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马铃薯钼辅因子硫化酶基因 (LOS5) 克隆及功能分析
1
作者 王英琪 李景伟 +4 位作者 于卓 赵晋邦 袁清华 刘博 姜超 《华北农学报》 北大核心 2026年第1期56-63,共8页
为探究马铃薯钼辅因子硫化酶基因(LOS5)的结构和功能,以紫彩3号马铃薯为试验材料,采用PCR技术克隆获得马铃薯StLO S5基因,并对其进行生物信息学分析、亚细胞定位、酵母逆境表型观察以及干旱胁迫下表达模式分析。结果表明,马铃薯StLOS5基... 为探究马铃薯钼辅因子硫化酶基因(LOS5)的结构和功能,以紫彩3号马铃薯为试验材料,采用PCR技术克隆获得马铃薯StLO S5基因,并对其进行生物信息学分析、亚细胞定位、酵母逆境表型观察以及干旱胁迫下表达模式分析。结果表明,马铃薯StLOS5基因CDS区全长2460 bp,编码819个氨基酸,分子质量为91.50 ku,理论等电点为6.78,亲水系数为-0.268,属于亲水性蛋白。系统进化分析显示,马铃薯StLOS5蛋白与番茄LOS5同源性最高,可能具有相似的功能。在其启动子区域检测到多个与非生物胁迫相关的顺式作用元件。亚细胞定位显示,StLOS5主要定位于细胞核。酵母逆境表型观察试验结果显示,StLOS5具有提高渗透胁迫耐受性的能力。荧光定量PCR分析结果表明,StLOS5的表达具有组织特异性,且在叶片中含量较高,并在干旱胁迫下能够快速响应,8%聚乙二醇处理12 h后叶片表达量达到峰值。以上结果表明,StLOS5在马铃薯响应干旱胁迫过程中具有一定作用。 展开更多
关键词 马铃薯 StLOS5 生物信息学分析 干旱胁迫
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水稻OsMS5-1/OsMS5-2双突变体花粉形态电镜扫描观察 被引量：3
2
作者 唐向民 金刚 +1 位作者 周琼 周瑞阳 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1660-1663,共4页
【目的】观察水稻MS5同源基因OsMS5-1/OsMS5-2双突变体的形态特征,为进一步研究水稻MS5同源基因OsMS5-1、OsMS5-2在水稻雄性育性中的功能提供参考。【方法】以前期通过RNAi干扰技术创制的两个水稻MS5同源基因OsMS5-1、OsMS5-2的粳稻中... 【目的】观察水稻MS5同源基因OsMS5-1/OsMS5-2双突变体的形态特征,为进一步研究水稻MS5同源基因OsMS5-1、OsMS5-2在水稻雄性育性中的功能提供参考。【方法】以前期通过RNAi干扰技术创制的两个水稻MS5同源基因OsMS5-1、OsMS5-2的粳稻中花11干扰单突变体T1代为亲本,将其进行正反杂交以创制双突变体,以野生型粳稻中花11成熟花粉粒为参照,对双突变体的花粉粒进行碘—碘化钾染色及电镜扫描观察。【结果】正反交双突变体的花粉粒均未被染色,呈细小、不规则、透明状,其不育度可达100%,而正常可育的野生型花粉粒被染为深蓝色,呈较大而规则的正圆形。双突变体的花粉粒存在发育缺陷,其外形、萌发孔和花粉粒外壁均明显不同于正常可育的野生型中花11的花粉粒。【结论】水稻OsMS5-1及OsMS5-2基因双突变体花粉粒形态特征与野生型可育花粉粒存在一定差异,但两种双突变体不育花粉粒总体上差别不明显,可作为鉴别早期不育与可育花粉的重要指标。 展开更多
关键词 水稻 MS5 OsMS5-1 OsMS5-2 双突变体 花粉形态
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烟草NtSPS5基因的克隆、表达及功能分析
3
作者 李冰雨 刘俊宏 +2 位作者 王中 杨军 徐馨 《江苏农业科学》 北大核心 2025年第19期45-52,共8页
基于烟草基因组与转录组数据,利用PCR克隆烟草NtSPS5基因,运用生物信息学方法分析基因结构、启动子顺式作用元件以及蛋白结构,同时利用qRT-PCR分析在不同糖源和激素处理条件下NtSPS5的表达模式,进行遗传转化研究NtSPS5调控烟草糖含量的... 基于烟草基因组与转录组数据,利用PCR克隆烟草NtSPS5基因,运用生物信息学方法分析基因结构、启动子顺式作用元件以及蛋白结构,同时利用qRT-PCR分析在不同糖源和激素处理条件下NtSPS5的表达模式,进行遗传转化研究NtSPS5调控烟草糖含量的功能。结果表明,NtSPS5基因编码区全长3 141 bp,其编码的蛋白有1 046个氨基酸,NtSPS5是亲水蛋白,无信号肽。NtSPS5基因的启动子区域包含多个参与激素响应的顺式作用元件。进一步表达分析结果表明,NtSPS5在脱落酸、茉莉酸甲酯、果糖和海藻糖处理下表达量显著上调,而生长素和麦芽糖会抑制NtSPS5基因的表达。此外,过表达NtSPS5基因显著提高了烟草叶片中的蔗糖、果糖、葡萄糖和可溶性糖含量。研究结果表明NtSPS5调控烟草蔗糖合成,并且受到糖和激素信号诱导,可为进一步探索植物蔗糖合成与代谢提供一定基础。 展开更多
关键词 蔗糖磷酸合成酶 烟草 NtSPS5基因表达分析 激素 功能分析
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水稻OsMNS5生物信息学分析及其对结实率的影响
4
作者 袁丽梦 陈宇乐 +7 位作者 刘世明 邢殿祥 黄培琪 罗佳怡 吴泽璇 雷友谊 毛兴学 张建军 《广东农业科学》 2025年第8期80-90,共11页
【目的】N-糖基化是真核细胞中蛋白质的一种主要共翻译和翻译后修饰,在内质网蛋白质降解和逆境胁迫中发挥重要作用。α-甘露糖苷酶(α-Mannosidase,MNS)参与N-糖基糖蛋白中α-1,2甘露糖的切除,分析OsMNS5对水稻生长发育的影响,为进一步... 【目的】N-糖基化是真核细胞中蛋白质的一种主要共翻译和翻译后修饰,在内质网蛋白质降解和逆境胁迫中发挥重要作用。α-甘露糖苷酶(α-Mannosidase,MNS)参与N-糖基糖蛋白中α-1,2甘露糖的切除,分析OsMNS5对水稻生长发育的影响,为进一步研究OsMNS5的生理功能及其在水稻内质网蛋白质降解中的作用提供理论依据。【方法】利用水稻基因组数据库鉴定水稻MNS基因家族成员,通过生物信息学方法系统分析其基因家族成员的蛋白理化性质、系统发育树、保守基序、顺式作用元件,进一步通过CRISPR/Cas9技术对OsMNS5进行基因编辑,并分析敲除OsMNS5对水稻农艺性状的影响。【结果】OsMNS基因家族中有4个成员,分别分布在4条染色体上,具有相似的蛋白保守结构域。4个OsMNS基因编码氨基酸序列长度在572~684 aa,相对分子质量范围为65.09~75.30 kD,等电点呈弱酸性至中性特征,亲水系数为负值;顺式作用元件分析发现,OsMNS基因家族成员启动子区域含有大量与植物激素、逆境胁迫和光等相关的响应元件;通过系统进化分析获得水稻中与拟南芥MNS5同源的蛋白OsMNS5,利用基因编辑技术敲除OsMNS5,获得2种不同突变类型的纯合突变体,基因敲除OsMNS5导致水稻结实率下降22.8%~31.7%。【结论】共鉴定出4个水稻MNS基因,水稻中MNS蛋白与其他物种中的同源蛋白均具有保守结构域;水稻OsMNS5与拟南芥AtMNS5同源,可能在内质网错误折叠蛋白降解中发挥重要的作用;OsMNS5敲除水稻结实率降低,为解析OsMNS5在水稻生长发育中的生物学功能提供理论基础。 展开更多
关键词 水稻 OsMNS5 生物信息学 基因编辑 结实率 内质网 蛋白质降解
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水稻广亲和基因S5-n的功能标记开发及其应用 被引量：36
5
作者 杨杰 王军 +2 位作者 曹卿 陈志德 仲维功 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期2000-2007,共8页
广亲和基因S5-n是能够恢复籼、粳杂种育性的基因,利用常规育种方法回交转育广亲和基因需要通过配组杂种F1,根据F1的育性判断和选择S5-n,选育周期长,方法繁琐。因此,在广亲和遗传改良和聚合育种中需要寻找一种快速、简便的广亲和基因检... 广亲和基因S5-n是能够恢复籼、粳杂种育性的基因,利用常规育种方法回交转育广亲和基因需要通过配组杂种F1,根据F1的育性判断和选择S5-n,选育周期长,方法繁琐。因此,在广亲和遗传改良和聚合育种中需要寻找一种快速、简便的广亲和基因检测方法。本研究根据水稻广亲和基因和籼粳S-5等位基因序列存在136bp缺失的特征,设计了InDel标记S5136。前人研究已经明确02428、Dualr、CPSLO17具有S5-n,分子标记S5136 PCR扩增这3个材料的带型为缺失带型,而不携带广亲和基因S5-n的材料的带型为非缺失带型。利用该标记对3037与02428的F2群体分析表明,该标记能准确区分S5-n、S5-i纯合及杂合基因型,标记基因型符合1∶2∶1比例,没有发生偏分离现象。利用该标记从554份水稻品种资源(O.sativa L.)和27份普通野生稻(O.rufipogen Griff.)以及24份江淮流域杂草稻资源中筛选出具有缺失带型的资源材料13份,并对其PCR产物测序证实为S5-n,对Kasalath的广亲和性进行了初步验证;从20份02428的高世代育种材料中,筛选到携带广亲和基因S5-n的恢复系2份。该标记可以用于S5-n基因资源筛选、分子标记辅助选择育种和培矮64S为母本的杂交种种子纯度鉴定。 展开更多
关键词 广亲和基因S5-n 功能标记 亚洲栽培稻 普通野生稻 杂草稻
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转LOS5玉米的大田抗旱性鉴定 被引量：10
6
作者 刘成 杨炳鹏 +10 位作者 孙宝成 章家长 唐怀君 王天宇 张登峰 谢小清 石云素 宋燕春 杨小红 黎裕 李建生 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第23期4469-4479,共11页
【目的】培育转基因抗旱玉米新品种是解决玉米生产问题的重要途径。通过鉴定和分析拟南芥LOS5转入玉米后对玉米田间抗旱性的影响,筛选抗旱性突出的转LOS5的玉米株系用于抗旱育种。【方法】在150、225、300、375、450和600 mm(CK)梯度灌... 【目的】培育转基因抗旱玉米新品种是解决玉米生产问题的重要途径。通过鉴定和分析拟南芥LOS5转入玉米后对玉米田间抗旱性的影响,筛选抗旱性突出的转LOS5的玉米株系用于抗旱育种。【方法】在150、225、300、375、450和600 mm(CK)梯度灌水胁迫处理条件下,大田鉴定8个转LOS5玉米株系及其受体郑58的抗旱性,测定产量和其他农艺性状的变化,明确LOS5在提高玉米抗旱性方面的主要田间表现形式,同时筛选抗旱性显著优于受体的转基因株系。【结果】随着累计灌水量600—150 mm逐渐降低,9个试验材料的产量和抗旱性均相应下降。8个转基因玉米株系的产量在225—450 mm灌水范围内均显著高于受体郑58,且在正常灌水600 mm的一半处理(300 mm)时差异最大化。300 mm灌水处理中,8个转基因株系的抗旱性指数为0.56—0.70,显著高于受体郑58(0.5),抗旱性提高12%—40%。抗旱性从强到弱的材料顺序是T8920B6、T8920B2、T8920B7、T8920B5、T8020B1、T8920B4、T8920B3、T8920B8和受体郑58。营养体生长和发育方面,在灌水150—225 mm处理中,8个转基因材料灌浆末期的叶色SPAD值38.4—42.4,均极显著高于受体郑58(28.7—37.5),但地上部生物重量、株高和穗位高没有显著差异;果穗发育方面,在灌水150—225 mm处理中,8个转基因株系的穗重为42.3—61.6 g,穗长为10.9—13.1 cm,均极显著高于受体(36.4—40.7 g和8.5—11.8 cm),但轴重和穗粗的差异不显著;籽粒发育方面,8个转基因株系的穗粒数为86.6—182.6,行粒数为8.4—15.6,也显著高于受体的穗粒数57.3—83.2和行粒数4.9—7.1,但穗行数和百粒重差异不显著。【结论】LOS5转入受体郑58后,对转基因玉米开花前营养生长的影响较小,但在开花之后维持受旱玉米的穗长、行粒数和灌浆后期叶色等方面发挥了积极作用,使受旱玉米的穗重、穗粒数和产量保持在相对较高的水平,从而提高了玉米的抗旱性;LOS5转基因玉米株系的抗旱性均高于受体郑58,但抗旱性提高程度有显著差异,对不同转化株系进行大田抗旱性鉴定和筛选是十分必要的;正常灌水量一半的胁迫强度能最大化玉米抗旱性的差异,有利于鉴定和筛选出有利用价值的转基因材料。 展开更多
关键词 玉米 LOS5 抗旱性 转基因
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水稻光温敏核不育基因tms5与pms3的互作效应 被引量：6
7
作者 王芳权 范方军 +10 位作者 夏士健 宗寿余 郑天清 王军 李文奇 许扬 陈智慧 蒋彦婕 陶亚军 仲维功 杨杰 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期317-329,共13页
tms5与pms3是水稻的光温敏核不育基因,其功能位点已经明确,然而它们在两系不育系中的效应尚不清楚。本研究针对tms5与pms3基因功能位点,分别设计了功能标记AS-TMS5和CAPS-PMS3。经鉴定发现,这2个功能标记能准确区分不育、可育性状对应... tms5与pms3是水稻的光温敏核不育基因,其功能位点已经明确,然而它们在两系不育系中的效应尚不清楚。本研究针对tms5与pms3基因功能位点,分别设计了功能标记AS-TMS5和CAPS-PMS3。经鉴定发现,这2个功能标记能准确区分不育、可育性状对应的隐性纯合、杂合和显性纯合3种基因型。利用AS-TMS5和CAPS-PMS3对培矮64S/9311、广占63S/湘恢47和粤光S/宁恢108的F2群体单株的基因型及育性的关系分析发现,tms5基因是广占63S和粤光S控制光温敏不育性状的主效基因,而pms3基因在培矮64S和粤光S中并不能独立起作用,还需要与其他基因共同调控。进一步分析粤光S/宁恢108的F2:3群体基因型与育性的关系,发现在粤光S/宁恢108背景下,携带pms3基因的株系几乎都表现可育,而携带tms5基因的株系在较高气温条件下表现不育,但育性转换温度可能较高;而携带tms5与pms3基因的株系育性转换温度比仅携带tms5基因的株系低,这为聚合2个基因选育不育性状稳定的光温敏不育系提供了思路和方法。 展开更多
关键词 tms5 pms3 功能标记 光敏不育 温敏不育
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应用数学模型对矮啤大麦S500高产栽培及经济效应的研究 被引量：4
8
作者 刘铁梅 邹薇 +3 位作者 张迁维 郑君 刘铁芳 缪志敏 《生物数学学报》 CSCD 北大核心 2008年第4期695-702,共8页
采用五因素五水平正交旋转回归组合设计,研究华中地区种植密度、有机肥、氮、磷、钾等因素与矮啤大麦S500产量、千粒重和经济效益的综合效应.对模型解析发现,在供试条件下密度、有机肥、氮、磷、钾单因子对大麦产量的绝对贡献顺序为氮肥... 采用五因素五水平正交旋转回归组合设计,研究华中地区种植密度、有机肥、氮、磷、钾等因素与矮啤大麦S500产量、千粒重和经济效益的综合效应.对模型解析发现,在供试条件下密度、有机肥、氮、磷、钾单因子对大麦产量的绝对贡献顺序为氮肥>有机肥>磷肥>钾肥>密度,对千粒重的绝对贡献顺序为磷肥>有机肥>钾肥>密度>氮肥,对净收入的绝对贡献顺序为氮肥>有机肥>磷肥>钾肥>密度.计算机模拟寻优表明,密度在219.3-233.13万株/hm^2,有机肥在22050-24975kg/hm^2,氮肥在186.49-208.92kg/km^2,磷肥在91.14-104.68kg/hm^2,钾肥在63.41-82.58kg/hm^2时,大麦千粒重在42g以上,大麦的产量在5000kg/hm^2,净收入在5000元/hm^2以上,足以实现大麦优质高产且经济效益大的目的. 展开更多
关键词 矮啤大麦S500 产量 千粒重 净收入 正交旋转回归
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红麻Ms5基因的克隆及多转录本分析 被引量：3
9
作者 唐向民 金刚 +3 位作者 李刚 周琼 陈鹏 周瑞阳 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期536-540,共5页
为研究Ms5基因在红麻(Hibiscus canabius L.)花药中的转录特征,以L23A不育系为试材,基于已知的红麻Ms5基因5′端cDNA序列,采用3′RACE和RT-PCR技术对该基因全长cDNA序列进行克隆。序列比对分析结果表明,红麻花药组织中同时存在Ms5基因2... 为研究Ms5基因在红麻(Hibiscus canabius L.)花药中的转录特征,以L23A不育系为试材,基于已知的红麻Ms5基因5′端cDNA序列,采用3′RACE和RT-PCR技术对该基因全长cDNA序列进行克隆。序列比对分析结果表明,红麻花药组织中同时存在Ms5基因2种不同的转录本,其长度分别为972和1 105bp,依次命名为HcMs5-α和HcMs5-β。这2种转录本均包含了完整且一致的编码序列,其编码序列(CDS)全长为858bp,预测编码的蛋白质含有285个氨基酸残基,分子质量为32.4ku,理论等电点为7.62;两者5′端前972bp序列完全一致,但3′端的非编码区(UTR)长度有所不同,HcMs5-β在第972bp以后比HcMs5-α多出133bp的序列,具有选择性转录终止的特征。这种转录终止信号的可选择性可能与该基因转录后水平的调控有关。 展开更多
关键词 红麻 Ms5基因 3′RACE 多转录本 选择性转录终止
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利用广亲和基因S5-n的功能标记鉴定水稻资源和检测杂交种纯度 被引量：2
10
作者 张爱伟 杨杰 +6 位作者 夏士健 曹卿 王军 汤顺英 戴金平 陈志德 仲维功 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2010年第6期1133-1138,共6页
为开发利用水稻广亲和基因S5-n的功能标记筛选了部分资源以及鉴定了以培矮64S不育系为母本的杂交种种子纯度。应用广亲和基因S5-n的功能标记S5136从不育系中筛选出携带广亲和基因S5-n的不育系粤泰A,并利用测序证实,同时发现在缺失下游有... 为开发利用水稻广亲和基因S5-n的功能标记筛选了部分资源以及鉴定了以培矮64S不育系为母本的杂交种种子纯度。应用广亲和基因S5-n的功能标记S5136从不育系中筛选出携带广亲和基因S5-n的不育系粤泰A,并利用测序证实,同时发现在缺失下游有1个单碱基的突变,与来源于印度的广亲和材料相同;对以培矮64S为母本的杂交稻两优986的种子中不育系自交结实情况进行了判定,从233棵苗中发现4株培矮64S,自交结实率为1.72%。同时比较了SDS方法和简易DNA快速提取方法的PCR结果,发现利用简易方法提取的DNA当天扩增也可以获得较好的PCR结果,但常温保存2周后,以简易方法提取的DNA为模板难以获得PCR产物。因此,S5-n基因的功能标记S5136可以用于广亲和基因的资源鉴定以及鉴定以培矮64S为母本的杂交种自交结实率。 展开更多
关键词 广亲和基因S5-n 功能标记 资源筛选 纯度鉴定
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普通野生稻（O.rufipogon）微核心种质中广亲和基因S5^n的检测与分析 被引量：2
11
作者 姚国新 但志武 +1 位作者 鲁旭东 黄文超 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2014年第1期11-14,共4页
普通野生稻微核心种质中蕴含丰富的优异基因资源,是用于水稻品种改良和基础研究的重要材料。为了筛选携带广亲和基因S5n的普通野生稻种质,利用前人开发的鉴定水稻S5n基因的InDel分子标记,对107份野生稻微核心种质进行了PCR扩增和读带分... 普通野生稻微核心种质中蕴含丰富的优异基因资源,是用于水稻品种改良和基础研究的重要材料。为了筛选携带广亲和基因S5n的普通野生稻种质,利用前人开发的鉴定水稻S5n基因的InDel分子标记,对107份野生稻微核心种质进行了PCR扩增和读带分析。结果筛选出3份携带S5n广亲和基因的野生稻种质,均来自海南省,该基因可能在海南完成演化。野生稻广亲和材料有助于籼粳交育种材料的创制。 展开更多
关键词 普通野生稻 微核心种质 S5^n 检测与分析
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不同水稻tms5突变位点对雄性不育起点温度的影响 被引量：1
12
作者 吴明基 刘华清 +5 位作者 陈建民 付艳萍 杨绍华 宋亚娜 林艳 王锋 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期761-771,共11页
【目的】研究不同水稻tms5突变位点对雄性不育起点温度的影响,探讨不育起点温度遗传调控途径。【方法】在水稻TMS5的6个外显子上设计11个CRISPR/Cas9基因编辑靶点,依次命名为T501—T511,构建相应载体转化粳稻品种日本晴和籼稻品种明恢86... 【目的】研究不同水稻tms5突变位点对雄性不育起点温度的影响,探讨不育起点温度遗传调控途径。【方法】在水稻TMS5的6个外显子上设计11个CRISPR/Cas9基因编辑靶点,依次命名为T501—T511,构建相应载体转化粳稻品种日本晴和籼稻品种明恢86,获得各靶点的tms5移码突变体。田间自然高温及人工气候箱(设日平均22、24和28℃3种温度)条件下分析tms5突变体的花粉碘染及自交结实率,鉴定不育起点温度。【结果】粳稻日本晴tms5突变体的不育起点温度高于28℃,籼稻明恢86的不同tms5突变体不育起点温度为22~28℃。此外,同一遗传背景下,通过T501靶点编辑产生的tms5-1移码突变体不育起点温度均显著高于T502靶点的tm5-2突变体,其他位点上的tms5突变体育性特征与tm5-2突变体并无差异。基因表达量分析表明,tms5-1突变体幼穗Ub_(L40)基因表达量显著低于tm5-2突变体的表达量。【结论】水稻tms5突变体不育起点温度不仅受遗传背景的影响,tms5基因突变位点不同也会影响不育起点温度,特别是T501位点与其余位点突变体间不育起点温度差异显著,为研究水稻tms5两系不育起点温度的分子机理及遗传调控网络提供了新思路。 展开更多
关键词 水稻 CRISPR/Cas9 TMS5 温敏核不育 不育起点温度
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利用CEL Ⅰ酶鉴定水稻广亲和基因S5位点的籼粳属性 被引量：1
13
作者 倪深 肖文斐 +2 位作者 陈红旗 王跃星 朱旭东 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期549-554,共6页
广亲和基因S5的克隆为水稻品种亲和特性的鉴定提供了分子学依据。利用PCR技术对水稻S5位点中籼、粳序列间存在差异的区段进行扩增,并结合芹菜核酸内切酶CELⅠ对其进行酶切鉴定,从而区分S5不同的基因型。研究结果表明该方法能准确鉴定不... 广亲和基因S5的克隆为水稻品种亲和特性的鉴定提供了分子学依据。利用PCR技术对水稻S5位点中籼、粳序列间存在差异的区段进行扩增,并结合芹菜核酸内切酶CELⅠ对其进行酶切鉴定,从而区分S5不同的基因型。研究结果表明该方法能准确鉴定不同水稻品种中S5位点的籼粳特性,并能发现新的差异序列。 展开更多
关键词 水稻 广亲和 S5基因 籼粳属性
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水稻微核心种质中广亲和基因S5^n的筛选 被引量：1
14
作者 姚国新 胡建 +1 位作者 黄明军 段俊枝 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2014年第11期6-9,共4页
利用S5n的功能标记扩增197份栽培稻微核心种质,从中筛选携带广亲和基因S5n的材料,并检验亲和性。结果表明,共筛选到11份(湖恢628、本邦谷、毫补卡、小红谷、饭毫皮、飞蛾糯2、特青选恢、包协-7B、毫马克(K)、清可、老造谷)含有S5n特异... 利用S5n的功能标记扩增197份栽培稻微核心种质,从中筛选携带广亲和基因S5n的材料,并检验亲和性。结果表明,共筛选到11份(湖恢628、本邦谷、毫补卡、小红谷、饭毫皮、飞蛾糯2、特青选恢、包协-7B、毫马克(K)、清可、老造谷)含有S5n特异带型的水稻种质,将其与籼稻9311和粳稻日本晴杂交,其F1结实率均高于75%,表现广亲和性。这批广亲和性材料可为籼粳亚种间的优势利用及品种选育提供更多的可利用资源。 展开更多
关键词 水稻 微核心种质 广亲和基因 S5^n基因 筛选与验证
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过表达花生ABA途径抗逆基因AhLOS5提高转基因烟草的耐盐性研究 被引量：1
15
作者 武晓亮 焦娟 +4 位作者 张连 张利民 张艳艳 赵瑞仝 李文金 《山东农业科学》 北大核心 2022年第4期1-8,共8页
AhLOS5基因编码花生ABA生物合成的关键酶钼辅因子硫酸化酶,是ABA途径重要的抗逆基因。为探究AhLOS5基因在植物耐盐方面的功能,本研究以T_(1)代过表达AhLOS5和RNAi转基因烟草株系为研究对象,测定盐胁迫下种子根长、细胞膜完整性、叶绿素... AhLOS5基因编码花生ABA生物合成的关键酶钼辅因子硫酸化酶,是ABA途径重要的抗逆基因。为探究AhLOS5基因在植物耐盐方面的功能,本研究以T_(1)代过表达AhLOS5和RNAi转基因烟草株系为研究对象,测定盐胁迫下种子根长、细胞膜完整性、叶绿素含量、抗氧化酶活性、内源ABA和脯氨酸含量等生理生化指标。结果表明,盐胁迫条件下,过表达AhLOS5的转基因烟草植株内源ABA含量显著升高,渗透调节物质含量高,膜脂完整性好,抗氧化酶活性及抗氧化物质含量明显升高,能够明显提高转基因株系的耐盐性。转基因烟草中另外3个抗逆相关基因DREB2B、RD22和P5CS表达量的检测结果表明,过表达AhLOS5转基因烟草获得的耐盐性是由胁迫诱导产生的内源ABA调控的。综上,花生AhLOS5基因可通过调控植物体内ABA合成量提高耐盐性,这对AhLOS5基因在花生抗性育种及品质改良中的应用具有指导意义。 展开更多
关键词 ABA AhLOS5基因 耐盐性 转基因烟草
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玉米ZmGS5基因克隆、分子特性分析及对拟南芥的遗传转化 被引量：2
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作者 刘晓丽 韩利涛 +2 位作者 魏楠 申飞 蔡一林 《作物杂志》 北大核心 2021年第1期16-25,共10页
高产是玉米育种的重要目标,籽粒大小是决定籽粒产量的重要因子。基于水稻中控制籽粒大小的OsGS5基因编码序列,利用同源克隆方法,获得了玉米ZmGS5基因,其cDNA全长为1695bp,开放阅读框1491bp,编码496个氨基酸,含有Peptidase-S10结构域、1... 高产是玉米育种的重要目标,籽粒大小是决定籽粒产量的重要因子。基于水稻中控制籽粒大小的OsGS5基因编码序列,利用同源克隆方法,获得了玉米ZmGS5基因,其cDNA全长为1695bp,开放阅读框1491bp,编码496个氨基酸,含有Peptidase-S10结构域、1个信号肽和1个丝氨酸羧肽酶(serine carboxypeptidases,SCP)类蛋白所特有的催化活性中心,这些都与SCP家族结构特点相符,也与OsGS5相关研究结果相同;磷酸化位点分析结果表明,ZmGS5含有丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸等蛋白激酶识别位点。qRTPCR分析显示ZmGS5在雄穗和叶片中的表达量较高,而在胚及胚乳中的表达量相对较低。除此之外,采用农杆菌介导法,建立了拟南芥的遗传转化体系,得到纯合转基因株系,T3代转基因拟南芥种子千粒重为0.0169g,较野生型千粒重(0.0139g)高。 展开更多
关键词 ZmGS5 基因克隆 丝氨酸羧肽酶 分子特性分析 遗传转化
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黄淮麦区部分小麦品种粒重基因TaGS5-A1的等位变异分布及其效应分析
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作者 李静雯 董亚超 +5 位作者 肖永贵 李法计 杨舒蓉 李鸣 夏先春 何中虎 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期272-280,共9页
为明确粒重基因TaGS5-A1的育种应用价值,利用竞争性等位基因特异性PCR(KASP)标记对119个不同遗传背景的黄淮麦区小麦品种进行TaGS5-A1基因等位变异检测,并结合3年2点6个环境的农艺性状表型数据,比较携带等位基因TaGS5-A1a和TaGS5-A1b的... 为明确粒重基因TaGS5-A1的育种应用价值,利用竞争性等位基因特异性PCR(KASP)标记对119个不同遗传背景的黄淮麦区小麦品种进行TaGS5-A1基因等位变异检测,并结合3年2点6个环境的农艺性状表型数据,比较携带等位基因TaGS5-A1a和TaGS5-A1b的品种千粒重、粒长、粒宽、株高、穗长和穗下节长等性状。结果表明,检测品种中有91个含TaGS5-A1b等位基因,分布频率为76.5%,有28个含TaGS5-A1a等位基因,分布频率为23.5%;在6个环境下含TaGS5-A1b品种的千粒重(43.4 g)和粒宽(3.4 mm)均极显著高于含TaGS5-A1a等位基因的品种,增幅分别为6.6%和3.0%,而含TaGS5-A1b等位基因品种的株高显著低于含TaGS5-A1a等位基因的品种,降幅为6.6%,含不同等位基因品种的粒长、穗长、穗下节长均无显著差异;安徽、河南、山东、陕西和河北5省检测材料中TaGS5-A1b优异等位变异的分布频率分别为100%、88.1%、81.8%、66.7%和66.7%。本研究为黄淮麦区小麦粒重分子育种提供了材料和高通量的功能标记。 展开更多
关键词 小麦 TaGS5-A1 等位变异 KASP
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广亲和基因S5-n在水稻核心种质资源中的分布研究 被引量：1
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作者 徐华山 周雷 +1 位作者 蒋医蔚 游艾青 《现代农业科技》 2017年第21期33-33,36,共2页
为了更好地发挥水稻广亲和基因S5-n在水稻育种中的作用,本研究分析了S5-n在264份水稻核心种质中的分布情况。结果表明,共检测到含有S5-n基因的材料26份,检出频率9.8%。其中,国内材料10份,国外材料16份。含有S5-n基因的26份材料中籼稻、... 为了更好地发挥水稻广亲和基因S5-n在水稻育种中的作用,本研究分析了S5-n在264份水稻核心种质中的分布情况。结果表明,共检测到含有S5-n基因的材料26份,检出频率9.8%。其中,国内材料10份,国外材料16份。含有S5-n基因的26份材料中籼稻、粳稻各为13份。S5-n基因在核心种质资源中的分布没有表现出籼、粳偏好。 展开更多
关键词 水稻 广亲和基因 S5-n 水稻核心种质资源 分布
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陆地棉MS5同源基因的电子克隆及序列分析
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作者 金刚 唐向民 +3 位作者 刘冬梅 陈鹏 韦丽君 周瑞阳 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第2期243-247,共5页
高等植物MS5基因的异常表达可导致雄性不育的发生。本研究利用EST数据库,在陆地棉隐性雄性不育系洞A中通过电子克隆获得1个棉花MS5同源基因,命名为GhMS5。采用RT-PCR方法验证GhMS5基因的cDNA序列,并利用在线分析平台和生物软件对该基因... 高等植物MS5基因的异常表达可导致雄性不育的发生。本研究利用EST数据库,在陆地棉隐性雄性不育系洞A中通过电子克隆获得1个棉花MS5同源基因,命名为GhMS5。采用RT-PCR方法验证GhMS5基因的cDNA序列,并利用在线分析平台和生物软件对该基因进行生物信息学分析。结果显示,RT-PCR验证编码区序列与电子克隆序列一致;获得的GhMS5基因cDNA长1 631 bp,包含一个长1 437 bp的完整开放阅读框,编码478个氨基酸;其分子量为53 240,等电点为9.25;GhMS5蛋白质具有典型的TPR保守结构域;此蛋白质不存在信号肽及跨膜结构,可能定位于叶绿体,二级结构主要以α-螺旋和无规则卷曲为主。表明电子克隆能用于棉花基因的分离。 展开更多
关键词 陆地棉 MS5同源基因 电子克隆 序列分析
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Microbacteriu estmeraromaticum GS514菌株中一种人参皂苷β-葡萄糖苷酶的分离及其性质研究
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作者 成乐琴 鱼红闪 +1 位作者 金凤燮 Deok-Chun Yang 《延边大学农学学报》 2011年第2期122-126,共5页
人参土壤微生物Microbacterium esteraromaticum GS514显示出良好的人参皂苷转化能力.采用DEAE-cellulose DE-52阴离子交换树脂,从人参土壤微生物Microbacterium esteraromaticum GS514中分离一种使人参皂苷Rb1水解为人参皂苷Rd的β-葡... 人参土壤微生物Microbacterium esteraromaticum GS514显示出良好的人参皂苷转化能力.采用DEAE-cellulose DE-52阴离子交换树脂,从人参土壤微生物Microbacterium esteraromaticum GS514中分离一种使人参皂苷Rb1水解为人参皂苷Rd的β-葡萄糖苷酶,并进行酶性质研究.结果表明,该酶分子量约为58.7kDa,在pH值6.5和40℃时显示出最强酶活性. 展开更多
关键词 Β-葡萄糖苷酶 MICROBACTERIUM esteraromaticum GS514 酶分离 人参皂苷RB1 人参皂苷RD
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