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反向斑点杂交法快速检测甘薯羽状斑驳病毒和甘薯G病毒
被引量:
14
1
作者
何海旺
何虎翼
+5 位作者
谭冠宁
刘义明
何新民
唐洲萍
李丽淑
王晖
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第1期43-48,共6页
【目的】以克隆得到的甘薯羽状斑驳病毒(Sweet potato feathery mottle virus,SPFMV)和甘薯G病毒(Sweet potato virus G,SPVG)基因片段为探针建立反向斑点杂交技术体系,应用于甘薯组培脱毒苗带毒情况检测,为生产优质甘薯组培脱毒苗提供...
【目的】以克隆得到的甘薯羽状斑驳病毒(Sweet potato feathery mottle virus,SPFMV)和甘薯G病毒(Sweet potato virus G,SPVG)基因片段为探针建立反向斑点杂交技术体系,应用于甘薯组培脱毒苗带毒情况检测,为生产优质甘薯组培脱毒苗提供保障。【方法】根据已公布的侵染甘薯的SPFMV和SPVG的核苷酸序列设计两对特异引物,以RT-PCR法从染病的甘薯叶片扩增SPFMV和SPVG的两个片段,并以克隆到的两个病毒片段及内参基因Actin片段为探针建立反向斑点杂交体系。【结果】分别克隆出长度约310和500 bp的片段,经BLAST比对,所获得的310 bp片段为SPFMV的外壳蛋白基因片段,同源性为97%,500 bp片段为SPVG的外壳蛋白基因片段,同源性为99%。分别用带有SPFMV和SPVG片段的重组质粒pUC-SPFMV和pUC-SPVG进行反向斑点杂交,发现不同病毒能获得单一信号,无交叉现象。以染病甘薯和脱毒甘薯苗为样品,用该种病毒的探针进行反向斑点杂交,染病植株样品中能获得单一信号,而脱毒苗甘薯样品未见任何信号,杂交结果与RT-PCR检测结果一致。【结论】用建立的反向斑点杂交技术体系能有效检测甘薯中的SPFMV和SPVG,无交叉信号,可用于甘薯组培脱毒苗的前期检测。
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关键词
甘薯
甘薯羽状斑驳病毒
甘薯G病毒毒
病毒检测
反向斑点杂交技术
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职称材料
甘薯病毒病原学研究进展
被引量:
15
2
作者
单林娜
葛应兰
+1 位作者
李建波
郑翠娟
《河南农业大学学报》
CAS
CSCD
2001年第1期92-96,共5页
综述了近 30a来国内外关于甘薯羽状斑驳病毒、甘薯潜隐病毒、甘薯脉花叶病毒、甘薯轻斑驳病毒、甘薯黄矮病毒、甘薯凹脉病毒 ,甘薯褪绿矮缩病毒、甘薯叶斑病毒、甘薯褪绿斑病毒、甘薯类花椰菜花叶病毒等 13种甘薯病毒病病原在侵染症状...
综述了近 30a来国内外关于甘薯羽状斑驳病毒、甘薯潜隐病毒、甘薯脉花叶病毒、甘薯轻斑驳病毒、甘薯黄矮病毒、甘薯凹脉病毒 ,甘薯褪绿矮缩病毒、甘薯叶斑病毒、甘薯褪绿斑病毒、甘薯类花椰菜花叶病毒等 13种甘薯病毒病病原在侵染症状、粒体形态、传播。
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关键词
甘薯
病毒病
病原学
症状
寄主范围
传播
粒体形态
理化性状
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职称材料
题名
反向斑点杂交法快速检测甘薯羽状斑驳病毒和甘薯G病毒
被引量:
14
1
作者
何海旺
何虎翼
谭冠宁
刘义明
何新民
唐洲萍
李丽淑
王晖
机构
广西农业科学院经济作物研究所
防城港市农业技术推广服务中心
出处
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第1期43-48,共6页
基金
广西科技攻关项目(桂科攻10123007-6B)
文摘
【目的】以克隆得到的甘薯羽状斑驳病毒(Sweet potato feathery mottle virus,SPFMV)和甘薯G病毒(Sweet potato virus G,SPVG)基因片段为探针建立反向斑点杂交技术体系,应用于甘薯组培脱毒苗带毒情况检测,为生产优质甘薯组培脱毒苗提供保障。【方法】根据已公布的侵染甘薯的SPFMV和SPVG的核苷酸序列设计两对特异引物,以RT-PCR法从染病的甘薯叶片扩增SPFMV和SPVG的两个片段,并以克隆到的两个病毒片段及内参基因Actin片段为探针建立反向斑点杂交体系。【结果】分别克隆出长度约310和500 bp的片段,经BLAST比对,所获得的310 bp片段为SPFMV的外壳蛋白基因片段,同源性为97%,500 bp片段为SPVG的外壳蛋白基因片段,同源性为99%。分别用带有SPFMV和SPVG片段的重组质粒pUC-SPFMV和pUC-SPVG进行反向斑点杂交,发现不同病毒能获得单一信号,无交叉现象。以染病甘薯和脱毒甘薯苗为样品,用该种病毒的探针进行反向斑点杂交,染病植株样品中能获得单一信号,而脱毒苗甘薯样品未见任何信号,杂交结果与RT-PCR检测结果一致。【结论】用建立的反向斑点杂交技术体系能有效检测甘薯中的SPFMV和SPVG,无交叉信号,可用于甘薯组培脱毒苗的前期检测。
关键词
甘薯
甘薯羽状斑驳病毒
甘薯G病毒毒
病毒检测
反向斑点杂交技术
Keywords
sweet potato
SPFMV
SPVG
virus detection
reverse dot blot hybridization
分类号
S435.51 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
甘薯病毒病原学研究进展
被引量:
15
2
作者
单林娜
葛应兰
李建波
郑翠娟
机构
南阳农业学校
出处
《河南农业大学学报》
CAS
CSCD
2001年第1期92-96,共5页
文摘
综述了近 30a来国内外关于甘薯羽状斑驳病毒、甘薯潜隐病毒、甘薯脉花叶病毒、甘薯轻斑驳病毒、甘薯黄矮病毒、甘薯凹脉病毒 ,甘薯褪绿矮缩病毒、甘薯叶斑病毒、甘薯褪绿斑病毒、甘薯类花椰菜花叶病毒等 13种甘薯病毒病病原在侵染症状、粒体形态、传播。
关键词
甘薯
病毒病
病原学
症状
寄主范围
传播
粒体形态
理化性状
Keywords
sweet potato
virus diseases
aetiology
分类号
S435.51 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
S432.41 [农业科学—植物病理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
反向斑点杂交法快速检测甘薯羽状斑驳病毒和甘薯G病毒
何海旺
何虎翼
谭冠宁
刘义明
何新民
唐洲萍
李丽淑
王晖
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
14
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
甘薯病毒病原学研究进展
单林娜
葛应兰
李建波
郑翠娟
《河南农业大学学报》
CAS
CSCD
2001
15
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职称材料
已选择
0
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