甘薯茎腐病是由达旦提狄克氏菌Dickeya dadantii引起的一种毁灭性细菌病害,对甘薯的生产造成了严重影响。为了研究茎腐病菌在甘薯组织中的侵染过程与定殖规律,利用三亲本杂交法构建表达超折叠体绿色荧光蛋白sfGFP(superfolder green flu...甘薯茎腐病是由达旦提狄克氏菌Dickeya dadantii引起的一种毁灭性细菌病害,对甘薯的生产造成了严重影响。为了研究茎腐病菌在甘薯组织中的侵染过程与定殖规律,利用三亲本杂交法构建表达超折叠体绿色荧光蛋白sfGFP(superfolder green fluorescent protein,sfGFP)基因的标记菌株,通过对阳性转化子进行分子鉴定,成功获得携带sfGFP标记的菌株(Ech36-GFP)。与原始菌株相比,Ech36-GFP的形态特征、生长速率和致病力均无明显差异,经10轮继代培养后sfGFP仍能稳定表达。基于梯度稀释、平板计数法及石蜡切片技术的联合应用,阐明了携带sfGFP标签的D.dadantii在甘薯根茎组织中的时空定殖模式。本研究借助标记菌株实现了病原菌侵染扩展过程的可视化观测,为研究茎腐病病原菌与寄主互作提供重要参考,同时为制定靶向防控策略及抗病品种选育提供理论依据。展开更多
文摘甘薯茎腐病是由达旦提狄克氏菌Dickeya dadantii引起的一种毁灭性细菌病害,对甘薯的生产造成了严重影响。为了研究茎腐病菌在甘薯组织中的侵染过程与定殖规律,利用三亲本杂交法构建表达超折叠体绿色荧光蛋白sfGFP(superfolder green fluorescent protein,sfGFP)基因的标记菌株,通过对阳性转化子进行分子鉴定,成功获得携带sfGFP标记的菌株(Ech36-GFP)。与原始菌株相比,Ech36-GFP的形态特征、生长速率和致病力均无明显差异,经10轮继代培养后sfGFP仍能稳定表达。基于梯度稀释、平板计数法及石蜡切片技术的联合应用,阐明了携带sfGFP标签的D.dadantii在甘薯根茎组织中的时空定殖模式。本研究借助标记菌株实现了病原菌侵染扩展过程的可视化观测,为研究茎腐病病原菌与寄主互作提供重要参考,同时为制定靶向防控策略及抗病品种选育提供理论依据。
