目的探究溶血磷脂酶样1(LYPLAL1)调控前列腺癌细胞线粒体自噬促进增殖、迁移及侵袭的作用机制。方法收集2023年6月至2024年3月张家口市第一医院收治的30例前列腺癌患者癌灶和癌旁正常组织标本。使用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和West...目的探究溶血磷脂酶样1(LYPLAL1)调控前列腺癌细胞线粒体自噬促进增殖、迁移及侵袭的作用机制。方法收集2023年6月至2024年3月张家口市第一医院收治的30例前列腺癌患者癌灶和癌旁正常组织标本。使用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blot检测前列腺癌组织和癌旁组织及前列腺上皮细胞和前列腺癌细胞中LYPLAL1 mRNA和(或)蛋白表达水平。将DU145细胞分为control组(不做任何处理)、si-NC组(转染对照si-NC序列)、si-LYPLAL1组(转染干扰si-LYPLAL1序列)、CQ组(用自噬阻断剂CQ 10μmol/L进行预处理)和si-LYPLAL1+CQ组(转染si-LYPLAL1序列后用CQ处理细胞);采用CCK-8法、划痕实验以及Transwell实验检测LYPLAL1表达对DU145细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。Western blot检测线粒体自噬相关蛋白[微管相关蛋白轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)、p62、PTEN诱导激酶1(PINK1)、parkin]表达水平。结果前列腺癌组织中LYPLAL1 mRNA(2.65±0.21 vs 1.03±0.04)及蛋白(2.74±0.25 vs 1.02±0.03)表达水平显著高于癌旁组织,差异有统计学意义(t=41.507、37.415,均P<0.001);与前列腺上皮细胞BPH-1相比,前列腺癌细胞LNCaP、PC-3、DU145中LYPLAL1 mRNA表达水平明显升高,差异具有统计学意义(t=5.826、6.483、7.509,均P<0.001)。与control组相比,si-LYPLAL1组细胞增殖率(53.56%±2.67%vs 98.42%±5.63%)、迁移率(48.61%±2.53%vs 100.40%±6.03%)和侵袭率(98.75%±5.35%vs 99.16%±5.58%)均明显降低,差异有统计学意义(t=11.459、12.531、12.754,均P<0.05)。与control组相比,si-LYPLAL1组细胞中LC3-II(2.35±0.20 vs 0.99±0.04)、parkin(2.68±0.18 vs 1.00±0.02)、PINK1(2.56±0.17 vs 0.98±0.03)蛋白表达明显升高,p62(0.55±0.05 vs 1.01±0.03)蛋白表达明显抑制,差异有统计学意义(t=13.994~19.413,均P<0.05)。CQ处理能够明显拮抗敲低LYPLAL1表达对前列腺癌细胞生物学特征的影响。结论前列腺癌中LYPLAL1表达上调可能通过调控线粒体自噬途径介导前列腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,参与前列腺癌的恶性进展。展开更多
文摘目的探究溶血磷脂酶样1(LYPLAL1)调控前列腺癌细胞线粒体自噬促进增殖、迁移及侵袭的作用机制。方法收集2023年6月至2024年3月张家口市第一医院收治的30例前列腺癌患者癌灶和癌旁正常组织标本。使用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blot检测前列腺癌组织和癌旁组织及前列腺上皮细胞和前列腺癌细胞中LYPLAL1 mRNA和(或)蛋白表达水平。将DU145细胞分为control组(不做任何处理)、si-NC组(转染对照si-NC序列)、si-LYPLAL1组(转染干扰si-LYPLAL1序列)、CQ组(用自噬阻断剂CQ 10μmol/L进行预处理)和si-LYPLAL1+CQ组(转染si-LYPLAL1序列后用CQ处理细胞);采用CCK-8法、划痕实验以及Transwell实验检测LYPLAL1表达对DU145细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。Western blot检测线粒体自噬相关蛋白[微管相关蛋白轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)、p62、PTEN诱导激酶1(PINK1)、parkin]表达水平。结果前列腺癌组织中LYPLAL1 mRNA(2.65±0.21 vs 1.03±0.04)及蛋白(2.74±0.25 vs 1.02±0.03)表达水平显著高于癌旁组织,差异有统计学意义(t=41.507、37.415,均P<0.001);与前列腺上皮细胞BPH-1相比,前列腺癌细胞LNCaP、PC-3、DU145中LYPLAL1 mRNA表达水平明显升高,差异具有统计学意义(t=5.826、6.483、7.509,均P<0.001)。与control组相比,si-LYPLAL1组细胞增殖率(53.56%±2.67%vs 98.42%±5.63%)、迁移率(48.61%±2.53%vs 100.40%±6.03%)和侵袭率(98.75%±5.35%vs 99.16%±5.58%)均明显降低,差异有统计学意义(t=11.459、12.531、12.754,均P<0.05)。与control组相比,si-LYPLAL1组细胞中LC3-II(2.35±0.20 vs 0.99±0.04)、parkin(2.68±0.18 vs 1.00±0.02)、PINK1(2.56±0.17 vs 0.98±0.03)蛋白表达明显升高,p62(0.55±0.05 vs 1.01±0.03)蛋白表达明显抑制,差异有统计学意义(t=13.994~19.413,均P<0.05)。CQ处理能够明显拮抗敲低LYPLAL1表达对前列腺癌细胞生物学特征的影响。结论前列腺癌中LYPLAL1表达上调可能通过调控线粒体自噬途径介导前列腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,参与前列腺癌的恶性进展。
