目的评价叶酸修饰的斑蝥素/黄芩苷脂质体(DSPE-PEG2k-folate-cantharidin&baicalin@lipsomes,FA-Can&Bai@Lips)在正常大鼠与荷瘤大鼠体内的药动学及组织分布差异。方法以HepG2细胞悬液接种于大鼠右侧腋下诱导荷瘤大鼠模型,尾静...目的评价叶酸修饰的斑蝥素/黄芩苷脂质体(DSPE-PEG2k-folate-cantharidin&baicalin@lipsomes,FA-Can&Bai@Lips)在正常大鼠与荷瘤大鼠体内的药动学及组织分布差异。方法以HepG2细胞悬液接种于大鼠右侧腋下诱导荷瘤大鼠模型,尾静脉注射FA-Can&Bai@Lips后采集不同给药时间点血浆与组织(心、肝、脾、肺、肾),采用超高效液相色谱-串联质谱联用技术(UPLC-MS/MS)测定血浆及组织中斑蝥素和黄芩苷浓度,应用Phoenix WinNonlin软件计算药动学参数,并分析比较FA-Can&Bai@Lips在正常机体状态与荷瘤状态下的药动学和组织分布差异。结果建立的同时测定斑蝥素与黄芩苷的UPLC-MS/MS方法线性关系良好,专属性、准确度与精密度、提取回收率与基质效应及稳定性等均符合生物样本检测要求。药动学参数表明,与正常组大鼠相比,荷瘤大鼠体内斑蝥素与黄芩苷的药时曲线下面积(area under the curve,AUC0-t、AUC0-∞)、平均驻留时间(mean residence time,MRT0-t、MRT0-∞)均显著升高(P<0.05),分别增加了55.68%、72.50%、43.10%、45.95%和15.10%、42.54%、9.09%、10.53%;斑蝥素在荷瘤大鼠体内半衰期(half-life,t1/2)缩短,但无显著性差异,而黄芩苷的t1/2显著延长(P<0.05),两者的表观分布容积(apparent volume of distribution,Vd)与清除率(clearance rate,CL)均明显降低。组织分布结果显示,斑蝥素与黄芩苷在荷瘤大鼠肝脏中浓度明显高于正常大鼠,其余组织药物浓度均显著低于正常大鼠。结论UPLC-MS/MS法分析速度快、简单、特异、灵敏,可用于大鼠血浆及组织中斑蝥素与黄芩苷的测定,且证实荷瘤状态会对FA-Can&Bai@Lips的体内药动学及组织分布产生明显影响。展开更多
化疗药物普遍缺乏特异性,开发一种可主动靶向递送化疗药物、对生物体无免疫原性的载体越来越受到人们的关注。本研究通过滚环扩增技术(rolling circle amplification,RCA)将合成的具有串联重复序列的DNA长单链与几条包含适配体AS1411的...化疗药物普遍缺乏特异性,开发一种可主动靶向递送化疗药物、对生物体无免疫原性的载体越来越受到人们的关注。本研究通过滚环扩增技术(rolling circle amplification,RCA)将合成的具有串联重复序列的DNA长单链与几条包含适配体AS1411的短链DNA杂交来构筑含有多价适配体的核酸载体(multivalent aptamer,Multi-Apt),利用其双螺旋结构大量负载抗肿瘤药物阿霉素(doxorubicin,Dox),用于靶向治疗小鼠黑色素瘤细胞(B16细胞)。通过琼脂糖凝胶电泳优化了RCA产物与短链的结合比例,利用酶标仪探究了Dox的负载及释放,并采用荧光显微镜、流式细胞术、酶标仪、CCK-8法和划痕实验考察了Multi-Apt-Dox对B16细胞的靶向性和生长抑制情况。实验结果显示,RCA产物与3条短链的最佳物质的量比为1∶50。荧光显微镜照片、流式细胞术和酶标仪实验结果表明,每个Multi-Apt可负载约200个Dox分子,而且其对B16细胞的亲和性是单价适配体的46倍。细胞实验表明,Multi-Apt在细胞内降解并释放药物后诱导产生选择性细胞毒性,从而极大降低Dox对正常细胞的毒性,为肿瘤治疗的靶向给药提供一种新的策略。展开更多
文摘目的评价叶酸修饰的斑蝥素/黄芩苷脂质体(DSPE-PEG2k-folate-cantharidin&baicalin@lipsomes,FA-Can&Bai@Lips)在正常大鼠与荷瘤大鼠体内的药动学及组织分布差异。方法以HepG2细胞悬液接种于大鼠右侧腋下诱导荷瘤大鼠模型,尾静脉注射FA-Can&Bai@Lips后采集不同给药时间点血浆与组织(心、肝、脾、肺、肾),采用超高效液相色谱-串联质谱联用技术(UPLC-MS/MS)测定血浆及组织中斑蝥素和黄芩苷浓度,应用Phoenix WinNonlin软件计算药动学参数,并分析比较FA-Can&Bai@Lips在正常机体状态与荷瘤状态下的药动学和组织分布差异。结果建立的同时测定斑蝥素与黄芩苷的UPLC-MS/MS方法线性关系良好,专属性、准确度与精密度、提取回收率与基质效应及稳定性等均符合生物样本检测要求。药动学参数表明,与正常组大鼠相比,荷瘤大鼠体内斑蝥素与黄芩苷的药时曲线下面积(area under the curve,AUC0-t、AUC0-∞)、平均驻留时间(mean residence time,MRT0-t、MRT0-∞)均显著升高(P<0.05),分别增加了55.68%、72.50%、43.10%、45.95%和15.10%、42.54%、9.09%、10.53%;斑蝥素在荷瘤大鼠体内半衰期(half-life,t1/2)缩短,但无显著性差异,而黄芩苷的t1/2显著延长(P<0.05),两者的表观分布容积(apparent volume of distribution,Vd)与清除率(clearance rate,CL)均明显降低。组织分布结果显示,斑蝥素与黄芩苷在荷瘤大鼠肝脏中浓度明显高于正常大鼠,其余组织药物浓度均显著低于正常大鼠。结论UPLC-MS/MS法分析速度快、简单、特异、灵敏,可用于大鼠血浆及组织中斑蝥素与黄芩苷的测定,且证实荷瘤状态会对FA-Can&Bai@Lips的体内药动学及组织分布产生明显影响。
文摘化疗药物普遍缺乏特异性,开发一种可主动靶向递送化疗药物、对生物体无免疫原性的载体越来越受到人们的关注。本研究通过滚环扩增技术(rolling circle amplification,RCA)将合成的具有串联重复序列的DNA长单链与几条包含适配体AS1411的短链DNA杂交来构筑含有多价适配体的核酸载体(multivalent aptamer,Multi-Apt),利用其双螺旋结构大量负载抗肿瘤药物阿霉素(doxorubicin,Dox),用于靶向治疗小鼠黑色素瘤细胞(B16细胞)。通过琼脂糖凝胶电泳优化了RCA产物与短链的结合比例,利用酶标仪探究了Dox的负载及释放,并采用荧光显微镜、流式细胞术、酶标仪、CCK-8法和划痕实验考察了Multi-Apt-Dox对B16细胞的靶向性和生长抑制情况。实验结果显示,RCA产物与3条短链的最佳物质的量比为1∶50。荧光显微镜照片、流式细胞术和酶标仪实验结果表明,每个Multi-Apt可负载约200个Dox分子,而且其对B16细胞的亲和性是单价适配体的46倍。细胞实验表明,Multi-Apt在细胞内降解并释放药物后诱导产生选择性细胞毒性,从而极大降低Dox对正常细胞的毒性,为肿瘤治疗的靶向给药提供一种新的策略。
