其他优良砧木品种优良性状的杂种可能性虽小却并非不可能。 展开更多
关键词 小金海棠 缺铁 无融合生殖 杂种 多倍体 黄化指数
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珠美海棠研究进展 被引量:4
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作者 孟晓烨 彭立新 《天津农学院学报》 CAS 2009年第4期42-46,共5页
珠美海棠抗逆性强,是改良利用盐碱地的优良资源,本文主要总结了其抗逆生理、繁殖、突变研究、分子标记、应用等方面的研究进展,并对今后的研究方向提出了建议。
关键词 珠美海棠 抗逆生理 组培繁殖
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珠美海棠叶片总RNA提取方法的比较 被引量:1
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作者 孟晓烨 李慧 +1 位作者 任健 彭立新 《天津农学院学报》 CAS 2010年第2期7-10,共4页
珠美海棠(Malus zumi)为多年生木本植物,组织中含有大量的多酚、多糖和蛋白质等物质,给总RNA的提取带来困难。本试验使用RNeasy Plant Mini Kit试剂盒、Trizol法、SDS法和改良CTAB法提取珠美海棠叶片总RNA,并用凝胶电泳和RT-PCR技术比较... 珠美海棠(Malus zumi)为多年生木本植物,组织中含有大量的多酚、多糖和蛋白质等物质,给总RNA的提取带来困难。本试验使用RNeasy Plant Mini Kit试剂盒、Trizol法、SDS法和改良CTAB法提取珠美海棠叶片总RNA,并用凝胶电泳和RT-PCR技术比较了4种不同方法提取的总RNA样品的质量,认为提取珠美海棠叶片总RNA的最佳方法为改良CTAB法。 展开更多
关键词 珠美海棠 总RNA 提取方法 CTAB
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红富士苹果郁闭园树体改造措施
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作者 尹立府 都灵芝 +2 位作者 韩占喜 宋海荣 陈秀英 《河北果树》 1997年第4期17-18,共2页
红富士苹果郁闭园树体改造措施@尹立府@都灵芝@韩占喜¥河北省阜城县苗圃场@宋海荣@陈秀英¥阜城县林业局红富士苹果郁闭园树体改造措施尹立府都灵芝韩占喜(河北省阜城县苗圃场053700)宋海荣陈秀英(阜城县林业局)阜城县... 红富士苹果郁闭园树体改造措施@尹立府@都灵芝@韩占喜¥河北省阜城县苗圃场@宋海荣@陈秀英¥阜城县林业局红富士苹果郁闭园树体改造措施尹立府都灵芝韩占喜(河北省阜城县苗圃场053700)宋海荣陈秀英(阜城县林业局)阜城县80年代中期发展红富士、红星等苹果150... 展开更多
关键词 苹果 红富士 郁闭园 树体 改造
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