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β1整合素-绿色荧光蛋白融合基因在角膜上皮细胞的功能性表达
1
作者 王又冬 张劲松 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期523-525,528,共4页
目的:将β1整合素-绿色荧光蛋白(GFP)融合基因转染兔角膜上皮细胞并检测其对各细胞外基质蛋白的黏附能力。方法:构建β1整合素-GFP融合基因真核细胞重组表达质粒,并将其转染至兔角膜上皮细胞。利用RT-PCR、Western印迹和荧光显微镜观察... 目的:将β1整合素-绿色荧光蛋白(GFP)融合基因转染兔角膜上皮细胞并检测其对各细胞外基质蛋白的黏附能力。方法:构建β1整合素-GFP融合基因真核细胞重组表达质粒,并将其转染至兔角膜上皮细胞。利用RT-PCR、Western印迹和荧光显微镜观察融合基因表达,同时检测转染细胞的增殖情况及对各细胞外基质蛋白的黏附能力。结果:成功将β1整合素-GFP融合基因转染兔角膜上皮细胞并使其过表达;转染β1整合素对角膜上皮细胞增殖无明显影响,但使细胞对各细胞外基质蛋白的黏附能力明显增高。结论:建立了功能性β1整合素-GFP过表达的角膜上皮细胞模型,为研究β1整合素基因在角膜上皮细胞的功能及角膜细胞移植奠定基础。 展开更多
关键词 角膜上皮细胞 Β1整合素 绿色荧光蛋白 基因转染
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Ad-siICOS-EGFP阻断ICOS共刺激通路抑制角膜移植急性排异反应
2
作者 袁伟 陆晓和 +1 位作者 宫玉波 周瑾 《实用医药杂志》 2011年第10期920-922,共3页
目的观察Ad-siICOS-EGFP阻断ICOS共刺激通路延长大鼠角膜植片存活时间,及抑制大鼠角膜移植急性免疫排斥的作用。方法建立大鼠同种异体穿透性角膜移植模型,将其随机分为A、B、C 3组:A组为单纯角膜移植对照组;B组为Ad-siICOS-EGFP注射组;... 目的观察Ad-siICOS-EGFP阻断ICOS共刺激通路延长大鼠角膜植片存活时间,及抑制大鼠角膜移植急性免疫排斥的作用。方法建立大鼠同种异体穿透性角膜移植模型,将其随机分为A、B、C 3组:A组为单纯角膜移植对照组;B组为Ad-siICOS-EGFP注射组;C组为Ad-EGFP注射组。术后观察排斥反应指数RI的变化并记录植片的存活时间。各移植组分别于术后5 d随机取10只大鼠,麻醉处死后,角膜冰冻切片行共聚焦显微镜观察。各组其余大鼠进行角膜植片存活时间统计。结果①各组角膜植片平均存活时间:B组角膜植片平均存活时间最长;②共聚焦显微镜观察GFP表达情况:B组及C组角膜植片可见绿色荧光表达,表达位于角膜上皮层及整个角膜基质层,A组角膜植片未见绿色荧光表达。结论移植术后即刻受体鼠球结膜下注射Ad-siICOS-EGFP,可延长大鼠角膜植片存活时间,抑制大鼠角膜移植急性免疫排斥反应。 展开更多
关键词 角膜移植 RNAi 共刺激分子(ICOS) 排斥反应
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