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结核分枝杆菌Ⅱ型毒素-抗毒素系统VapBC家族的研究进展
1
作者 付博 安能(综述) +1 位作者 郭法谋 孙红宾(审校) 《中国生物制品学杂志》 2025年第1期115-121,共7页
结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)中有多种Ⅱ型毒素-抗毒素(toxin-antitoxin,TA)系统,其中VapBC家族是数量最多的TA系统,包括毒素VapC及其抗毒素VapB。毒素VapC具有PIN(PilT N-terminal)结构域特征,通常是核糖核酸酶(RNas... 结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)中有多种Ⅱ型毒素-抗毒素(toxin-antitoxin,TA)系统,其中VapBC家族是数量最多的TA系统,包括毒素VapC及其抗毒素VapB。毒素VapC具有PIN(PilT N-terminal)结构域特征,通常是核糖核酸酶(RNase),可通过切割tRNA或23S rRNA的次黄嘌呤-蓖麻毒素环(sarcin-ricin loop,SRL)发挥其毒性;抗毒素VapB可通过与启动子DNA结合调节同源毒素的表达水平或与同源毒素直接结合抑制其毒性。VapBC家族与Mtb的生长、致病性和耐药性等密切相关,因此,本文就Mtb中VapBC家族的功能、毒素VapC的底物特异性、VapBC的结构及基于该结构的药物研发现状作一综述,以期为治疗结核病(tuberculosis,TB)提供新的思路。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 毒素-抗毒素系统 VapBC家族 应激反应 蛋白结构
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结核分支杆菌MPT83蛋白基因在大肠杆菌表达载体中的克隆、表达与鉴定 被引量：1
2
作者 尤敏 邓小波 崔尚金 《现代预防医学》 CAS 北大核心 2008年第18期3594-3596,共3页
[目的]从分支杆菌培养物中提取DNA,扩增结核分支杆菌MPT83蛋白基因,并在大肠杆菌中进行表达、克隆和鉴定。[方法]从分支杆菌培养物中提取总DNA,扩增MPT83因并克隆入T载体,将目的基因插入表达载体pET-32a(+)中,转化BL21宿主菌,IPTG诱导... [目的]从分支杆菌培养物中提取DNA,扩增结核分支杆菌MPT83蛋白基因,并在大肠杆菌中进行表达、克隆和鉴定。[方法]从分支杆菌培养物中提取总DNA,扩增MPT83因并克隆入T载体,将目的基因插入表达载体pET-32a(+)中,转化BL21宿主菌,IPTG诱导表达构建的表达质粒pET-MPT83经PCR和BamHⅠ+HindⅢ双酶切进行鉴定。[结果]经SDS-PAGE分析,在约42ku处出现新的蛋白条带,5h后表达量即达到高峰;Western blotting分析表明,融合蛋白能够被分支杆菌阳性血清所识别;纯化的表达蛋白经SDS-PAGE电泳,出现清晰的单一条带。表明MPT83基因原核表达载体构建成功。[结论]结核分支杆菌MPT83蛋白基因在大肠杆菌表达载体中的克隆、表达与鉴定,为结核病的诊断以及亚单位疫苗、核酸疫苗的制备和应用奠定基础。 展开更多
关键词 结核分支杆菌 MPT83基因 原核表达 SDS-PAGE WESTERN BLOTTING
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结核分枝杆菌rpoB基因的套式PCR扩增及其DNA测序 被引量：3
3
作者 曹晔 秦玲 《上海医学检验杂志》 2000年第3期174-175,共2页
关键词 结核分枝杆攻 RPOB基因 套式PCR扩增 DNA测序
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限制性片段长度多态性分析酶切条件的优化
4
作者 王丽 裴秀英 戴寿芝 《中华临床医药杂志（北京）》 CAS 2003年第4期26-27,共2页
目的：对结核分枝杆菌RFLP—DNA分型技术的各个环节进行优化，以提高DNA指纹的清晰度和稳定性。方法：提取结核分枝杆菌DNA，经PvuII酶切后进行琼脂糖凝胶电泳、southern转印，并用经地高辛随机引物标记试剂盒标记IS6110的245bp探针进... 目的：对结核分枝杆菌RFLP—DNA分型技术的各个环节进行优化，以提高DNA指纹的清晰度和稳定性。方法：提取结核分枝杆菌DNA，经PvuII酶切后进行琼脂糖凝胶电泳、southern转印，并用经地高辛随机引物标记试剂盒标记IS6110的245bp探针进行杂交。结果：用于结核分枝杆菌DNARFLP分析的最佳DNA浓度是2μg，内切酶浓度为2u／μgDNA，酶切反应时间为4h。结论：RFLP的酶切条件经过合理优化，可以在消耗最低的情况下取得最佳的实验效果。 展开更多
关键词 限制性片段长度多态性分析 酶切条件 优化 分枝杆菌 结核
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儿童结核病结核分枝杆菌临床分离株中esxA、fbpB、Rv2660c基因多态性研究 被引量：2
5
作者 马廷廷 黄延风 +1 位作者 杨震华 苏薇 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第17期1768-1773,共6页
目的对抗原编码基因esxA、fbpB、Rv2660c进行测序,了解esxA、fbpB、Rv2660c的基因多态性。方法选取135株结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)临床分离株,运用PCR方法扩增目的基因esx A、fbp B、Rv2660c并进行测序,与结核标准... 目的对抗原编码基因esxA、fbpB、Rv2660c进行测序,了解esxA、fbpB、Rv2660c的基因多态性。方法选取135株结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)临床分离株,运用PCR方法扩增目的基因esx A、fbp B、Rv2660c并进行测序,与结核标准株H37Rv基因序列以及从免疫表位数据库(immune epitope database,IEDB)中查询到的表位序列进行对比,分析esx A、fbp B、Rv2660c基因序列中的变异特征。结果在135株菌株中,esx A、Rv2660c序列暂未发现基因变异。fbpB共66株(48.89%)发现了基因变异,5个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点共造成8个(14.81%)T细胞抗原表位以及9个(24.32%)B细胞抗原表位序列的多态性。fbpB基因的d N值为0.000 120,d S为0.002 126,其中T细胞表位区与非T细胞表位区的d N值分别为0.000 067和0.000 408,d S分别为0.002 382和0.000 470,B细胞表位区dN和dS值分别为0.000 063和0.002 380,非B细胞表位区dN和dS均为0。结论 esxA、Rv2660c基因序列较保守,fbp B存在基因多态性,预测会对蛋白Ag85B的免疫功能造成影响,从而影响H56的免疫有效性。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 esxA fbpB Rv2660c 基因多态性
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耐多药结核分枝杆菌KatG及rpoB基因变异的研究
6
作者 顾德林 帅桂生 +2 位作者 王枫 石彩芳 黄飞 《南通医学院学报》 2004年第4期412-412,414,共2页
目的 :建立快速检测耐多药结核分枝杆菌的分子药敏方法 ,掌握南通地区结核分枝杆菌 Kat G及 rpo B基因的突变特点 ,探索结核分枝杆菌耐异烟肼、利福平直接检测的可行性。方法 :收集 47例耐异烟肼、利福平的结核分枝杆菌临床分离株行 PC... 目的 :建立快速检测耐多药结核分枝杆菌的分子药敏方法 ,掌握南通地区结核分枝杆菌 Kat G及 rpo B基因的突变特点 ,探索结核分枝杆菌耐异烟肼、利福平直接检测的可行性。方法 :收集 47例耐异烟肼、利福平的结核分枝杆菌临床分离株行 PCR结合 DNA直接测序法检测 Kat G及 rpo B基因突变。以结核分枝杆菌标准株 H37Rv为参比菌株 ,应用 BACTEC460 TB快速培养系统进行结核分枝杆菌自动培养、药敏。结果 :47例耐异烟肼、利福平分离株结核分枝杆菌 Kat G及 rpo B基因突变阳性分别为 2 9例 (61.7% )、43例 (91.5 % ) ,两者同时突变 2 6例 (5 5 .3 % )。结论 :PCR-直接测序法敏感、特异、可靠实用 ,可快速检测结核分枝杆菌 Kat G及 rpo B基因突变 ,用于临床耐多药结核快速检测。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 耐药性 异烟肼 利福平 直接测序法KatG基因 rpoB基困
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BCG感染牛肺泡巨噬细胞的转录组测序和分析
7
作者 徐金瑞 吕翠萍 +3 位作者 杨易 周彦兵 骆佳 王玉炯 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期12-16,217,共6页
目的:通过卡介苗(BCG)感染牛肺泡巨噬细胞(BAM)的转录组测序及生物信息学分析,揭示差异表达的基因和长链非编码RNA (lncRNA),为巨噬细胞抗结核分枝杆菌感染的免疫调控机制研究提供理论依据。方法:采用肺脏灌洗离心法收集并培养BAM,分为... 目的:通过卡介苗(BCG)感染牛肺泡巨噬细胞(BAM)的转录组测序及生物信息学分析,揭示差异表达的基因和长链非编码RNA (lncRNA),为巨噬细胞抗结核分枝杆菌感染的免疫调控机制研究提供理论依据。方法:采用肺脏灌洗离心法收集并培养BAM,分为感染组和未感染组,感染组经BCG感染后12h,利用转录组测序技术(RNA-Seq)检测感染组和未感染组BAM mRNA表达谱及lncRNA表达谱,并进行生物信息学相关分析。结果:与未感染组比较,感染组BAM差异表达的lncRNAs共有119个(P<0.05),差异表达的mRNA共有1 111个(P<0.05)。在差异表达基因的功能富集分析中,最显著富集项与免疫功能相关(GO:0006955,P<0.05),共有125个基因,其中有63个基因表达上调,62个基因表达下调,且白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素17 (IL-17)和白细胞介素23A (IL-23A)等促炎因子表达上调。lncRNA靶基因预测,差异表达的lncRNA参与转化生长因子β(TGF-β)信号通路及ABC转运体信号通路的调控(P<0.05)。结论:BCG感染BAM后,激发宿主细胞产生强烈的免疫反应,引起lncRNA和mRNA表达谱的改变。 展开更多
关键词 卡介苗 牛肺泡巨噬细胞 转录组测序 长链非编码RNA
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