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菊苣ANS基因的克隆及表达分析
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作者 冯清香 朱哈修 +6 位作者 杜洋 徐艳茹 王晨晨 刘雪 李大勇 周军 张彬 《华北农学报》 北大核心 2025年第3期51-59,共9页
花青素合酶(ANS)是植物花青素合成过程中的关键酶,可以将无色的花色苷催化成红色、橙色、蓝色等不同颜色的花青素。为了探究ANS基因调控菊苣叶色的分子机制,首先对该基因进行生物信息学分析,随后选取红色结球型菊苣(印地欧)和绿色菊苣(... 花青素合酶(ANS)是植物花青素合成过程中的关键酶,可以将无色的花色苷催化成红色、橙色、蓝色等不同颜色的花青素。为了探究ANS基因调控菊苣叶色的分子机制,首先对该基因进行生物信息学分析,随后选取红色结球型菊苣(印地欧)和绿色菊苣(普那)为材料,克隆得到菊苣ANS基因(CiANS),并对该基因在这2个材料中的氨基酸序列及蛋白结构进行了差异分析,最后对ANS基因的组织特异表达和蛋白的亚细胞定位进行了检测,并对ANS蛋白进行了原核表达。结果显示,CiANS与莴苣及栽培菊苣的ANS亲缘关系最近,Motif分析发现,CiANS蛋白基序在不同植物中均较为保守。2种菊苣中ANS的克隆结果表明,ANS基因全长均为1068 bp,编码355个氨基酸,具有9个差异氨基酸,但在预测的三级结构上并未表现出明显的差异。qRT-PCR结果显示,CiANS基因在不同组织中均有表达,但在叶片中表达量最高,并且红色的结球菊苣中CiANS基因的表达水平显著高于绿色的普那菊苣。亚细胞定位结果显示,CiANS蛋白定位于细胞质和细胞核中。CiANS蛋白在原核载体上诱导表达后大小共为45 ku,与预期蛋白大小一致。综上所述,菊苣叶色差异的形成很可能与ANS基因的表达量差异有关,研究结果为解析菊苣叶色分子调控网络及花青素代谢遗传改良提供了理论依据。 展开更多
关键词 菊苣 花青素合酶 表达分析 亚细胞定位 原核表达
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不同花色绿绒蒿DFR基因克隆及表达分析 被引量:3
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作者 王海菊 陈晓涓 +2 位作者 李拓键 罗军 屈燕 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2024年第3期88-95,共8页
二氢黄酮4-还原酶(DFR)是花青素合成通路中的关键酶,其表达与花青素积累紧密相关,影响花朵呈色。为了探究DFR基因与绿绒蒿花色形成的关系,以红色的红花绿绒蒿和黄色的全缘叶绿绒蒿为试验材料,使用RT-PCR技术成功从中克隆出DFR基因,并对... 二氢黄酮4-还原酶(DFR)是花青素合成通路中的关键酶,其表达与花青素积累紧密相关,影响花朵呈色。为了探究DFR基因与绿绒蒿花色形成的关系,以红色的红花绿绒蒿和黄色的全缘叶绿绒蒿为试验材料,使用RT-PCR技术成功从中克隆出DFR基因,并对其进行生物信息学及RT-qPCR分析。结果显示,2种绿绒蒿DFR基因的cDNA全长为1 131,1 125 bp,分别编码376,374个氨基酸,命名为MpDFR、MiDFR。生物信息学分析发现,2种蛋白均属于亲水性蛋白,且具有DFR特有的NADPH结合结构域和底物特异性结合结构域。系统进化树表明,MpDFR、MiDFR蛋白与鸦片罂粟、沉水樟、三枝九叶草、澳洲坚果、蒂罗花的亲缘关系最近。Motif分析发现,DFR蛋白基序在不同植物中均较为保守。RT-qPCR结果显示,MpDFR、MiDFR在不同组织中均有表达,具有组织特异性。花蕾期中MpDFR、MiDFR基因表达量最高,且显著高于其他2个时期。另外,红花绿绒蒿中DFR表达量均高于全缘叶绿绒蒿。结合西南林业大学屈燕课题组研究发现,这2种绿绒蒿中花青素类化合物的积累模式与DFR基因的表达模式一致,所以,研究花青素生物合成途径中的关键结构基因DFR对于了解该途径以及通过基因工程手段改良植物花色均十分重要。 展开更多
关键词 红花绿绒蒿 全缘叶绿绒蒿 二氢黄酮4-还原酶 基因克隆 表达分析
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铁皮石斛原球茎增殖的培养条件研究 被引量:79
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作者 张治国 刘骅 +4 位作者 王黎 蔡志光 韩献忠 赵立红 罗紫娟 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 1992年第8期431-433,共3页
关键词 铁皮石斛 原球茎 培养 石斛 繁殖
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牡丹SCoT分子标记正交优化及引物筛选 被引量:44
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作者 侯小改 王娟 +3 位作者 贾甜 张钰乾 侯娟 李嘉珏 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2011年第5期92-96,共5页
以牡丹基因组DNA为模板,采用L16(45)正交试验设计对影响目标起始密码子多态性-聚合酶链式反应(SCoT-PCR)的五因素(Taq酶用量、Mg2+浓度、模板DNA用量、dNTPs浓度和引物浓度)进行优化试验,建立了优化的牡丹SCoT-PCR反应体系:Mg2+2.50 mmo... 以牡丹基因组DNA为模板,采用L16(45)正交试验设计对影响目标起始密码子多态性-聚合酶链式反应(SCoT-PCR)的五因素(Taq酶用量、Mg2+浓度、模板DNA用量、dNTPs浓度和引物浓度)进行优化试验,建立了优化的牡丹SCoT-PCR反应体系:Mg2+2.50 mmol/L、dNTPs 0.25 mmol/L、引物0.60μmol/L、Taq DNA聚合酶0.50 U、模板DNA 1.00 ng/μL,1×PCR-Buffer,总体积20.00μL。比较各因素对扩增反应的结果,其中以Mg2+浓度的影响最大,DNA模板用量的影响最小。运用牡丹17个品种验证了该体系稳定可靠,并从36个SCoT引物中筛选出扩增条带清晰、多态性丰富的24个引物。这一体系的建立及多态性引物的筛选为今后利用SCoT标记技术对牡丹进行相关研究提供了科学依据。 展开更多
关键词 牡丹 SCoT-PCR 反应体系 正交设计 引物筛选
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空间条件对红花种子发芽的影响 被引量:20
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作者 高文远 赵淑平 +5 位作者 薛岚 肖培根 李向高 祁章年 陈湄 汪恭质 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期135-138,共4页
目的:探讨空间环境对药用植物生长发育的影响。方法:以红花种子为材料,搭载返回式卫星,经空间飞行完成后在地面进行种子发芽的观察,同时用电泳方法检测种子的过氧化物酶、酯酶和可溶性蛋白质图谱。结果:空间飞行各组种子材料的平... 目的:探讨空间环境对药用植物生长发育的影响。方法:以红花种子为材料,搭载返回式卫星,经空间飞行完成后在地面进行种子发芽的观察,同时用电泳方法检测种子的过氧化物酶、酯酶和可溶性蛋白质图谱。结果:空间飞行各组种子材料的平均发芽率高于地面对照组。飞行材料的过氧化物酶活性也高于地面对照组。飞行与地面材料的同工酶和蛋白质电泳图谱在种子发芽阶段略有变化,但绝大多数谱带一致。结论:空间环境的微重力和辐射对红花种子发芽均有影响,但它们在种子发芽阶段对基因表达影响不十分明显。失重可能与造成过氧化物酶活性升高的重要因素有关。 展开更多
关键词 红花 空间飞行 发芽 电泳 种子 药用植物
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葛根SCoT-PCR反应体系优化及引物筛选 被引量:19
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作者 尚小红 严华兵 +4 位作者 曹升 张尚文 谢向誉 王艳 欧昆鹏 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期1-7,共7页
【目的】优化葛根SCoT-PCR反应体系,筛选适用于葛根的SCoT引物,为利用SCoT分子标记进行葛根种质资源鉴定、遗传多样性分析及分子标记辅助育种提供技术支持。【方法】采用正交设计对SCoT-PCR反应体系中的DNA模板量、dNTPs浓度、Mg^(2+)... 【目的】优化葛根SCoT-PCR反应体系,筛选适用于葛根的SCoT引物,为利用SCoT分子标记进行葛根种质资源鉴定、遗传多样性分析及分子标记辅助育种提供技术支持。【方法】采用正交设计对SCoT-PCR反应体系中的DNA模板量、dNTPs浓度、Mg^(2+)浓度、Taq DNA聚合酶量和引物浓度5个因素进行优化,利用最佳SCoT-PCR反应体系筛选出适用于葛根的SCoT引物,并对该体系进行验证。【结果】最佳葛根SCoT-PCR反应体系20.00μL:DNA模板50.00 ng,dNTPs 0.25 mmol/L,Mg^(2+)1.50 mmol/L,引物0.80μmol/L,Taq DNA聚合酶0.50 U。利用该体系从36条SCoT引物中筛选出35条可从葛根中扩增出清晰条带的引物。使用3条引物对18个葛根材料进行PCR扩增,PCR产物表现出良好的重复性、稳定性和丰富的多态性。【结论】建立的最佳葛根SCoT-PCR反应体系和筛选获得的35条SCoT引物可适用于葛根种质资种鉴定、遗传多样性分析、相关分子标记开发等研究。 展开更多
关键词 葛根 SCoT-PCR 反应体系优化 引物筛选
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金线莲的快速繁殖 被引量:30
7
作者 毛碧增 娄沂春 +2 位作者 蔡素琴 梁五生 李德葆 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期527-528,共2页
关键词 金线莲 繁殖 快速繁殖
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枸杞LbaHY5基因克隆、亚细胞定位及表达分析
8
作者 赵安琪 尹跃 +3 位作者 何军 安巍 秦小雅 胡体旭 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2024年第6期76-83,共8页
为研究枸杞LbaHY5基因的性质及功能,探明LbaHY5在枸杞果实发育中的作用,以宁夏枸杞宁杞1号为试材,采用生物信息学、亚细胞定位及qRT-PCR等方法对LbaHY5的结构和功能进行初步分析,结果表明:LbaHY5开放阅读框全长为483 bp,编码160个氨基酸... 为研究枸杞LbaHY5基因的性质及功能,探明LbaHY5在枸杞果实发育中的作用,以宁夏枸杞宁杞1号为试材,采用生物信息学、亚细胞定位及qRT-PCR等方法对LbaHY5的结构和功能进行初步分析,结果表明:LbaHY5开放阅读框全长为483 bp,编码160个氨基酸,分子质量为17.52 ku,等电点为9.69,属于亲水性蛋白。保守结构和多序列比对分析显示,LbaHY5蛋白含有bZIP结构域,属于bZIP家族成员。进化树分析表明,枸杞LbaHY5蛋白与茄科植物如番茄、马铃薯等的HY5蛋白高度同源。此外,启动子分析表明,该基因启动子区域富含多种功能元件,这些元件分别与光信号、激素信号以及非生物胁迫应答等过程相关。亚细胞定位结果显示,LbaHY5蛋白定位在细胞核上。qRT-PCR检测发现,LbaHY5基因在花中表达量最高,茎中最低,且在果实发育时期表达量呈现逐渐上升趋势。研究表明LbaHY5可能参与枸杞花器官和果实生长发育。 展开更多
关键词 枸杞 LbaHY5基因 基因克隆 亚细胞定位 表达分析
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KT和NAA对铁皮石斛带芽茎段生长发育的影响 被引量:11
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作者 洪森荣 肖波 江静 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2012年第1期55-56,共2页
探讨不同浓度KT和NAA对铁皮石斛带芽茎段生长发育的影响。结果表明:MS培养基有利于铁皮石斛带芽茎段根的分化,MS+KT 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基对铁皮石斛带芽茎段芽和叶的分化均有促进作用。
关键词 KT NAA 铁皮石斛 带芽茎段 生长发育
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杂交元胡新品种选育的研究 被引量:3
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作者 徐昭玺 李艾莲 +4 位作者 王丽华 朱敏 周远鹏 江京莉 魏建和 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 1993年第11期593-595,613,共4页
新品种杂交元胡是由正品浙江元胡与野生齿瓣元胡杂交后,利用无性繁殖固定其杂种优势,经单株选育而成。它综合了瓣元胡块茎大、生长旺盛,浙江元胡有效成分含量高、繁殖较快的优点,单位面积产量比浙江元胡提高50%以上。药理试验表... 新品种杂交元胡是由正品浙江元胡与野生齿瓣元胡杂交后,利用无性繁殖固定其杂种优势,经单株选育而成。它综合了瓣元胡块茎大、生长旺盛,浙江元胡有效成分含量高、繁殖较快的优点,单位面积产量比浙江元胡提高50%以上。药理试验表明抗炎、镇痛等主要作用与正品浙江元胡相似,且适应北方载培,填补了元胡在北方无当地品种的空白,为元胡在北方就地生产,就地应用提供了良种。 展开更多
关键词 元胡 品种 选择 育种
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苦豆子不同外植体愈伤组织的诱导研究 被引量:1
11
作者 贝盏临 张欣 +3 位作者 曹君迈 雷茜 王茂成 罗禄军 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2012年第1期61-62,共2页
以苦豆子的茎尖、茎、根、上胚轴、下胚轴、胚根为外植体,以MS附加不同激素配比的培养基为基质,进行了诱导苦豆子愈伤组织的适宜外植体及培养条件的筛选。确定出苦豆子诱导愈伤组织的最佳外植体为胚根,最佳培养基为MS,适宜的细胞生长素2... 以苦豆子的茎尖、茎、根、上胚轴、下胚轴、胚根为外植体,以MS附加不同激素配比的培养基为基质,进行了诱导苦豆子愈伤组织的适宜外植体及培养条件的筛选。确定出苦豆子诱导愈伤组织的最佳外植体为胚根,最佳培养基为MS,适宜的细胞生长素2,4-D浓度范围为1.2~2.0 g/L,适宜的6-BA浓度为0.16 g/L。 展开更多
关键词 苦豆子 外植体 愈伤组织
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灵芝LaeA基因的电子克隆、表达及生物信息学分析
12
作者 贺望兴 李文金 +5 位作者 蒋咏梅 童忠飞 陈华玲 李延升 谢小群 李琛 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2024年第2期47-54,共8页
为通过电子克隆得到灵芝LaeA基因序列,分析其基因序列信息,并初步探究其调控功能。采用电子克隆的方法,以已知桔青霉的LaeA蛋白序列为模板,在灵芝的EST数据库中进行序列相似性搜索比对(Blast),经序列拼接、序列验证和序列延伸等电子克... 为通过电子克隆得到灵芝LaeA基因序列,分析其基因序列信息,并初步探究其调控功能。采用电子克隆的方法,以已知桔青霉的LaeA蛋白序列为模板,在灵芝的EST数据库中进行序列相似性搜索比对(Blast),经序列拼接、序列验证和序列延伸等电子克隆方法获得灵芝LaeA基因的cDNA序列;采用生物信息学软件对LaeA基因编码蛋白质的基本理化性质、疏水性/亲水性、亚细胞定位、信号肽、二级结构、三级结构及进化关系等方面进行了预测和分析。结果表明,LaeA基因全长1 134 bp,编码378个氨基酸,蛋白分子质量为42.895 3 ku,存在于细胞质中,是亲水性蛋白;LaeA蛋白结构主要由47.88%无规则卷曲、33.33%α-螺旋和18.78%延伸链组成,有S-腺苷甲硫氨酸结合位点,属于AdoMet_MTases超家族蛋白;系统进化分析结果显示,LaeA蛋白与云芝、污叉丝孔菌等白腐担子菌类的亲缘关系较为亲近;qRT-PCR结果表明,LaeA基因在灵芝细胞液体静置培养过程中的表达量显著高于振荡培养方式。推测LaeA蛋白作为1种甲基转移酶蛋白,通过参与组蛋白的甲基化修饰,进而影响基因簇的表达水平。 展开更多
关键词 灵芝 LAEA 电子克隆 生物信息学
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山东地区药用植物染色体数目的观察(Ⅱ) 被引量:4
13
作者 葛传吉 李岩坤 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 1989年第6期34-35,33,共3页
关键词 药用植物 染色体 山东省
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我国药材种子种苗产业存在的问题及其对策 被引量:45
14
作者 张丽萍 杨世林 +3 位作者 杨春清 李万军 胡炳义 王康正 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第10期579-581,共3页
目的 :引导我国药材种子种苗产业朝科学的、高质量的、规范的、合法的主向发展。方法 :在简要说明药材种子种苗在中药材生产中的重要作用的基础上 ,,提出目前我国药材种子种苗产业存在的问题 ,并概括了国家及科研单位近几年在药材种子... 目的 :引导我国药材种子种苗产业朝科学的、高质量的、规范的、合法的主向发展。方法 :在简要说明药材种子种苗在中药材生产中的重要作用的基础上 ,,提出目前我国药材种子种苗产业存在的问题 ,并概括了国家及科研单位近几年在药材种子方面做的工作 ,提出了药材种子产业的发展对策。结果与结论 :国家政府机构的大力支持与重视 ,科研单位的努力工作 ,必将使中药材种子种苗产业的现状有很大的改观。 展开更多
关键词 药材 种子 种苗 产业化 发展对策
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石斛组织培养研究进展 被引量:94
15
作者 张明 夏鸿西 +1 位作者 朱利泉 张玉进 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期323-326,共4页
目的 :综述国内外对石斛组织培养进行的深入研究。方法 :系统查阅国内外近 10年来的有关文献 2 0余篇。结果与结论 :介绍了石斛组培的多种方法 ,对培养基、激素及多种条件对组培的影响作了论述 ,并提出了存在的问题及对策。
关键词 石斛 组织培养 研究进展 中药材
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DNA分子诊断技术在药用植物研究上的应用 被引量:15
16
作者 王康正 高文远 +3 位作者 范磊 赵淑平 肖培根 傅荣昭 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第12期707-709,720,共4页
DNA分子诊断技术在药用植物研究上的应用王康正(中国中医研究院中药研究所北京100700)高文远范磊赵淑平肖培根(中国医学科学院中国协和医科大学药用植物研究所北京100094)傅荣昭(中国科学院遗传研究所北京1001... DNA分子诊断技术在药用植物研究上的应用王康正(中国中医研究院中药研究所北京100700)高文远范磊赵淑平肖培根(中国医学科学院中国协和医科大学药用植物研究所北京100094)傅荣昭(中国科学院遗传研究所北京100101)随着科学技术的进步和国内外在... 展开更多
关键词 药用植物 DNA 分子诊断技术 资源 育种
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发根农杆菌介导的药用植物遗传转化研究进展 被引量:23
17
作者 陈敏 王和勇 +1 位作者 廖志华 孙敏 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2000年第3期98-102,共5页
发根农杆菌介导的植物遗传转化是近年来发展起来的一项新的植物遗传转化技术。本文就发根农杆菌 Ri质粒的结构、发根农杆菌介导的植物遗传转化的方法和步骤 。
关键词 发根农杆菌 R1质粒 毛状根 药用植物 遗传转化
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暗紫贝母鳞茎器官培养生长特征和生物碱累积的研究 被引量:19
18
作者 高山林 朱丹妮 +1 位作者 蔡朝晖 徐德然 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第3期144-147,共4页
本文应用组织培养中器官培养技术对我国特有的名贵中药材—暗紫贝母进行了生长量、生物碱含量等八个指标和培养天数关系的研究。结果表明:培养30—50d期间是鳞茎组织快速生长期,50d时鳞茎培养物中干物质积累最高,为适宜采收期。培养鳞... 本文应用组织培养中器官培养技术对我国特有的名贵中药材—暗紫贝母进行了生长量、生物碱含量等八个指标和培养天数关系的研究。结果表明:培养30—50d期间是鳞茎组织快速生长期,50d时鳞茎培养物中干物质积累最高,为适宜采收期。培养鳞茎在全生长阶段中生物碱含量都较高,是野生商品药材的1.22—1.50倍,从而有效地保持和提高了主要化学成分。 展开更多
关键词 暗紫贝母 器官培养 生物碱
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猪苓菌丝形成菌核栽培方法的研究 被引量:10
19
作者 郭顺星 王秋颖 +1 位作者 张集慧 夏洪燕 《中国药学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第10期658-660,共3页
目的 阐明在伴生菌的作用下 ,不同栽培方法对猪苓菌丝形成菌核的影响。方法 以树棒为载体 ,粗砂为基质 ,纯猪苓菌种、纯猪苓菌丝形成菌核伴生菌和蜜环菌为供试菌株 ,采用花盆栽培方法。结果 猪苓菌种和伴生菌间隔接种于树棒鱼鳞口和... 目的 阐明在伴生菌的作用下 ,不同栽培方法对猪苓菌丝形成菌核的影响。方法 以树棒为载体 ,粗砂为基质 ,纯猪苓菌种、纯猪苓菌丝形成菌核伴生菌和蜜环菌为供试菌株 ,采用花盆栽培方法。结果 猪苓菌种和伴生菌间隔接种于树棒鱼鳞口和晚期接蜜环菌有利于猪苓菌核的形成和生长。结论 伴生菌是猪苓菌丝形成菌核的关键生物因子 ;蜜环菌是猪苓菌核继续生长发育的主要营养来源。 展开更多
关键词 猪苓菌丝 伴生菌 猪苓菌核 栽培方法
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组培条件对云南红豆杉愈伤组织生长和形成紫杉醇的影响 被引量:30
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作者 陈永勤 朱蔚华 +1 位作者 吴蕴祺 胡秋 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期269-272,共4页
目的 :寻找适合于云南红豆杉愈伤组织生长和形成紫杉醇的培养条件。方法 :对在不同光照条件下和不同培养基上的愈伤组织进行生长分析和紫杉醇含量测定。结果与结论 :黑暗、0 .1mg·L-1BAP和 1.0mg·L-12 ,4 D的激素组合 ,B5,DCR... 目的 :寻找适合于云南红豆杉愈伤组织生长和形成紫杉醇的培养条件。方法 :对在不同光照条件下和不同培养基上的愈伤组织进行生长分析和紫杉醇含量测定。结果与结论 :黑暗、0 .1mg·L-1BAP和 1.0mg·L-12 ,4 D的激素组合 ,B5,DCR或 6 ,7 V基本培养基有利于云南红豆杉愈伤组织生长和形成紫杉醇 ;培养基中NO3 -浓度高有利于愈伤组织的生长 ,NH+ 4浓度高抑制愈伤组织的生长 ,但显著提高紫杉醇含量。 展开更多
关键词 云南红豆杉 愈伤组织培养 紫杉醇
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