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南方菜豆花叶病毒RT-RPA检测方法的建立 被引量：10
1
作者 魏霜 袁俊杰 +7 位作者 李桂芬 乾义柯 魏梅生 冯黎霞 胡学难 何日荣 武目涛 张永江 《植物检疫》 北大核心 2018年第1期50-53,共4页
本研究针对南方菜豆花叶病毒(Southern bean mosaic virus,SBMV)保守序列设计了特异性PRA引物,建立了快速灵敏的一步法逆转录重组酶聚合酶扩增检测技术(RT-RPA),采用SBMV,BPMV,SMV,Ar MV和TRSV共5种病毒评价该方法的特异性,并对其灵敏... 本研究针对南方菜豆花叶病毒(Southern bean mosaic virus,SBMV)保守序列设计了特异性PRA引物,建立了快速灵敏的一步法逆转录重组酶聚合酶扩增检测技术(RT-RPA),采用SBMV,BPMV,SMV,Ar MV和TRSV共5种病毒评价该方法的特异性,并对其灵敏度进行评价。结果显示,建立的RT-RPA方法特异性强;灵敏度达到0.1 ng。本研究建立的RT-RPA方法检测SBMV特异性强、灵敏度高,无需特殊的仪器设备,适合实验室或者现场快速检测。 展开更多
关键词 南方菜豆花叶病毒 RPA 检测
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TC/IC-RT-PCR检测黄瓜绿斑驳花叶病毒 被引量：6
2
作者 沈建国 林双庆 +4 位作者 蔡伟 李海明 王念武 翁瑞泉 黄可辉 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2012年第1期13-17,共5页
根据GenBank上登录的黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV)外壳蛋白基因保守序列,设计特异性引物,利用试管捕捉RT-PCR(TC-RT-PCR)和免疫捕捉RT-PCR(IC-RT-PCR)技术对黄瓜绿斑驳花叶病毒进行检测.结果表明,TC-RT-PCR和IC-RT-PCR均具有良好的特异性... 根据GenBank上登录的黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV)外壳蛋白基因保守序列,设计特异性引物,利用试管捕捉RT-PCR(TC-RT-PCR)和免疫捕捉RT-PCR(IC-RT-PCR)技术对黄瓜绿斑驳花叶病毒进行检测.结果表明,TC-RT-PCR和IC-RT-PCR均具有良好的特异性,检测灵敏度分别比DAS-ELISA高10和100倍;通过对一批进境黄瓜样品的检测,验证了2种检测技术的实际应用效果.因此,本研究建立的TC-RT-PCR和IC-RT-PCR检测技术,可有效应用于CGMMV的快速检测. 展开更多
关键词 黄瓜绿斑驳花叶病毒 试管捕捉RT-PCR 免疫捕捉RT-PCR
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一种豇豆重花叶病毒IC-RT real-time PCR检测方法的建立 被引量：3
3
作者 李彬 粟寒 +2 位作者 吴翠萍 周明华 安榆林 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期491-496,共6页
为建立豇豆重花叶病毒(Cowpeasevere mosaic virus,CPSMV)免疫捕获-反转录-实时荧光(IC-RTreal-time)PCR分子检测方法,利用从ATCC和DSMZ引进的CPSMV标准毒株,先建立CPSMVRTreal-time PCR检测方法;在此基础上,建立用于CPSMV检测的IC-RTre... 为建立豇豆重花叶病毒(Cowpeasevere mosaic virus,CPSMV)免疫捕获-反转录-实时荧光(IC-RTreal-time)PCR分子检测方法,利用从ATCC和DSMZ引进的CPSMV标准毒株,先建立CPSMVRTreal-time PCR检测方法;在此基础上,建立用于CPSMV检测的IC-RTreal-time PCR方法.结果表明:IC-RTreal-time PCR方法的灵敏度可达500 pg叶组织;该方法具有特异性好、灵敏度高、操作简便等优点,省去了RNA的提取过程,适用于豇豆等豆类种子及种苗中对豇豆重花叶病毒的快速检测. 展开更多
关键词 豇豆重花叶病毒 免疫捕获反转录 实时荧光PCR
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一种豇豆重花叶病毒RT-PCR检测方法的研究 被引量：3
4
作者 李彬 吴翠萍 +1 位作者 粟寒 安榆林 《植物检疫》 北大核心 2010年第4期28-32,共5页
对一种豇豆重花叶病毒(Cowpeas evere mosaic virus,CPSMV)反转录PCR分子检测方法进行了研究。利用从美国菌种保藏中心和德国微生物毒株保藏中心引进的CPSMV标准毒株,设计了一对特异性简并引物(CPSMVf/CPSMVr),建立了CPSMVRT-PCR检测方... 对一种豇豆重花叶病毒(Cowpeas evere mosaic virus,CPSMV)反转录PCR分子检测方法进行了研究。利用从美国菌种保藏中心和德国微生物毒株保藏中心引进的CPSMV标准毒株,设计了一对特异性简并引物(CPSMVf/CPSMVr),建立了CPSMVRT-PCR检测方法。该方法具有良好的扩增反应及特异性,灵敏度可达1pg的总病叶组织RNA量。CPSMV双抗夹心酶联免疫法(DAS-ELISA)灵敏度为10μg叶组织。该方法适用于豇豆等豆类蔬菜种子及种苗中对豇豆重花叶病毒的快速检测。 展开更多
关键词 豇豆重花叶病毒 简并引物 反转录PCR 双抗夹心酶联免疫法
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丝克高粱rDNA ITS区的RFLP分析 被引量：2
5
作者 郭琼霞 黄可辉 +1 位作者 虞赟 吴珍泉 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2005年第3期349-352,共4页
对检疫性杂草丝克高粱及其5个同属近似种假高粱、明福1号、拟高粱、苏丹草和黑高粱的rDNA内转录间隔区(ITS)进行PCR扩增及测序,并利用限制性内切酶XceⅠ对这些近似种的PCR产物进行酶切分析.结果表明:各个种间均有XceⅠ酶切位点,其中假... 对检疫性杂草丝克高粱及其5个同属近似种假高粱、明福1号、拟高粱、苏丹草和黑高粱的rDNA内转录间隔区(ITS)进行PCR扩增及测序,并利用限制性内切酶XceⅠ对这些近似种的PCR产物进行酶切分析.结果表明:各个种间均有XceⅠ酶切位点,其中假高粱、明福1号、拟高粱、苏丹草及黑高粱5个种的酶切图谱完全一致,而丝克高粱的酶切图谱与其5个同属近似种的酶切图谱不同.假高粱、明福1号、拟高粱、苏丹草及黑高粱的rDNA PCR扩增产物可以切出4条带,大小约为670、530、190、150 bp;而丝克高粱只能切出2条带,大小约为670、190 bp,这与其5个同属近似种在rDNA ITS区有2个XceⅠ酶切位点,而丝克高粱只有1个酶切位点的结果相一致.因此,利用XceⅠ就可以把丝克高粱与其5个近似种区分开. 展开更多
关键词 丝克高粱 内转录间隔区 限制性片段长度多态性分析 分子鉴别
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2009-2021年从国外引进牧草种子检疫审批情况分析 被引量：1
6
作者 王晓亮 朱莉 +3 位作者 姜培 陈冉冉 李志红 冯晓东 《植物检疫》 2023年第6期62-68,共7页
从国外引种检疫审批是防止植物检疫性有害生物随种子进入我国的重要手段途径。2008年之后,牧草产业开始有了一定的发展,而牧草种子是牧草产业发展的基础。本文整理2009-2021年从国外引进牧草种子检疫审批数据,重点分析苜蓿、燕麦、黑麦... 从国外引种检疫审批是防止植物检疫性有害生物随种子进入我国的重要手段途径。2008年之后,牧草产业开始有了一定的发展,而牧草种子是牧草产业发展的基础。本文整理2009-2021年从国外引进牧草种子检疫审批数据,重点分析苜蓿、燕麦、黑麦草的引进情况,从总体趋势、引种单位、原产国、种植地等方面开展分析,并与海关进口数据进行对比,以期为我国从国外引进牧草种子检疫审批研究和管控提供参考依据。 展开更多
关键词 从国外引种 检疫审批 牧草种子
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基于一步法RT-PCR的瓜类单粒种子携带CGMMV的快速检测技术 被引量：2
7
作者 蒋庆琳 周国辉 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2014年第9期1860-1865,共6页
为探究直接检测瓜类单粒种子携带黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV)的快速检测技术,以一步法RT-PCR为基础,构建同时扩增CGMMV基因组3′端和5′端基因的(一步法)双重RT-PCR、双重IC-RT-PCR和巢式双重IC-RT-PCR技术,灵敏度分别为10-3、10-3、10-4... 为探究直接检测瓜类单粒种子携带黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV)的快速检测技术,以一步法RT-PCR为基础,构建同时扩增CGMMV基因组3′端和5′端基因的(一步法)双重RT-PCR、双重IC-RT-PCR和巢式双重IC-RT-PCR技术,灵敏度分别为10-3、10-3、10-4,巢式双重IC-RT-PCR灵敏度比双重RT-PCR、双重IC-RTPCR高10倍。对不同种质、不同来源的种子及种子的不同部位进行检出率比较,巢式双重IC-RT-PCR检出率高于其它2个检测技术,试验种子种表带毒检出率高于种子组织研磨物,商用种子种表带毒检出率低于种子组织研磨物。为有效阻断毒源,建议同时对种表和种子组织研磨物进行检测,种表采用双重RT-PCR检测,种子组织研磨物采用双重IC-RT-PCR或巢式双重IC-RT-PCR检测。 展开更多
关键词 黄瓜绿斑驳花叶病毒 双重RT-PCR 双重IC-RT-PCR 巢式双重IC-RT-PCR 种子检测
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PMA-qPCR检测十字花科黑斑病菌活菌方法的建立 被引量：4
8
作者 于璇 王卫芳 +4 位作者 李献锋 冯黎霞 乾义柯 张承军 魏霜 《植物检疫》 2021年第4期49-54,共6页
利用叠氮溴化丙锭(propidium monoazide,PMA)与实时荧光PCR技术相结合(PMA-qPCR),对PMA质量浓度、暗孵育和曝光时间等因素进行优化,建立了检测十字花科黑斑病菌活菌的方法。结果显示,当PMA质量浓度为10μg/mL,避光条件下孵育5 min、然... 利用叠氮溴化丙锭(propidium monoazide,PMA)与实时荧光PCR技术相结合(PMA-qPCR),对PMA质量浓度、暗孵育和曝光时间等因素进行优化,建立了检测十字花科黑斑病菌活菌的方法。结果显示,当PMA质量浓度为10μg/mL,避光条件下孵育5 min、然后曝光10 min,此条件下能够抑制10-7CFU/mL十字花科黑斑病菌死菌的DNA扩增,对活菌扩增无影响,通过对比qPCR和PMA-qPCR的灵敏度可知,两者灵敏度差异不大,最低检出限均为10-3CFU/mL,将PMA-qPCR方法用于实际5批十字花科黑斑病菌阳性的油菜籽样品检测,结果显示该方法能准确反映实际样品的带活菌的情况。本研究为十字花科黑斑病菌活菌的检测提供了快速检测方法,可为实验室该病菌的快速筛检提供参考。 展开更多
关键词 十字花科黑斑病菌 PMA-qPCR 活菌 检测
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国际种子检测协会(ISTA)的种子病害标准检疫法 被引量：1
9
作者 倪长春 《世界农药》 CAS 2004年第4期28-30,共3页
被种传病原菌侵染的种子是影响农业生产的第一个侵染源,并也是传播植物病原的重要途径.因此,随着对作为种子消毒剂农药管理法规的齐全外,建立一种具有高灵敏性、重现性,以及简便、快速、低成本的、国际统一的种子病害标准检疫方法也甚... 被种传病原菌侵染的种子是影响农业生产的第一个侵染源,并也是传播植物病原的重要途径.因此,随着对作为种子消毒剂农药管理法规的齐全外,建立一种具有高灵敏性、重现性,以及简便、快速、低成本的、国际统一的种子病害标准检疫方法也甚为必要.为此,国际种子检测协会(Intemational SeedTesting Association,ISTA)于2002年在全面修订有关健康种子检疫章程中,把病害检疫方法的认证和管理体系也作了明确的规定.同时,对每一个病原体也制定了标准的检疫方法,并一起编纂在健康种子检疫方法一书中,已于2003年出版. 展开更多
关键词 国际种子检测协会 种子病害 标准检疫法 事实病害
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我国口岸截获楔天牛情况分析及全球楔天牛属昆虫概况 被引量：1
10
作者 李洋 朱彬 +5 位作者 郭静 杨静 郑斯竹 朱宏斌 徐梅 杨晓军 《植物检疫》 2025年第2期54-62,共9页
本文对口岸2003-2024年截获的楔天牛属昆虫种类、来源、寄主和入境口岸进行了统计分析,并大致梳理了全球楔天牛属昆虫的分类和分布情况。结果表明,截获次数最多的是白桦楔天牛[Saperda(Eusaperda) scalaris],截获的楔天牛寄主主要有栎属... 本文对口岸2003-2024年截获的楔天牛属昆虫种类、来源、寄主和入境口岸进行了统计分析,并大致梳理了全球楔天牛属昆虫的分类和分布情况。结果表明,截获次数最多的是白桦楔天牛[Saperda(Eusaperda) scalaris],截获的楔天牛寄主主要有栎属(Quercus spp.)、山核桃属(Carya spp.)、李属(Prunus spp.)等近30个属的植物,截获来源于近40个国家或地区,截获次数最多的是美国,截获的口岸主要有大窑湾、上海、洋山港、嘉兴、盐田、乍浦等。全球现存楔天牛属昆虫50种,中国18种,其中有8种仅在中国有分布。该属中最常见的种类为青杨楔天牛[Saperda (Compsidia) populnea]和山杨楔天牛(Saperda carcharias),这两种天牛广泛分布于欧亚大陆,危害严重,是世界性关注的重要林木害虫。北美的17个非中国种和欧亚的14个非中国种均值得我国进境口岸重点关注。 展开更多
关键词 楔天牛属 截获 种类 分布
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进境大豆中大豆疫霉病菌的实时荧光PCR检测技术初步研究 被引量：1
11
作者 钱茱希 刘晓宇 +4 位作者 许剑涛 杨静 李彬 吴翠萍 李井干 《植物检疫》 2025年第2期41-45,共5页
对于土传检疫性有害生物大豆疫霉(Phytophthora sojae),国内外鲜有对于进境大豆中大豆疫霉的检疫鉴定研究,尤其是通过实时荧光PCR的检测方法。本研究选取50批进境大豆样品,运用实时荧光PCR检测中的MGB探针法,从进境的阿根廷、乌拉圭、... 对于土传检疫性有害生物大豆疫霉(Phytophthora sojae),国内外鲜有对于进境大豆中大豆疫霉的检疫鉴定研究,尤其是通过实时荧光PCR的检测方法。本研究选取50批进境大豆样品,运用实时荧光PCR检测中的MGB探针法,从进境的阿根廷、乌拉圭、巴西、美国、加拿大大豆中检出大豆疫霉病菌。因此,口岸应提高警惕,加强对进境大豆的检疫,防止大豆疫霉传入,以保护我国农业经济,守护好国门生物安全。 展开更多
关键词 大豆疫霉病菌 实时荧光PCR 检测
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泰国进口玉米种子玉米褪绿斑驳病毒的检测 被引量：10
12
作者 雷屈文 李旻 +1 位作者 丁元明 王云月 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期51-54,共4页
采用DAS-ELISA对从泰国进口的6个玉米品种的种子进行玉米褪绿斑驳病毒(Maize chlorotic mottle virus,MCMV)检测,结果显示其中1个样品为MCMV阳性,其他品种为阴性。RT-PCR检测结果进一步证实该样品为阳性。对PCR产物进行测序,将分离物序... 采用DAS-ELISA对从泰国进口的6个玉米品种的种子进行玉米褪绿斑驳病毒(Maize chlorotic mottle virus,MCMV)检测,结果显示其中1个样品为MCMV阳性,其他品种为阴性。RT-PCR检测结果进一步证实该样品为阳性。对PCR产物进行测序,将分离物序列与已发布的23条MCMV序列进行比对和系统进化分析,结果表明该分离物的序列与中国分离物和泰国分离物的遗传距离较近,同分化在进化树的同一个簇。取5号样品的100粒种子进行DAS-ELISA检测,结果仅有2粒种子为阳性,即MCMV的检出率为2%。 展开更多
关键词 玉米种子 玉米褪绿斑驳病毒(MCMV) 序列分析 检测
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油菜茎基溃疡病菌的实时荧光PCR检测 被引量：9
13
作者 周国梁 尚琳琳 +3 位作者 林泓 印丽萍 徐殿胜 易建平 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期10-17,共8页
根据油菜茎基溃疡病菌Leptosphaeria maculans与其近似种ITS序列的差异,设计了检测L.maculans的引物Lmb3/R2和探针Probe-M,建立了L.maculans的实时荧光PCR检测方法。试验结果表明,来自加拿大、澳大利亚和乌克兰等国的22株L.maculans菌... 根据油菜茎基溃疡病菌Leptosphaeria maculans与其近似种ITS序列的差异,设计了检测L.maculans的引物Lmb3/R2和探针Probe-M,建立了L.maculans的实时荧光PCR检测方法。试验结果表明,来自加拿大、澳大利亚和乌克兰等国的22株L.maculans菌株都能得到阳性扩增,而供试的30株L.biglobosa菌株和6株其他菌株以及空白对照没有荧光信号的增加。该检测方法的灵敏度达到4 pg菌丝DNA,整个检测过程控制在4 h内,其快速、特异和灵敏的特点可以满足进境油菜籽样品的快速初检以及病菌分离物的快速鉴定。 展开更多
关键词 油菜茎基溃疡病菌 实时荧光PCR
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我国蔬菜种子进出口检疫现状及展望 被引量：4
14
作者 姚剑 张萍 +2 位作者 戴雷 余晓峰 方元炜 《种子》 CSCD 北大核心 2008年第11期83-86,共4页
通过对我国蔬菜种子进出口检疫的特点、存在的问题分析,结合国内外种子健康度检验现状,构建我国蔬菜种子检疫的发展规划,提出加强检疫管理和建设检疫标准体系的设想。
关键词 蔬菜种子 检疫 健康度检验 标准
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进境大豆种子中烟草环斑病毒的快速检测 被引量：5
15
作者 闻伟刚 崔俊霞 盛蕾 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期748-751,共4页
烟草环斑病毒(Tobacco ringspot virus,TRSV)是进境大豆种子必须检疫的项目,属于我国禁止入境的二类检疫性有害生物,本文建立了大豆种子中TRSV的快速检测方法。采用Trizol试剂直接提取大豆种子总RNA,通过RT-PCR扩增得到359 bp特异性产... 烟草环斑病毒(Tobacco ringspot virus,TRSV)是进境大豆种子必须检疫的项目,属于我国禁止入境的二类检疫性有害生物,本文建立了大豆种子中TRSV的快速检测方法。采用Trizol试剂直接提取大豆种子总RNA,通过RT-PCR扩增得到359 bp特异性产物。该产物经半巢式PCR进一步验证得到206 bp特异性片段,经测序及同源性比较表明,片段序列与GenBank中登录的TRSV外壳蛋白基因部分序列存在92%～96%的同源性,而未见与其它基因序列存在同源性。同时,大豆种子样品经DAS-ELISA复核检测结果显示TRSV阳性反应。因此,判定该批进境大豆种子携带TRSV。 展开更多
关键词 大豆 烟草环斑病毒 快速检测 RT—PCR 半巢式PCR
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玉米资源抗丝黑穗病快速鉴定方法的初步研究 被引量：9
16
作者 董玲 金益 王振华 《西南农业学报》 CSCD 2005年第5期653-657,共5页
本文以11份已知抗性的玉米自交系为试验材料,研究了玉米自交系苗期可溶性总糖含量与接种条件下丝黑穗发病率间的关系,结果表明玉米自交系在沙与土1:1混合处理中,1叶期幼苗地上部分可溶性总糖含量与田间接种的发病率有较好的相关性,相关... 本文以11份已知抗性的玉米自交系为试验材料,研究了玉米自交系苗期可溶性总糖含量与接种条件下丝黑穗发病率间的关系,结果表明玉米自交系在沙与土1:1混合处理中,1叶期幼苗地上部分可溶性总糖含量与田间接种的发病率有较好的相关性,相关系数为0.9868,符合指数曲线回归方程Y=0.008157e0.444841x.以幼苗可溶性总糖含量为指标建立了玉米资源抗感丝黑穗病的抗性分级标准,即幼苗可溶性总糖含量低于10.81 %为高抗,11.03 %～14.43 %为抗病,14.47 %～15.99 %的为中抗,16.01 %～19.10 %为感病,19.11 %～21.16 %为高感.应用测定幼苗可溶性总糖含量的方法对东北农业大学玉米研究室提供的70份玉米材料进行了抗玉米丝黑穗病鉴定,其中未发现高抗材料,有抗病和中抗材料各16份. 展开更多
关键词 玉米 丝黑穗病 可溶性总糖含量
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加拿大进境大豆上检出菜豆荚斑驳病毒 被引量：3
17
作者 沈建国 王念武 +2 位作者 翁瑞泉 黄可辉 郭琼霞 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期127-129,共3页
本研究采用DAS-ELISA、IC-RT-PCR及序列测定方法,对加拿大进境大豆种子进行菜豆荚斑驳病毒(Beanpod mottle virus,BPMV)和大豆花叶病毒(Soybean mosaic virus,SMV)检测,结果表明,BPMV的DAS-ELISA和IC-RT-PCR检测结果均为阳性,且PCR扩增... 本研究采用DAS-ELISA、IC-RT-PCR及序列测定方法,对加拿大进境大豆种子进行菜豆荚斑驳病毒(Beanpod mottle virus,BPMV)和大豆花叶病毒(Soybean mosaic virus,SMV)检测,结果表明,BPMV的DAS-ELISA和IC-RT-PCR检测结果均为阳性,且PCR扩增产物序列与已报道的BPMV基因序列相似性达97%以上,而SMV的DAS-ELISA和IC-RT-PCR检测结果都为阴性。综合血清学、分子生物学检测结果,确认该批大豆携带有菜豆荚斑驳病毒。 展开更多
关键词 菜豆英斑驳病毒 检测 DAS-EUSA IC-RT-PCR
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LAMP方法检测豌豆细菌性疫病菌 被引量：4
18
作者 封立平 尼秀媚 +3 位作者 厉艳 吴兴海 纪瑛 甘琴华 《植物检疫》 北大核心 2013年第3期80-84,共5页
本文应用环介导等温核酸扩增技术(LAMP)对豌豆细菌性疫病菌的肽相关脂蛋白(oprL)特异性基因进行扩增,采用2对引物识别目的片段的6个特异性区域,60 oC恒温1h完成扩增,设计的引物与假单胞属的近缘菌丁香假单胞菌丁香致病变种、绿黄假单胞... 本文应用环介导等温核酸扩增技术(LAMP)对豌豆细菌性疫病菌的肽相关脂蛋白(oprL)特异性基因进行扩增,采用2对引物识别目的片段的6个特异性区域,60 oC恒温1h完成扩增,设计的引物与假单胞属的近缘菌丁香假单胞菌丁香致病变种、绿黄假单胞菌、丁香假单胞菌大豆致病变种、丁香假单胞菌菜豆致病变种都没有扩增反应,表现了较好的特异性。该LAMP检测方法与普通PCR相比灵敏度高100倍。同时,LAMP技术的检测程序便捷,所需设备简单,其结果可以通过肉眼观察来判断,比常规PCR能更早得到反应结果,因此该技术在该病菌的口岸检疫方面拥有更大的优势。 展开更多
关键词 豌豆细菌性疫病菌 LAMP oprL 检测
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从印度尼西亚进口玉米中首次截获玉米褪绿斑驳病毒
19
作者 单振菊 水克娟 +4 位作者 闫邦奇 刘明航 徐淼锋 廖力 张卫东 《植物检疫》 2025年第2期63-66,共4页
玉米褪绿斑驳病毒(maize chlorotic mottle virus,MCMV)是我国进境植物检疫性有害生物。主要分布于秘鲁、美国、墨西哥、刚果民主共和国、肯尼亚、阿根廷、巴西等国家,中国台湾、四川和云南曾有过报道。2024年6月拱北海关技术中心通过... 玉米褪绿斑驳病毒(maize chlorotic mottle virus,MCMV)是我国进境植物检疫性有害生物。主要分布于秘鲁、美国、墨西哥、刚果民主共和国、肯尼亚、阿根廷、巴西等国家,中国台湾、四川和云南曾有过报道。2024年6月拱北海关技术中心通过双抗体夹心酶联免疫吸附(DAS-ELISA)、RT-PCR方法、实时荧光RT-PCR和序列比对分析进行验证,首次从印度尼西亚进口玉米种子中检出该病毒。这是我国首次从印度尼西亚进口玉米种子中截获该病毒,可为海关一线人员执法把关提供技术支撑。 展开更多
关键词 玉米褪绿斑驳病毒 DAS-ELISA RT-PCR 实时荧光RT-PCR 序列分析
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应用激光共聚焦显微扫描术研究小麦矮腥黑穗病菌和小麦网腥黑穗病菌冬孢子的自发荧光特性 被引量：4
20
作者 王宏毅 林石明 +1 位作者 张江洪 高泉准 《植物检疫》 北大核心 2012年第4期35-37,共3页
本文应用共聚焦激光扫描显微术(CLSM)对小麦矮腥黑穗病(TCK)和小麦网腥黑穗病菌(TCT)冬孢子的自发荧光特性进行了研究。研究表明:在这两种冬孢子中,它们各自都含有自发荧光物质,而且都能在488nm、543nm这2种波长激发光激发下,分别在相应... 本文应用共聚焦激光扫描显微术(CLSM)对小麦矮腥黑穗病(TCK)和小麦网腥黑穗病菌(TCT)冬孢子的自发荧光特性进行了研究。研究表明:在这两种冬孢子中,它们各自都含有自发荧光物质,而且都能在488nm、543nm这2种波长激发光激发下,分别在相应的510～530nm、580～600nm范围中得到相应发射光,只是在488nm波长激发光激发下,两种冬孢子发射出的光荧光强度最高,荧光光分布均匀,大体形态清楚;但层切扫描发现自发荧光在这两种冬孢子的空间分布存在明显差异:TCK冬孢子的自发荧光物质主要分布在外孢壁和网脊上,而在原生质中分布少;TCT冬孢子的自发荧光物质主要分布在原生质中,孢壁分布少,而网脊上不分布。应用CLSM在实际TCK检测工作中,能克服荧光显微镜存在的检测重复性较差、可靠性小的缺点,提升了TCK检验检疫的技术水平。 展开更多
关键词 激光共聚焦显微技术 小麦矮腥黑穗病 小麦网腥黑穗病菌 自发荧光特性
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