目的:为了获得功能基因的信息,构建烤烟品种南江3号的均一化cDNA文库。方法:用RNeasy Plant Mini Kit提取烤烟南江3号叶片和花的RNA,用反转录酶逆转录合成第一链cDNA。以LD-PCR扩增获得的双链cDNA为模板,采用基于双链特异性核酸酶(Duple...目的:为了获得功能基因的信息,构建烤烟品种南江3号的均一化cDNA文库。方法:用RNeasy Plant Mini Kit提取烤烟南江3号叶片和花的RNA,用反转录酶逆转录合成第一链cDNA。以LD-PCR扩增获得的双链cDNA为模板,采用基于双链特异性核酸酶(Duplex-Specific Nuclease,DSN)的均一化cDNA文库技术,构建南江3号盛花期的均一化cDNA文库。结果:构建了南江3号盛花期的均一化cDNA文库,文库重组率大为97.47%,库容量约为1.26×106,插入片段平均长度大于1.2kb。从文库中随机48个克隆进行PCR检测,挑取20个克隆进行测序,序列通过BLAST比对结果显示文库可能包含大量基因和ESTs序列。结论:该文库为研究南江3号的基因功能和资源提供材料来源。展开更多
文摘目的:为了获得功能基因的信息,构建烤烟品种南江3号的均一化cDNA文库。方法:用RNeasy Plant Mini Kit提取烤烟南江3号叶片和花的RNA,用反转录酶逆转录合成第一链cDNA。以LD-PCR扩增获得的双链cDNA为模板,采用基于双链特异性核酸酶(Duplex-Specific Nuclease,DSN)的均一化cDNA文库技术,构建南江3号盛花期的均一化cDNA文库。结果:构建了南江3号盛花期的均一化cDNA文库,文库重组率大为97.47%,库容量约为1.26×106,插入片段平均长度大于1.2kb。从文库中随机48个克隆进行PCR检测,挑取20个克隆进行测序,序列通过BLAST比对结果显示文库可能包含大量基因和ESTs序列。结论:该文库为研究南江3号的基因功能和资源提供材料来源。
