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活性氧在顺铂致HepG_2凋亡中的作用 被引量：3
1
作者 陈伟庆 沈薇 沈鼎明 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第11期957-959,共3页
目的　利用Acivicin阻断GGT的功能 ,观察其单独对HepG2 凋亡及联用顺铂后对HepG2 的凋亡、细胞内ROS产生的影响。方法　细胞毒性测定采用MTT法。Acivicin和顺铂分别或联合处理HepG2 细胞。采用DCFH DA能被ROS作用发光的特性。通过流式... 目的　利用Acivicin阻断GGT的功能 ,观察其单独对HepG2 凋亡及联用顺铂后对HepG2 的凋亡、细胞内ROS产生的影响。方法　细胞毒性测定采用MTT法。Acivicin和顺铂分别或联合处理HepG2 细胞。采用DCFH DA能被ROS作用发光的特性。通过流式细胞仪测定细胞内ROS的变化。凋亡检测采用细胞凋亡原位检测法 (TUNEL法 )。结果　MTT法测定HepG2 IC50 值Acivicin为 1 4mmol L ,顺铂为 67μmol L。Acivicin 1 4mmol L和顺铂 67μmol L以及Acivicin( 1 4mmol L) +顺铂 ( 67μmol L)HepG2 2 4h细胞内的ROS显著升高 ,尤其是在当与顺铂联用时HepG2 细胞内的ROS升高就更加明显。TUNEL法测定Acivicin( 1 4mmol L)在 2 4、48、72h致HepG2 的凋亡率分别分 ( 16 3± 3 5 ) %、( 2 7 9± 4 3 ) %、( 4 7 2±3 0 ) %。与对照组相比差异显著 (P <0 0 5 )。顺铂 ( 67μmol L)HepG2 2 4h的凋亡率为 ( 73 4± 1 5 ) %,Acivicin( 1 4mmol L)+顺铂 ( 67μmol L)HepG2 2 4h的凋亡率为 ( 94 7± 0 5 ) %,较单用显著增加 (P <0 0 1)。结论　顺铂致HepG2 凋亡的机制之一是增加细胞内ROS的产生。Acivicin抑制GGT ,干扰GSH代谢 ,可致HepG2 细胞内的ROS升高 ,使细胞凋亡 ,并增强顺铂的细胞毒性。 展开更多
关键词 顺铂 活性氧 凋亡 HEPG2
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丁酸钠诱导人脑胶质瘤细胞系SHG-44凋亡的初步探讨 被引量：3
2
作者 詹彦 支兴刚 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2004年第3期284-287,共4页
目的 :研究短链脂肪酸盐丁酸钠对培养人脑胶质瘤细胞系SHG - 4 4的增殖抑制和凋亡诱导。方法 :通过细胞体外培养的方法 ,以 2mmol/L和 4mmol/L丁酸钠处理SHG - 4 4细胞 ,用MTT比色试验和PCNA免疫组化染色观察细胞增殖 ,电子显微镜、线... 目的 :研究短链脂肪酸盐丁酸钠对培养人脑胶质瘤细胞系SHG - 4 4的增殖抑制和凋亡诱导。方法 :通过细胞体外培养的方法 ,以 2mmol/L和 4mmol/L丁酸钠处理SHG - 4 4细胞 ,用MTT比色试验和PCNA免疫组化染色观察细胞增殖 ,电子显微镜、线粒体跨膜电位 (△ψm)检测以鉴定细胞凋亡。 结果 :①SHG - 4 4细胞增殖受到明显抑制 ,PCNA表达减弱 ;②4mmol/L丁酸钠明显诱导SHG - 4 4细胞凋亡 ,电镜下可见细胞膜内陷自行分割包裹碎裂的核片段和部分胞浆 ,脱离细胞主体 ,形成凋亡小体 ;罗丹明 12 3染色示凋亡细胞△ψm下降。 结论 :丁酸钠能抑制人脑胶质瘤SHG - 4 4细胞的增殖 ,4mmol/L丁酸钠能诱导SHG - 4 4细胞发生线粒体途径凋亡。 展开更多
关键词 丁酸钠 胶质瘤 凋亡
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癌痛消胶囊调节小鼠荷H_(22)移植性肝癌细胞VEGF,p53和p21ras表达的实验研究 被引量：13
3
作者 王庆高 韦艾凌 徐志新 《广西中医药》 2005年第2期45-48,共4页
目的:通过观察癌痛消胶囊调节小鼠荷H22 移植性肝癌细胞中血管内皮生长因子(Vascularen dothelialgrowthfactor,VEGF)、p53和p21ras的表达作用,以探讨该药抑制肿瘤的作用机理。方法:昆明种雄性小白鼠60只,按随机区组分为6组(A -F组) ;A... 目的:通过观察癌痛消胶囊调节小鼠荷H22 移植性肝癌细胞中血管内皮生长因子(Vascularen dothelialgrowthfactor,VEGF)、p53和p21ras的表达作用,以探讨该药抑制肿瘤的作用机理。方法:昆明种雄性小白鼠60只,按随机区组分为6组(A -F组) ;A -E组每鼠均于前肢右腋皮下接种0 2mlH22 肿瘤细胞悬液(浓度为1×107/ml) ,接种24h后按体重给药。A组、B组、C组分别给予大、中、小剂量的癌痛消胶囊,D组予康赛迪胶囊,E组予生理盐水,均灌胃给药,每日1次。连续用药10天,停药24h ,称重并处死动物,剥取瘤块称重,计算出肿瘤生长抑制率,用免疫组化法检测癌细胞中VEGF ,p53 ,p21ras ,VHL的表达程度。F组予饲料及水分正常饲养。结果:A ,B ,C ,D组均有明显的抑瘤作用,其中以A组的抑瘤作用最明显(P<0 05或P<0 01)。造模各组动物的肝癌细胞中均见VEGF ,p53和p21ras的阳性染色,但阳性表达程度不同,与B ,C ,E组比较,癌痛消胶囊大剂量组和康赛迪胶囊组均可明显降低肝癌细胞中VEGF ,p53和p21ras的阳性表达(P<0 05或P<0 01)。结论:癌痛消胶囊对小鼠H22 移植性肝癌有抑瘤作用,抑制肿瘤生长的机理可能与下调VEGF ,p53和p21ras的水平有关。 展开更多
关键词 癌痛消胶囊 H22 肝癌细胞 VEGF P53 P21RAS 实验研究
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中华眼镜蛇毒组分CⅡ诱导多药耐药白血病细胞K562/A02凋亡 被引量：14
4
作者 左长清 林振桃 孔天翰 《广州医学院学报》 2004年第3期26-30,共5页
目的 :研究中华眼镜蛇毒组分CⅡ (FCⅡNNAV)对多药耐药白血病细胞K5 6 2 /A0 2的抑制作用及机制。方法 :应用MTT法、荧光显微镜法、流式细胞仪法 ,观察FCⅡNNAV单用及联合阿霉素 (ADM)体外对K5 6 2 /A0 2的毒性作用、凋亡作用及对Bcl 2... 目的 :研究中华眼镜蛇毒组分CⅡ (FCⅡNNAV)对多药耐药白血病细胞K5 6 2 /A0 2的抑制作用及机制。方法 :应用MTT法、荧光显微镜法、流式细胞仪法 ,观察FCⅡNNAV单用及联合阿霉素 (ADM)体外对K5 6 2 /A0 2的毒性作用、凋亡作用及对Bcl 2表达的影响。结果 :FCⅡNNAV单用对耐药K5 6 2 /A0 2及敏感K5 6 2细胞均有抑制作用 ,IC50 分别为 (0 .75± 0 .0 1) μg/mL和 (0 .6 7± 0 .11) μg/mL。FCⅡNNAV联合ADM体外对细胞K5 6 2 /A0 2有较强的协同抑制作用。荧光显微镜、流式细胞仪检测FCⅡNNAV能明显诱导细胞K5 6 2 /A0 2凋亡 ,凋亡率呈剂量依赖性增加。流式细胞仪检测发现FCⅡNNAV能使细胞K5 6 2 /A0 2的Bcl 2表达下调 ,表达率呈剂量依赖性减少。结论 :FCⅡNNAV对细胞K5 6 2 /A0 2及细胞K5 6 2均有较强的抑制作用 ,且抑制作用与剂量呈正相关 ,并与抗癌药ADM有较强协同作用。FCⅡNNAV能明显诱导K5 6 2 /A0 2细胞凋亡 ,其机制可能与Bcl 2表达下调有关。 展开更多
关键词 蛇毒 肿瘤 多药耐药 凋亡
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应用MTT法检测肿瘤化疗药物的敏感性 被引量：12
5
作者 徐静 吴锋 梅铭惠 《华夏医学》 2005年第1期140-143,共4页
化疗作为全身性治疗手段 ,在恶性肿瘤治疗过程中具有重要地位。但是由于肿瘤患者对化疗的反应各异 ,即使肿瘤组织学类型相同 ,其对化疗药物的反应也可能不同。现今个体化治疗已成为肿瘤治疗研究的热点 ,而体外肿瘤药敏实验是实现个体化... 化疗作为全身性治疗手段 ,在恶性肿瘤治疗过程中具有重要地位。但是由于肿瘤患者对化疗的反应各异 ,即使肿瘤组织学类型相同 ,其对化疗药物的反应也可能不同。现今个体化治疗已成为肿瘤治疗研究的热点 ,而体外肿瘤药敏实验是实现个体化治疗的基础和依据。体外肿瘤药敏试验方法很多 ,其中四唑蓝 (即 3- (4,5 -双甲基 - 2 -噻唑 ) - (2 ,5 )——苯基溴化四氮唑蓝 ,MTT)法以其简便、经济、客观等优点为大多数研究者所接受。现对 MTT法的历史、原理及作用进行探讨 ,侧重其在确定抗肿瘤新药敏感性试验中的价值。 展开更多
关键词 肿瘤药敏 吉西他滨 MTT比色法 肝癌
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钙咪唑啉对人胃腺癌MGC-803细胞增殖分化的影响
6
作者 孟松娘 吕桂芝 +2 位作者 赵雅丽 刘树仁 林仲翔 《四川肿瘤防治》 2000年第1期1-4,共4页
目的:探讨钙调蛋白在癌细胞增殖分化中的作用。方法:应用钙调蛋白拮抗剂—钙咪唑啉(CalmidazoliunCDZ)50～150nmol/L作用于人胃腺癌MGC803细胞,用白细胞计数法观察到CDZ对人胃癌细胞的增殖有明显的抑制作用,利用3HTdR掺入、PDE活性测定... 目的:探讨钙调蛋白在癌细胞增殖分化中的作用。方法:应用钙调蛋白拮抗剂—钙咪唑啉(CalmidazoliunCDZ)50～150nmol/L作用于人胃腺癌MGC803细胞,用白细胞计数法观察到CDZ对人胃癌细胞的增殖有明显的抑制作用,利用3HTdR掺入、PDE活性测定、CAMP含量测定、流式细胞光度术、cAMPPDEase电镜细胞化学技术进行系统研究。结果:钙调蛋白拮抗剂CDZ抑制MGC803细胞的DNA合成,一定浓度的CDZ阻断MGC803细胞于G1期,经CDZ处理的癌细胞内磷酸二脂酶(PhosphodiesterasePDE)活性下降,并使细胞内cAMP水平瞬时升高,癌细胞质膜上的3’.5’环磷酸腺苷磷酸二酯酶(cAMPPDEase)活性明显下降。结论:上述结果表明钙调蛋白在人胃癌细胞的增殖分化过程中起重要的调控作用,有理论和实际应用的价值。 展开更多
关键词 钙调蛋白 钙咪唑啉 细胞增殖 胃肿瘤 治疗
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HyTK基因转导联合丙氧鸟苷对鼠膀胱癌细胞的体外杀伤作用 被引量：2
7
作者 张荣贵 叶钢 刘为池 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期214-216,共3页
目的　探索HyTK基因转导丙氧鸟苷 (ganciclovir,GCV)对鼠膀胱癌细胞的影响。方法　脂质体介导法将PL(HyTK)SN质粒转染PA3 17细胞 ,潮霉素B筛选 ,直到出现抗性克隆 ,扩增培养 ,NIH3T3细胞测定病毒滴度 ,用逆转录病毒上清液感染T73 9细胞 ... 目的　探索HyTK基因转导丙氧鸟苷 (ganciclovir,GCV)对鼠膀胱癌细胞的影响。方法　脂质体介导法将PL(HyTK)SN质粒转染PA3 17细胞 ,潮霉素B筛选 ,直到出现抗性克隆 ,扩增培养 ,NIH3T3细胞测定病毒滴度 ,用逆转录病毒上清液感染T73 9细胞 ,潮霉素B筛选 ,直到出现抗性克隆 ,扩增培养 ,命名为T73 9 TK。RT PCR对T73 9 TK细胞进行鉴定。然后观察其在体外膀胱癌细胞的杀伤作用。结果　RT PCR证实HyTK基因已插入T73 9细胞并有其mRNA的表达 ,经不同浓度GCV处理后的T73 9 TK细胞均表现出有杀伤作用 ,而T73 9细胞在各个剂量的GCV作用下生长均良好。结论　GCV对转导了HyTK基因的T73 展开更多
关键词 膀胱癌 基因治疗 HYTK基因 逆转录病毒载体 丙氧鸟苷(GCV)
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TRAIL基因原核表达载体的构建、表达与抗体制备
8
作者 方琴 孙等军 +6 位作者 张旭 任志娟 肖芸 刘丰丰 吴正宇 文小平 王季石 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2004年第1期50-53,共4页
目的:获取抗肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)抗体。方法:利用PCR技术和基因重组技术将TRAIL基因构建于原核表达载体pPreTMH-Tb中,经酶切、测序鉴定证实构建完全正确后,通过IPTG诱导在大肠杆菌DH-5α中获得表达,并将TRAIL蛋白免疫家... 目的:获取抗肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)抗体。方法:利用PCR技术和基因重组技术将TRAIL基因构建于原核表达载体pPreTMH-Tb中,经酶切、测序鉴定证实构建完全正确后,通过IPTG诱导在大肠杆菌DH-5α中获得表达,并将TRAIL蛋白免疫家兔,通过Dot blot及Western blot检测抗TRAIL抗体的产生。结果:成功构建TRAIL基因原核表达载体,并在大肠杆菌DH-5α中获得表达,TRAIL蛋白表达量占菌体蛋白质总量的11.8％,Dot blot及Western blot检测证实获得了抗TRAIL抗体。结论:成功制备抗TRAIL抗体,这为TRAIL在真核细胞水平研究奠定了实验基础。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 基因表达 大肠杆菌
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FK和EP方案治疗恶性滋养细胞肿瘤的疗效对比分析
9
作者 王静 汪楚英 +1 位作者 曹永涛 卞文伟 《湖北预防医学杂志》 2003年第6期16-18,共3页
目的　与传统的 FK方案对比 ,观察 EP方案对恶性滋养细胞肿瘤的近期疗效、耐受性与毒副反应。方法　两方案分别治疗 30例患者。FK组 :5 -氟尿嘧啶和更生霉素静脉滴注 ,8天为 1疗程。EP组 :足叶乙甙和顺氯氨铂静脉滴注 ,5天为 1疗程。结... 目的　与传统的 FK方案对比 ,观察 EP方案对恶性滋养细胞肿瘤的近期疗效、耐受性与毒副反应。方法　两方案分别治疗 30例患者。FK组 :5 -氟尿嘧啶和更生霉素静脉滴注 ,8天为 1疗程。EP组 :足叶乙甙和顺氯氨铂静脉滴注 ,5天为 1疗程。结果　 FK和 EP组治疗有效率分别为 90 .0 %和 96 .7% (P>0 .0 5 ) ;两组均有不同程度的毒副作用 ,白细胞减少发生率分别为 5 0 .0 %和 4 6 .6 % (P>0 .5 ) ;EP组口腔溃疡发生率为 6 .7% ,显著低于 FK组 4 0 .0 % (P<0 .0 1) ;腹泻发生率 FK组为 2 0 .0 % ,EP组无发生 (P<0 .0 5 )。结论　足叶乙甙和顺氯氨铂联合给药治疗恶性滋养细胞肿瘤的有效率与传统 FK方案对比无统计学差异 ,患者耐受良好 ,毒副反应较轻 ,值得进一步研究。 展开更多
关键词 恶性滋养细胞肿瘤 抗癌药物 联合给药 疗效
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CSN6对宫颈癌细胞自噬的调节作用 被引量：1
10
作者 毛尊 李玉玲 巩玉森 《徐州医科大学学报》 CAS 2019年第1期42-45,共4页
目的探讨组成型光形态发生因子9信号复合体亚基6(constitutive photomorphogenesis 9 signalosome subunit 6,CSN6)对宫颈癌HeLa细胞和SiHa细胞自噬能力的影响。方法用自噬双标腺病毒mRFP-GFP-LC3感染宫颈癌细胞示踪自噬流的水平,将阴... 目的探讨组成型光形态发生因子9信号复合体亚基6(constitutive photomorphogenesis 9 signalosome subunit 6,CSN6)对宫颈癌HeLa细胞和SiHa细胞自噬能力的影响。方法用自噬双标腺病毒mRFP-GFP-LC3感染宫颈癌细胞示踪自噬流的水平,将阴性对照序列(siCtrl)、CSN6 siRNA(siCSN6)、空载体质粒(Vector)及CSN6过表达质粒(CSN6)分别转染宫颈癌细胞,Western blot检测CSN6及微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated proteinl light chain 3,LC3)的表达。结果与siCtrl组相比,siCSN6组CSN6表达下降,而自噬体数量和LC3表达增加;与Vector组相比,CSN6组CSN6表达增加,而自噬体数量和LC3表达下降。结论转染小干扰CSN6增加宫颈癌细胞自噬水平,CSN6过表达抑制自噬活性。 展开更多
关键词 组成型光形态发生因子9信号复合体亚基6 宫颈癌 微管相关蛋白1轻链3 自噬
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