目的建立1种简便、有效的SYBR Green Ⅰ实时定量逆转录PCR（SYBR Green Ⅰ Q—RT—PCR）方法检测乳腺癌组织、癌旁乳腺组织人乳腺珠蛋白（hMAM）mRNA表达水平。方法对SYBR Green Ⅰ Q—RT—PCR检测乳腺癌细胞株MDA—MB—231表达hMAM mRN...目的建立1种简便、有效的SYBR Green Ⅰ实时定量逆转录PCR（SYBR Green Ⅰ Q—RT—PCR）方法检测乳腺癌组织、癌旁乳腺组织人乳腺珠蛋白（hMAM）mRNA表达水平。方法对SYBR Green Ⅰ Q—RT—PCR检测乳腺癌细胞株MDA—MB—231表达hMAM mRNA的反应条件进行优化，初步检验该方法的重复性、灵敏性。应用该方法检测11例健康志愿者外周血hMAM mRNA表达，检验该方法的特异性，并对10例乳腺癌组织、10例对应癌旁乳腺组织hMAM mRNA表达水平进行测定。结果SYBR Green Ⅰ Q—RT—PCR可重复栓出乳腺癌细胞株MDA—MB-231极低表达hMAM mRNA，CT值为34．45～34．67，变异系数（CV）=0．25％。健康志愿者外周血中hMAM mRNA均阴性。乳腺癌组织hMAM mRNA阳性率为80．0％（8／10），其中Ⅰ期1例（100．0％），其量为37800；Ⅱ期6例（100．0％），量为100．4（中位）；Ⅲ期1例（33．3％），量为2．94。结论建立的SYBR Green Ⅰ Q—RT—PCR方法具有简便、特异、重复性、灵敏度好、定量结果可靠、直观等优点，应用于乳腺癌组织和癌旁乳腺组织hMAM mRNA的定量检测是理想的。展开更多
文摘目的建立1种简便、有效的SYBR Green Ⅰ实时定量逆转录PCR（SYBR Green Ⅰ Q—RT—PCR）方法检测乳腺癌组织、癌旁乳腺组织人乳腺珠蛋白（hMAM）mRNA表达水平。方法对SYBR Green Ⅰ Q—RT—PCR检测乳腺癌细胞株MDA—MB—231表达hMAM mRNA的反应条件进行优化，初步检验该方法的重复性、灵敏性。应用该方法检测11例健康志愿者外周血hMAM mRNA表达，检验该方法的特异性，并对10例乳腺癌组织、10例对应癌旁乳腺组织hMAM mRNA表达水平进行测定。结果SYBR Green Ⅰ Q—RT—PCR可重复栓出乳腺癌细胞株MDA—MB-231极低表达hMAM mRNA，CT值为34．45～34．67，变异系数（CV）=0．25％。健康志愿者外周血中hMAM mRNA均阴性。乳腺癌组织hMAM mRNA阳性率为80．0％（8／10），其中Ⅰ期1例（100．0％），其量为37800；Ⅱ期6例（100．0％），量为100．4（中位）；Ⅲ期1例（33．3％），量为2．94。结论建立的SYBR Green Ⅰ Q—RT—PCR方法具有简便、特异、重复性、灵敏度好、定量结果可靠、直观等优点，应用于乳腺癌组织和癌旁乳腺组织hMAM mRNA的定量检测是理想的。
