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内生嗜线虫镰刀菌NQ8GⅡ4诱导番茄抗枯萎病的作用机制
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作者 郭苗苗 李金 +2 位作者 贾淑鑫 闫思远 顾沛雯 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第10期132-143,共12页
【目的】探究内生嗜线虫镰刀菌(Fusarium nematophilum)NQ8GⅡ4诱导番茄抗枯萎病的作用机制,为番茄枯萎病的生物防治提供理论依据。【方法】以从健康枸杞根部分离的内生嗜线虫镰刀菌(F.nematophilum)NQ8GⅡ4菌株和番茄枯萎病原菌尖孢镰... 【目的】探究内生嗜线虫镰刀菌(Fusarium nematophilum)NQ8GⅡ4诱导番茄抗枯萎病的作用机制,为番茄枯萎病的生物防治提供理论依据。【方法】以从健康枸杞根部分离的内生嗜线虫镰刀菌(F.nematophilum)NQ8GⅡ4菌株和番茄枯萎病原菌尖孢镰刀菌(F.oxysporum f.sp.lycopersic)Fol-1菌株为材料,采用皿内对峙法测定NQ8GⅡ4菌株对番茄枯萎病菌Fol-1的体外拮抗活性,通过温室盆栽试验测定NQ8GⅡ4菌株对番茄枯萎病的防治效果。采用组织化学染色探究NQ8GⅡ4菌株对番茄植株活性氧、膜脂过氧化及细胞死亡的影响,采用紫外可见分光光度计测定NQ8GⅡ4菌株对番茄植株防御酶活性及丙二醛含量的影响,采用RT-qPCR扩增明确NQ8GⅡ4菌株对番茄植株防御相关基因表达量的影响,探究NQ8GⅡ4菌株诱导番茄抗枯萎病的生理生化机理。【结果】平板对峙试验结果显示,NQ8GⅡ4对Fol-1菌株生长有明显抑制作用,不论是同时接种NQ8GⅡ4和Fol-1处理还是先接种NQ8GⅡ4培养3 d后再接种Fol-1菌株处理,NQ8GⅡ4菌落与Fol-1菌落之间均出现了明显的抑菌带,且抑菌带边缘的Fol-1生长受到明显抑制。与同时接种NQ8GⅡ4和Fol-1菌株相比,先接种NQ8GⅡ4菌株培养3 d后再接种Fol-1菌株,NQ8GⅡ4对Fol-1的抑制作用更强,抑制率为60.00%。激光扫描共聚焦荧光显微镜观察发现,接种50 d后GFP-NQ8GⅡ4菌株能成功定植于番茄根部,定植率高达91.84%。盆栽试验发现,NQ8GⅡ4能显著降低番茄枯萎病的发生,防效高达76.85%。组织化学染色结果显示,与对照(CK)相比,单接种NQ8GⅡ4对番茄叶片的H_(2)O_(2)、O^(-)_(2)和膜脂过氧化无显著影响;单接种Fol-1菌株处理组番茄叶片活性氧显著爆发,膜脂过氧化和细胞死亡程度严重。与单接种Fol-1处理组相比,接种NQ8GⅡ4和Fol-1菌株处理组番茄叶片的活性氧爆发程度显著降低,略有膜脂过氧化但发生程度显著降低,且未检测到明显的细胞死亡。进一步研究发现,与对照(CK)相比,单独接种NQ8GⅡ4处理接种前期CAT、POD活性增加,后期SOD、β-1,3-GA和PAL等防御酶活性显著增强。与单独接种病原菌Fol-1处理相比,NQ8GⅡ4和Fol-1共同处理的番茄植株防御酶活性增加,丙二醛含量降低。RT-qPCR检测结果表明,接种NQ8GⅡ4120 h后,能显著诱导番茄PR1a、GLUA、NPR1、WRKY33和Basic CHI 5个防御相关基因的上调表达。【结论】内生嗜线虫镰刀菌NQ8GⅡ4不仅能显著抑制番茄枯萎病原菌尖孢镰刀菌的生长,促使番茄防御相关酶活性的提高,而且还可以通过激活番茄的SA和JA防御信号途径,诱导番茄植株对枯萎病的抗性,显著降低了番茄枯萎病的发生,在番茄枯萎病生物防治中具有潜在的应用前景。 展开更多
关键词 内生嗜线虫镰刀菌 番茄枯萎病 生物防治 诱导抗病机制
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藜叶片响应出芽短梗霉菌侵染内参基因筛选及光合作用相关基因表达分析
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作者 程亮 高汉峰 +3 位作者 朱海霞 李娟 王信 郭青云 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第8期1752-1762,共11页
【目的】筛选适合出芽短梗霉菌株PA-2侵染藜的稳定表达的最适内参基因,并进行PA-2侵染下藜光合作用相关基因的表达分析验证。【方法】分别以菌株PA-2孢子侵染0、1、3、5、7 d的藜叶片和正常生长藜的根、茎、叶为供试材料,通过qRT-PCR技... 【目的】筛选适合出芽短梗霉菌株PA-2侵染藜的稳定表达的最适内参基因,并进行PA-2侵染下藜光合作用相关基因的表达分析验证。【方法】分别以菌株PA-2孢子侵染0、1、3、5、7 d的藜叶片和正常生长藜的根、茎、叶为供试材料,通过qRT-PCR技术和Ct值评估3个候选内参基因GAPDH、β-ACTIN、β-TUBULIN的表达稳定性,并利用筛选出的内参基因,对藜光合作用相关基因(LFRN、MDH、PetC、psaA、CAB40、psaN、BHY和MO_(2))的表达水平进行定量分析。【结果】在菌株PA-2侵染藜不同时间点和不同组织的样本中,藜最适内参基因为GAPDH,可用于后续分析光合作用相关基因的表达水平。以GAPDH作为内参基因检测8个光合作用相关基因的表达水平,在不同侵染时间点,8个光合作用相关基因的表达量均出现不同程度的下调,除MDH基因外,其余基因均在5 d时达到最低水平。其中PctC、psaN、CAB40、BHY、MO_(2)基因在藜受侵染0~1 d中下调表达,在3 d达到较高水平,后期表达量下调;pasA先上调表达后下调表达;LFRN在受侵染后持续下调表达;MDH在受侵染后先显著下调,在3 d达到较低水平,后上调表达。在藜受侵染的不同组织中,8个基因在藜叶中均有大量表达,其中MDH基因在茎中大量表达,PctC和CAB40在根中表达量最低,除MDH基因外,其余7个基因在不同组织中的表达量高低排序为:叶>茎>根。【结论】本研究为后续利用qRT-PCR分析藜基因表达及研究PA-2致病机理奠定基础。 展开更多
关键词 出芽短梗霉菌PA-2 内参基因 光合作用相关基因 表达分析
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一株新型Bt菌株的鉴定及其抗椰子茎泻血病菌和杀小菜蛾活性 被引量:3
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作者 孙晓东 余凤玉 +2 位作者 宋薇薇 牛晓庆 覃伟权 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2015年第5期961-965,共5页
从海南采集的土样中分离鉴定获得1株可抑制椰子茎泻血病菌和杀小菜蛾幼虫的苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)WENCHANG-BT20;经cry基因的鉴定明确了该菌株含有cry1Aa、cry1La、cry1Ai、cry1Ac、cry1Be、cry1Ka、cry1Ia、... 从海南采集的土样中分离鉴定获得1株可抑制椰子茎泻血病菌和杀小菜蛾幼虫的苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)WENCHANG-BT20;经cry基因的鉴定明确了该菌株含有cry1Aa、cry1La、cry1Ai、cry1Ac、cry1Be、cry1Ka、cry1Ia、cry2Ab基因。生物学检测结果表明,该菌株晶体蛋白对小菜蛾幼虫的LC50为0.088μg/m L(95%置信区间为0.046-0.127μg/m L);该菌株对椰子茎泻血病菌菌丝生长有一定的抑制作用,平板对峙培养法培养5 d后,抑菌圈直径为22 mm。 展开更多
关键词 BT 椰子茎泻血病 抑菌性 小菜蛾 LC50
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芦苇内生真菌Mü1W1C6菌株的生物学特性研究 被引量:2
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作者 辛雅芬 宋天巧 +4 位作者 高克祥 Kurt Mendgen 米士伟 刘畅 何邦令 《山东农业科学》 2011年第3期79-82,共4页
研究了一株具有生防潜力的芦苇内生真菌Choiromyces aboriginum Mü1W1C6菌株的生物学特性。结果表明,与麦芽糖培养基、查彼培养基相比,该真菌在马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)和基本培养基上生长较好;在PDA培养基上1,0~35℃均能生长... 研究了一株具有生防潜力的芦苇内生真菌Choiromyces aboriginum Mü1W1C6菌株的生物学特性。结果表明,与麦芽糖培养基、查彼培养基相比,该真菌在马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)和基本培养基上生长较好;在PDA培养基上1,0~35℃均能生长2,0~30℃时生长较好2,5℃时最适;葡萄糖、果糖能显著促进该真菌的生长,而乳糖、淀粉、麦芽糖则没有明显的促进作用;有机氮源更有利于菌丝生长,无机氮源不利于菌丝生长;该内生真菌对pH的适应范围很广,在pH 5~11的范围内都能生长良好,相比之下,在中性偏碱性的环境中生长最好;光周期、生长因子、微量元素对芦苇内生真菌的生长均无显著影响。 展开更多
关键词 内生真菌 Choiromyces aboriginum Mü1W1C6菌株 生物学特性 生物防治
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一株白僵菌的分离及最适培养基的筛选
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作者 李静 蔡卫东 赵洪 《黔南民族师范学院学报》 2016年第2期115-118,共4页
从蚕僵虫中分离一株白僵菌菌株Bb2003092502,分别在以淀粉类和纤维素类等为主料的固体培养基上进行培养,结果表明:淀粉类培养基中以大米为主料的培养基白僵菌产孢子最多,菌丝生长最好;纤维素为主料的培养基中玉米杆粉相对好一些;两类培... 从蚕僵虫中分离一株白僵菌菌株Bb2003092502,分别在以淀粉类和纤维素类等为主料的固体培养基上进行培养,结果表明:淀粉类培养基中以大米为主料的培养基白僵菌产孢子最多,菌丝生长最好;纤维素为主料的培养基中玉米杆粉相对好一些;两类培养基比较,白僵菌在淀粉类培养基中的生长情况、产孢子量明显优于纤维类培养基。 展开更多
关键词 白僵菌 孢子 培养基 淀粉类 纤维素类
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玫烟色拟青霉亚致死浓度对小菜蛾取食和成虫生殖的影响 被引量:6
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作者 吕利华 武亚敬 +2 位作者 何余容 冯夏 陈焕瑜 《中国生物防治》 CSCD 北大核心 2007年第4期322-327,共6页
在室内测定了玫烟色拟青霉菌株SCAU-PFCF01的亚致死剂量对小菜蛾幼虫取食量、蛹重、化蛹、羽化、成虫寿命和雌蛾产卵量的影响。结果表明,用玫烟色拟青霉1×102和1×103孢子/ml处理小菜蛾2龄幼虫后,其幼虫期的总取食量较对照相... 在室内测定了玫烟色拟青霉菌株SCAU-PFCF01的亚致死剂量对小菜蛾幼虫取食量、蛹重、化蛹、羽化、成虫寿命和雌蛾产卵量的影响。结果表明,用玫烟色拟青霉1×102和1×103孢子/ml处理小菜蛾2龄幼虫后,其幼虫期的总取食量较对照相比分别降低29.3%和54.1%。处理4龄幼虫后,玫烟色拟青霉导致其化蛹率、蛹重、羽化率、成虫寿命及成虫产卵量显著下降,1×103孢子/ml处理4龄幼虫后小菜蛾的平均蛹重、雌成虫寿命、雄成虫寿命、成虫的产卵量分别为4.3mg、15.3d、17.2d和135.1粒/雌,显著低于对照。 展开更多
关键词 小菜蛾 玫烟色拟青霉 亚致死效应 取食 生殖力
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苏云金杆菌液态发酵培养基的优化 被引量:4
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作者 廖湘萍 付三乔 +1 位作者 易华蓉 杨翠珍 《湖北农业科学》 北大核心 2007年第4期571-572,共2页
对苏云金芽孢杆菌液体发酵法的培养基进行优化,确定其适宜的配方为4%葡萄糖,4%蛋白胨,2.5%酵母水溶性浸出物,0.5%无机盐混合。在此条件下,经过32 h发酵后,还原糖0.49%,生物效价4 234.00IU.μL-1,晶体含量0.55%,菌体湿重18.72%。
关键词 苏云金芽孢杆菌 培养基 优化
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云南澜沧县思茅松林虫生真菌多样性研究 被引量:3
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作者 赵永鑫 陈玘喆 +1 位作者 杜广祖 陈斌 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期2161-2174,共14页
【目的】探究云南澜沧县思茅松林虫生真菌多样性组成,为进一步开发、利用和保护思茅松林虫生真菌资源提供理论依据。【方法】2019—2020年,采用踏查法对云南省澜沧县思茅松林内被虫生真菌感染的罹病虫体进行采集,采用划线法和弹射法对... 【目的】探究云南澜沧县思茅松林虫生真菌多样性组成,为进一步开发、利用和保护思茅松林虫生真菌资源提供理论依据。【方法】2019—2020年,采用踏查法对云南省澜沧县思茅松林内被虫生真菌感染的罹病虫体进行采集,采用划线法和弹射法对虫生真菌进行分离培养,结合形态学方法对虫生真菌进行种类鉴定。【结果】从物种组成看,云南省澜沧县思茅松林虫生真菌有5属9种,分别为白僵菌属球孢白僵菌和布氏白僵菌、绿僵菌属黄绿绿僵菌和金龟子绿僵菌、棒束孢属细脚棒束孢和环链棒束孢、虫草属高雄山虫草、线虫草属下垂虫草和蜂头虫草,其中球孢白僵菌和细脚棒束孢为优势种,相对多度分别为44.09%和33.33%。从物种多样性分析来看,澜沧县思茅松林下虫生真菌物种多样性丰富,分布均匀,垂直地带分布特征明显。从侵染寄主昆虫种类看,球孢白僵菌的寄主范围最广,共16种,其中鞘翅目昆虫占侵染个体总数的41.46%,叶甲被侵染的数量最多,占29.27%;细脚棒束孢和环链棒束孢的侵染寄主主要为松毛虫和鳞翅目蛹,其中细脚棒束孢的侵染寄主中鳞翅目蛹数量最多,占58.06%;白僵菌、棒束孢和高雄山虫草均可感染松毛虫,白僵菌和绿僵菌均可感染金龟子和膜翅目蚁科。【结论】云南澜沧县思茅松林虫生真菌物种多样性丰富,优势种为球孢白僵菌和细脚棒束孢,在松林害虫生物防治中具有良好潜力,应加强对球孢白僵菌和细脚棒束孢的保护和利用。 展开更多
关键词 思茅松林 虫生真菌 生物多样性 生物防治 云南澜沧
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