紫花苜蓿细胞质雄性不育恢复基因的初步定位 被引量：3

1

作者 张世超 王英哲 +3 位作者 金艳 陈晶晶 王莹 徐博 《草业科学》 CAS CSCD 2018年第5期1067-1071,共5页

以紫花苜蓿(Medicago sativa)不育系MS-GN-1A为母本,恢复系MS178为父本组合构建BSA分离群体,获得的F1代均表现为雄性可育,在大田种植了221株F2代群体单株,盛花期将花粉颗粒染色后,显微镜下观察统计出,不育的F2代株数为57,可育F2代株数1... 以紫花苜蓿(Medicago sativa)不育系MS-GN-1A为母本,恢复系MS178为父本组合构建BSA分离群体,获得的F1代均表现为雄性可育,在大田种植了221株F2代群体单株,盛花期将花粉颗粒染色后,显微镜下观察统计出,不育的F2代株数为57,可育F2代株数164,并没有观察到半不育植株。将所有植株划分为可育和不育两组,并构建可育和不育DNA混池,混池DNA从可育和不育植株组DNA中各随机抽取20个样品,以此对恢复基因定位。随机挑选160对已知的四倍体苜蓿SSR引物扩增基因池DNA,获得2个具有多态性的分子标记,分别是Mt2c12、AW166,初步定位Rf基因在类群Composite5上。将类群Composite5上的所有引物进行合成,进一步进行引物筛选,最终获得4个具有多态性的标记BI68、Mt2c12、BG267和AW776153,遗传距离分别为19.0、20.9、44.6和72.1cM。 展开更多

关键词 紫花苜蓿 细胞质雄性不育系 恢复基因 SSR BSA 引物筛选 遗传距离

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8个苜蓿品种抗寒性的比较 被引量：31

2

作者 朱爱民 张玉霞 +3 位作者 王显国 田永雷 丛百明 张庆昕 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2019年第1期45-52,共8页

【目的】探究8个国产苜蓿品种的抗寒性判定方法,为科尔沁沙地筛选抗寒性强的苜蓿品种提供理论依据。【方法】以8个苜蓿品种(草原2号、草原3号、东苜1号、农菁1号、农菁8号、肇东、龙牧801、公农1号)的1龄期越冬器官为材料,对其分别进行-... 【目的】探究8个国产苜蓿品种的抗寒性判定方法,为科尔沁沙地筛选抗寒性强的苜蓿品种提供理论依据。【方法】以8个苜蓿品种(草原2号、草原3号、东苜1号、农菁1号、农菁8号、肇东、龙牧801、公农1号)的1龄期越冬器官为材料,对其分别进行-10,-15,-20,-25,-30和-35℃低温处理,4℃处理为对照,统计不同处理材料在盆栽试验中的存活率,测定其相对电导率、根颈活力,计算半致死温度(LT50),拟合Logistic回归方程,对8个品种抗寒性进行聚类分析。【结果】东苜1号和草原3号存活率表现较好,而草原2号和农菁8号存活率表现较差。8个苜蓿品种根颈相对电导率均随处理温度下降而上升,根颈活力均随处理温度下降而减弱;用电导率法协同Logistic回归方程所得LT50的8个苜蓿品种抗寒性强弱排序为:草原3号>东苜1号>农菁1号>公农1号>肇东>龙牧801>草原2号>农菁8号;根据根颈活力法协同Logistic回归方程所得LT50的8个苜蓿品种抗寒性排序为:东苜1号>草原3号>农菁1号>公农1号>龙牧801>肇东>农菁8号>草原2号;用单一电导率法或根颈活力法对8个苜蓿品种抗寒性的聚类分析结果不同,且以根颈活力法可信度较高,而综合2种方法的聚类分析更具代表性、准确性更高;8个苜蓿品种抗寒性可分为3类,其中东苜1号、草原3号和农菁1号为高抗寒品种,公农1号、肇东和龙牧801为一般抗寒品种,草原2号和农菁8号为低抗寒品种;8个苜蓿品种不同低温处理下的植株存活率与其抗寒性测定结果表现一致。【结论】利用电导率法或根颈活力法协同Logistic方程计算苜蓿LT50可行,LT50可作为评价苜蓿抗寒性的指标。 展开更多

关键词 苜蓿品种 抗寒性 半致死温度

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不同紫花苜蓿杂交组合对冻害胁迫的生理响应 被引量：9

3

作者 陈晶晶 王英哲 +2 位作者 金艳 郭强 徐博 《草业科学》 CAS CSCD 2018年第5期1138-1144,共7页

冻害是紫花苜蓿(Medicago sativa)在东北地区种植的主要限制性因素,筛选能够抵御冻害胁迫的育种材料,对于提高紫花苜蓿的产量和品质有重要意义。本研究选用5种不同紫花苜蓿杂交组合为试验材料,3个阶段处理,即抗寒锻炼阶段、冷冻阶段以... 冻害是紫花苜蓿(Medicago sativa)在东北地区种植的主要限制性因素,筛选能够抵御冻害胁迫的育种材料,对于提高紫花苜蓿的产量和品质有重要意义。本研究选用5种不同紫花苜蓿杂交组合为试验材料,3个阶段处理,即抗寒锻炼阶段、冷冻阶段以及返青阶段,测定其可溶性蛋白(SP)、可溶性糖(SS)、脯氨酸(Pro)、丙二醛(MDA)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果表明,随3阶段处理SP的含量总体呈现升高的趋势,且每个材料返青阶段的含量均显著高于对照组,并达到最大值(P<0.05);SS的含量总体呈先降低后升高再降低的趋势,冷冻阶段的SS含量显著高于对照组且达到最大值;Pro含量总体呈升高趋势;Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ杂交组合MDA含量低于对照组,但降幅不显著(P>0.05),其余各阶段含量均显著高于对照组,且返青阶段达到最大值;SOD活性总体呈先升高后降低的趋势,且冷冻阶段含量显著高于对照组达到最大值。采用隶属函数法综合评价各杂交组合的抗寒性,由强至弱的顺序是Ⅴ>Ⅲ>Ⅰ>Ⅱ>Ⅳ。 展开更多

关键词 紫花苜蓿 杂交组合 抗寒锻炼 冻害胁迫 生理响应 隶属函数法 抗寒性评价

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高温胁迫对德钦紫花苜蓿形态指标和生理特性的影响 被引量：8

4

作者 王荟 赵雁 +2 位作者 邵辰光 王鸿泽 毕玉芬 《云南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期765-768,共4页

为了探明高温胁迫对德钦紫花苜蓿(秋眠级1.2)生长发育的影响,研究以不同耐热性的紫花苜蓿品种——阿尔冈金(秋眠级2)和赛迪10(秋眠级9)为对照材料,进行高温胁迫处理,胁迫温度为35℃/30℃(白天/黑夜),对照温度为25℃/20℃(白天/黑夜),胁... 为了探明高温胁迫对德钦紫花苜蓿(秋眠级1.2)生长发育的影响,研究以不同耐热性的紫花苜蓿品种——阿尔冈金(秋眠级2)和赛迪10(秋眠级9)为对照材料,进行高温胁迫处理,胁迫温度为35℃/30℃(白天/黑夜),对照温度为25℃/20℃(白天/黑夜),胁迫处理105 d,对供试材料的形态和生理指标进行分析。结果表明:在高温胁迫下,德钦紫花苜蓿的分枝数累积增长率最高(8 900%),植株能保持较高的增长速度;主茎长度减少幅度最小(-9.45%),徒长程度较轻;相对含水量累积增长率变幅小(8.92%),含水量相对稳定;相对电导率的增长率最小(862.82%),细胞膜受高温危害程度较轻。综合各指标分析结果,德钦紫花苜蓿具有较好高温耐受性。高温胁迫后紫花苜蓿植株主茎长度变短、分枝数增加和含水量相对稳定,这些指标可否作为鉴定植物的耐热性的指标有待于进一步研究。 展开更多

关键词 高温胁迫 紫花苜蓿 耐热性 相对增长率

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14个紫花苜蓿杂交组合耐盐性比较 被引量：9

5

作者 金艳 王英哲 +2 位作者 陈晶晶 郭强 徐博 《草业科学》 CAS CSCD 2018年第12期2931-2939,共9页

为筛选适合盐渍化土地种植的耐盐型作物,以14个紫花苜蓿(Medicago sativa)杂交组合F1代为试验材料,采用室内盆栽法,研究不同浓度盐胁迫对其幼苗的过氧化氢酶(CAT)活性、丙二醛(MDA)含量、可溶性糖(SS)含量以及可溶性蛋白(SP)含量的影响... 为筛选适合盐渍化土地种植的耐盐型作物,以14个紫花苜蓿(Medicago sativa)杂交组合F1代为试验材料,采用室内盆栽法,研究不同浓度盐胁迫对其幼苗的过氧化氢酶(CAT)活性、丙二醛(MDA)含量、可溶性糖(SS)含量以及可溶性蛋白(SP)含量的影响,并结合隶属函数法综合评价14个紫花苜蓿杂交组合的抗盐能力强弱。不同杂交组合对不同浓度的盐胁迫反应不一。根据紫花苜蓿杂交组合对各指标的综合评价,结果表明,耐盐性较好的杂交组合为骑士-2(2010)×MS-GN,WL319HQ×MS-GN,维多利亚×MS-GN,阿迪娜×MS-GN,甘农3号×MS-GN。 展开更多

关键词 紫花苜蓿 杂交组合 耐盐性 生理指标 隶属函数法

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20份新疆紫花苜蓿种质SSR遗传多样性分析 被引量：4

6

作者 马金星 剡转转 +2 位作者 张吉宇 王铁梅 卢欣石 《云南农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2018年第3期397-404,共8页

【目的】本研究旨在为紫花苜蓿分子育种提供基础。【方法】基于SSR分子标记,对20份新疆紫花苜蓿种质资源进行遗传多样性分析,用梯度PCR仪对50对SSR引物进行扩增筛选,筛选出多态性好的引物用于20份种质材料的研究。【结果】从50对SSR引... 【目的】本研究旨在为紫花苜蓿分子育种提供基础。【方法】基于SSR分子标记,对20份新疆紫花苜蓿种质资源进行遗传多样性分析,用梯度PCR仪对50对SSR引物进行扩增筛选,筛选出多态性好的引物用于20份种质材料的研究。【结果】从50对SSR引物中筛选得到9对多态性引物,共扩增出199个条带,多态性条带179个,多态带百分率89.95%。20份种质的遗传距离在0.010 4~0.086 0之间,Nei’s基因多样性指数和Shannon信息指数的平均值分别为0.164 0和0.254 4。UPGMA聚类分析显示:20份苜蓿材料在遗传相似系数为0.957 1时可分为5个类群。【结论】来自新疆的紫花苜蓿种质资源具有丰富的遗传多样性,种群间发生了较高的遗传分化。 展开更多

关键词 紫花苜蓿 SSR标记 多态性 遗传多样性 遗传分化

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紫花苜蓿9个盐响应相关基因 表达模式 被引量：7

7

作者 张亚玲 张攀 +5 位作者 尹航 王洋 孙杰 吴清莹 付佳琦 崔国文 《草业科学》 CAS CSCD 2018年第5期1057-1066,共10页

紫花苜蓿(Medicago sativa)是世界上种植面积最大、应用最广泛的豆科牧草。由于其耐盐性中等,其在我国北方地区的产量和种植受到土壤盐渍化的限制。因此提高紫花苜蓿的耐盐性具有重要的科学和生产意义。为此,以龙牧801紫花苜蓿(M.sativa... 紫花苜蓿(Medicago sativa)是世界上种植面积最大、应用最广泛的豆科牧草。由于其耐盐性中等,其在我国北方地区的产量和种植受到土壤盐渍化的限制。因此提高紫花苜蓿的耐盐性具有重要的科学和生产意义。为此,以龙牧801紫花苜蓿(M.sativa‘Longmu 801’)为试验材料,采用实时荧光定量PCR技术分析了不同浓度NaCl胁迫下9个盐胁迫蛋白质组筛选出的盐响应相关基因的表达模式。结果显示,处理时间和处理浓度对9个基因的相对表达量均有显著性影响,表明这9个基因均在紫花苜蓿盐胁迫应答中发挥着一定作用。处理1h时,G6PI、ABP19a、Trx-h1、PR bet 1、FBPA、6PGDH和ALDH这7个基因的相对表达量在不同NaCl胁迫浓度处理的紫花苜蓿中均显著上调,RRM和GDPD在NaCl处理2h后开始上调。除G6PI基因,其他8个基因在0.4%NaCl处理下相对表达量显著高于0.2%和0.8%NaCl处理。这些基因参与糖代谢、信号转导和胁迫响应。以上结果表明,紫花苜蓿的耐盐性极其复杂,涉及到多基因的表达和代谢通路的调控。研究结果有助于全面研究并了解紫花苜蓿的盐响应相关基因的表达模式,促进紫花苜蓿耐盐分子育种。 展开更多

关键词 紫花苜蓿 盐响应基因 表达模式 实时荧光定量PCR

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耐旱丰产紫花苜蓿新品系杂选1号的选育及栽培技术 被引量：1

8

作者 田福平 李锦华 +7 位作者 张怀山 时永杰 张茜 王春梅 胡宇 朱新强 张小甫 李润林 《江苏农业科学》 北大核心 2013年第10期92-93,175,共3页

紫花苜蓿新品系杂选1号是由1个耐旱材料为父本,3个优选速生材料为母本,分别杂交产生的3个杂交系经开放授粉选育而成。杂选1号紫花苜蓿是适于黄土高原半干旱区旱作栽培的丰产品种,在灌溉栽培条件下也具有较高产量,解决了现有推广品种在... 紫花苜蓿新品系杂选1号是由1个耐旱材料为父本,3个优选速生材料为母本,分别杂交产生的3个杂交系经开放授粉选育而成。杂选1号紫花苜蓿是适于黄土高原半干旱区旱作栽培的丰产品种,在灌溉栽培条件下也具有较高产量,解决了现有推广品种在降雨较少的生长季或年份产草量大幅下降的问题。 展开更多

关键词 紫花苜蓿 耐旱性 丰产 栽培技术

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GsPPCK1和GsPPCK3基因转化苜蓿及其耐碱性分析 被引量：3

9

作者 王家佳 张利莉 +4 位作者 钱雪 陈明明 才华 赵超越 朱延明 《塔里木大学学报》 2014年第2期20-31,共12页

基于课题组构建的野大豆碱胁迫基因转录谱和调控网络,筛选出两个碱胁迫应答关键基因:丝苏氨酸磷酸激酶(GsPPCK1和GsPPCK3)。本研究构建了以35S为启动子,bar基因为筛选标记基因的植物超表达载体,以紫花苜蓿龙牧806子叶节为外植体,通过农... 基于课题组构建的野大豆碱胁迫基因转录谱和调控网络,筛选出两个碱胁迫应答关键基因:丝苏氨酸磷酸激酶(GsPPCK1和GsPPCK3)。本研究构建了以35S为启动子,bar基因为筛选标记基因的植物超表达载体,以紫花苜蓿龙牧806子叶节为外植体,通过农杆菌介导法进行了GsPPCK1和GsPPCK3的苜蓿遗传转化;通过固沙草筛选GsPPCK1获得抗性植株45株,GsPPCK3获得53株;对抗性植株进行PCR和Real-time PCR检测,最终确定基因超量表达各2个株系。为进一步研究该基因的耐碱性,用NaHCO3分别为0 mmol/L、100 mmol/L、200 mmol/L、250 mmol/L的4个浓度处理转基因苜蓿,9 d后不同NaHCO3胁迫下对转基因株系进行耐碱性相关的生理指标分析,包括质膜透性、叶绿素含量、丙二醛含量、脯氨酸含量、柠檬酸含量、SOD活性及PEPC活性,结果表明:GsPPCK1和GsPPCK3在苜蓿中的超量表达显著提高了苜蓿的耐碱性。 展开更多

关键词 苜蓿 GsPPCK基因 农杆菌介导 转基因株系 耐碱性

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ABA对紫花苜蓿幼苗抗苏打盐碱渗透调节和氧化性损伤的影响 被引量：6

10

作者 李波 刘骅峻 +2 位作者 林浩 李红 杨曌 《云南农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2019年第4期689-694,共6页

【目的】探究不同浓度ABA对苏打盐碱胁迫下紫花苜蓿幼苗生理效应的影响。【方法】以WL343HQ紫花苜蓿为试验材料,对其幼苗进行150mmol/L苏打盐碱胁迫和不同浓度的ABA缓解处理,测定不同处理幼苗叶片的生理生化变化,采用隶属函数法对ABA缓... 【目的】探究不同浓度ABA对苏打盐碱胁迫下紫花苜蓿幼苗生理效应的影响。【方法】以WL343HQ紫花苜蓿为试验材料,对其幼苗进行150mmol/L苏打盐碱胁迫和不同浓度的ABA缓解处理,测定不同处理幼苗叶片的生理生化变化,采用隶属函数法对ABA缓解效应进行综合分析。【结果】苏打盐碱胁迫紫花苜蓿幼苗喷施ABA后,紫花苜蓿叶片的可溶性糖、甜菜碱、脯氨酸、可溶性蛋白含量以及POD、PAL、CAT、AXP活性均随着ABA浓度的增加呈现先增后降的趋势,4种渗透调节物质和4种抗氧化酶活性在ABA浓度为50或100μmol/L时达最大值。【结论】通过隶属函数值综合分析,在ABA浓度为25~100μmol/L时对苏打盐碱胁迫均有一定缓解作用,且在ABA浓度为50~75μmol/L时对苏打盐害缓解效果最佳。 展开更多

关键词 紫花苜蓿 脱落酸(ABA) 苏打盐碱胁迫 渗透调节物质 抗氧化酶 隶属函数

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两种诱变处理对紫花苜蓿种子萌发及植株生理生化特性的影响 被引量：6

11

作者 申晓慧 《草业科学》 CAS CSCD 2018年第6期1435-1442,共8页

为了研究诱变处理对紫花苜蓿(Medicago sativa)种子萌发及植株生理特性的影响,以紫花苜蓿Wega7F种子为供试材料,经^(60)Co-γ和甲基磺酸乙酯(EMS)两种诱变处理后,测定种子萌发、幼苗生长及植株生理指标。结果表明,不同剂量^(60)Co-γ射... 为了研究诱变处理对紫花苜蓿(Medicago sativa)种子萌发及植株生理特性的影响,以紫花苜蓿Wega7F种子为供试材料,经^(60)Co-γ和甲基磺酸乙酯(EMS)两种诱变处理后,测定种子萌发、幼苗生长及植株生理指标。结果表明,不同剂量^(60)Co-γ射线处理对苜蓿萌发率、发芽指数、幼苗生长的影响不同,低剂量(150Gy)提高了发芽率、发芽指数及幼苗生长,高剂量(300和450Gy)抑制萌发率和幼苗生长。EMS处理均抑制苜蓿种子的萌发及幼苗生长。在低剂量条件下,^(60)Co-γ射线处理对株高有促进作用,高剂量会抑制植株生长;EMS处理则抑制苜蓿株高生长。两种诱变处理均促进苜蓿分枝,且低剂量处理下均有利于提高苜蓿单株鲜草产量。在^(60)Co-γ辐射和0.4%EMS处理下,叶绿素含量提高,其他处理叶绿素含量均降低。诱变提高了苜蓿叶片的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性,对3种酶活性的影响程度表现为POD>CAT>SOD。本研究结果表明,150Gy ^(60)Co-γ对苜蓿产量及株高影响显著,为苜蓿生产应用提供了一定利用价值;EMS处理更有利于增强苜蓿分枝能力,有利于苜蓿在观赏方面的提高及改良。 展开更多

关键词 60CO-Γ辐射 EMS 产量性状 酶活性 生理特性 育种改良

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几种三叶草的辐射敏感性及适宜辐射剂量的研究 被引量：4

12

作者 海棠 马鹤林 +2 位作者 申庆宏 陈有君 贾鲜艳 《内蒙古草业》 1994年第3期45-46,共2页

本文以￣（６０）Ｃ＿ｏ－ｒ射线不同刘量照几种三叶草结果显著抑制幼芽和幼根的生长，并降低了种子活力，按多靶单击模型Ｙ＝１－（１－ｅ￣（－ＹＤ））￣Ｎ拟合剂量效应曲线，以电子计算机处理求得了三叶草的适宜辐射剂量。

关键词 三叶草 辐射育种 辐射敏感性 适宜辐射剂量

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外源蛋白在苜蓿体细胞胚中的表达

13

作者 刘文婷 田立宁 +2 位作者 聂小妮 梁宗锁 何蔚娟 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2011年第4期194-200,共7页

【目的】探讨转基因苜蓿植株根、茎、叶和体细胞胚中外源GUS的表达情况,为外源蛋白在苜蓿体细胞胚中的积累提供理论依据。【方法】以在加拿大广泛种植的N4.4.2紫花苜蓿品种的叶柄为外植体,进行农杆菌GV3101介导的苜蓿遗传转化,将感染的... 【目的】探讨转基因苜蓿植株根、茎、叶和体细胞胚中外源GUS的表达情况,为外源蛋白在苜蓿体细胞胚中的积累提供理论依据。【方法】以在加拿大广泛种植的N4.4.2紫花苜蓿品种的叶柄为外植体,进行农杆菌GV3101介导的苜蓿遗传转化,将感染的苜蓿叶柄外植体置于不同的转化培养基中培养,获得了适合于农杆菌介导的转基因苜蓿植株,将其用于转基因体细胞胚的诱导。采用PCR方法筛选阳性株系,并对其进行GUS组织化学染色分析,对转基因植株根、茎、叶和体细胞胚进行荧光定量分析。【结果】以苜蓿叶柄为外植体成功获得11株阳性转基因植物,转化效率为30.6%。GUS荧光定量分析结果表明,体细胞胚中GUS外源蛋白的表达量明显高于根、茎和叶,是其表达量的3～6倍;根、茎和叶中GUS表达量较低,且三者间没有明显差异。【结论】苜蓿体细胞胚能积累相对高的外源蛋白,是外源蛋白表达的最佳材料,为外源蛋白大量工厂化生产奠定了实验基础。 展开更多

关键词 苜蓿 农杆菌 GUS表达 体细胞胚 外源蛋白

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混合盐碱胁迫对16个紫花苜蓿品种萌发期的影响 被引量：15

14

作者 李诗琴 于洪柱 +1 位作者 刘艺杉 王志锋 《江苏农业科学》 2020年第3期194-194,195-198,共5页

采用培养皿纸上发芽法,用3个浓度的混合盐碱溶液(30、40、50 mmol/L)以及对照对16个紫花苜蓿品种进行萌发试验,测定其发芽率、发芽势、胚芽和胚根长度,并通过隶属函数标准差赋予权重法进行综合评价。结果表明,盐碱浓度40 mmol/L为紫花... 采用培养皿纸上发芽法,用3个浓度的混合盐碱溶液(30、40、50 mmol/L)以及对照对16个紫花苜蓿品种进行萌发试验,测定其发芽率、发芽势、胚芽和胚根长度,并通过隶属函数标准差赋予权重法进行综合评价。结果表明,盐碱浓度40 mmol/L为紫花苜蓿受盐碱胁迫萌发的临界浓度;盐碱浓度50 mmol/L为紫花苜蓿萌发的极限浓度;供试紫花苜蓿的发芽率、发芽势、胚芽和胚根长度随着盐碱浓度的增加而不断降低,4个指标与紫花苜蓿耐盐碱性相关性大小依次为发芽势>发芽率>胚根>胚芽;16个紫花苜蓿品种的耐盐碱强弱依次为公农1号>惊喜>金皇后>WL343HQ>北极熊>公农5号>旱地>斯贝德>3010>阿尔冈金>先行者>MT4014>巨能2>驯鹿>巨能7>英斯特。 展开更多

关键词 紫花苜蓿 混合盐碱胁迫 萌发期 隶属函数值 权重法 耐盐碱 相关性 综合评价

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紫花苜蓿线粒体和叶绿体DNA高效提取体系的建立 被引量：2

15

作者 姜少俊 周海辰 +4 位作者 金樑 宋瑜 杨阳 张晓强 王晓娟 《云南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期747-754,共8页

细胞质雄性不育系是作物杂种优势利用的有效途径,分离其不育系线粒体和叶绿体基因组是深入探究细胞质雄性不育分子机制的重要环节,本研究以紫花苜蓿细胞质雄性不育系CMS1和野生对照植株WT为研究材料,选取新鲜叶片经冷冻匀浆、差速离心... 细胞质雄性不育系是作物杂种优势利用的有效途径,分离其不育系线粒体和叶绿体基因组是深入探究细胞质雄性不育分子机制的重要环节,本研究以紫花苜蓿细胞质雄性不育系CMS1和野生对照植株WT为研究材料,选取新鲜叶片经冷冻匀浆、差速离心分离叶绿体和线粒体、DNase I降解核DNA、蛋白酶K裂解线粒体和叶绿体、酚—氯仿—异戊醇去除蛋白质和用乙醇沉淀叶绿体DNA(cpDNA)和线粒体DNA(mtDNA),结果如下:(1)叶绿体提取液中叶绿体数量的平均值为1 500个/m L,而詹纳斯绿B染色观察发现提取液中线粒体结构完整、含量较多;(2)叶片取材量为4 g时,CMS1(WT)的cpDNA平均产率为0.41(0.47)μg/g,而mtDNA的平均产率为1.15(0.83)μg/g;改进叶片取材量为10 g时,两种苜蓿材料的cpDNA和mtDNA的平均产率升高至2.17μg/g和2.22μg/g,并且纯度好(cpDNA和mtDNA的OD260/OD280均保持在2.0左右);延长蛋白酶K消化处理时间(2 h,4 h和6 h)可以提高紫花苜蓿cpDNA和mtDNA的产率,其中消化4 h的mtDNA质量浓度最高(59.9 ng/μL),而cpDNA浓度则在孵育6 h后达到最高值24.3 ng/μL;(3)紫花苜蓿CMS1和WT的mtDNA和cpDNA琼脂糖凝胶电泳检测发现,细胞质基因组条带清晰,无拖尾现象,进一步表明采用以上方法提取的紫花苜蓿mtDNA和cpDNA符合分子遗传学研究的标准和要求。 展开更多

关键词 紫花苜蓿 线粒体DNA 叶绿体DNA 差速离心法

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水稻金属硫蛋白基因(rgMT)遗传转化的紫花苜蓿耐盐性分析 被引量：6

16

作者 徐畅 何好 +1 位作者 李国良 金淑梅 《草业科学》 CAS CSCD 2018年第4期829-838,共10页

采用根癌农杆菌介导法将从水稻(Oryza sativa)中克隆出的一个金属硫蛋白基因(rgMT)转化到紫花苜蓿(Medicago sativa)品种"农菁1号"中,经PCR和Northern blot技术对获得的抗性植株进行了检测,证明rgMT基因已整合到苜蓿基因组中... 采用根癌农杆菌介导法将从水稻(Oryza sativa)中克隆出的一个金属硫蛋白基因(rgMT)转化到紫花苜蓿(Medicago sativa)品种"农菁1号"中,经PCR和Northern blot技术对获得的抗性植株进行了检测,证明rgMT基因已整合到苜蓿基因组中并在转基因植株中转录表达。以野生型苜蓿为对照,对获得的转基因苜蓿株系在不同浓度NaCl、NaHCO3胁迫下的表型和生理指标测定发现,NaCl、NaHCO3胁迫处理后,野生型苜蓿受胁迫严重甚至死亡,转基因苜蓿受胁迫较轻。转基因苜蓿的脯氨酸含量和超氧化物歧化酶活性显著高于野生型(P<0.05),细胞膜透性显著低于野生型,野生型苜蓿叶片中积累的过氧化氢高于转基因苜蓿的叶片中积累的过氧化氢。研究结果表明,rgMT基因已在苜蓿中表达,并且提高了转基因苜蓿的耐盐性。 展开更多

关键词 水稻金属硫蛋白基因 紫花苜蓿 遗传转化 生理指标 耐盐性 过氧化氢

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PEG模拟干旱胁迫下5种紫花苜蓿萌发期抗旱性的评估 被引量：47

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作者 程波 胡生荣 +4 位作者 高永 樊璐 翟波 刘湘杰 张慧敏 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2019年第1期53-59,共7页

【目的】分析5种紫花苜蓿种子萌发期的抗旱性,以选育适合在内蒙古半干旱地区种植的紫花苜蓿品种。【方法】以内蒙古半干旱地区常用的5个紫花苜蓿品种(金皇后、中苜一号、阿尔冈金、威尔纳、冰驰)种子为材料,利用不同渗透势的PEG-6000溶... 【目的】分析5种紫花苜蓿种子萌发期的抗旱性,以选育适合在内蒙古半干旱地区种植的紫花苜蓿品种。【方法】以内蒙古半干旱地区常用的5个紫花苜蓿品种(金皇后、中苜一号、阿尔冈金、威尔纳、冰驰)种子为材料,利用不同渗透势的PEG-6000溶液(0,-0.03,-0.10,-0.24,-0.42,-0.94 MPa)模拟干旱环境,测定5种紫花苜蓿品种种子萌发期的发芽率、发芽势、发芽指数、单日发芽数、抗旱指数5项指标,并利用隶属函数法对5种紫花苜蓿的抗旱性进行综合评价。【结果】不同渗透势的PEG溶液对5种紫花苜蓿种子的萌发均有抑制作用,且抑制效果随着渗透势的降低而增强,当渗透势达到-0.94MPa时,只有金皇后的发芽率在50%以上,具备正常的发芽能力。在渗透势从0下降到-0.42MPa时,5种紫花苜蓿种子的发芽高峰期不同程度向后推移5d左右,且发芽高峰期的最大发芽数也随之下降10～20粒,当渗透势达到-0.94MPa时,5种紫花苜蓿种子单日发芽数都不足5粒。依据隶属函数法,评判出5种紫花苜蓿种子萌发期抗旱性强弱依次为:金皇后>威尔纳>阿尔冈金>中苜一号>冰驰。【结论】在内蒙古半干旱地区,最适宜种植的紫花苜蓿品种为金皇后,其次为威尔纳。 展开更多

关键词 紫花苜蓿 种子萌发 抗旱性 内蒙古半干旱地区

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紫花苜蓿抗旱相关促分裂原活化蛋白激酶植物表达载体的构建

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作者 白雪梅 陶柏秋 张岩 《内蒙古石油化工》 CAS 2013年第1期30-32,共3页

本实验在前期用RT-PCR法克隆出紫花苜蓿促分裂原活化蛋白激酶MMK4基因cDNA的基础上以其为基因供体与诱导型启动子构建植物表达载体,并分别通过三亲本杂交法和冻融法将重组质粒导入根癌农杆菌LBA4404中,为通过农杆菌介导法将MMK4基因导... 本实验在前期用RT-PCR法克隆出紫花苜蓿促分裂原活化蛋白激酶MMK4基因cDNA的基础上以其为基因供体与诱导型启动子构建植物表达载体,并分别通过三亲本杂交法和冻融法将重组质粒导入根癌农杆菌LBA4404中,为通过农杆菌介导法将MMK4基因导入植物奠定基础。 展开更多

关键词 抗旱 促分裂原活化蛋白激酶基因 植物表达载体

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3个紫花苜蓿新品系在新疆维吾尔自治区的生产性能评价 被引量：6

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作者 对山开勒得·热合木江 朱文煜 +1 位作者 董佳乐 王玉祥 《畜牧与饲料科学》 2024年第4期78-84,共7页

[目的]评价3个紫花苜蓿新品系在新疆维吾尔自治区的生产性能。[方法]以新疆农业大学草种质资源与育种团队选育的3个紫花苜蓿新品系MX01、MX02、MX03作为研究对象,以新疆维吾尔自治区培育的紫花苜蓿本地品种“新牧4号”作为对照(CK),测... [目的]评价3个紫花苜蓿新品系在新疆维吾尔自治区的生产性能。[方法]以新疆农业大学草种质资源与育种团队选育的3个紫花苜蓿新品系MX01、MX02、MX03作为研究对象,以新疆维吾尔自治区培育的紫花苜蓿本地品种“新牧4号”作为对照(CK),测定并比较不同紫花苜蓿材料在3个刈割茬次下的株高、干鲜比、叶茎比、鲜草产量、鲜草总产量、干草产量、干草总产量,并对各性状指标与鲜草总产量和干草总产量之间的相关性进行分析。[结果]4份材料的平均株高从高到低依次为MX01(95.23 cm)、CK(94.56 cm)、MX03(90.25 cm)、MX02(88.36 cm),表明MX01的生长速度较快。4份材料的平均干鲜比从高到低依次为MX02(32.22%)、CK(28.81%)、MX01(27.76%)、MX03(25.36%),表明MX02在干物质积累方面的表现较好。4份材料的平均叶茎比从高到低依次为MX03(70.85%)、MX02(67.53%)、CK(66.68%)、MX01(62.76%),表明MX03在品质方面具有优势。MX02和MX03前2个刈割茬次的鲜草产量对鲜草总产量的贡献率较高,均达到80%以上;4份材料的鲜草总产量从高到低依次为MX03(89.01 t/hm^(2))、MX02(86.33 t/hm^(2))、CK(83.53 t/hm^(2))、MX01(76.62 t/hm^(2)),MX03的鲜草总产量显著(P<0.05)高于其他3份材料,提示该份材料适宜用作鲜草生产。3个紫花苜蓿新品系材料在3个刈割茬下干草产量对干草总产量的贡献率变化存在明显差异;4份材料的干草总产量从高到低依次为MX02(27.82 t/hm^(2))、CK(24.06 t/hm^(2))、MX03(22.57 t/hm^(2))、MX01(21.27 t/hm^(2)),提示MX02适宜用作干草生产。第2茬鲜草产量与鲜草总产量呈极显著(P<0.01)正相关,第2茬叶茎比与干草总产量呈极显著(P<0.01)负相关。[结论]对不同刈割茬次及整个生产周期下3个紫花苜蓿新品系多项性状指标的评价结果表明,新品系MX02和MX03的综合表现更好,具有在新疆维吾尔自治区推广种植的潜力。 展开更多

关键词 紫花苜蓿 株高 叶茎比 干鲜比 草产量 相关性分析

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三叶草种间杂种的育成

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作者 А.К.Слесарвиичюс 仇良德 《国外畜牧学（草原与牧草）》 1989年第1期20-21,共2页

本文采用红三叶、杂三叶和具有抗菌核病的野生种——粉花三叶草进行远缘杂交,经过选择、培育从而获得较为满意的32个杂交植株。

关键词 三叶草 豆科牧草 育种

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