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液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中赖脯胰岛素及其药动学研究 被引量：5
1
作者 孙筱初 林菲菲 +6 位作者 万咪咪 佟悦 常路 袁梦 冯莹莹 滕国生 刘佳 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期2383-2388,共6页
赖脯胰岛素皮下注射吸收较快,与人胰岛素相比,其降血糖作用起效更快,血药浓度峰值更高,可更好地控制餐后高血糖。本文建立了液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定大鼠血浆中的赖脯胰岛素,并评价其药动学特征。采用牛胰岛素作为内标,血浆... 赖脯胰岛素皮下注射吸收较快,与人胰岛素相比,其降血糖作用起效更快,血药浓度峰值更高,可更好地控制餐后高血糖。本文建立了液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定大鼠血浆中的赖脯胰岛素,并评价其药动学特征。采用牛胰岛素作为内标,血浆样品经过固相萃取后,使用ACQUITY UPLC Peptide CSH C18柱(2.1 mm×50 mm, 1.7μm)进行色谱分离。采用电喷雾离子源(ESI源),在正离子模式下以多反应监测模式检测,赖脯胰岛素和牛胰岛素(内标)定量的离子对分别为m/z 1 162.5→217.2和m/z 1 157.5→136.0。方法学验证结果表明,大鼠血浆中赖脯胰岛素的线性范围为0.1~100 ng·mL^(-1),日内、日间准确度和精密度均符合生物样品分析相关要求,回收率在63.1%~68.1%之间。与文献报道方法相比,色谱分离得到改善,回收率显著提高。本方法成功应用于大鼠的单剂量皮下注射赖脯胰岛素的药代动力学研究。本研究中实验动物的使用已获得中国科学院上海药物研究所实验动物管理与使用委员会的批准。 展开更多
关键词 赖脯胰岛素 LC-MS/MS 药代动力学 固相萃取
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UPLC-MS/MS法快速、灵敏、直接测定人血浆中的门冬胰岛素 被引量：3
2
作者 韩盈 魏国兰 +4 位作者 米楠 郭林峰 胡春云 李爽 毕吕存 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期2389-2393,共5页
本实验建立了一种超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)快速、灵敏、直接测定人血浆中的门冬胰岛素。血浆样品经过固相萃取(SPE)处理后,采用电喷雾电离离子源(ESI),多反应离子监测(MRM),正离子扫描进行测定。以牛胰岛素为内标,采用Wat... 本实验建立了一种超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)快速、灵敏、直接测定人血浆中的门冬胰岛素。血浆样品经过固相萃取(SPE)处理后,采用电喷雾电离离子源(ESI),多反应离子监测(MRM),正离子扫描进行测定。以牛胰岛素为内标,采用Waters ACQUITY UPLC CSH C18色谱柱(50 mm×2.1 mm, 1.7μm)进行色谱分离,以乙酸水溶液(A)-乙酸乙腈溶液(B)作为流动相,流速0.600 mL·min^(-1)进行梯度洗脱。结果表明,门冬胰岛素在0.200~10.0 ng·mL^(-1)内线性关系良好,精密度小于14.5%,方法的回收率在36.7%~41.7%。本方法灵敏度高,精密度重现性好,成功支持了采用葡萄糖钳夹技术在健康男性受试者中比较门冬胰岛素注射液与诺和锐?的药代动力学研究。试验获得四川大学华西医院临床试验伦理分委员会批准[批准号:2017年临床试验(西药)审(148)号]。 展开更多
关键词 门冬胰岛素 UPLC-MS/MS 固相萃取 生物等效性
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ELISA法检测人血清中重组人信号调节蛋白α-抗CD20人鼠嵌合抗体融合蛋白IMM0306的方法学建立和验证
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作者 靖钰 姚慕蓉 +5 位作者 李松 陈典泽 张力 杨勇 钟勘 宗山海 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期2367-2371,共5页
IMM0306是重组人信号调节蛋白α-抗CD20人鼠嵌合抗体融合蛋白,拟在临床中治疗难治或复发性CD20阳性B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)。本文建立了ELISA法(酶联免疫吸附法)用于评价人血清中IMM0306的药代动力学。该实验获得中国医学科学院肿... IMM0306是重组人信号调节蛋白α-抗CD20人鼠嵌合抗体融合蛋白,拟在临床中治疗难治或复发性CD20阳性B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)。本文建立了ELISA法(酶联免疫吸附法)用于评价人血清中IMM0306的药代动力学。该实验获得中国医学科学院肿瘤医院伦理委员会批准(批准号:CTR20192612)。用重组人CD47蛋白包被过夜, 5%脱脂奶粉封闭2 h,洗涤板后,按照板位图每孔加入100μL样本孵育1.5 h,洗涤后加入生物素标记的检测抗体anti-IMM0306-biotin并孵育1 h,随后加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的链霉亲和素孵育1 h,显色并检测。捕获试剂的最佳包被浓度为2μg·mL^(-1),检测试剂anti-IMM0306-biotin和链霉亲和素-HRP的最佳稀释度分别为1∶500和1∶5 000。该方法的定量下限为4 ng·mL^(-1),标准曲线范围是4~100 ng·mL^(-1)。方法的验证结果均满足相应的接受标准,可以用于IMM0306临床药代动力学研究。 展开更多
关键词 CD47 抗体融合蛋白 ELISA 药代动力学
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