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凝血酶激活小胶质细胞的时间及浓度依赖性研究 被引量：1
1
作者 罗兴梅 陈星宇 伍国锋 《癫痫与神经电生理学杂志》 2018年第6期327-331,共5页
目的:用不同浓度的凝血酶在设定时间内刺激小胶质细胞,确定凝血酶激活小胶质细胞的最佳浓度。再以最佳浓度分别作用不同时间,以探讨该浓度凝血酶作用小胶质细胞激活的最佳时间。方法:体外培养小胶质细胞N9,分为正常对照组、凝血酶5U/mL... 目的:用不同浓度的凝血酶在设定时间内刺激小胶质细胞,确定凝血酶激活小胶质细胞的最佳浓度。再以最佳浓度分别作用不同时间,以探讨该浓度凝血酶作用小胶质细胞激活的最佳时间。方法:体外培养小胶质细胞N9,分为正常对照组、凝血酶5U/mL组、10U/mL组、15U/mL组、20U/mL组、25U/mL组、30U/mL组,作用时间为6h,用ELISA法检测上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量、Griess法检测一氧化氮(NO)含量,以确定凝血酶激活小胶质细胞的最佳浓度。然后以最佳浓度分别作用于小胶质细胞3、6、12、24h,再次用上述方法检测细胞上清液中TNF-α、NO含量,确定凝血酶激活小胶质细胞的最佳时间。结果:凝血酶浓度为5U/mL时,TNF-α含量与正常对照组比较差异无统计学意义(P=0.632),凝血酶浓度在10-20U/mL时,TNF-α含量随凝血酶剂量增加而逐渐升高,20U/mL时TNF-α的含量达到最高(P<O.001)。不同浓度凝血酶刺激组,细胞上清液中NO含量比较,组间差异有统计学意义(f=365.819,P<0.001)。凝血酶浓度为5U/mL时,NO的含量为4.44(±0.12)μmol,与正常对照组比较差异有统计学意义(P=0.018),且NO含量随着凝血酶浓度增加而升高,各组与正常对照组比较差异均有显著意义(P<0.001)。结论:凝血酶诱导小胶质细胞激活的最佳浓度为20U/mL,最佳时间为12h。 展开更多
关键词 小胶质细胞 凝血酶 肿瘤坏死因子(TNF-α) 一氧化氮(NO)
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孕烷受体X及其下游目的基因编码蛋白在小鼠慢性颞叶癫痫模型的表达 被引量：1
2
作者 孙琬冰 王剑虹 洪震 《癫痫与神经电生理学杂志》 2018年第6期321-326,共6页
目的:探究孕烷受体X(pregnane X receptor,PXR)及其下游目的基因编码蛋白P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)和细胞色素P450 3A4(cytochrome P450 3A4,CYP3A4)在小鼠慢性颞叶癫痫模型中的表达情况及对脑内卡马西平浓度的影响。方法:雄性C57... 目的:探究孕烷受体X(pregnane X receptor,PXR)及其下游目的基因编码蛋白P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)和细胞色素P450 3A4(cytochrome P450 3A4,CYP3A4)在小鼠慢性颞叶癫痫模型中的表达情况及对脑内卡马西平浓度的影响。方法:雄性C57/BL小鼠(n=30)随机分为模型组(n=20)和对照组(n=10)。模型组使用海人酸(kainic acid,KA)海马原位注射构建海人酸点燃模型,对照组同一位置注射等体积生理盐水。通过行为学及脑电图监测筛选慢性颞叶癫痫模型。Western blot检测PXR、P-gp及CYP3A4在海马内的表达水平。使用免疫荧光技术对P-gp和CYP3A4进行双标,检测其共表达;卡马西平连续给药7d后,通过高效液相色谱法(HPLC)检测脑组织内卡马西平浓度。结果:模型组小鼠中55%出现反复自发性发作行为及脑电图上典型的痫样放电,确认为慢性颞叶癫痫模型。模型组小鼠海马PXR表达水平较对照组显著增高(P<0.0001)。P-gp(P<0.001)和CYP3A4(P<0.001)的表达水平也较对照组显著增高,而且在模型组小鼠脑组织内存在显著共表达。模型组小鼠脑内卡马西平浓度显著低于对照组(P<0.05)。结论:PXR表达上调后可能通过同时激活下游目的基因编码蛋白P-gp和CYP3A4使二者发挥协同作用从而介导癫痫耐药。 展开更多
关键词 耐药性癫痫 颞叶癫痫 孕烷受体X(PXR) P-糖蛋白(P-gp) 细胞色素P4503A4(CYP3A4)
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