大豆基因型对根癌农杆菌菌株敏感性的研究 被引量：23

1

作者 王罡 王萍 +2 位作者 蔺宇 张领兵 吴颖 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期297-300,共4页

以栽培大豆 [Glycinemax (L .)Mer]吉林 30、吉林 43、绥农 8、黑农 35和东农 42等的下胚轴为外植体 ,用EHA10 5和LBA44 0 42个根癌农杆菌菌株 (分别含有 pGBI12 1S4ABC和pGBI4A2B质粒 )研究大豆基因型对根癌农杆菌的敏感性 ,以及根癌... 以栽培大豆 [Glycinemax (L .)Mer]吉林 30、吉林 43、绥农 8、黑农 35和东农 42等的下胚轴为外植体 ,用EHA10 5和LBA44 0 42个根癌农杆菌菌株 (分别含有 pGBI12 1S4ABC和pGBI4A2B质粒 )研究大豆基因型对根癌农杆菌的敏感性 ,以及根癌农杆菌对大豆的侵染能力。结果表明 ,大豆基因型对根癌农杆菌的敏感性存在显著差异 ,以吉林 43最敏感。根癌农杆菌菌株对大豆下胚轴侵染能力不同 ,含有 pGBI12 1S4ABC质粒的LBA44 0 4侵染能力较强 ,但差异未达显著水平。 展开更多

关键词 大豆 基因型 根癌农杆菌 菌株敏感性

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转hrpZpsta抗病基因大豆的研究 被引量：14

2

作者 张云月 付永平 +4 位作者 王丕武 王鹏 李勃 马建 曲静 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2011年第9期86-92,共7页

【目的】将具有广谱抗病性的hrpZpsta基因导入大豆,为培育抗灰斑病的转基因大豆新品系奠定基础。【方法】采用农杆菌介导法,以大豆子叶节为受体,将具有广谱抗性的hrpZpsta基因转入大豆品种"吉林30"中,以耐盐基因badh作为筛选... 【目的】将具有广谱抗病性的hrpZpsta基因导入大豆,为培育抗灰斑病的转基因大豆新品系奠定基础。【方法】采用农杆菌介导法,以大豆子叶节为受体,将具有广谱抗性的hrpZpsta基因转入大豆品种"吉林30"中,以耐盐基因badh作为筛选标记性基因,经过抗性筛选,对转基因植株进行PCR检测、Southern杂交和RT-PCR检测分析。【结果】确定的NaCl筛选浓度为200mmol/L。对T1、T2和T3代转基因植株进行PCR检测,得到T1代阳性植株30株,T2代45株,T3代284株,说明外源hrpZpsta基因在转基因后代中能够遗传。Southern杂交结果表明,外源目的基因hrpZpsta已经整合进大豆基因组中,且整合位点不尽相同。RT-PCR结果表明,hrpZpsta基因在受体大豆中获得表达。【结论】获得了hrpZpsta基因遗传表达的T3代转基因大豆株系。 展开更多

关键词 hrpZpsta基因 大豆 农杆菌介导法 子叶节 T3代转基因株系

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大豆胰蛋白酶抑制剂和脂肪氧化酶基因双价RNAi表达载体的改造及转化 被引量：7

3

作者 王丹 付永平 +1 位作者 王丕武 马建 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2012年第12期85-89,105,共6页

【目的】应用RNA干扰技术同时抑制大豆脂肪氧化酶(Lox)和胰蛋白酶抑制剂(KTi)基因的表达,改良大豆品质,培育缺失Lox和KTi的大豆新材料。【方法】应用RNAi原理,以双价RNAi植物表达载体pCAM-BIA1301-KtiRi-LoxRi为基础,以植物表达载体pCAM... 【目的】应用RNA干扰技术同时抑制大豆脂肪氧化酶(Lox)和胰蛋白酶抑制剂(KTi)基因的表达,改良大豆品质,培育缺失Lox和KTi的大豆新材料。【方法】应用RNAi原理,以双价RNAi植物表达载体pCAM-BIA1301-KtiRi-LoxRi为基础,以植物表达载体pCAMBIA3301的质粒DNA为模板,利用CaMV35S启动子的上游引物和CaMV35S终止子的下游引物,PCR扩增含有除草剂抗性基因bar的整个表达原件,然后将其插入到pCAM-BIA1301-KtiRi-LoxRi中,构建以除草剂为筛选标记的双价RNAi表达载体,并通过花粉管通道法转化至大豆吉农18、吉农28和吉农27 3个品种中,对转基因植株进行PCR、Southern杂交、RT-PCR分子水平检测和除草剂抗性检测。【结果】质粒PCR和酶切鉴定以及测序结果表明,双价RNAi植物表达载体pCAMBIA1301-KtiRi-LoxRi-bar构建成功。将其转入到大豆中,分别获得吉农18、吉农28、吉农27T1代籽粒47,25和86粒,以及T2代转基因植株50株。RT-PCR结果表明,转基因株系中脂肪氧化酶和胰蛋白酶抑制剂mRNA积累受到明显抑制。【结论】获得了转pCAMBIA1301-KtiRi-LoxRi-bar的T2代转基因大豆。 展开更多

关键词 大豆 胰蛋白酶抑制剂 脂肪氧化酶 花粉管通道法 除草剂

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转基因大豆的潜在风险及发展趋势研究 被引量：6

4

作者 索海翠 熊瑞权 +1 位作者 马启斌 年海 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期244-245,共2页

随着转基因安全证书的发放,转基因作物的安全性再度引起很大争议。针对世界范围内种植规模最大的转基因作物抗草甘膦大豆,从生态环境和食品安全两方面入手,阐述其进一步发展给我国带来的潜在风险及其必然的发展趋势。

关键词 转基因大豆 生态风险 食品安全 发展趋势

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生长素诱导大豆未成熟子叶胚胎发生效应的研究 被引量：6

5

作者 王罡 王萍 吴颖 《吉林农业科学》 CSCD 2002年第2期7-10,共4页

用 2 ,4_D与萘乙酸两种生长素的各 4种浓度诱导大豆未成熟子叶胚胎发生。结果表明 ,两种生长素均可诱导胚胎发生 ,并且胚胎发生率和平均胚数在两种生长素间无显著差异 ;品种在平均胚数上存在差异。高浓度的 2 ,4_D诱导胚胎发生效果好于... 用 2 ,4_D与萘乙酸两种生长素的各 4种浓度诱导大豆未成熟子叶胚胎发生。结果表明 ,两种生长素均可诱导胚胎发生 ,并且胚胎发生率和平均胚数在两种生长素间无显著差异 ;品种在平均胚数上存在差异。高浓度的 2 ,4_D诱导胚胎发生效果好于低浓度 ,诱导率达 4 1 2 3%。同时 ,观察到诱导大豆未成熟子叶胚胎发生时 ,开始第一周高浓度的 2 。 展开更多

关键词 大豆 生长素 未成熟子叶 胚胎发生效应 再生率 组织培养体系

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分子标记技术在大豆遗传育种中的应用 被引量：2

6

作者 姚丹 闫伟 +2 位作者 张扬 关淑艳 王丕武 《吉林农业科学》 CSCD 2009年第6期31-33,44,共4页

大豆是世界上重要的经济与粮食作物,大豆研究一直受到人们的广泛关注,但与玉米、水稻等作物相比,其研究进展十分缓慢。20世纪80年代末,DNA分子标记技术的出现,大大提高了遗传育种效率。本文从大豆遗传图谱的构建、遗传多样性研究、数量... 大豆是世界上重要的经济与粮食作物,大豆研究一直受到人们的广泛关注,但与玉米、水稻等作物相比,其研究进展十分缓慢。20世纪80年代末,DNA分子标记技术的出现,大大提高了遗传育种效率。本文从大豆遗传图谱的构建、遗传多样性研究、数量性状基因分析、分子标记辅助育种等四个方面概述了分子标记技术在大豆遗传育种中的应用情况。 展开更多

关键词 大豆 分子标记 遗传育种 应用

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转基因技术在大豆抗病毒育种中的应用研究进展 被引量：2

7

作者 韩阳 王昌凌 赖冰冰 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2010年第1期118-120,共3页

介绍了大豆遗传转化的再生系统、遗传转化的研究方法以及大豆抗病毒基因工程的主要成果。

关键词 大豆 基因工程 抗病毒病 育种

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大豆凝集素和脂肪氧化酶双价RNAi表达载体的构建及其遗传转化 被引量：1

8

作者 张学明 宋阳 +7 位作者 王丕武 马建 晏佳琳 付永平 曲静 张卓 董环宇 李琦 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2015年第7期82-88,共7页

【目的】应用RNA干扰技术，同时抑制大豆凝集素（Soybean agglutinin，SBA）和脂肪氧化酶（Lipoxy—genase，Lox）基因在种子中的表达，改良大豆营养品质，为培育优质大豆材料奠定基础。【方法】根据RNAi原理，酶切获得Lox目的片段，构... 【目的】应用RNA干扰技术，同时抑制大豆凝集素（Soybean agglutinin，SBA）和脂肪氧化酶（Lipoxy—genase，Lox）基因在种子中的表达，改良大豆营养品质，为培育优质大豆材料奠定基础。【方法】根据RNAi原理，酶切获得Lox目的片段，构建以除草剂Bar基因为筛选标记、种子特异性启动子P7aP启动SBA和Lox双干扰的pCAMBIA3301-SBA—Lox（pSBA—Lox）干扰表达载体，并通过农杆菌介导法转化大豆（品种为吉农28），采用PCR、Southern杂交和实时荧光定量PCR对转基因植株进行检测。【结果】质粒PCR和酶切鉴定结果表明，双价RNAi植物表达载体pSBA-Lox构建成功。将其转入到大豆中，对转化植株进行PCR、Southern杂交检测，结果显示，外源基因以单拷贝形式整合到植物基因组中，并能遗传给后代。T1代转基因植株的实时荧光定量PCR分析显示，转基因植株中SBA基因和Lox基因在籽粒中的表达量比未转化受体植株均明显降低，SBA基因表达量降低了35．9％～47．2％，Lox基因表达量降低了32．8％～56．1％，而在幼嫩叶片中的表达量相比对照植株变化不大。【结论】获得了大豆凝集素和脂肪氧化酶表达量均明显降低的T2代转基因大豆。 展开更多

关键词 大豆 凝集素 脂肪氧化酶 RNA干扰技术 遗传转化

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山东栽培豆与野生豆抗裂荚基因SHAT1-5的克隆及序列分析 被引量：1

9

作者 林延慧 李伟 +4 位作者 张彦威 刘赟 王彩洁 徐冉 张礼凤 《山东农业科学》 2018年第2期1-6,共6页

大豆的裂荚性是影响其产量的重要因素之一,因此栽培豆中豆荚开裂特性的遗传学机制成为国内外研究的热点。本研究以山东栽培豆(山宁11、山宁17、齐黄34、齐黄35和鲁0305-1)及山东野生豆(东营野生豆1、2号和山东野生豆1、2号)作为试验材料... 大豆的裂荚性是影响其产量的重要因素之一,因此栽培豆中豆荚开裂特性的遗传学机制成为国内外研究的热点。本研究以山东栽培豆(山宁11、山宁17、齐黄34、齐黄35和鲁0305-1)及山东野生豆(东营野生豆1、2号和山东野生豆1、2号)作为试验材料,根据已有报道,通过PCR扩增克隆了一个大豆抗裂荚基因SHAT1-5,并对该基因的序列进行多态性分析。结果显示,山东栽培豆和野生豆在SHAT1-5基因区约1 599 bp位置处,各自出现不同倍数的TAA重复。山东栽培豆与野生豆在SHAT1-5基因启动子上游4 kb关键调控区极度保守,栽培豆中不存在20 bp的缺失,这些结果与前人报道的东北栽培豆和野生豆中的情况有所不同。这表明,山东栽培豆与野生豆的裂荚性可能受其他基因的调控。 展开更多

关键词 栽培豆 野生豆 裂荚 基因 多态性分析 启动子

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大豆天冬氨酸蛋白酶基因启动子的克隆及其表达活性分析

10

作者 赵艳 孙天国 +3 位作者 王慧 张梅娟 崔巍 沙伟 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2012年第12期79-84,共6页

【目的】克隆大豆天冬氨酸蛋白酶基因(soyAP1)启动子,并对其表达方式及活性进行分析。【方法】利用TAIL-PCR方法从大豆基因组DNA中克隆soyAP1基因启动子片段。利用启动子在线预测工具分析soyAP1基因启动子片段的启动子元件,并用克隆得到... 【目的】克隆大豆天冬氨酸蛋白酶基因(soyAP1)启动子,并对其表达方式及活性进行分析。【方法】利用TAIL-PCR方法从大豆基因组DNA中克隆soyAP1基因启动子片段。利用启动子在线预测工具分析soyAP1基因启动子片段的启动子元件,并用克隆得到的SAP片段替换pCAMBIA1301中的CaMV35S启动子,构建表达载体pCAM-SAP。通过农杆菌介导法,使其在大豆各组织中进行瞬时表达,用GUS组织化学染色法分析SAP在各组织中的表达活性。【结果】克隆获得了大豆soyAP1基因的启动子片段,长1 650bp,并将之命名为SAP,其转录起始位点可能是553bp处的A;PLACE分析表明,SAP序列中含有多种典型的种子特异性表达元件;GUS组织化学染色显示,SAP驱动的GUS基因在大豆根、茎、叶中基本不表达,但在种子中有较高的表达活性,且表达强度与CaMV35S启动子相近。【结论】大豆SAP启动子可能具有种子特异表达特性。 展开更多

关键词 大豆 天冬氨酸蛋白酶基因 启动子 瞬时表达

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非寄主植物烟草中与大豆疫霉菌激发素互作蛋白质的筛选

11

作者 高保利 孙果忠 +2 位作者 马青 朱振东 王晓鸣 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2009年第4期173-178,共6页

【目的】采用酵母双杂交技术,从非寄主植物烟草中筛选与大豆疫霉菌类激发素PSE7和激发素SO-JB互作的蛋白。【方法】以PGBKT7-PSE7和PGBKT7-SOJB为诱饵质粒筛选烟草cDNA文库,得到的阳性克隆经测序后,在NCBI上进行Blast分析。【结果】PSE7... 【目的】采用酵母双杂交技术,从非寄主植物烟草中筛选与大豆疫霉菌类激发素PSE7和激发素SO-JB互作的蛋白。【方法】以PGBKT7-PSE7和PGBKT7-SOJB为诱饵质粒筛选烟草cDNA文库,得到的阳性克隆经测序后,在NCBI上进行Blast分析。【结果】PSE7和SOJB在烟草中存在几个相似的结合蛋白,表明二者具有共享的生物学功能;SOJB能与肽酶和泛素结合蛋白(与蛋白质降解有密切关系)互作,而PSE7没有筛选到类似蛋白;SOJB和PSE7均能与跨膜运输蛋白结合,PSE7与水通道蛋白结合,SOJB与铜离子转运蛋白结合,表明二者在胞质内均存在作用靶标。【结论】PSE7和SOJB最终分别从烟草中筛选出9和13个阳性互作蛋白。 展开更多

关键词 大豆疫霉菌 激发素 酵母双杂交系统 烟草 蛋白质筛选

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植物抗病基因工程育种策略及其在大豆上的应用

12

作者 韩阳 曹永强 赖冰冰 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期1103-1107,共5页

概述了植物抗真菌病害、细菌病害和病毒病害基因工程育种的主要策略,重点介绍了大豆转基因抗病育种的主要成果。植物抗病害转基因育种策略主要包括基于寄主-病原菌相互识别和信号传导体系的基因工程和基于抗菌蛋白的基因工程;植物抗病... 概述了植物抗真菌病害、细菌病害和病毒病害基因工程育种的主要策略,重点介绍了大豆转基因抗病育种的主要成果。植物抗病害转基因育种策略主要包括基于寄主-病原菌相互识别和信号传导体系的基因工程和基于抗菌蛋白的基因工程;植物抗病毒病害基因工程育种策略还包括病毒外壳蛋白基因介导的抗性、复制酶介导的抗性、运动蛋白介导的抗性、卫星RNA介导的抗性、RNA介导的抗性等。 展开更多

关键词 大豆 基因工程 抗病育种

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转桃PpCuZnSOD基因大豆的耐旱性 被引量：3

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作者 杨艳丽 杨勇 +1 位作者 李大红 李鸿雁 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2018年第5期978-983,共6页

为探索桃(Prunus persica L.)铜/锌超氧化物歧化酶基因(PpCuZnSOD)在植物抗干旱胁迫中的作用,应用农杆菌介导法,将PpCuZnSOD基因转入大豆品种中黄13中。Southern印迹分析证实PpCuZnSOD基因已整合到大豆基因组中。定量PCR分析结果表明,... 为探索桃(Prunus persica L.)铜/锌超氧化物歧化酶基因(PpCuZnSOD)在植物抗干旱胁迫中的作用,应用农杆菌介导法,将PpCuZnSOD基因转入大豆品种中黄13中。Southern印迹分析证实PpCuZnSOD基因已整合到大豆基因组中。定量PCR分析结果表明,转基因大豆中PpCuZnSOD表达水平均明显增加。用15%PEG4000模拟干旱胁迫时,转基因大豆种子萌发率与主根长显著高于非转基因大豆。在干旱10 d条件下,转基因大豆与非转基因大豆相比,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)活性增加,而丙二醛(MDA)含量下降,叶绿素含量降低较少。活性氧(ROS)染色结果显示,转基因植株在干旱胁迫下活性氧少于非转基因植株。复水后4 d,转基因大豆的成活率显著高于非转基因大豆。这些结果表明,PpCuZnSOD能提高大豆的耐旱性。 展开更多

关键词 转基因 耐旱性 大豆 PpCuZnSOD基因

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影响大豆DNA导入受体幼荚成活率因素的初探 被引量：3

14

作者 王志新 《黑龙江农业科学》 2000年第4期10-11,28,共3页

对影响大豆外源 DNA导入成活率诸多因素进行了探讨 ,结果表明 ,适当的 DNA导入时间、正确选择导入花部位、适量的柱头切取、适宜的土壤水分及疏花疏荚都可显著提高 DNA导入成活率 ,成活率最高为 49% ,平均为 34.3%

关键词 大豆 DNA导入 成活率 花粉管通道技术

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福建大豆主栽品种的组织培养研究

15

作者 张戊英 张韵春 张蔚勇 《闽西职业技术学院学报》 2006年第1期117-119,共3页

利用福建大豆主栽品种的子叶节为外植体,进行组织培养再生研究,探讨不同品种、不同激素和除草剂不同浓度的诱导效果。结果表明不同大豆品种诱导分化能力差别较大,供试品种中“莆豆8008”的诱导能力较强,丛生芽诱导率和平均丛生芽数分别... 利用福建大豆主栽品种的子叶节为外植体,进行组织培养再生研究,探讨不同品种、不同激素和除草剂不同浓度的诱导效果。结果表明不同大豆品种诱导分化能力差别较大,供试品种中“莆豆8008”的诱导能力较强,丛生芽诱导率和平均丛生芽数分别为94.2%和2.69。不同激素种类和浓度对大豆子叶节丛生芽诱导,表明6-BA较适合于丛生芽的诱导,适宜浓度为1.67mg/L。大豆子叶节不定芽分化和伸长的除草剂Glufosinate梯度实验表明除草剂Glufosinate5mg/L可作为不定芽分化和伸长的选择压力,生根培养基上不宜加除草剂Glufosinate。 展开更多

关键词 大豆 子叶节 组织培养 激素 GLUFOSINATE

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甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因转化大豆的研究 被引量：4

16

作者 尚丽霞 蔡勤安 +3 位作者 于志晶 杨向东 孟凡钢 马瑞 《东北农业科学》 2016年第2期35-38,共4页

本研究利用农杆菌介导法将甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因导入大豆,以提高大豆的耐盐性。对132棵转化植株进行了PCR检测,获得64棵阳性植株,阳性率达到48%。对PCR阳性植株进一步进行Southern杂交分析,证明BADH基因已经整合到大豆基因组中。

关键词 大豆 BADH基因 遗传转化

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大豆遗传转化受体系统对转化率影响的研究进展

17

作者 邵广忠 任海祥 +1 位作者 岳岩磊 宗春美 《中国科技成果》 2010年第16期49-51,共3页

大豆是公认的难转化作物，受体的选择已成为直接影响转基因的成功与否的主要因素。本文对目前所使用的大豆外植体（胚轴、未成熟子叶、下胚轴、子叶、子叶节、胚性培养物、原生质体、子房、大豆叶片等）进行了比较，简述了大豆不同受体... 大豆是公认的难转化作物，受体的选择已成为直接影响转基因的成功与否的主要因素。本文对目前所使用的大豆外植体（胚轴、未成熟子叶、下胚轴、子叶、子叶节、胚性培养物、原生质体、子房、大豆叶片等）进行了比较，简述了大豆不同受体的选择对其转化成功率的影响。 展开更多

关键词 大豆受体系统 再生能力 组织培养

原文传递