RNF8调控肝细胞癌增殖和迁移的作用及机制

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作者 牛小行 蒋立柱 +1 位作者 罗胜勇 刘文斌 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第7期1305-1311,共7页

目的探讨RNF8对肝细胞癌增殖、侵袭和迁移及促进上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)过程中的作用,明确RNF8对肝癌细胞的调控机制。方法采用免疫组织化学法检测人肝癌组织和癌旁组织中RNF8及RhoA中的表达;Western b... 目的探讨RNF8对肝细胞癌增殖、侵袭和迁移及促进上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)过程中的作用,明确RNF8对肝癌细胞的调控机制。方法采用免疫组织化学法检测人肝癌组织和癌旁组织中RNF8及RhoA中的表达;Western blot法和RT-PCR法检测人正常肝细胞和肝癌细胞中RNF8及RhoA中的表达水平。在HepG2细胞中过表达RNF8和siRNA干扰下调RNF8的表达,细胞实验分组如下:对照组(Control,正常HepG2细胞)、RNF8过表达组、RNF8低表达组(siRNA RNF8)、RNF8过表达+Rhosin(20μmol·L^(-1),RhoA阻断剂)组。通过CCK-8法检测细胞增殖能力;划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell实验检测细胞侵袭能力;最后通过Western blot法和RT-PCR法检测RNF8、RhoA、PCNA、CyclinD1、N-cadherin、vimentin、Slug、E-cadherin蛋白和mRNA的表达水平。结果肝癌组织及肝癌细胞中RNF8及RhoA表达明显增加;RNF8敲低后肝癌细胞的增殖、迁移、侵袭和EMT发生明显受到抑制,而过表达RNF8明显升高肝癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力和促进EMT发生。RhoA随着RNF8的敲低和过表达呈现正相关,过表达RNF8同时给与RhoA阻断剂时明显逆转过表达RNF8升高肝癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力和促进EMT的现象。结论RNF8可促进肝癌细胞增殖、迁移、侵袭能力和促进EMT,并同时促进RhoA的表达,RNF8通过调控RhoA促进EMT发生促进肝细胞癌的进展。 展开更多

关键词 肝细胞癌 RNF8 Ras同源物家族成员A 上皮间质转化 侵袭 Rhosin

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基于TLR4/MyD88/NF-κB信号通路探讨豆甾醇抗肝细胞癌的作用机制

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作者 于春 马燕花 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第5期867-873,共7页

目的采用分子对接和体外实验,探讨豆甾醇(stigmasterol)对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的调节机制。方法使用AutoDock程序进行分子对接,研究豆甾醇与Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)、... 目的采用分子对接和体外实验,探讨豆甾醇(stigmasterol)对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的调节机制。方法使用AutoDock程序进行分子对接,研究豆甾醇与Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)、髓样分化因子88(myeloid differentiation primary response gene 88,MyD88)和核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)的结合亲和力。通过CCK-8、愈合实验和Transwell实验评估其对细胞增殖和迁移的影响,同时通过克隆形成实验测定克隆形成能力。利用流式细胞术检查细胞凋亡和细胞周期。Western blot分析用于评估豆甾醇处理后的TLR4、MyD88和NF-κB蛋白表达情况。结果分子对接显示豆甾醇与TLR4、MyD88和NF-κB具有良好的结合构象。豆甾醇在体外对肝细胞癌细胞的增殖、迁移、侵袭和克隆形成能力表现出抑制作用。此外,它促进了细胞凋亡,抑制了细胞周期,并减少了TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的蛋白表达(P<0.05)。结论豆甾醇通过调节TLR4/MyD88/NF-κB信号通路抑制了肝细胞癌细胞的活性。 展开更多

关键词 豆甾醇 TOLL样受体4 髓样分化因子88 核因子-ΚB 肝细胞癌 凋亡

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lncRNA ENST00000452996.1通过ERK/GSK-3β/β-catenin信号通路调控肝癌细胞增殖、迁移及侵袭 被引量：4

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作者 谢群 林丽彬 +2 位作者 郑伟男 徐丽 林扬元 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期679-687,共9页

目的研究一种新的长链非编码RNA ENST00000452996.1对肝癌细胞增殖、迁移及侵袭等的影响及其调控机制。方法TCGA数据集分析肝癌组织ENST00000452996.1表达;构建ENST00000452996.1的shRNA载体,包装病毒感染Huh-7细胞(shENST00000452996.1... 目的研究一种新的长链非编码RNA ENST00000452996.1对肝癌细胞增殖、迁移及侵袭等的影响及其调控机制。方法TCGA数据集分析肝癌组织ENST00000452996.1表达;构建ENST00000452996.1的shRNA载体,包装病毒感染Huh-7细胞(shENST00000452996.1组),CCK-8法、克隆形成法、流式细胞术、划痕法和Transwell小室法分别检测细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力;Western blot法检测shENST00000452996.1组、ERK激动剂EGF处理组和GSK-3β抑制剂TDZD-8处理组的ERK/GSK-3β/β-catenin信号分子的表达。结果TCGA分析发现,肝癌组织ENST00000452996.1表达水平明显高于癌旁组织,且与Edmondson-Steiner分级呈正相关,与总生存时间呈负相关;与对照组相比,shENST00000452996.1组细胞增殖、迁移及侵袭能力明显下降,凋亡能力明显增强,p-ERK1/2、p-GSK-3β^(Ser9)和β-catenin表达均下调,GSK-3β和p-β-catenin表达上调,核β-catenin表达下降;与shENST00000452996.1组相比,EGF处理组p-ERK1/2表达升高,EGF处理组和TDZD-8处理组p-GSK-3β^(Ser9)和β-catenin及核β-catenin表达均升高,GSK-3β和p-β-catenin表达均降低。结论干扰ENST00000452996.1表达抑制ERK1/2磷酸化,阻止GSK3β^(Ser9)磷酸化,导致β-catenin磷酸化,抑制β-catenin核转位,推断ENST00000452996.1通过ERK/GSK-3β/β-catenin信号通路增强肝癌细胞增殖、迁移及侵袭能力,抑制细胞凋亡,从而发挥促进肝细胞癌的作用。 展开更多

关键词 长链非编码RNA ENST00000452996.1 肝细胞癌 增殖 侵袭 ERK GSK-3Β Β-CATENIN

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CyclinD1、p21^(WAF1)、p53及Ki-67在肝细胞癌中的表达及与预后的关系 被引量：17

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作者 王玉兰 杜经丽 +3 位作者 石怀银 郭爱桃 韦立新 赵景民 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期20-24,共5页

目的探讨肝细胞癌(HCC)中cyclin D1、p21、p53及Ki-67蛋白的表达及其与HCC预后的关系。方法选择2000年1月-2005年1月在解放军总医院行手术切除的80例HCC患者的肝组织标本,采用EliVision法进行cyclin D1、p21WAF1、p53及Ki-67免疫组化染... 目的探讨肝细胞癌(HCC)中cyclin D1、p21、p53及Ki-67蛋白的表达及其与HCC预后的关系。方法选择2000年1月-2005年1月在解放军总医院行手术切除的80例HCC患者的肝组织标本,采用EliVision法进行cyclin D1、p21WAF1、p53及Ki-67免疫组化染色,分析其表达水平与HCC病理特征的关系,并进行生存分析。结果 Cyclin D1、p21WAF1、p53及Ki-67在HCC中的阳性表达率分别为38.8%、40.5%、65.4%及80.0%,均明显高于癌旁肝组织(分别为19.0%、11.5%、0.0%、6.3%,P<0.005)。相关分析显示,cyclin D1阳性表达与核分级呈正相关(P=0.041),p21WAF1及p53阳性表达与肿瘤分化程度(P=0.032、P=0.031)和血管浸润(P=0.036、P=0.011)呈正相关,Ki-67阳性表达与肿瘤分化程度(P=0.004)、核分级(P=0.045)和血管浸润(P=0.001)呈正相关。生存分析显示,cyclin D1及Ki-67高表达者预后较差。Ki-67阳性表达与p53(P=0.000)及p21WAF1(P=0.047)阳性表达有明显相关性,其他各蛋白之间表达无明显相关。Cox回归模型分析显示,肿瘤大小(P=0.042)、肿瘤数目(P=0.004)及血管浸润(P=0.000)为HCC的独立预后因素。结论 Cyclin D1、p21WAF1、p53及Ki-67可能参与了HCC的生物学进程;cyclin D1及Ki-67阳性表达对HCC预后的判断有一定价值。 展开更多

关键词 癌 肝细胞 细胞周期蛋白D1 周期素依赖激酶抑制剂p21 肿瘤抑制蛋白质P53 KI-67抗原

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肝脏炎症型血管平滑肌脂肪瘤临床病理分析

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作者 石怀银 韦立新 +4 位作者 孙璐 邰艳红 王玉兰 郭爱桃 赵景民 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期83-85,共3页

目的探讨肝脏炎症型血管平滑肌脂肪瘤的组织学形态、免疫组织化学特点、鉴别诊断以及预后。方法回顾性分析5例肝脏炎症型血管平滑肌脂肪瘤患者的临床病理资料并进行随访分析,选择典型蜡块做免疫组织化学染色观察。结果 5例患者中男1例,... 目的探讨肝脏炎症型血管平滑肌脂肪瘤的组织学形态、免疫组织化学特点、鉴别诊断以及预后。方法回顾性分析5例肝脏炎症型血管平滑肌脂肪瘤患者的临床病理资料并进行随访分析,选择典型蜡块做免疫组织化学染色观察。结果 5例患者中男1例,女4例,年龄21～48岁。3例肿瘤位于肝左叶,2例位于肝右叶。肿瘤直径5.5～10.0cm,平均7.5cm。大体观察见肿瘤切面呈灰白色,境界清楚,无出血、坏死及囊性变。光镜下见肿瘤由梭形及上皮样肌细胞、不规则的厚壁血管、不同比例的脂肪组织构成,背景中均见大量的炎细胞浸润,炎细胞包括淋巴细胞、浆细胞和组织细胞;肿瘤细胞异型性不明显,核分裂象少见,无出血、坏死及囊性变。免疫组织化学染色示肿瘤细胞HMB-45阳性(5/5),Melan-A阳性(5/5),SMA阳性(5/5),Vimentin阳性(5/5),而CD21、CD35、CK18、CK19、Hepatocyteparaffin-1、AFP、EMA、CK均为阴性。5例患者均行局部肿瘤切除术,术后随访3～9年均无复发。结论肝脏炎症型血管平滑肌脂肪瘤是血管平滑肌脂肪瘤的一种亚型,其生物学行为与经典的血管平滑肌脂肪瘤相同,呈良性经过。 展开更多

关键词 肝肿瘤 血管肌脂瘤 病理学 临床

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基于mTOR/P70S6K通路研究上调miR-205-5p对肝癌细胞增殖、侵袭的影响

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作者 侯外林 陆慧 +1 位作者 龙建武 吴新军 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第13期3244-3247,共4页

目的基于哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/p70核糖体S6蛋白激酶(P70S6K)通路研究上调微小核糖核酸(miR)-205-5p对肝癌细胞增殖、侵袭的影响。方法肝癌HepG2细胞株经过细胞培养、转染后,分为上调miR-205-5p组、肝癌组和阴性对照组。实时荧... 目的基于哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/p70核糖体S6蛋白激酶(P70S6K)通路研究上调微小核糖核酸(miR)-205-5p对肝癌细胞增殖、侵袭的影响。方法肝癌HepG2细胞株经过细胞培养、转染后,分为上调miR-205-5p组、肝癌组和阴性对照组。实时荧光定量(RT)-聚合酶链反应(PCR)检测miR-205-5p表达,观察肝癌细胞增殖、凋亡、侵袭能力,Western印迹检测p-mTOR、p-P70S6K、mTOR、P70S6K蛋白表达。结果上调miR-205-5p组miR-205-5p表达显著高于肝癌组和阴性对照组,阴性对照组显著高于肝癌组(均P<0.05)。在24、48、72 h,上调miR-205-5p组细胞光密度值均显著低于阴性对照组和肝癌组,阴性对照组光密度值均显著低于肝癌组,在72 h差异表现最为明显(P<0.05),阴性对照组和肝癌组随着时间延长,光密度值逐渐显著升高,上调miR-205-5p组光密度值逐渐显著降低(均P<0.05)。上调miR-205-5p组72 h细胞增殖数、细胞侵袭数显著低于肝癌组和阴性对照组,细胞凋亡数显著高于肝癌组和阴性对照组(均P<0.05)。上调miR-205-5p组mTOR、P70S6K、p-mTOR、p-P70S6K蛋白表达显著低于肝癌组和阴性对照组(均P<0.05)。结论上调miR-205-5p可以影响mTOR/P70S6K信号通路的活性,参与肝癌细胞侵袭、增殖、凋亡的过程。 展开更多

关键词 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR) p70核糖体S6蛋白激酶(P70S6K) 微小核糖核酸(miR)-205-5p

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蛇毒半胱氨酸蛋白酶抑制剂重组蛋白对人肝癌MHCC97H细胞TGF-β2、TNF-α表达的影响 被引量：4

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作者 谢群 林扬元 +1 位作者 唐南洪 林建银 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期1208-1212,共5页

目的研究蛇毒半胱氨酸蛋白酶抑制剂(snake venom cystatin,sv-cystatin)重组蛋白对人肝癌MHCC97H细胞转化生长因子-β2(transforming growth factor-β2,TGF-β2)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达的影响。方法采... 目的研究蛇毒半胱氨酸蛋白酶抑制剂(snake venom cystatin,sv-cystatin)重组蛋白对人肝癌MHCC97H细胞转化生长因子-β2(transforming growth factor-β2,TGF-β2)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达的影响。方法采用ELISA方法检测不同浓度sv-cystatin重组蛋白对人肝癌MHCC97H细胞TGF-β2、TNF-α分泌的影响;实时定量PCR和Western blot法分别分析不同浓度sv-cystatin重组蛋白体外处理人肝癌MHCC97H细胞后TGF-β2、TNF-α的mRNA及蛋白表达。结果与对照组相比,5种浓度的sv-cystatin重组蛋白对MHCC97H细胞TGF-β2、TNF-α的分泌具有明显的抑制作用,并呈剂量依赖性(P<0.05);25、50、100、200 mg·L-14种浓度的重组蛋白能够抑制TGF-β2的mRNA及蛋白表达,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05);而50、100、200 mg·L-13种浓度的重组蛋白能够抑制TNF-α的mRNA及蛋白表达,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 sv-cystatin重组蛋白可能通过抑制TGF-β2和TNF-α的表达来发挥多方面的抗肿瘤作用。 展开更多

关键词 蛇毒 半胱氨酸蛋白酶抑制剂 肝癌 MHCC97H 转化生长因子Β2 肿瘤坏死因子α

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KiSS-1基因重组真核质粒的构建、鉴定及其表达 被引量：1

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作者 徐玫芳 臧盛兵 +3 位作者 黄爱民 刘景丰 高凌云 高美钦 《福建医科大学学报》 2009年第3期193-197,共5页

目的构建KiSS-1基因重组真核质粒,将其导入人高转移肝癌MHCC97-H细胞中,获得瞬时表达的细胞株,为进一步研究KiSS-1基因对人肝癌细胞侵袭转移的影响奠定基础。方法Trizol试剂法提取新鲜胎盘组织总RNA,经RT-PCR扩增目的片段,PCR产物及真... 目的构建KiSS-1基因重组真核质粒,将其导入人高转移肝癌MHCC97-H细胞中,获得瞬时表达的细胞株,为进一步研究KiSS-1基因对人肝癌细胞侵袭转移的影响奠定基础。方法Trizol试剂法提取新鲜胎盘组织总RNA,经RT-PCR扩增目的片段,PCR产物及真核表达载体分别双酶切后进行连接,并转化入大肠杆菌Ecoli.Dh5α扩增以获得重组载体,采用脂质体介导转染技术将高纯度的KiSS-1质粒转染到人高转移肝癌细胞株中,用RT-PCR和Westernblot技术加以鉴定。结果RT-PCR获得预期大小的特异性DNA片段,经PCR、双酶切鉴定及测序,证实已将KiSS-1基因cDNA片段正确插入真核表达载体中;RT-PCR、免疫细胞化学和Westernblot证实KiSS-1基因已转染入MHCC97-H细胞中。结论成功获得pcDNA3.1/HisC/KiSS-1重组质粒和瞬时表达KiSS-1基因的肝癌细胞,为后续建立稳定转染的KiSS-1高表达阳性细胞克隆奠定基础,为体内外实验研究KiSS-1对人肝癌细胞增殖、侵袭和转移能力的影响提供前提条件。 展开更多

关键词 肿瘤抑制蛋白类 遗传载体 转染 肝肿瘤 肿瘤侵润 真核细胞核 质粒

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硫化氢调控BDNF-TrkB通路诱导HepG2细胞阿霉素耐受性 被引量：1

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作者 黄圣旺 银晓刚 董琳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1747-1752,共6页

目的探讨硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)对HepG2细胞阿霉素(adriamycin,ADM)耐受性产生的促进及其机制。方法以NaHS为H2S的供体,体外培养HepG2细胞,CCK-8法检测ADM对HepG2细胞的IC50值,碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色后流式细胞仪检... 目的探讨硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)对HepG2细胞阿霉素(adriamycin,ADM)耐受性产生的促进及其机制。方法以NaHS为H2S的供体,体外培养HepG2细胞,CCK-8法检测ADM对HepG2细胞的IC50值,碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色后流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot检测HepG2细胞脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)的表达。结果 NaHS(100、200、400μmol·L-1)预处理HepG2细胞30 min能呈浓度依赖性地升高ADM处理72 h后对HepG2细胞的IC50值;200μmol·L-1NaHS预处理HepG2细胞30 min能明显降低0.32 mg·L-1ADM处理24 h后对HepG2细胞凋亡的诱导作用;NaHS(100、200、400μmol·L-1)作用HepG2细胞24h后,细胞BDNF的表达量明显增加;10 nmol·L-1BDNF受体(酪氨酸激酶受体B,tropomyosin-relatedkinase B,TrkB)阻断剂(K252a)预处理30 min可明显降低200μmol·L-1NaHS对HepG2细胞ADM IC50的增强作用和对ADM(0.32mg·L-1,24 h)诱导细胞凋亡的抑制作用。结论 H2S可促进HepG2细胞ADM耐受性的产生,其机制可能与其上调BDNF-TrkB通路有关。 展开更多

关键词 硫化氢 耐受性 HEPG2细胞 阿霉素 BDNF—TrkB

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苯甲醛左氧氟沙星席夫碱诱导人肝癌细胞凋亡作用 被引量：3

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作者 霍菲 唐乃夫 +5 位作者 范媛媛 刘诗濛 张莹 梁红霞 胡国强 刘彬 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期821-826,共6页

目的研究苯甲醛左氧氟沙星席夫碱化合物对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的诱导作用。方法用不同浓度的（S）-1,8-（2-甲基亚乙氧基）-6-氟-7-（4-甲基-哌嗪-1-基）-3-[S-苄基硫基-4-（对硝基苯甲叉基氨基）-1,2,4-均三唑-3-基]-喹啉（1-H）-4... 目的研究苯甲醛左氧氟沙星席夫碱化合物对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的诱导作用。方法用不同浓度的（S）-1,8-（2-甲基亚乙氧基）-6-氟-7-（4-甲基-哌嗪-1-基）-3-[S-苄基硫基-4-（对硝基苯甲叉基氨基）-1,2,4-均三唑-3-基]-喹啉（1-H）-4-酮（M18）与SMMC-7721细胞、人乳腺癌细胞MB-231、人结肠癌细胞HCT-116、人肝癌细胞HEPG-2和小鼠骨髓间充质干细胞体外培养。MTT法检测M18对各种细胞的生长抑制作用;Hoechst 33258荧光染色法、TUNEL法检测细胞凋亡变化;高内涵活细胞成像系统测定细胞线粒体膜电位（△ψm）变化;Western blot方法测定caspase-3、p53蛋白表达量的改变,以及细胞色素C在线粒体内外的分布。结果 M18在4-32μmol·L^-1的浓度范围内能明显抑制SMMC-7721细胞、MB-231细胞、HCT-116细胞、HEPG-2细胞增殖,呈浓度、时间依赖关系,作用于细胞24 h的IC50值分别为8.65、9.37、12.74和9.40μmol·L^-1;左氧氟沙星盐酸盐作用于SMMC-7721细胞24 h的IC50值为735.10μmol·L^-1,M18作用于骨髓间充质干细胞24 h的IC50值为38.96μmol·L^-1;不同浓度M18作用人肝癌SMMC-7721细胞24h,细胞凋亡率高于对照组（P〈0.05）。M18作用于SMMC-7721细胞后,细胞线粒体膜电位降低,与对照组相比差异有统计学意义;M18明显增加SMMC-7721细胞的p53和caspase-3蛋白表达量,其中caspase-3活性裂解片段增加明显;M18作用使细胞线粒体内细胞色素C明显减少,胞质内细胞色素C明显增加。结论苯甲醛左氧氟沙星席夫碱能够诱导人肝癌细胞凋亡,作用与线粒体凋亡通路有关。 展开更多

关键词 氟喹诺酮席夫碱 肝癌细胞 细胞增殖 凋亡 线粒体膜电位 p53

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葫芦素B诱导细胞铁死亡抑制肝癌Huh-7细胞增殖的机制 被引量：20

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作者 洪婷 王依蕾 +1 位作者 曾海荣 袁易 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期638-645,共8页

目的 研究葫芦素B(cucurbitacin B,Cu B)对肝癌Huh-7细胞增殖的影响及其作用机制。方法 CCK-8法检测不同浓度Cu B对Huh-7细胞的存活率;葫芦素B(0.5、1、2μmol·L^(-1))作用于Huh-7细胞24 h, EdU染色检测细胞增殖;DCFH-DA,C11-BODIP... 目的 研究葫芦素B(cucurbitacin B,Cu B)对肝癌Huh-7细胞增殖的影响及其作用机制。方法 CCK-8法检测不同浓度Cu B对Huh-7细胞的存活率;葫芦素B(0.5、1、2μmol·L^(-1))作用于Huh-7细胞24 h, EdU染色检测细胞增殖;DCFH-DA,C11-BODIPY和FeRhonox-1荧光探针分别检测细胞内活性氧水平,细胞内脂质过氧化水平和细胞内Fe^(2+)浓度;谷胱甘肽(GSH)试剂盒和丙二醛(MDA)试剂盒分别检测细胞内GSH和MDA水平;Real-time PCR和Western blot分别检测SLC7A11、GPX4、SLC40A1、Transferrin、Nrf2、HO-1的mRNA水平和蛋白表达情况;免疫共沉淀法检测GPX4蛋白的泛素化。结果 与对照组比较,随Cu B药物浓度增大,Huh-7细胞存活率逐渐降低,其IC50为0.96μmol·L^(-1);与对照组比较,不同剂量Cu B干预后,EdU阳性细胞明显减少(P<0.05);细胞内活性氧、脂质过氧化水平和Fe^(2+)浓度的荧光强度明显增强(P<0.05);同时细胞内脂质过氧化产物MDA的积累明显增多(P<0.05),而细胞内GSH水平明显下降(P<0.05);此外,不同剂量Cu B干预后,GPX4的mRNA水平和蛋白水平明显降低(P<0.05);而且Nrf2和HO-1的蛋白水平明显降低(P<0.05)。免疫共沉淀分析显示,Cu B促进了GPX4的泛素化和降解。结论 Cu B可能通过促进GPX4泛素化和降解诱导细胞铁死亡抑制肝癌细胞Huh-7增殖。 展开更多

关键词 葫芦素B 肝癌 铁死亡 GPX4 泛素化 增殖

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仑伐替尼联合氟伐他汀对小鼠肝癌移植瘤的抑制作用及其机制 被引量：3

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作者 雷艺 程旸 +5 位作者 林鑫盛 孙朋辉 康帅 李成 李建聪 朱云 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期1511-1516,共6页

目的探究仑伐替尼联合氟伐他汀对小鼠肝移植瘤的抑制作用及其可能机制。方法构建裸小鼠肝癌皮下移植瘤模型,分别给予氟伐他汀单药、仑伐替尼单药、氟伐他汀联合仑伐替尼和对照溶剂:计算肿瘤倍增时间,免疫组织化学法检测移植瘤组织增殖... 目的探究仑伐替尼联合氟伐他汀对小鼠肝移植瘤的抑制作用及其可能机制。方法构建裸小鼠肝癌皮下移植瘤模型,分别给予氟伐他汀单药、仑伐替尼单药、氟伐他汀联合仑伐替尼和对照溶剂:计算肿瘤倍增时间,免疫组织化学法检测移植瘤组织增殖细胞核抗原(PCNA)的表达水平;TUNEL法检测细胞凋亡水平;实时定量PCR和免疫组织化学法检测TLR4的表达;Western blot法检测β-catenin表达。培养体外肝癌细胞进行Rescue实验,Western blot法检测TLR4及β-catenin表达。结果裸鼠移植瘤实验中,与单药组及对照组相比,联合用药组肿瘤体积最小,肿瘤倍增时间明显延长(P<0.05),PCNA的表达明显降低(P<0.05),细胞凋亡水平明显升高(P<0.05)。联合用药组肝癌组织TLR4的表达较仑伐替尼组明显降低(P<0.05),同时,β-catenin的表达较仑伐替尼组明显降低。体外细胞实验中,过表达TLR4可以逆转氟伐他汀联合仑伐替尼诱导的β-catenin的表达下降。结论与单药仑伐替尼相比,仑伐替尼联合氟伐他汀可明显抑制小鼠肝移植瘤的增殖、促进其凋亡。联合用药可抑制仑伐替尼引起的TRL4及β-catenin的表达升高。联合用药可能是通过抑制TLR4来抑制β-catenin的表达。 展开更多

关键词 仑伐替尼 氟伐他汀 肝细胞癌 增殖 TOLL样受体4 Β-CATENIN

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miR-124靶向ZEB2对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响 被引量：2

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作者 方卉 杨俊发 +3 位作者 姚瑶 蒋启 路正东 王根宝 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期1155-1163,共9页

目的观察miR-124表达变化对肝癌细胞增殖,凋亡,迁移和侵袭的影响及其机制。方法检测HepG2中miR-124、ZEB2的表达变化。分别采用CCK-8、流式细胞术、Edu和Transwell技术检测miR-124与ZEB2表达变化对细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力。双... 目的观察miR-124表达变化对肝癌细胞增殖,凋亡,迁移和侵袭的影响及其机制。方法检测HepG2中miR-124、ZEB2的表达变化。分别采用CCK-8、流式细胞术、Edu和Transwell技术检测miR-124与ZEB2表达变化对细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力。双荧光素酶和靶基因预测miR-124与ZEB2的靶向关系;Western blot检测其对增殖、凋亡、迁移和侵袭相关蛋白表达影响。结果miR-124在HepG2细胞中的表达低于正常肝细胞L-02;而ZEB2与miR-124呈相反的趋势。生物信息学预测和双荧光素酶的结果表明,ZEB2的表达与miR-124表达负相关。与对照组相比,过表达miR-124和沉默ZEB2明显抑制细胞增殖活性、迁移和侵袭能力;沉默miR-124和过表达ZEB2明显促进细胞增殖活性、迁移和侵袭能力。Western blot结果显示,过表达miR-124和沉默ZEB2明显促进Bax蛋白表达和抑制Bcl-2、PCNA、MMP2和MMP9蛋白表达水平;沉默miR-124和过表达ZEB2则相反。结论miR-124可负向调控ZEB2抑制肝癌细胞增殖,迁移和侵袭的影响。 展开更多

关键词 miR-124 ZEB2 增殖 HEPG2 迁移 侵袭

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甘草次酸衍生物的合成及其抗肝癌活性

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作者 崔旭鑫 崔文平 +5 位作者 毕艳兴 成帆 李育宁 张宝来 赵全义 杨孝来 《中国药理学通报》 2025年第11期2150-2157,共8页

目的 以甘草次酸为母核,设计合成一系列衍生物,并对其进行抗肿瘤活性筛选,对活性最优化合物进行体内外抗肿瘤作用及机制研究。方法MTT法筛选出抗肿瘤活性最优的化合物;MTT法、划痕实验、平板克隆实验和Transwell迁移实验检测化合物对肿... 目的 以甘草次酸为母核,设计合成一系列衍生物,并对其进行抗肿瘤活性筛选,对活性最优化合物进行体内外抗肿瘤作用及机制研究。方法MTT法筛选出抗肿瘤活性最优的化合物;MTT法、划痕实验、平板克隆实验和Transwell迁移实验检测化合物对肿瘤细胞活性和迁移能力的影响;流式细胞术检测化合物对肿瘤细胞周期和凋亡的影响;蛋白印迹实验检测对促凋亡蛋白Bax、caspase-3、cleaved caspase-3的影响;建立小鼠肝癌腹水瘤模型,检测化合物体内的抗肿瘤作用。结果 筛选出化合物C22对肝癌细胞的抑制作用最为明显;C22以时间-浓度依赖性抑制肝癌细胞的活性和迁移;化合物C22能上调肝癌细胞中促凋亡蛋白Bax、caspase-3、cleaved caspase-3的表达,诱导细胞凋亡并阻滞细胞周期于G_(0)/G_(1)、S期;化合物C22能明显抑制小鼠肝癌腹水瘤的生长,延长生存期。结论 甘草次酸衍生物C22能够明显抑制肝癌细胞的活性和迁移能力,阻滞细胞周期,诱导细胞凋亡,并且能抑制肝癌腹水的生成,延长生存期。 展开更多

关键词 甘草次酸 合成 衍生物 抗肿瘤活性 肝癌 细胞凋亡

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蛋白激酶D抑制剂CRT0066101通过抑制PI3K/AKT信号通路促进肝癌细胞凋亡和自噬抑制肿瘤

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作者 邓浩华 唐宝元 +1 位作者 谢蓓 李林静 《中国药理学通报》 2025年第12期2297-2305,共9页

目的探究蛋白激酶D(protein kinase D,PKD)特异性抑制剂CRT0066101对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的抑制作用及其分子机制,为肝细胞癌的靶向治疗提供新的理论依据和治疗策略。方法采用不同浓度CRT0066101处理肝癌细胞系,通过... 目的探究蛋白激酶D(protein kinase D,PKD)特异性抑制剂CRT0066101对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的抑制作用及其分子机制,为肝细胞癌的靶向治疗提供新的理论依据和治疗策略。方法采用不同浓度CRT0066101处理肝癌细胞系,通过CCK-8法、克隆形成实验和EdU染色法检测药物对肝癌细胞增殖的抑制作用;运用划痕实验和Transwell迁移和侵袭实验评估药物对肝癌细胞迁移和侵袭能力的影响;采用Western blot分析CRT0066101对PKD及其下游PI3K/AKT信号通路关键蛋白磷酸化水平的影响;通过Western blot、流式细胞术及mRFP-GFP-LC3双荧光报告系统检测药物对肝癌细胞凋亡和自噬的调控作用。结果CRT0066101能显著抑制肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。Western blot结果显示,CRT0066101可剂量依赖性抑制PKD家族蛋白的磷酸化水平,并下调PI3K/AKT信号通路的活化。同时,CRT0066101处理可上调促凋亡蛋白Bax的表达,下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,并显著增加自噬标志蛋白Beclin-1和LC3B-Ⅱ的表达水平,提示该药物能同时诱导肝癌细胞凋亡和自噬。结论CRT0066101通过特异性抑制PKD活性,阻断PI3K/AKT信号通路,进而抑制肝癌细胞增殖和转移,并诱导细胞凋亡和自噬,是一种具有潜在临床应用价值的肝癌靶向治疗小分子抑制剂。 展开更多

关键词 肝癌 CRT0066101 自噬 凋亡 抑制剂 蛋白激酶D

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