黄瓜绿斑驳花叶病毒(cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)是我国重要的农业植物检疫性有害生物。植株感染CGMMV后会给土壤带来潜在的健康风险,为探明土壤中残留病毒存活的时间,明确CGMMV在不同地区自然条件下能否随病残体越冬越...黄瓜绿斑驳花叶病毒(cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)是我国重要的农业植物检疫性有害生物。植株感染CGMMV后会给土壤带来潜在的健康风险,为探明土壤中残留病毒存活的时间,明确CGMMV在不同地区自然条件下能否随病残体越冬越夏,并作为下茬作物的初侵染源,本研究制备病残土浸提液,通过摩擦接种试验和土壤传毒试验评估不同病残土质量比(病残体/无菌土=1.3%、3%和6%)下残留病毒的致病性。在非越冬条件下,病残土质量比为1.3%时,病残土浸提液摩擦接种西瓜的发病率最高可达86.7%,质量比为6%时,发病率均高达100%;病残土质量比为1.3%、3%、6%的土壤传毒率分别为0、1.5%和10.7%,表明土壤中积累的病毒需达到一定的量才具有传播性。在广西南宁、新疆乌鲁木齐和河南郑州三地,病残土质量比为6%的土壤样本越冬后,其病残土浸提液摩擦接种西瓜的发病率分别为26.61%、35.33%和26.67%,土壤传毒率为2.00%、1.33%和1.67%;越冬越夏后,摩擦接种发病率下降至4.00%、2.00%和2.67%。结果表明,我国不同纬度的葫芦科作物产区中,CGMMV均可随病残体越冬越夏,并作为下茬葫芦科作物的初侵染源;随着时间的增加,土壤中残留病毒的致病力逐渐降低。展开更多
本研究以日本黄瓜绿斑驳花叶病毒(kyuri green mottle mosaic virus,KGMMV)为材料,设计1对常规RT-PCR检测引物KGCPN-F/KGCPN-R和1组引物/探针KGM-F/KGM-R/KGM-P,分析测试了2对已发表KGMMV常规RT-PCR检测引物KGCP-F/KGCP-R和KGMP-F/KGMP...本研究以日本黄瓜绿斑驳花叶病毒(kyuri green mottle mosaic virus,KGMMV)为材料,设计1对常规RT-PCR检测引物KGCPN-F/KGCPN-R和1组引物/探针KGM-F/KGM-R/KGM-P,分析测试了2对已发表KGMMV常规RT-PCR检测引物KGCP-F/KGCP-R和KGMP-F/KGMP-R,建立了KGMMV的常规和实时荧光RT-PCR检测方法。结果表明,引物KGCP-F/KGCP-R扩增KGMMV时出现预期大小的条带,扩增黄瓜绿斑驳花叶病毒(cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)时出现非常微弱的条带;引物KGCPN-F/KGCPN-R扩增KGMMV时出现预期大小的条带,扩增小西葫芦绿斑驳花叶病毒(zucchini green mottle mosaic virus,ZGMMV)时出现比预期稍大的条带,通过对PCR产物进行序列测定和分析比对可准确鉴定KGMMV。KGCP-F/KGCP-R和KGCPN-F/KGCPN-R的相对灵敏度分别为10^(-6)和10^(-5)稀释度,适用于KGMMV的常规RT-PCR检测。基于引物探针KGM-F/KGM-R/KGM-P建立的KGMMV实时荧光RT-PCR检测方法能特异性检出KGMMV,相对灵敏度达10^(-7)稀释度,分别比2对常规RT-PCR检测引物高10倍和100倍,适用于瓜类种子中KGMMV的快速检测。展开更多
本研究对疑似番茄病毒病样本进行RT-PCR检测,并对扩增产物进行测序及系统进化分析,确认样本感染了番茄褐色皱纹果病毒(Tomato brown rugose fruit virus,ToBRFV)。染病番茄的种子中可检测到ToBRFV,而带毒种子长成的幼苗却检测不到ToBRFV...本研究对疑似番茄病毒病样本进行RT-PCR检测,并对扩增产物进行测序及系统进化分析,确认样本感染了番茄褐色皱纹果病毒(Tomato brown rugose fruit virus,ToBRFV)。染病番茄的种子中可检测到ToBRFV,而带毒种子长成的幼苗却检测不到ToBRFV,表明该病毒主要存在于种皮。利用10%的磷酸三钠对带毒种子进行消毒处理可以使病毒灭活。利用摩擦法对22份醋栗番茄进行苗期接种鉴定,获得了2份耐/抗ToBRFV的材料,可为抗性品种选育提供资源。展开更多
文摘黄瓜绿斑驳花叶病毒(cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)是我国重要的农业植物检疫性有害生物。植株感染CGMMV后会给土壤带来潜在的健康风险,为探明土壤中残留病毒存活的时间,明确CGMMV在不同地区自然条件下能否随病残体越冬越夏,并作为下茬作物的初侵染源,本研究制备病残土浸提液,通过摩擦接种试验和土壤传毒试验评估不同病残土质量比(病残体/无菌土=1.3%、3%和6%)下残留病毒的致病性。在非越冬条件下,病残土质量比为1.3%时,病残土浸提液摩擦接种西瓜的发病率最高可达86.7%,质量比为6%时,发病率均高达100%;病残土质量比为1.3%、3%、6%的土壤传毒率分别为0、1.5%和10.7%,表明土壤中积累的病毒需达到一定的量才具有传播性。在广西南宁、新疆乌鲁木齐和河南郑州三地,病残土质量比为6%的土壤样本越冬后,其病残土浸提液摩擦接种西瓜的发病率分别为26.61%、35.33%和26.67%,土壤传毒率为2.00%、1.33%和1.67%;越冬越夏后,摩擦接种发病率下降至4.00%、2.00%和2.67%。结果表明,我国不同纬度的葫芦科作物产区中,CGMMV均可随病残体越冬越夏,并作为下茬葫芦科作物的初侵染源;随着时间的增加,土壤中残留病毒的致病力逐渐降低。
文摘本研究以日本黄瓜绿斑驳花叶病毒(kyuri green mottle mosaic virus,KGMMV)为材料,设计1对常规RT-PCR检测引物KGCPN-F/KGCPN-R和1组引物/探针KGM-F/KGM-R/KGM-P,分析测试了2对已发表KGMMV常规RT-PCR检测引物KGCP-F/KGCP-R和KGMP-F/KGMP-R,建立了KGMMV的常规和实时荧光RT-PCR检测方法。结果表明,引物KGCP-F/KGCP-R扩增KGMMV时出现预期大小的条带,扩增黄瓜绿斑驳花叶病毒(cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)时出现非常微弱的条带;引物KGCPN-F/KGCPN-R扩增KGMMV时出现预期大小的条带,扩增小西葫芦绿斑驳花叶病毒(zucchini green mottle mosaic virus,ZGMMV)时出现比预期稍大的条带,通过对PCR产物进行序列测定和分析比对可准确鉴定KGMMV。KGCP-F/KGCP-R和KGCPN-F/KGCPN-R的相对灵敏度分别为10^(-6)和10^(-5)稀释度,适用于KGMMV的常规RT-PCR检测。基于引物探针KGM-F/KGM-R/KGM-P建立的KGMMV实时荧光RT-PCR检测方法能特异性检出KGMMV,相对灵敏度达10^(-7)稀释度,分别比2对常规RT-PCR检测引物高10倍和100倍,适用于瓜类种子中KGMMV的快速检测。
文摘本研究对疑似番茄病毒病样本进行RT-PCR检测,并对扩增产物进行测序及系统进化分析,确认样本感染了番茄褐色皱纹果病毒(Tomato brown rugose fruit virus,ToBRFV)。染病番茄的种子中可检测到ToBRFV,而带毒种子长成的幼苗却检测不到ToBRFV,表明该病毒主要存在于种皮。利用10%的磷酸三钠对带毒种子进行消毒处理可以使病毒灭活。利用摩擦法对22份醋栗番茄进行苗期接种鉴定,获得了2份耐/抗ToBRFV的材料,可为抗性品种选育提供资源。
