猕猴桃溃疡病病原菌的分子鉴定和致病力测定 被引量：30

1

作者 赵利娜 胡家勇 +2 位作者 叶振风 刘普 朱立武 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期604-608,共5页

为明确猕猴桃细菌性溃疡病致病菌种类与特征,以从安徽岳西、陕西户县和重庆黔江等猕猴桃主产区收集到的溃疡病感染枝条和树皮为材料,采用平板划线、梯度稀释和BPA培养法分离病原物,采用烟草过敏性反应和猕猴桃健康叶片接种观察其致病性... 为明确猕猴桃细菌性溃疡病致病菌种类与特征,以从安徽岳西、陕西户县和重庆黔江等猕猴桃主产区收集到的溃疡病感染枝条和树皮为材料,采用平板划线、梯度稀释和BPA培养法分离病原物,采用烟草过敏性反应和猕猴桃健康叶片接种观察其致病性,结合特异引物扩增的16S-23SrDNA-ITS序列分析,对病原菌种类进行分子鉴定。结果表明:从收集的溃疡病感染枝条和树皮中,共分离纯化得到10株分离物;所有分离物均可使烟草叶片产生过敏反应,猕猴桃叶片接种显示同一菌株对不同品种及不同菌株对同一品种的致病力均存在差异。对特异扩增得到的280bp 16S-23SrDNA-ITS序列进行Blast比对分析,结果表明:10个菌株为同一致病菌,其DNA片段大小和序列均与丁香假单孢杆菌猕猴桃致病变种(Pseudomonas syringae pv.actinidae)完全一致。据此可以确定,试验分离所得的菌株均为丁香假单孢杆菌猕猴桃致病变种。 展开更多

关键词 猕猴桃 溃疡病 丁香假单孢杆菌 鉴定 致病力

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植物内生放线菌活性物质防治猕猴桃溃疡病 被引量：34

2

作者 申哲 黄丽丽 +2 位作者 涂璇 程晶晶 康振生 《中国生物防治》 CSCD 北大核心 2008年第4期329-334,共6页

以供试内生放线菌发酵液的皿内抑菌活性为指标,得到对猕猴桃细菌性溃疡病菌有抑制活性的菌株76株,其中35株的发酵液对猕猴桃溃疡菌的抑菌圈直径≥20mm,5株对猕猴桃溃疡病菌均具有显著的抑制活性。其中gCLA4菌株发酵液抑菌谱最广,不仅对... 以供试内生放线菌发酵液的皿内抑菌活性为指标,得到对猕猴桃细菌性溃疡病菌有抑制活性的菌株76株,其中35株的发酵液对猕猴桃溃疡菌的抑菌圈直径≥20mm,5株对猕猴桃溃疡病菌均具有显著的抑制活性。其中gCLA4菌株发酵液抑菌谱最广,不仅对4种靶标细菌具有抑制活性,还对10种植物病原真菌有较强的抑制活性。通过发酵液制备及大孔吸附树脂D101处理得到gCLA4菌粗提活性物质。田间防治结果表明,gCLA4菌株粗提活性物质100倍稀释液对猕猴桃溃疡病28d的相对防效达64.9%,明显优于化学药剂施那宁。 展开更多

关键词 猕猴桃溃疡病 拮抗内生放线菌 田间防治 大孔吸附树脂D101

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猕猴桃果实熟腐病菌生物学特性及其寄主抗病性鉴定研究 被引量：15

3

作者 李诚 王禄 +5 位作者 蒋军喜 王园秀 赵尚高 李帮明 余强 涂贵庆 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期1061-1065,1151,共6页

为掌握猕猴桃果实熟腐病的发生规律和为其综合防治提供理论依据,对该病害的两种主要病原菌葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)和拟茎点霉菌(Phomopsis sp.)的生物学特性、寄主范围和猕猴桃品种抗病性进行了鉴定研究,结果表明葡萄座腔... 为掌握猕猴桃果实熟腐病的发生规律和为其综合防治提供理论依据,对该病害的两种主要病原菌葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)和拟茎点霉菌(Phomopsis sp.)的生物学特性、寄主范围和猕猴桃品种抗病性进行了鉴定研究,结果表明葡萄座腔菌和拟茎点霉菌均在25℃和pH 7.0的条件下生长最快;适合两者生长的碳氮源种类基本相同;葡萄座腔菌偏好利用马铃薯葡萄糖培养基、胡萝卜培养基和苜蓿煎汁培养基,而拟茎点霉菌偏好利用烟草煎汁培养基。伤口接种试验表明,供试的5科14种植物均能被上述两种病菌感染,都应属于其寄主范围的植物;供试的17个猕猴桃品种,只有3个品种为高抗品种,其余14个为感病品种。 展开更多

关键词 猕猴桃果实熟腐病 葡萄座腔菌 生物学特性 品种抗病性

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利用EMA-qPCR建立快速检测猕猴桃溃疡病菌活菌的方法 被引量：13

4

作者 周大祥 殷幼平 +1 位作者 王中康 熊书 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期143-148,共6页

利用叠氮溴乙锭(ethidium monoazide bromide,EMA)与实时荧光定量PCR技术相结合(EMA-qPCR),建立了一种有效快速检测猕猴桃溃疡病菌活菌的方法。以猕猴桃溃疡病菌ITS序列为检测靶标,菌体经EMA渗透处理,再进行qPCR特异性扩增。结果显示,q... 利用叠氮溴乙锭(ethidium monoazide bromide,EMA)与实时荧光定量PCR技术相结合(EMA-qPCR),建立了一种有效快速检测猕猴桃溃疡病菌活菌的方法。以猕猴桃溃疡病菌ITS序列为检测靶标,菌体经EMA渗透处理,再进行qPCR特异性扩增。结果显示,qPCR检测灵敏度为2cfu;当EMA的浓度为2.0μg/mL时,能有效抑制1.0×10~7 cfu/mL经高温灭活的死菌的扩增,对活菌的扩增没有影响。当活菌数在1.0×10~1~1.0×10~5 cfu范围内,每个qPCR反应体系中活菌数与Ct值呈线性相关(R^2=0.988)。不同温度处理活菌菌悬液后用EMA-qPCR检测猕猴桃溃疡病菌的存活情况并与平板计数法进行比较,结果表明待检样品可在4℃和20℃短期保存。对疑似带病猕猴桃材料进行EMA-qPCR检测,结果表明能减少猕猴桃溃疡病菌PCR的假阳性结果。本研究建立的EMAqPCR方法是一种有效检测猕猴桃溃疡病菌活菌的方法,能有效避免PCR检测实际样品可能造成的假阳性结果。 展开更多

关键词 猕猴桃溃疡病菌 叠氮溴乙锭 实时荧光定量PCR 活菌检测

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江西奉新县猕猴桃叶斑病病原菌鉴定 被引量：11

5

作者 秦双林 王园秀 +3 位作者 蒋军喜 崔朝宇 欧阳慧 黄婷 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期488-491,共4页

为明确江西奉新县猕猴桃一种新的真菌性叶斑病病原菌种类,对采集的病叶样品进行了真菌分离,对分离菌株进行了形态学和分子生物学鉴定,并作了致病性测定。共分离得到32个真菌菌株,其在人工接种实验中均具有致病性。各菌株的培养特征、分... 为明确江西奉新县猕猴桃一种新的真菌性叶斑病病原菌种类,对采集的病叶样品进行了真菌分离,对分离菌株进行了形态学和分子生物学鉴定,并作了致病性测定。共分离得到32个真菌菌株,其在人工接种实验中均具有致病性。各菌株的培养特征、分生孢子形态大小相同,均符合文献中对多主棒孢的描述。随机选取3个菌株,测定了其r DNA-ITS序列,3个菌株的序列相同,且与Gen Bank中的多主棒孢的对应序列具有100%的同源性。据此认为,奉新猕猴桃叶斑病的病原菌种类为半知菌类棒孢属中的多主棒孢(Corynespora cassiicola)。 展开更多

关键词 猕猴桃叶斑病 病原鉴定 多主棒孢

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安徽岳西山区猕猴桃溃疡病发病原因及防治研究 被引量：9

6

作者 张力田 储琳 +5 位作者 钱子华 彭世芳 方书苗 黄国华 徐育海 张鸿 《中国南方果树》 北大核心 2010年第5期71-73,共3页

从观察发病规律及采叶和土样分析发现,安徽岳西较高山区猕猴桃溃疡病Pseudomonas syringae pv.actinidae的发病与硼磷双缺有关,磷硼间存在互补关系,控制此病须磷硼双补;合理深施重施磷混有机肥,合理施硼,保持土壤具备高磷中硼营养水平,... 从观察发病规律及采叶和土样分析发现,安徽岳西较高山区猕猴桃溃疡病Pseudomonas syringae pv.actinidae的发病与硼磷双缺有关,磷硼间存在互补关系,控制此病须磷硼双补;合理深施重施磷混有机肥,合理施硼,保持土壤具备高磷中硼营养水平,避免树体伤口累积,可有效控制此病害的发生。冻害年份,特别是大冻造成大量伤口时,应加强保护,避免加重此病的发生。 展开更多

关键词 猕猴桃 溃疡病 发病原因 防治措施 磷 硼 安徽岳西

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奉新猕猴桃黑斑病病原菌鉴定及室内药剂筛选 被引量：13

7

作者 周英 李庚花 +5 位作者 胡叶开 强遥 张凯东 赵尚高 李帮明 蒋军喜 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期48-56,共9页

【目的】明确江西省奉新县猕猴桃黑斑病病原菌种类,筛选防治该病害的有效药剂。【方法】从奉新县果园中随机采集40个呈典型症状的猕猴桃黑斑病病果,采用PDA培养基按照常规组织分离法对其进行病菌分离和纯化。从获得的菌株中选择代表性菌... 【目的】明确江西省奉新县猕猴桃黑斑病病原菌种类,筛选防治该病害的有效药剂。【方法】从奉新县果园中随机采集40个呈典型症状的猕猴桃黑斑病病果,采用PDA培养基按照常规组织分离法对其进行病菌分离和纯化。从获得的菌株中选择代表性菌株HB-1进行病菌鉴定和药剂筛选。在测定其致病性的基础上对其培养性状、分生孢子和分生孢子链形态进行观察,并测量其分生孢子大小。根据菌落形态特征和病菌形态大小,参考相关文献,对病原菌进行种类归属鉴定。提取菌株HB-1基因组DNA,对其rDNA-ITS和EF-1α基因进行PCR扩增和序列测定,根据序列同源性大小对病原菌进行分子鉴定。采用菌丝生长速率法测定22种杀菌剂对该病菌的室内抑菌活性。【结果】共分离获得35个培养性状一致的真菌菌株,供试菌株HB-1具有致病性,其菌落绒状,正面墨绿色,背面淡绿色。菌株产生卵形或倒棍棒形,具2~5个横隔膜和1~3个纵、斜隔膜、大小(15~50)μm×(7.5~12.5)μm的分生孢子。分生孢子链状着生并有分支,支链一般长1~5个孢子,最长也未达到10个孢子。上述培养性状和形态特征符合文献中对链格孢(Alternaria alternata)的描述。该菌株的rDNA-ITS和EF-1α基因序列长度分别为531 bp和240 bp,与GenBank中链格孢(A.alternata)的序列同源性为100%。在药剂筛选试验中,申嗪霉素、咪鲜胺锰盐、己唑醇、肟菌·戊唑醇、丙环唑、苯醚甲环唑、戊唑·嘧菌酯和氟硅䂳8种杀菌剂抑菌活性强,EC50值均小于1μg/mL;中生菌素、嘧菌环胺、吡唑醚菌酯、异菌脲、噁酮·锰锌、多抗霉素、丙森锌、代森联和腈苯唑9种杀菌剂抑菌活性较强,EC50值1~10μg/mL;啶酰菌胺、乙蒜素、春雷霉素、精甲·百菌清和百菌清5种杀菌剂的抑菌活性较弱或不明显,EC50值均大于25μg/mL。【结论】确定奉新县猕猴桃黑斑病病原为链格孢(A.alternata),申嗪霉素、咪鲜胺锰盐、己唑醇、肟菌·戊唑醇、丙环唑、苯醚甲环唑、戊唑·嘧菌酯和氟硅䂳8种杀菌剂对链格孢具有强烈的抑菌活性。 展开更多

关键词 猕猴桃黑斑病 链格孢 杀菌剂 毒力测定

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奉新县猕猴桃果实腐烂病病原菌分离鉴定 被引量：35

8

作者 李诚 蒋军喜 +3 位作者 冷建华 李帮明 余强 涂贵庆 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期259-263,共5页

为明确江西奉新猕猴桃果实腐烂的病原菌种类,对该县猕猴桃烂果进行大量病菌分离,对分离的病菌进行了分子鉴定和致病性测定,结果表明引起奉新猕猴桃烂果的病原菌有6种,分别是葡萄座腔菌(Botryospha-eria dothidea)、富氏葡萄孢盘菌(Botry... 为明确江西奉新猕猴桃果实腐烂的病原菌种类,对该县猕猴桃烂果进行大量病菌分离,对分离的病菌进行了分子鉴定和致病性测定,结果表明引起奉新猕猴桃烂果的病原菌有6种,分别是葡萄座腔菌(Botryospha-eria dothidea)、富氏葡萄孢盘菌(Botryotinia fuckeliana)、盘多毛孢菌(Pestalotiopsis sp.)、层出镰刀菌(Fusariumproliferatum)、拟茎点霉菌(Phomopsis sp.)和链格孢菌(Alternaria sp.),其中主要是葡萄座腔菌(分出率占83.0%),其次是拟茎点霉菌(分出率占8.9%)。致病性测定结果同时表明葡萄座腔菌既可从果面伤口侵入,也可以从果皮直接侵入,其他5种真菌则只能从伤口侵入。研究结果对奉新猕猴桃烂果病害的防治和进一步研究将具有重要的指导意义。 展开更多

关键词 猕猴桃 果实腐烂病害 病菌分子鉴定 葡萄座腔菌

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湘西自治州猕猴桃溃疡病发生情况及防治措施探讨 被引量：3

9

作者 林文力 罗赛男 +2 位作者 肖伏莲 杨水芝 卜范文 《湖南农业科学》 2015年第5期42-44,共3页

猕猴桃细菌性溃疡病的发生具有潜伏期长、传播速度快、防治难度大等特点,可在短期内造成大面积的树体死亡,是猕猴桃生产中的一种毁灭性病害。调查发现,吉首、永顺、凤凰部分猕猴桃果园溃疡病的发病率分别为37.92%、93.90%、95.32%,感病... 猕猴桃细菌性溃疡病的发生具有潜伏期长、传播速度快、防治难度大等特点,可在短期内造成大面积的树体死亡,是猕猴桃生产中的一种毁灭性病害。调查发现,吉首、永顺、凤凰部分猕猴桃果园溃疡病的发病率分别为37.92%、93.90%、95.32%,感病品种有红阳、秦美、米良1号、华优、徐香等,严重制约了湘西自治州猕猴桃产业的可持续发展。通过分析湘西自治州猕猴桃溃疡病发生的特点及原因,提出应科学制定猕猴桃产业发展规划,健全无病苗木繁育体系、选择溃疡病抗性较强的品种、切实加强联合攻关研究等综合治理的措施。 展开更多

关键词 猕猴桃溃疡病 发生情况 防治措施 湘西

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‘红阳’猕猴桃褐斑病病原菌分离鉴定及防治药剂毒力测定 被引量：14

10

作者 冉飞 张荣全 +6 位作者 袁腾 马继玲 尹显慧 李文志 樊荣 吴小毛 龙友华 《中国果树》 北大核心 2021年第6期27-32,I0004,共7页

为有效防控‘红阳’猕猴桃受褐斑病的危害,采用传统的组织块分离方法对发病叶片进行了病原菌分离纯化,并对病原菌开展了致病性测试、形态特征观察、多基因序列分析及系统发育树构建,明确分离获得的菌株为细极链格孢(Alternaria tenuissi... 为有效防控‘红阳’猕猴桃受褐斑病的危害,采用传统的组织块分离方法对发病叶片进行了病原菌分离纯化,并对病原菌开展了致病性测试、形态特征观察、多基因序列分析及系统发育树构建,明确分离获得的菌株为细极链格孢(Alternaria tenuissima)。采用菌丝生长速率法测定6种药剂对病原菌的抑菌效果,结果发现,咪鲜胺和苯醚甲环唑抑菌活性最强,EC50分别为0.0084、0.0553 mg/L,可用于田间防治由链格孢菌引起的褐斑病。 展开更多

关键词 猕猴桃 ‘红阳’ 褐斑病 病原菌分离鉴定 药剂筛选

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黄芩乙醇提取物对猕猴桃溃疡病致病菌抑菌机理研究 被引量：9

11

作者 裴沪荣 卢明秀 +1 位作者 龙力 龙章富 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期477-485,共9页

【目的】探究黄芩乙醇提取物(Ethanol extract of Scutellaria baicalensis,ESB)对猕猴桃溃疡病病原菌丁香假单胞菌猕猴桃致病变种(Pseudomonas syringae pv.actinidiae,Psa)的抑菌机理,为开发新型植物源杀菌剂提供理论依据。【方法】以... 【目的】探究黄芩乙醇提取物(Ethanol extract of Scutellaria baicalensis,ESB)对猕猴桃溃疡病病原菌丁香假单胞菌猕猴桃致病变种(Pseudomonas syringae pv.actinidiae,Psa)的抑菌机理,为开发新型植物源杀菌剂提供理论依据。【方法】以Psa为研究对象,采用琼脂打孔法评估Psa对ESB的敏感性;通过梯度稀释法确定液体培养时ESB对Psa的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。探究1/4MIC、1/2MIC、3/4MIC和MIC下ESB对Psa的作用效果。通过菌液光密度绘制Psa生长曲线、电导率仪测定培养液上清电导率、考马斯亮蓝法检测胞外可溶性蛋白含量、碱性磷酸酶(AKP)试剂盒检测AKP活性、硫酸亚铁法测定菌体对磷的代谢、氧化还原反应测定呼吸链脱氢酶活性、0.3%固体培养基检测Psa泳动能力;扫描电镜和透射电镜观察Psa在MIC处理下的形态变化。【结果】5种ESB浓度作用下的抑菌圈直径均在16.00 mm以上,MIC和MBC均为2.4 mg/mL。ESB能抑制Psa生长,破坏细胞膜和细胞壁,造成电解质、蛋白质外泄,干扰菌体正常的物质和能量代谢;ESB可显著抑制Psa泳动能力,阻碍细胞的迁移。扫描电镜和透射电镜观察发现,ESB作用后的Psa菌体形态出现缩短、凹陷、畸形、破裂,细胞质外泄,菌体大量裂解等现象。【结论】ESB可破坏Psa的细胞结构,干扰物质和能量代谢,抑制菌体生长,具有开发成植物源杀菌剂的潜力。 展开更多

关键词 黄芩 乙醇提取物 猕猴桃溃疡病致病菌 抑菌机理

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猕猴桃溃疡病病原菌的鉴定及生防菌的筛选 被引量：13

12

作者 杜贞娜 晏子英 +3 位作者 候忠余 李树江 张晓勇 杨友联 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2021年第4期755-761,共7页

【目的】探明猕猴桃溃疡病的致病病原,为该病的生物防治提供有效的菌种资源。【方法】采用常规组织分离法从猕猴桃感染溃疡病的染病组织分离致病病原菌,从猕猴桃种植土壤和健康猕猴桃组织中分离细菌,采用抑菌圈法筛选拮抗菌株,通过形态... 【目的】探明猕猴桃溃疡病的致病病原,为该病的生物防治提供有效的菌种资源。【方法】采用常规组织分离法从猕猴桃感染溃疡病的染病组织分离致病病原菌,从猕猴桃种植土壤和健康猕猴桃组织中分离细菌,采用抑菌圈法筛选拮抗菌株,通过形态学与分子生物学相结合的方法对分离的菌株进行鉴定。【结果】从猕猴桃感染溃疡病的染病组织中分离到9株菌株,经鉴定确定致病病原菌为丁香假单胞杆菌猕猴桃致病变种(Pseudomonas syringae pv.actinidae);从土壤和健康的猕猴桃组织分离到35株细菌,其中3株芽孢杆菌(Bacillus spp.)对猕猴桃溃疡病病原菌具有较好拮抗效果,抑菌圈直径平均为20.8~23.7 mm。【结论】为猕猴桃溃疡病生防菌剂的开发应用奠定了基础。 展开更多

关键词 猕猴桃 溃疡病 病原菌 拮抗真菌 生物防治 分子生物学鉴定 六盘水 贵州

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