为研究多花黄精(Polygonatum cyrtonema)脱水反应元件结合蛋白(dehydration responsive element binding,DREB)基因家族的功能,基于多花黄精不同组织器官转录组、全长转录组数据对DREB家族成员进行鉴定,同时对其蛋白理化性质、系统进化...为研究多花黄精(Polygonatum cyrtonema)脱水反应元件结合蛋白(dehydration responsive element binding,DREB)基因家族的功能,基于多花黄精不同组织器官转录组、全长转录组数据对DREB家族成员进行鉴定,同时对其蛋白理化性质、系统进化特征、保守基序和蛋白结构进行分析;并结合FPKM值及qRT-PCR分析在不同器官、盐胁迫和PEG-6000模拟干旱胁迫下的表达量;通过农杆菌介导法转化洋葱,进行PcDREB10亚细胞定位;利用发根农杆菌诱导多花黄精毛状根,利用qRT-PCR分析过表达PcDREB10盐胁迫后PcDREB10/12/27的表达情况。研究结果表明:多花黄精DREB家族有35个成员,命名为PcDREB1~PcDREB35,均为亲水蛋白,且稳定性较低。PcDREB家族成员在不同器官中的表达不一致,具有组织特异性,且在盐胁迫及干旱胁迫下表达模式不同。亚细胞定位结果显示PcDREB10在细胞核上。发根农杆菌介导的过表达PcDREB10后,经高盐溶液处理,根系中PcDREB10/27上调表达,而PcDREB12下调表达,提示PcDREB10/12/27在多花黄精抵御盐胁迫的过程中可能发挥不同作用。展开更多
文摘为研究多花黄精(Polygonatum cyrtonema)脱水反应元件结合蛋白(dehydration responsive element binding,DREB)基因家族的功能,基于多花黄精不同组织器官转录组、全长转录组数据对DREB家族成员进行鉴定,同时对其蛋白理化性质、系统进化特征、保守基序和蛋白结构进行分析;并结合FPKM值及qRT-PCR分析在不同器官、盐胁迫和PEG-6000模拟干旱胁迫下的表达量;通过农杆菌介导法转化洋葱,进行PcDREB10亚细胞定位;利用发根农杆菌诱导多花黄精毛状根,利用qRT-PCR分析过表达PcDREB10盐胁迫后PcDREB10/12/27的表达情况。研究结果表明:多花黄精DREB家族有35个成员,命名为PcDREB1~PcDREB35,均为亲水蛋白,且稳定性较低。PcDREB家族成员在不同器官中的表达不一致,具有组织特异性,且在盐胁迫及干旱胁迫下表达模式不同。亚细胞定位结果显示PcDREB10在细胞核上。发根农杆菌介导的过表达PcDREB10后,经高盐溶液处理,根系中PcDREB10/27上调表达,而PcDREB12下调表达,提示PcDREB10/12/27在多花黄精抵御盐胁迫的过程中可能发挥不同作用。