[目的]水稻Hd1(Heading date 1)在不同遗传背景的品种中存在多种单体型,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术创制hd1突变体探究其对抽穗期的调控,解析Hd1单体型的功能特性。[方法]在Hd1的CDS设计靶位点,构建敲除载体,利用农杆菌介导法转入受体...[目的]水稻Hd1(Heading date 1)在不同遗传背景的品种中存在多种单体型,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术创制hd1突变体探究其对抽穗期的调控,解析Hd1单体型的功能特性。[方法]在Hd1的CDS设计靶位点,构建敲除载体,利用农杆菌介导法转入受体品种龙粳11(LJ11)和松粳2(SJ2)中。测序鉴定转基因植株突变类型,与对照同时种植调查抽穗期,qRT-PCR检测突变体中成花素基因Hd3a和RFT1的表达量。[结果]Hd1的编码区在LJ11背景下第30个碱基后面插入G,在SJ2背景下第31个碱基后面插入T,获得纯合突变体hd1(LJ11)和hd1(SJ2),相较于野生型,hd1(LJ11)延迟了水稻开花,Hd3a和RFT1的表达量下降,而hd1(SJ2)提早了水稻开花伴随着Hd3a和RFT1的表达量上升。[结论]hd1(LJ11)延迟抽穗6.1 d,hd1(SJ2)提早开花2.8 d,说明两种遗传背景下Hd1发挥功能存在差异性,调控抽穗期具有背景依赖性。展开更多
文摘[目的]水稻Hd1(Heading date 1)在不同遗传背景的品种中存在多种单体型,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术创制hd1突变体探究其对抽穗期的调控,解析Hd1单体型的功能特性。[方法]在Hd1的CDS设计靶位点,构建敲除载体,利用农杆菌介导法转入受体品种龙粳11(LJ11)和松粳2(SJ2)中。测序鉴定转基因植株突变类型,与对照同时种植调查抽穗期,qRT-PCR检测突变体中成花素基因Hd3a和RFT1的表达量。[结果]Hd1的编码区在LJ11背景下第30个碱基后面插入G,在SJ2背景下第31个碱基后面插入T,获得纯合突变体hd1(LJ11)和hd1(SJ2),相较于野生型,hd1(LJ11)延迟了水稻开花,Hd3a和RFT1的表达量下降,而hd1(SJ2)提早了水稻开花伴随着Hd3a和RFT1的表达量上升。[结论]hd1(LJ11)延迟抽穗6.1 d,hd1(SJ2)提早开花2.8 d,说明两种遗传背景下Hd1发挥功能存在差异性,调控抽穗期具有背景依赖性。
