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表达狂犬病毒糖蛋白和核蛋白的重组腺病毒的生物学特性及免疫研究 被引量:1
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作者 殷相平 李志勇 +5 位作者 李江涛 李宝玉 兰喜 杨彬 李学瑞 柳纪省 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期19-24,共6页
对狂犬病毒G+N双基因复制缺陷型腺病毒穿梭载体进行转染,以获得融合表过狂犬病毒糖蛋白和核蛋白重组腺病毒,并对其进行生物学特性和免疫学研究.结果表明:将含有狂犬病毒G+N的重组穿梭质粒pAdTrack-CMV/G+N与腺病毒骨架载体pAdEasy-1在... 对狂犬病毒G+N双基因复制缺陷型腺病毒穿梭载体进行转染,以获得融合表过狂犬病毒糖蛋白和核蛋白重组腺病毒,并对其进行生物学特性和免疫学研究.结果表明:将含有狂犬病毒G+N的重组穿梭质粒pAdTrack-CMV/G+N与腺病毒骨架载体pAdEasy-1在大肠杆菌细胞内同源重组,可获得带有目的基因的重组腺病毒载体pAd/G+N,经PacI酶切后转染HEK-293细胞,可获得带有目的基因的重组腺病毒.重组腺病毒在HEK-293细胞中连续传代15代次后,在细胞内的病变时间缩短为20 h以内.经测定,重组腺病毒对HEK-293细胞的TCID50为10-8.0.mL-1,用RT-PCR法可检测到狂犬病毒糖蛋白和核蛋白基因片段;重组腺病毒经口服免疫小白鼠,对狂犬病毒CVS毒株的免疫保护率可达80%. 展开更多
关键词 狂犬病毒 重组腺病毒 生物学特性 免疫
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蚊浓核病毒的研究进展 被引量:1
2
作者 顾金保 陈晓光 《热带医学杂志》 CAS 2008年第8期869-872,共4页
蚊浓核病毒是一类可以特异性感染蚊类的病原体,感染蚊类后可引起宿主特征性的细胞核致密增生病变,并可最终导致宿主发病或死亡。本文对近年蚊浓核病毒的生物学、分子生物学、病原学等研究进展作一综述,并对其发展为蚊类生物杀虫剂用于... 蚊浓核病毒是一类可以特异性感染蚊类的病原体,感染蚊类后可引起宿主特征性的细胞核致密增生病变,并可最终导致宿主发病或死亡。本文对近年蚊浓核病毒的生物学、分子生物学、病原学等研究进展作一综述,并对其发展为蚊类生物杀虫剂用于蚊媒防治进行展望。 展开更多
关键词 蚊浓核病毒 细小病毒 蚊媒防治
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南京地区犬细小病毒病流行病学调查 被引量:1
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作者 方光远 樊金云 +4 位作者 金海燕 黄心昱 陈俊红 王楠楠 戴鼎震 《金陵科技学院学报》 2020年第3期73-76,共4页
犬细小病毒病是犬的一种高度接触性病毒性传染病,由犬细小病毒感染引起。从季节以及犬年龄、体型、品种和性别5个角度,对南京某宠物医院2013年12月1日—2019年11月30日6年间诊断的678例犬细小病毒病病例进行了统计分析。结果表明:犬细... 犬细小病毒病是犬的一种高度接触性病毒性传染病,由犬细小病毒感染引起。从季节以及犬年龄、体型、品种和性别5个角度,对南京某宠物医院2013年12月1日—2019年11月30日6年间诊断的678例犬细小病毒病病例进行了统计分析。结果表明:犬细小病毒病发病率较高的季节为春秋冬季节,其中春季为28.2%,秋季为28%;主要发病年龄集中在犬1~6月龄,发病率为82.8%;发病率较高的是中、小型品种犬,发病率为84.6%;外来品种犬对该病易感,发病率为63.7%;公犬对该病易感性较高,发病率为61%。对犬细小病毒病提出了具体的防控措施。 展开更多
关键词 犬细小病毒病 发病率 流行病学调查 防控
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RT-PCR快速检测牛病毒性腹泻病毒方法的建立与应用 被引量:7
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作者 张俭伟 赵宏坤 +3 位作者 杨少华 高运东 王长法 仲跻峰 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期368-370,共3页
根据已发表的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)5'-UTR序列,设计1对特异性引物,建立了快速检测BVDV的RT-PCR方法。利用该方法能从BVDV中扩增出196bp特异性目的片段。应用此方法检测了26份疑似病例临床样品,14份为阳性。试验表明,该方法特异性... 根据已发表的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)5'-UTR序列,设计1对特异性引物,建立了快速检测BVDV的RT-PCR方法。利用该方法能从BVDV中扩增出196bp特异性目的片段。应用此方法检测了26份疑似病例临床样品,14份为阳性。试验表明,该方法特异性强、敏感性好,能检测到1pg的病毒RNA,是一种快速准确的检测方法。 展开更多
关键词 RT-PCR 牛病毒性腹泻病毒 检测
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羊口疮病毒ORF019基因的克隆及表达 被引量:3
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作者 沈岩尔 贾怀杰 +5 位作者 王晓霞 陈国华 何小兵 房永祥 薛慧文 景志忠 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1-7,共7页
【目的】克隆、分析羊口疮病毒(ORFV)的ORF019基因,进而表达、纯化和鉴定重组表达产物.【方法】根据GenBank登录的ORFV OV-SA00株(AY386264)E2L基因序列设计1对引物,以提取的ORFV/QH02/2010株基因组DNA为模板,通过PCR获得该毒株的ORF01... 【目的】克隆、分析羊口疮病毒(ORFV)的ORF019基因,进而表达、纯化和鉴定重组表达产物.【方法】根据GenBank登录的ORFV OV-SA00株(AY386264)E2L基因序列设计1对引物,以提取的ORFV/QH02/2010株基因组DNA为模板,通过PCR获得该毒株的ORF019基因,将该基因连接至原核表达载体pET-32a(+)上,获得重组质粒pET-32a-ORF019,并对其测序,测序结果与副痘病毒属及其脊椎动物痘病毒亚科代表毒株的E2L蛋白进行一致性分析;并转化BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导获得重组融合蛋白,用SDS-PAGE和Western-blot对表达的目的蛋白进行分析.【结果】成功获得重组质粒pET-32a-ORF019,读码框正确;生物信息学分析发现,ORF019基因在副痘病毒属各成员间高度保守,也在脊椎动物痘病毒亚科痘病毒的遗传进化过程中保留了相对稳定的氨基酸残基;获得了约100 ku的融合蛋白表达产物,并以包涵体的形式存在于宿主菌.【结论】成功对ORFV019基因进行系统的遗传演化分析,并利用原核表达系统获得了重组表达产物. 展开更多
关键词 羊口疮病毒 ORF019基因 进化分析 原核表达 纯化
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免疫层析试纸条检测口蹄疫非结构蛋白3ABC抗体的研究 被引量:1
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作者 张喜悦 徐天刚 +4 位作者 刘春菊 赵永刚 冯娟 赵云玲 王志亮 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期532-535,共4页
为建立口蹄疫(FMD)快速检测方法,本研究以纯化的FMD病毒(FMDV)非结构蛋白(NSP)3ABC作为捕捉抗原,金标FMDV抗原作为金标试剂,建立了检测FMDNSP3ABC抗体的胶体金免疫层析试纸条(ICS)。应用FMDICS试验与UBIFMDNSP酶联免疫吸附试验(ELISA)... 为建立口蹄疫(FMD)快速检测方法,本研究以纯化的FMD病毒(FMDV)非结构蛋白(NSP)3ABC作为捕捉抗原,金标FMDV抗原作为金标试剂,建立了检测FMDNSP3ABC抗体的胶体金免疫层析试纸条(ICS)。应用FMDICS试验与UBIFMDNSP酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒对反刍动物、猪的FMD标准阳性血清的不同滴度进行测定,结果表明ICS在检测反刍动物血清时的检测下限(1∶64)与ELISA(1∶128)接近,而检测猪血清时的检测下限(1∶8)低于UBINSP-ELISA试剂盒(1∶64)。同时用ICS和UBINSP-ELISA检测313份牛血清和111份羊血清,结果ICS检测牛血清时的敏感性和特异性分别为81.81%和96.69%,检测羊血清时敏感性和特异性分别为88.88%和95.10%;ICS与UBINSP-ELISA用于检测牛血清时符合率为95.52%,用于检测羊血清时的符合率为94.59%。结果表明ICS适合在基层单位或养殖场进行自行检测。 展开更多
关键词 免疫层析试纸条 口蹄疫 非结构蛋白 抗体
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病毒类基因工程疫苗研究进展 被引量:1
7
作者 李洪珊 李殿玉 +1 位作者 李向茸 冯若飞 《西北民族大学学报(自然科学版)》 2024年第1期40-53,共14页
疫苗接种被认为是控制病原体和预防人类以及动物疾病最有效的方法之一.近年来由于病毒性疾病来势汹汹,传统疫苗如灭活或减毒活疫苗的局限性及潜在问题日益突显,而基因工程技术的进步使得疫苗设计和研发得以改进,由此衍生的病毒类基因工... 疫苗接种被认为是控制病原体和预防人类以及动物疾病最有效的方法之一.近年来由于病毒性疾病来势汹汹,传统疫苗如灭活或减毒活疫苗的局限性及潜在问题日益突显,而基因工程技术的进步使得疫苗设计和研发得以改进,由此衍生的病毒类基因工程疫苗作为下一代疫苗越来越受到研究者的高度关注.通过病毒类基因工程疫苗的类型,重点介绍不同疫苗的开发原理、特点及用途,探讨其应用前景和发展趋势,旨在为新发病毒类疾病疫苗的研发提供参考. 展开更多
关键词 病原体 基因工程技术 亚单位疫苗 病毒载体疫苗 核酸疫苗
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流行性出血热病毒人工感染家猪的实验研究
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作者 杨占清 刘运喜 +8 位作者 孟祥瑞 肖杰传 于晓敏 张云 陶开华 张炳根 刘景山 张允湘 何东平 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第1期52-53,共2页
流行性出血热病毒人工感染家猪的实验研究杨占清,刘运喜,孟祥瑞,肖杰传,于晓敏,张云,陶开华,张炳根刘景山,张允湘,何东平1988年笔者从家猪肺分离到流行性出血热(EHF)病毒,并且流行病学调查表明家猪带毒率与人群发病... 流行性出血热病毒人工感染家猪的实验研究杨占清,刘运喜,孟祥瑞,肖杰传,于晓敏,张云,陶开华,张炳根刘景山,张允湘,何东平1988年笔者从家猪肺分离到流行性出血热(EHF)病毒,并且流行病学调查表明家猪带毒率与人群发病呈相关关系。为进一步证实家猪能否作... 展开更多
关键词 流行性出血热 病毒 家猪 人工感染
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