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新型IDO1/TDO抑制剂SHR9146的有关物质检测 被引量:1
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作者 肖梅 李维 +2 位作者 张颖颖 姚飞 杭太俊 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1751-1758,共8页
目的:建立高效液相色谱法进行肿瘤免疫治疗的新型高选择性吲哚胺2,3-双加氧酶1(IDO1)/色氨酸2,3-加氧酶(TDO)抑制剂(S)-2-(4-(4-(4-(6-氟-5H-咪唑并[5,1-a]异吲哚-5-基)哌啶-1-基)苯基)-1H-吡唑-1-基)乙醇(SHR9146)的有关物质检测。方法... 目的:建立高效液相色谱法进行肿瘤免疫治疗的新型高选择性吲哚胺2,3-双加氧酶1(IDO1)/色氨酸2,3-加氧酶(TDO)抑制剂(S)-2-(4-(4-(4-(6-氟-5H-咪唑并[5,1-a]异吲哚-5-基)哌啶-1-基)苯基)-1H-吡唑-1-基)乙醇(SHR9146)的有关物质检测。方法:采用Kromasil C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以0.01 mol·L^(-1)磷酸二氢钾缓冲溶液(含0.3%三乙胺,磷酸调节pH至3.0)(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1),紫外检测波长270 nm。结果:SHR9146与各有关物质的色谱分离良好,色谱响应在0.01~5.0μg·mL^(-1)浓度范围内线性关系良好(r>0.999),检测限和定量限分别约为21.95和73.16 ng·mL^(-1)。利用上述方法,对3批产品的有关物质进行分析,并采用加校正因子的主成分自身对照法计算含量,杂质SHR9146Z-399含量在0.46%~0.60%,SHR9146Z-333含量不超过0.11%,其他单个杂质含量均不超过0.10%,有关物质含量总和低于1.0%。结论:建立的HPLC-UV方法专属性好,检测灵敏度高,可用于SHR9146原料药的质量控制。 展开更多
关键词 吲哚胺2 3-双加氧酶1/色氨酸2 3-加氧酶抑制剂 (S)-2-(4-(4-(4-(6-氟-5H-咪唑并[5 1-a]异吲哚-5-基)哌啶-1-基)苯基)-1H-吡唑-1-基)乙醇 有关物质 高效液相色谱法 质量控制 加校正因子的主成分自身对照法
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基于网络药理学和实验验证探究柳蒿芽脂溶性成分调节2型糖尿病的作用机制
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作者 徐艳华 华谦 +4 位作者 何祥 那仁朝克图 孙鑫颖 乌云嘎 王青虎 《天然产物研究与开发》 北大核心 2025年第5期965-973,共9页
利用网络药理学和实验验证研究柳蒿芽脂溶性成分(liposoluble components of Artemisia integrifolia L.bud,AILC)调节2型糖尿病(type 2 diabetes melitus,T2DM)的作用机制。首先,制备了AILC,并分离得到了24个化合物;运用SwissTargetPre... 利用网络药理学和实验验证研究柳蒿芽脂溶性成分(liposoluble components of Artemisia integrifolia L.bud,AILC)调节2型糖尿病(type 2 diabetes melitus,T2DM)的作用机制。首先,制备了AILC,并分离得到了24个化合物;运用SwissTargetPrediction数据库获取AILC靶点;利用GenCards、OMIM和TTD数据库获取T2DM疾病靶点。然后通过Venn、Cytoscape3.10.1、String和DAVID数据库分析AILC调节T2DM的潜在活性成分、核心靶点及作用通路之间的关系。最后,通过建立T2DM大鼠模型进行实验验证。网络药理学结果显示,AILC作用于T2DM关键靶点可能为蛋白激酶B、肿瘤坏死因子、白细胞介素-6、血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)、氧化物酶体增殖物激活受体等。这些靶点主要富集在缺氧诱导因子-1信号通路、磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路、人类巨细胞病毒感染、非小细胞肺癌、松弛素信号通路。动物实验结果显示,AILC能明显降低大鼠血清总胆固醇、甘油三酯、血糖含量;免疫组化和蛋白质免疫印记法验证表明,AILC显著下调大鼠VEGFA表达量(P<0.05)。研究表明,柳蒿芽脂溶性成分通过调节VEGFA蛋白表达,调节糖脂代谢紊乱而对T2DM起到治疗作用。 展开更多
关键词 柳蒿芽脂溶性成分 网络药理学 血管内皮生长因子A 2型糖尿病 糖脂代谢
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基于VOSviewer与CiteSpace的仿制药研究现状及趋势 被引量:2
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作者 刘少华 吴春兴 +3 位作者 孙法瑞 舒成仁 王雨来 邵碧波 《药物评价研究》 北大核心 2025年第3期746-756,共11页
目的基于文献计量学总结国内外仿制药领域的研究现状及趋势,为进一步研究提供参考。方法通过检索收集中国学术期刊全文数据库(CNKI)、Web of Science数据库中收录的相关文献,借助CiteSpace6.3R2、VOSview1.6.20、文献计量学在线分析平... 目的基于文献计量学总结国内外仿制药领域的研究现状及趋势,为进一步研究提供参考。方法通过检索收集中国学术期刊全文数据库(CNKI)、Web of Science数据库中收录的相关文献,借助CiteSpace6.3R2、VOSview1.6.20、文献计量学在线分析平台等探讨本领域的作者机构合作、国家合作概况,并分析关键词共现、聚类、突现等,并对分析结果可视化展示。结果共纳入2564篇文献,其中中文文献641篇,英文文献1923篇。刊文趋势表明,国内外仿制药领域研究的发展趋势基本相同。目前本领域研究已有国际化趋势,但我国的国际合作中心性为0。关键词分析显示,国内外仿制药领域研究内容在保持一致的前提下各有侧重,其研究内容与热点可相互补充借鉴。结论系统分析了2000—2024年间仿制药领域的相关文献,总结了目前全球仿制药领域的研究现状及趋势,并进一步指出国内外研究的异同,可为本领域的进一步研究提供指导。 展开更多
关键词 仿制药 文献计量学 VOS viewer CITESPACE 一致性评价 生物等效性
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基于UPLC-Q-TOF-MS/MS及网络药理学探讨活络效灵丹治疗糖尿病周围神经病变的物质基础研究 被引量:1
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作者 张喆 李玉琴 +5 位作者 施亚宁 宿树兰 范若颖 尚尔鑫 朱悦 段金廒 《药学学报》 北大核心 2025年第4期1124-1136,共13页
本实验通过超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)、网络药理学探讨活络效灵丹治疗糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy,DPN)的物质基础。利用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术结合PeakView^(TM)1.2软件、Molec... 本实验通过超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)、网络药理学探讨活络效灵丹治疗糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy,DPN)的物质基础。利用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术结合PeakView^(TM)1.2软件、Molecule Profiler^(TM)软件分析活络效灵丹的体外成分及正常大鼠与高脂饲料喂养联合小剂量链脲佐菌素注射所致DPN大鼠的入血成分,通过Swiss Target Prediction、GeneCards等数据库筛选成分对应靶点及疾病靶点,利用Venny 2.1平台获得交集靶点,导入STRING平台及Cytoscape 3.10.1软件构建蛋白互作网络及“成分-靶点”网络图分析其核心成分与核心靶点,对核心靶点进行GO和KEGG富集分析。实验获得南京中医药大学实验动物伦理委员会批准(批准号:202310A023)。结果共鉴定出活络效灵丹提取物83个化学成分,包括丹参酮ⅡA等52个萜类、Z-藁本内酯等11个苯酞类、阿魏酸等15个有机酸类及4个香豆素类、1个酚类成分。在正常大鼠血浆中鉴定出15个原型成分与29个代谢产物,在DPN大鼠血浆中鉴定出17个原型成分与32个代谢产物。网络药理学结果显示,3-乙酰基-11-酮基-β-乳香酸、11-酮基-β-乳香酸等5个核心成分可能通过TNF、IL6等27个核心靶点,调节AGE-RAGE、PI3K/Akt等信号通路发挥治疗DPN的作用。本研究通过UPLC-Q-TOF-MS/MS技术分析了活络效灵丹的体内外化学成分及主要化合物的裂解规律,结合网络药理学分析其治疗DPN的核心成分,为阐明活络效灵丹治疗DPN的功效物质基础及作用机制研究提供科学依据。 展开更多
关键词 活络效灵丹 UPLC-Q-TOF-MS/MS 网络药理学 糖尿病周围神经病变 化学成分 入血成分
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奥赛利定联合髂筋膜间隙阻滞对老年衰弱患者股骨近端防旋髓内钉内固定术后康复质量的影响 被引量:1
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作者 刘克 王帅 +3 位作者 张帅帅 孙志明 王大龙 叶文学 《中国新药与临床杂志》 北大核心 2025年第2期145-149,共5页
目的评价奥赛利定联合髂筋膜间隙阻滞对老年衰弱患者股骨近端防旋髓内钉(PFNA)内固定术后康复质量的影响。方法选择全身麻醉下行PFNA内固定术老年衰弱患者60例,随机分为对照组和试验组,每组30例。麻醉前5 min,试验组静脉注射奥赛利定1 ... 目的评价奥赛利定联合髂筋膜间隙阻滞对老年衰弱患者股骨近端防旋髓内钉(PFNA)内固定术后康复质量的影响。方法选择全身麻醉下行PFNA内固定术老年衰弱患者60例,随机分为对照组和试验组,每组30例。麻醉前5 min,试验组静脉注射奥赛利定1 mg,对照组注射舒芬太尼5μg,所有患者均行全身麻醉并实施超声引导下髂筋膜间隙阻滞,术后行患者自控静脉镇痛(PCIA)。记录术中丙泊酚、瑞芬太尼用量;记录术前24 h和术后2、6、24、48 h的视觉模拟评分法(VAS)评分,术后24 h内镇痛泵按压次数和补救镇痛情况;检测术前和术后2、24 h白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α和C反应蛋白(CRP)水平;记录术后苏醒时间、拔管时间、麻醉恢复室(PACU)停留时间和不良反应发生情况,采用恢复质量量表(QoR-15)评分评估术后早期恢复质量。结果与对照组相比,试验组术中丙泊酚和瑞芬太尼用量显著减少(P<0.05)。与术前24 h相比,2组术后2~48 h VAS评分均不同程度下降(P<0.05),试验组显著低于对照组(P<0.05)。试验组术后48 h内镇痛泵按压次数和补救镇痛次数均显著少于对照组(P<0.01)。与术前24 h相比,2组术后2、24 h的IL-6、TNF-α和CRP水平均显著上升(P<0.05),QoR-15评分增加,且2组间比较差异显著(P<0.05)。与对照组相比,试验组术后苏醒时间、拔管时间、PACU停留时间明显缩短(P<0.05)。试验组不良反应发生率低于对照组(P<0.05)。结论奥赛利定联合髂筋膜间隙阻滞应用于老年衰弱患者PFNA内固定术,安全有效,能减轻术后急性疼痛,减少不良反应,有利于早期康复。 展开更多
关键词 奥赛利定 髂筋膜间隙阻滞 镇痛 老年患者 衰弱
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基于UPLC-QqQ-MS/MS法联合多元统计分析及熵权TOPSIS法评价白术饮片质量 被引量:2
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作者 单国顺 刘想 +6 位作者 袁楚 高如汐 王凡一 张可 吴昊 刘思奇 赵启苗 《中国现代应用药学》 北大核心 2025年第5期714-723,共10页
目的对白术饮片的质量进行系统的评价,从而保证白术饮片的质量和临床疗效。方法采用超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱(UPLC-QqQ-MS/MS)技术对白术饮片中白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、隐绿... 目的对白术饮片的质量进行系统的评价,从而保证白术饮片的质量和临床疗效。方法采用超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱(UPLC-QqQ-MS/MS)技术对白术饮片中白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、隐绿原酸、绿原酸、新绿原酸和1,3-二咖啡酰奎宁酸的含量进行测定;采用多元统计分析方法考察白术饮片的产地、生长年限、加工和炮制方法对外观性状及有效成分含量的影响;利用熵权TOPSIS法构建白术药材质量评价模型,并考察不同影响因素对白术饮片质量的影响。结果本研究所建立的白术中活性成分的含量测定方法稳定、可行;通过对不同白术饮片质量进行分析发现,产地对白术饮片中倍半萜内酯类和酚酸类成分含量具有显著影响,浙江产白术的倍半萜内酯类和酚酸类化合物的含量较高;生长年限对白术饮片中倍半萜内酯类和酚酸类成分含量也具有显著影响,多年生白术饮片中倍半萜内酯类和酚酸类成分含量更高;切制途径和干燥方法对白术饮片中倍半萜内酯类和酚酸类成分含量也具有显著影响;麸炒却可令不同因素影响下的白术饮片所含化学成分趋同。最后,通过熵权TOPSIS分析也证实,浙江产地、生长≥2年、软化切制后经过烘干方式得到白术饮片质量最佳。结论本研究所建立的研究方法可用于白术饮片的质量评价。 展开更多
关键词 白术 超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱(UPLC-QqQ-MS/MS) 多元统计分析 熵权TOPSIS法 质量评价
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西洋参中皂苷类成分表征和炮制导致成分转化的研究进展 被引量:2
7
作者 刘忠英 李瑜 +2 位作者 刘舒 后宗 汪戎锦 《吉林大学学报(理学版)》 北大核心 2025年第1期229-240,共12页
西洋参富含多种药理活性物质,具有保护心血管系统、改善神经系统疾病和降血糖等多种药理作用,目前对西洋参中皂苷类成分的结构表征及炮制转化研究取得了显著进展.总结概括西洋参中皂苷类活性成分的分类和分布、现代主流分析技术以及炮... 西洋参富含多种药理活性物质,具有保护心血管系统、改善神经系统疾病和降血糖等多种药理作用,目前对西洋参中皂苷类成分的结构表征及炮制转化研究取得了显著进展.总结概括西洋参中皂苷类活性成分的分类和分布、现代主流分析技术以及炮制加工对皂苷类成分的转化机制,为西洋参皂苷类成分的深入挖掘和创新炮制技术等提供有效的技术支撑和指导方法,从而扩大其在医疗和保健等方面的应用. 展开更多
关键词 西洋参 皂苷 串联质谱 炮制加工
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注射用亚胺培南西司他丁钠用于儿童的分剂量及稳定性研究 被引量:1
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作者 张先明 朱增燕 +1 位作者 王文静 杜小换 《中国药房》 北大核心 2025年第1期101-105,共5页
目的考察注射用亚胺培南西司他丁钠(ICS)的分剂量对其主药亚胺培南(IPN)含量一致性的影响以及不同浓度药液的稳定性,为儿童安全、有效使用ICS提供参考。方法3名操作员按照临床儿童常用的2种分剂量方式(以10 mL或20 mL的0.9%氯化钠注射... 目的考察注射用亚胺培南西司他丁钠(ICS)的分剂量对其主药亚胺培南(IPN)含量一致性的影响以及不同浓度药液的稳定性,为儿童安全、有效使用ICS提供参考。方法3名操作员按照临床儿童常用的2种分剂量方式(以10 mL或20 mL的0.9%氯化钠注射液制成ICS初溶药液,自初溶药液中吸取所需药量)制备ICS供试液,平行处理后通过超高效液相色谱-串联质谱联用法测定IPN的含量,根据IPN含量变异系数(CV)<15%判断每组供试液的含量一致性。按照说明书配制ICS供试液X1,再将X1以0.9%氯化钠注射液按1∶1和1∶2体积比稀释后制得供试液X2和X3,分别置于室温[(23.0±0.5)℃]、30℃恒温水浴锅以及2~8℃冰箱内保存,以规定放置温度和时间下测得的IPN质量浓度与初始(0 h)质量浓度之比判断药液稳定性(比值≥90%则认为药液稳定)。结果每位操作员以2种分剂量方式制得的每组药液中,IPN含量的CV均小于15%,表明IPN的含量偏差较小。3个质量浓度水平的药液在室温6 h或冷藏18 h条件下均较稳定;在30℃放置6 h时,供试液X1和X2也可保持稳定,但供试液X3中IPN的质量浓度较0 h时的质量浓度下降约20%。结论ICS在儿童常用的2种分剂量方式下,其主药IPN的含量一致性较好。ICS药液的稳定性受浓度、温度和时间的影响,更低的浓度在更高的温度下会导致IPN的稳定性降低。临床应注意控制医嘱溶媒量以及配制和使用过程中的环境温度与时间。 展开更多
关键词 注射用亚胺培南西司他丁钠 亚胺培南 分剂量 儿童 稳定性
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基于ICH Q3C协调的《中华人民共和国药典》药用辅料果胶标准中残留溶剂控制 被引量:2
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作者 伍伟聪 林嗣翔 +1 位作者 郭雅娟 王彩媚 《医药导报》 北大核心 2025年第2期235-238,共4页
目的以药用辅料果胶为例,基于ICH Q3C风险评估和管理理念探讨《中华人民共和国药典》(简称《中国药典》)品种正文果胶残留溶剂控制标准。方法对不同工艺和不同生产企业的果胶产品开展工艺调研,了解果胶中溶剂残留的种类,采用气相色谱法... 目的以药用辅料果胶为例,基于ICH Q3C风险评估和管理理念探讨《中华人民共和国药典》(简称《中国药典》)品种正文果胶残留溶剂控制标准。方法对不同工艺和不同生产企业的果胶产品开展工艺调研,了解果胶中溶剂残留的种类,采用气相色谱法考察不同生产企业产品的溶剂残留情况。结果根据产品工艺,产品中存在残留2类溶剂甲醇以及3类溶剂乙醇和异丙醇的风险,18批样品中,测得甲醇的残留量在0.05%~0.17%,乙醇残留量在0.01%~0.38%,异丙醇均未检出,残留溶剂总量为0.07%~0.55%。结论建议《中国药典》果胶标准正文中可不单列残留溶剂检查项,在标准的标示项下,要求生产企业标明残留溶剂的名称及限度。 展开更多
关键词 果胶 残留溶剂 ICH Q3C 中华人民共和国药典
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基于指纹图谱及多指标定量结合熵权-TOPSIS模型的不同产地淡豆豉质量评价 被引量:1
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作者 曾茂贵 郑文炜 +1 位作者 张宽 郑婉晴 《中国现代应用药学》 北大核心 2025年第9期1452-1462,共11页
目的基于指纹图谱定性、多指标差异成分定量与化学计量学结合熵权-逼近理想解排序法(TOPSIS)的整合分析方法综合评价不同产地淡豆豉饮片质量。方法对32批不同产地来源的淡豆豉进行外观性状及薄层色谱鉴别,采用ChromCore 300 C_(18)色谱... 目的基于指纹图谱定性、多指标差异成分定量与化学计量学结合熵权-逼近理想解排序法(TOPSIS)的整合分析方法综合评价不同产地淡豆豉饮片质量。方法对32批不同产地来源的淡豆豉进行外观性状及薄层色谱鉴别,采用ChromCore 300 C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.1%乙酸水,梯度洗脱,体积流量1.0 mL·min^(-1),检测波长260nm,柱温30℃,进样量10μL,建立HPLC指纹图谱并分析相似度;采用聚类分析、主成分分析、正交偏最小二乘法-判别分析筛选差异成分,结合利用熵权-TOPSIS法对淡豆豉质量进行综合评价。结果各批次淡豆豉均符合2020年版中国药典要求,但饮片质量存在差异。32批淡豆豉的指纹图谱相似度处于0.807~0.990,标定了20个共有峰,化学计量学分析结果一致,可将样品根据不同产地分为6组,依据VIP值筛选出6个差异性指标成分(大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、大豆苷元、黄豆黄素、染料木素),熵权-TOPSIS法评价表明河北产地S3批次的淡豆豉饮片综合质量最优。结论建立淡豆豉质量评价方法简便易行,结合化学计量学分析能实现对不同产地淡豆豉的判别归属,通过熵权-TOPSIS模型可评价不同批次淡豆豉综合质量,为其整体质量控制提升提供参考。 展开更多
关键词 淡豆豉 高效液相色谱 指纹图谱 多元化学计量学 多指标定量 熵权-TOPSIS 质量评价
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替加环素通过抑制cpxR延缓肺炎克雷伯菌对多黏菌素B耐药的作用及机制研究 被引量:1
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作者 张欢欢 冯伟 +1 位作者 华尚军 钱妍 《陆军军医大学学报》 北大核心 2025年第12期1401-1412,F0003,共13页
目的探究多黏菌素B(polymyxin B,PMB)联合替加环素(tigecycline,TGC)对延缓肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,KP)PMB耐药性的影响,并分析诱导耐药和延缓耐药的可能机制。方法以陆军军医大学第一附属医院重症监护室临床分离的6株KP为... 目的探究多黏菌素B(polymyxin B,PMB)联合替加环素(tigecycline,TGC)对延缓肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,KP)PMB耐药性的影响,并分析诱导耐药和延缓耐药的可能机制。方法以陆军军医大学第一附属医院重症监护室临床分离的6株KP为研究对象,采用微量肉汤稀释法测定PMB的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)。通过1/2MIC浓度PMB单药及联合1/2和1/4MIC浓度TGC体外诱导6株KP,连续传代14 d监测MIC变化。选择延缓耐药效果最显著的686K菌株,通过转录组测序、qRT-PCR和蛋白组学分析686K野生株、PMB诱导耐药株(686K·R)以及PMB联合TGC延缓耐药株(686K·DR)的基因及蛋白表达差异,并通过文献和生物信息学分析延缓耐药过程中的靶基因,同时利用同源重组技术构建cpxR基因敲除株686K/ΔcpxR∷Apr及其回补株686K/ΔcpxR∷Apr/pRK415-cpxR,检测耐药相关基因表达水平及体外诱导后MIC变化。结果亚抑菌浓度(1/2MIC)PMB单药诱导下,6株KP在2 d内均发生耐药;而联合TGC显著延缓耐药。转录组与蛋白组分析表明,686K·R株中,PhoP/Q双组分系统、脂多糖修饰酶及外排泵系统表达显著上调[|Log2差异倍数(fold change,FC)|≥2,P<0.0001];而TGC可显著抑制相应的表达变化。成功构建cpxR缺失及回补株,在cpxR缺失株中,耐药相关基因phoP、pmrD、acrA表达量降低(P<0.001),且PMB单药诱导下耐药性延迟至第6天,回补株第2天恢复耐药表型;在cpxR缺失时,PMB联合TGC对延缓耐药性的效果与PMB单药诱导并无差异。结论PMB联合TGC可延缓KP对PMB的耐药。cpxR作为关键调控因子,可通过调节脂多糖修饰及外排泵AcrAB-TolC表达影响PMB耐药,在诱导耐药过程中具有重要调控功能。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 多黏菌素B 替加环素 联合用药 cpxR
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基于报告基因的重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体抗体融合蛋白生物学活性测定方法的建立、验证及应用 被引量:1
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作者 范文红 安怡芳 +3 位作者 裴德宁 韩春梅 郭莹 周勇 《中国生物制品学杂志》 2025年第1期73-79,共7页
目的建立简便快捷的重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体(recombinant human tumor necrosis factor receptorⅡ,rhTNFRⅡ)抗体融合蛋白(rhTNFRⅡ-Fc)制品生物学活性测定方法,并对方法进行验证及应用,为该类制品工艺稳定性评价奠定基础。方法利... 目的建立简便快捷的重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体(recombinant human tumor necrosis factor receptorⅡ,rhTNFRⅡ)抗体融合蛋白(rhTNFRⅡ-Fc)制品生物学活性测定方法,并对方法进行验证及应用,为该类制品工艺稳定性评价奠定基础。方法利用HEK293T-NF-κB-Luc转基因细胞,不同浓度rhTNFRⅡ-Fc融合蛋白能够不同程度抑制TNF-α对转基因细胞中核因子(nuclear factor,NF)-kB的转录激活作用,通过荧光素酶检测系统(Bright-GloTM-Luciferase Assay System)对rhTNFRⅡ-Fc进行生物学活性检测,并对该方法进行试验参数的优化及专属性、准确性、线性及精密性验证。以rhTNFRⅡ-Fc融合蛋白生物学活性测定国际标准品作为参比品,采用该方法测定原研药依那西普及国内3家不同企业(A、B、C)各1批rhTNFRⅡ-Fc融合蛋白产品的比活性。结果rhTNFRⅡ-Fc融合蛋白在该方法中存在量效关系,且符合四参数曲线方程,R^(2)>0.99;方法优化后确定细胞铺板浓度为4×10^(5)个/mL,TNF-α作用浓度为10 ng/mL,rhTNFRⅡ-Fc稀释起始浓度为200 ng/mL,1∶1.5倍稀释,作用时间为4~5 h,样品稀释液为DMEM+1%FBS。仅依那西普产品能够抑制TNF-α对HEK293T-NF-κB-Luc细胞中NF-κB的转录激活,而其他几种融合蛋白类制品均无对TNF-α的诱导抑制作用;5个不同稀释组回收率样本经3次测定,回收率平均值分别为(101.54±4.63)%、(99.67±6.41)%、(101.20±5.58)%、(101.44±6.80)%、(100.72±6.15)%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)均小于7%,线性拟合的R^(2)=0.9998;精密性验证日间和板间RSD均小于8.0%。该方法检测原研药依那西普及A、B、C企业rhTNFRⅡ-Fc融合蛋白的比活性分别为2.01×10^(6)、2.59×10^(6)、1.56×10^(6)、2.04×10^(6)IU/mg。结论利用HEK293T-NF-κB-Luc转基因细胞成功建立了rhTNFRⅡ-Fc融合蛋白生物学活性测定方法,该方法简便快捷,专属性强,准确性高,精密性良好,可用于不同企业该类制品的生物学活性常规检测。 展开更多
关键词 重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体抗体融合蛋白 核因子-ΚB 报告基因 生物学活性 荧光素酶检测系统 国际标准品
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数字PCR技术对HEK293细胞系基因组DNA的定量 被引量:1
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作者 毕华 问芬芬 +5 位作者 陶磊 魏玲慧 杨靖清 卢宁 秦玺 梁成罡 《中国生物制品学杂志》 2025年第2期190-196,203,共8页
目的通过微流体芯片式数字PCR技术对HEK293细胞基因组DNA进行定量研究,为更加准确地定量基因以及基因组DNA相关检测提供新思路。方法首先通过柱提法获得HEK293细胞DNA,经琼脂糖凝胶电泳进行鉴定及纯度分析,再采用传统分光光度法、Qubit... 目的通过微流体芯片式数字PCR技术对HEK293细胞基因组DNA进行定量研究,为更加准确地定量基因以及基因组DNA相关检测提供新思路。方法首先通过柱提法获得HEK293细胞DNA,经琼脂糖凝胶电泳进行鉴定及纯度分析,再采用传统分光光度法、Qubit法和微流体芯片式数字PCR技术分别对HEK293细胞基因组DNA进行定量并进行统计分析。结果分光光度法测定HEK293细胞基因组DNA浓度为100.08 ng/μL,Qubit法测定值为93.98 ng/μL,数字PCR法检测拷贝数为29722.81 copies/μL,按照1个人类单拷贝基因组约3.3 pg粗略回算,分光光度和Qubit法换算的拷贝数分别约为30327和28479 copies/μL,数字PCR法测定值与分光光度法测定值的偏差仅为2%,而与Qubit法测定值的偏差仅为4%。结论本研究通过数字PCR、分光光度和Qubit法对HEK293细胞基因组进行DNA测定并比较,为DNA的定量提供了一种新的测定方法及思路,同时也为其他核酸类物质的定量提供了参考。 展开更多
关键词 HEK293细胞 数字PCR 宿主DNA DNA定量
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款冬花药用与非药用部位中6种活性成分比较研究 被引量:1
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作者 昝珂 蔡喜生 +4 位作者 吴芸 王赵 王丹丹 李海亮 金红宇 《中国药物警戒》 2025年第1期67-71,共5页
目的比较款冬花药用和非药用部位中6种活性成分含量差异。方法建立高效液相色谱法同时测定款冬花不同部位中绿原酸、芦丁、3,4-O-二咖啡酰奎宁酸、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸、款冬酮等6种成分的含量。采用ShimNex CS ... 目的比较款冬花药用和非药用部位中6种活性成分含量差异。方法建立高效液相色谱法同时测定款冬花不同部位中绿原酸、芦丁、3,4-O-二咖啡酰奎宁酸、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸、款冬酮等6种成分的含量。采用ShimNex CS C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱,检测波长为220 nm,流速为1 mL·min^(-1),柱温为30℃。结果芦丁和款冬酮在款冬花的花梗和根中均未检出,其余4种咖啡酰奎宁酸类成分也均低于花蕾。结论验证了款冬花药材以花蕾入药的科学性和合理性,非药用部位的混入会影响该药材质量,建议在质量标准中增加杂质检查项目,确保药材的质量。 展开更多
关键词 款冬花 药用部位 非药用部位 款冬酮 活性成分 3 5-O-二咖啡酰奎宁酸 4 5-O-二咖啡酰奎宁酸 高效液相色谱 含量测定
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紫杉烷类药物的研制 被引量:1
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作者 郭宗儒 《药学学报》 北大核心 2025年第1期239-244,共6页
新药创制是复杂的智力活动,涉及科学研究、技术创造、产品开发和医疗效果等多维科技活动。每个药物都有自身的研发轨迹,而构建化学结构是最重要的环节,因为它涵盖了药效、药代、安全性和生物药剂学等多维性质。本栏目以药物化学视角,对... 新药创制是复杂的智力活动,涉及科学研究、技术创造、产品开发和医疗效果等多维科技活动。每个药物都有自身的研发轨迹,而构建化学结构是最重要的环节,因为它涵盖了药效、药代、安全性和生物药剂学等多维性质。本栏目以药物化学视角,对有代表性的药物的成功构建,加以剖析和解读。紫杉醇是含氮的二萜化合物, 1975年发现具有抗癌活性,并揭示其药理作用机制是促进微管蛋白聚合并使微管稳定化,这与已知秋水仙碱和长春碱抑制微管蛋白聚合的机制完全不同。紫杉醇直到1992年由施贵宝公司研发成功上市,历时近20年。曲折的研发历程是由于紫杉醇的化学结构复杂,性质怪异,被紫杉醇发现者谑称为“只有树无所事事才会合成这样的化合物”,水/脂溶性和含量极低,作为天然的先导物对合成、结构改造和开发成药都是非常困难的事情。紫杉醇的构效关系也很窄促,四个稠合环不宜变动自不待言,大部分手性碳也不宜改变构型,酰基也不得简化,因而可变动的位置和基团就很少了,这可从赛诺菲在1996年和2010年上市的多西他赛和卡巴他赛与紫杉醇的结构相差无多得到反映。紫杉醇注射液含有的助溶剂引起较严重的不良反应,治疗时需预用免疫抑制剂糖皮质激素也是不得已的。但尽管如此,近30年来的应用,在多种癌症的治疗上仍然不失为明星药物。也因此对紫杉烷类药物以及制剂学的研究一直在进行中。 展开更多
关键词 药理作用机制 智力活动 赛诺菲 糖皮质激素 生物药剂学 医疗效果 免疫抑制剂 新药创制
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鸡内金当归褥疮软膏的制备工艺优化及质量标准研究 被引量:1
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作者 庞晓军 谢颜 陈杏 《中国药房》 北大核心 2025年第4期447-453,共7页
目的优化鸡内金当归褥疮软膏的制备工艺,并建立其质量标准。方法以油相、乳化剂用量和乳化温度为指标,采用响应面法优化鸡内金当归褥疮软膏的制备工艺。采用薄层色谱法鉴别该软膏中的鸡内金和当归,观察该软膏的性状,按照《中国药典》方... 目的优化鸡内金当归褥疮软膏的制备工艺,并建立其质量标准。方法以油相、乳化剂用量和乳化温度为指标,采用响应面法优化鸡内金当归褥疮软膏的制备工艺。采用薄层色谱法鉴别该软膏中的鸡内金和当归,观察该软膏的性状,按照《中国药典》方法对该软膏进行粒度和装量检查,采用高效液相色谱法测定该软膏中尿苷、阿魏酸和藁本内酯的含量。结果鸡内金当归褥疮软膏的最优制备工艺为:油相白凡士林4.0 g、液体石蜡7.0 g、羊毛脂5.0 g,乳化剂三乙醇胺0.44 g,乳化温度78℃。按最优工艺制备所得鸡内金当归褥疮软膏为米白色膏状,其粒度和装量检查均符合《中国药典》要求。鸡内金和当归的薄层色谱鉴别结果良好。尿苷、阿魏酸、藁本内酯的线性范围分别为1.6~25.6μg/mL、0.00315~0.1008 mg/mL、0.006~0.192 mg/mL(r均大于0.999);精密度、稳定性、重复性、加样回收率试验的RSD均小于2%(n=6);平均含量分别为0.0812、0.1000、0.3969 mg/g。结论所得最优制备工艺可用于鸡内金当归褥疮软膏的院内制剂生产;所建含量测定方法可用于该软膏的质量控制。 展开更多
关键词 鸡内金当归褥疮软膏 制备工艺 质量标准 响应面法 薄层色谱法 高效液相色谱法
暂未订购
菲啰嗪柱前衍生联合高效液相色谱法测定麦芽酚铁胶囊中痕量Fe(Ⅱ) 被引量:1
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作者 李波 杨欢 旷文俊 《中国医院药学杂志》 北大核心 2025年第2期148-151,共4页
目的:建立一种高效液相色谱法(HPLC)用于测定麦芽酚铁胶囊中Fe(Ⅱ)的含量,并进行方法学验证。方法:采用月旭Ultimate^(R)LP-C8色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)进行分离,以pH 7.0菲啰嗪缓冲液∶乙腈∶四氢呋喃(V/V/V,98.8∶1.0∶0.2)-乙... 目的:建立一种高效液相色谱法(HPLC)用于测定麦芽酚铁胶囊中Fe(Ⅱ)的含量,并进行方法学验证。方法:采用月旭Ultimate^(R)LP-C8色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)进行分离,以pH 7.0菲啰嗪缓冲液∶乙腈∶四氢呋喃(V/V/V,98.8∶1.0∶0.2)-乙腈(V/V,80∶20)为流动相进行洗脱;进样体积为5μL;检测波长为561 nm;柱温为30℃;流速为1 mL·min^(–1)。结果:准确度和精密度均符合要求,检出限与定量限分别为0.045、0.075μg·mL^(–1),检测浓度在0.075~2.55μg·mL^(–1)内线性关系良好;耐用性、溶液稳定性(18.5 h内)结果也均符合要求。结论:该研究首次采用HPLC技术直接测定麦芽酚铁胶囊中Fe(Ⅱ)含量。该检测方法准确度和精密度高,灵敏度好,可用于补铁剂的工艺开发和质量控制。 展开更多
关键词 亚铁离子含量测定 麦芽酚铁胶囊 补铁产品 高效液相色谱法 质量标准
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降血糖药SGLT2抑制剂埃格列净的研制 被引量:1
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作者 郭宗儒 《药学学报》 北大核心 2025年第6期1962-1964,共3页
1背景100多年前,人们发现蔷薇科植物果皮中含有次级代谢产物根皮苷(1,phlorizin),是以二氢查尔酮为苷元的葡萄糖苷,具有抑制钠−葡萄糖共转运蛋白-2(sodium-dependent glucose cotransporter 2,SGLT2)和SGLT1的双重活性(Chassis H,Jollif... 1背景100多年前,人们发现蔷薇科植物果皮中含有次级代谢产物根皮苷(1,phlorizin),是以二氢查尔酮为苷元的葡萄糖苷,具有抑制钠−葡萄糖共转运蛋白-2(sodium-dependent glucose cotransporter 2,SGLT2)和SGLT1的双重活性(Chassis H,Jolliffe N,Smith H.The action of phlorizin on the excretion of glucose,xylose,sucrose,creatinine,and urea by man.J Clin Invest,1933,12:1083−1089),因选择性不高和在肠道迅速被糖苷酶水解成根皮素(phloretin)和葡萄糖而失效。 展开更多
关键词 SGLT2抑制剂 埃格列净 降血糖药
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器官芯片及其在新药研发中的应用研究进展 被引量:1
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作者 张士龙 乐乐 +3 位作者 梁徐睿 张晓蔚 左志强 张涛 《中国新药杂志》 北大核心 2025年第4期386-393,共8页
传统的新药研发具有周期长、耗资大、失败率高等问题。为了克服上述问题,器官芯片技术应运而生,作为近年来新兴的前沿技术,在新药研发过程中发挥巨大作用。本文重点阐述了器官芯片在新药研发中的应用及其在核药研发领域中的潜在应用,并... 传统的新药研发具有周期长、耗资大、失败率高等问题。为了克服上述问题,器官芯片技术应运而生,作为近年来新兴的前沿技术,在新药研发过程中发挥巨大作用。本文重点阐述了器官芯片在新药研发中的应用及其在核药研发领域中的潜在应用,并讨论了器官芯片所面临的机遇与挑战,为新药研发工作者提供参考和借鉴。 展开更多
关键词 器官芯片 新药研发 药物发现 疾病模型 核素药物
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一测多评法联合化学计量学及熵权TOPSIS法综合评价复方石淋通胶囊质量 被引量:1
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作者 张海军 陈争珍 +1 位作者 李志明 张贝 《中国药业》 2025年第6期71-77,共7页
目的建立同时测定复方石淋通胶囊中11种成分的高效液相色谱法,并评价其质量。方法色谱柱为Agilent Eclipse Plus C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.2%甲酸溶液-乙腈(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为327 nm(新绿原酸、... 目的建立同时测定复方石淋通胶囊中11种成分的高效液相色谱法,并评价其质量。方法色谱柱为Agilent Eclipse Plus C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.2%甲酸溶液-乙腈(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为327 nm(新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸)、238 nm(马钱苷、当药苷、断氧化马钱子苷)、340 nm(维采宁-1、新西兰牡荆苷、夏佛塔苷、异夏佛塔苷、异牡荆苷),柱温为30℃,进样量为10μL。以马钱苷为内参,建立其与其他10种成分的相对校正因子(f);计算样品中11种成分的含量,并与外标法检测结果比较。采用化学计量学及熵权优劣解距离(TOPSIS)法对13批样品进行差异分析。结果方法学考察结果均符合2020年版《中国药典》要求;f耐用性良好,两种方法所得含量无显著差异(P>0.05)。化学计量学分析显示13批样品聚为3类;断氧化马钱子苷、夏佛塔苷、马钱苷、新绿原酸、异夏佛塔苷和隐绿原酸是影响13批样品质量的差异标志物。熵权TOPSIS分析显示,13批样品相对贴近度(C_(i))值为0.1709~0.7135,其中4批C_(i)>0.5,质量较好。结论该研究中所建方法可用于复方石淋通胶囊质量的综合评价,不同厂家样品质量存在一定差异。 展开更多
关键词 复方石淋通胶囊 高效液相色谱法 一测多评法 化学计量学 熵权优劣解距离法 质量评价
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