肺孢子虫包囊的分离及纯化 被引量：6

1

作者 梅芹 王其南 +2 位作者 李崇智 陈雅棠 刘约翰 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1992年第3期166-170,共5页

20只纯系Wistar大鼠经皮下注射醋酸可的松25m/次,每wk2次,用药7wk后即可诱发大鼠肺孢子虫肺炎。经相差显微镜直接检查、姬姆萨染色、亚甲胺蓝染色及六亚甲基四胺银染色在肺组织内检出肺孢子虫包囊。分离纯化过程包括三个步骤:1 肺组织... 20只纯系Wistar大鼠经皮下注射醋酸可的松25m/次,每wk2次,用药7wk后即可诱发大鼠肺孢子虫肺炎。经相差显微镜直接检查、姬姆萨染色、亚甲胺蓝染色及六亚甲基四胺银染色在肺组织内检出肺孢子虫包囊。分离纯化过程包括三个步骤:1 肺组织匀浆的制备及过滤;2 采用0.2％胶原酶消化;3 不连续Percoll密度梯度离心。包囊及滋养体密度为1.033g/ml,肺组织碎片密度达1.040g/ml,从而分离。经上述过程处理后可获得较为纯净的肺孢子虫包囊,可用于ELISA。 展开更多

关键词 肺孢子虫病 分离 纯化 肺孢子虫

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检测卡氏肺孢子虫的改良六亚甲基四胺银染色法 被引量：7

2

作者 倪小毅 叶彬 陈雅棠 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期319-319,共1页

卡氏肺孢子虫肺炎是艾滋病相关的重要机会性感染，随着艾滋病患者的增加，检测卡氏肺孢子虫包囊的简便、准确的方法显得非常重要，涂片染色是基本方法之一，而六亚甲基四胺银染色（Ｇｏｍｏｒｉ＇ｓｍｅｔｈｅｎａｍｉｎｅｓｉｌｖｅｒ... 卡氏肺孢子虫肺炎是艾滋病相关的重要机会性感染，随着艾滋病患者的增加，检测卡氏肺孢子虫包囊的简便、准确的方法显得非常重要，涂片染色是基本方法之一，而六亚甲基四胺银染色（Ｇｏｍｏｒｉ＇ｓｍｅｔｈｅｎａｍｉｎｅｓｉｌｖｅｒｎｉｔｒａｔｅｓｔａｉｎ，ＧＭＳ）... 展开更多

关键词 卡氏肺孢子虫 银染法 六亚甲基四胺 诊断

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聚合酶链反应结合非放射性标记探针检测粪便中微小隐孢子虫 被引量：11

3

作者 陈雅棠 马良 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期246-250,共5页

目的：利用非放射性标记探针技术检测经聚合酶链反应扩增后的人粪便中微小隐孢子虫ＤＮＡ，观察该方法的特异性和敏感性。方法：用裂解法从粪便标本直接制备微小隐孢子虫模板ＤＮＡ，用一对人工合成的寡核苷酸作ＰＣＲ引物，扩增长度为... 目的：利用非放射性标记探针技术检测经聚合酶链反应扩增后的人粪便中微小隐孢子虫ＤＮＡ，观察该方法的特异性和敏感性。方法：用裂解法从粪便标本直接制备微小隐孢子虫模板ＤＮＡ，用一对人工合成的寡核苷酸作ＰＣＲ引物，扩增长度为４５２ｂｐ的微小隐孢子虫目的ＤＮＡ片段。将扩增产物直接点在或经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹法转移到硝酸纤维素膜上，再和生物素标记的寡核苷酸探针杂交，经底物（ＢＣＩＰ）呈色观察。结果：阳性杂交信号只见于微小隐孢子虫ＤＮＡ扩增产物，而约氏疟原虫、杜氏利什曼原虫、贾第虫、白色念珠菌、大肠杆菌和人白细胞ＤＮＡ均无杂交信号。ＰＣＲ结合斑点杂交或Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹法检测隐孢子虫ＤＮＡ的敏感性均为０．１ｐｇ。结论：非放射性探针检测人粪便隐孢子虫ＤＮＡ的ＰＣＲ扩增产物，具有敏感性高、特异性强、操作较简便及无放射性污染等优点。 展开更多

关键词 微小隐孢子虫 聚合麦链反应 探针

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双抗夹心-ELISA快速诊断隐孢子虫病 被引量：3

4

作者 尹继刚 张西臣 +1 位作者 陈建宝 丁颖 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期126-126,共1页

关键词 隐孢子虫病 诊断 双抗夹心-ELISA

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PCR技术与病原染色法检测大鼠卡氏肺孢子虫的研究 被引量：4

5

作者 安春丽 李素云 +1 位作者 姜莉 田边将信 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期27-28,共2页

卡氏肺孢子虫肺炎（Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓｃａｒｉｎｉｐｎｅｕｍｏｎｉａ，ＰＣＰ）是免疫机能低下病人常见的并发症和死亡原因，由于ＡＩＤＳ病人的增多，抗癌化疗和器官移植等医疗手段的应用，ＰＣＰ病人日趋增多。本文应用ＰＣ... 卡氏肺孢子虫肺炎（Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓｃａｒｉｎｉｐｎｅｕｍｏｎｉａ，ＰＣＰ）是免疫机能低下病人常见的并发症和死亡原因，由于ＡＩＤＳ病人的增多，抗癌化疗和器官移植等医疗手段的应用，ＰＣＰ病人日趋增多。本文应用ＰＣＲ技术检测大鼠肺内病原体ＤＮＡ，并... 展开更多

关键词 卡氏肺孢子虫 病原染色法 聚合酶链反应

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卡氏肺孢子虫感染的免疫诊断研究 被引量：7

6

作者 王庆林 刘启文 何书明 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期260-263,共4页

目的：探讨肺泡灌洗液、血清抗原及血清抗体检测诊断卡氏肺孢子虫感染的价值。方法：利用免疫抑制大鼠模型及双夹心ＥＬＩＳＡ法检测不同时期感染大鼠肺泡灌洗液和血清中肺孢子虫抗原，用ＩＦＡ法检测血清中的肺孢子虫ＩｇＧ抗体，并与... 目的：探讨肺泡灌洗液、血清抗原及血清抗体检测诊断卡氏肺孢子虫感染的价值。方法：利用免疫抑制大鼠模型及双夹心ＥＬＩＳＡ法检测不同时期感染大鼠肺泡灌洗液和血清中肺孢子虫抗原，用ＩＦＡ法检测血清中的肺孢子虫ＩｇＧ抗体，并与病原学检查结果进行比较。结果：感染大鼠肺泡灌洗液的抗原检测于免疫抑制６－８ｗｋ后均呈阳性，而对照组大鼠均呈阴性；大多数感染大鼠血清抗原检测为阴性；正常大鼠血清中有低滴度肺孢子虫ＩｇＧ抗体，感染大鼠抗体滴度轻度升高或不升高，但中止免疫抑制后血清抗体滴度明显升高，而肺泡灌洗液中抗原逐渐阴转。结论：肺泡灌洗液抗原检测可用于肺孢子虫感染的诊断，但血清中很难检出这种抗原；血清ＩｇＧ抗体的上升并不表示为现症感染。 展开更多

关键词 卡氏肺孢子虫 免疫诊断 ELISA

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卡氏肺孢子虫快速染色法 被引量：3

7

作者 瞿介明 何礼贤 +2 位作者 李锡莹 周燕南 胡必杰 《上海医科大学学报》 CSCD 1994年第4期315-316,T019,共3页

卡氏肺孢子虫快速染色法瞿介明，何礼贤，李锡莹，周燕南，胡必杰（上海医科大学中山临床医学院肺病学教研室，病理科）卡氏肺孢子虫肺炎（ＰＣＰ）是一种极其严重的机会感染性疾病，病情重笃且易迅速恶讹，未经及时诊治病死率可高达１... 卡氏肺孢子虫快速染色法瞿介明，何礼贤，李锡莹，周燕南，胡必杰（上海医科大学中山临床医学院肺病学教研室，病理科）卡氏肺孢子虫肺炎（ＰＣＰ）是一种极其严重的机会感染性疾病，病情重笃且易迅速恶讹，未经及时诊治病死率可高达１００％［１］。降低本病病死率的关键... 展开更多

关键词 肺孢子虫 染色法 肺孢子虫病

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快速DNA提取法在检测卡氏肺孢子虫PCR中的应用 被引量：2

8

作者 安春丽 姜丽 +1 位作者 闻功丽 田边将信 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1998年第5期71-72,91,共3页

为寻求一种适用于临床诊断的PCR方法。方法用快速PCR模板DNA制备方法提取实验大鼠肺组织，支气管肿泡灌洗液和血液中的卡氏肺孢子虫DNA，进行PCR扩增，并与传统的DNA提取法进行对比。结果两种方法收到一致的理想结果。结论快速法提取的... 为寻求一种适用于临床诊断的PCR方法。方法用快速PCR模板DNA制备方法提取实验大鼠肺组织，支气管肿泡灌洗液和血液中的卡氏肺孢子虫DNA，进行PCR扩增，并与传统的DNA提取法进行对比。结果两种方法收到一致的理想结果。结论快速法提取的DNA适用于卡氏肺孢子虫的PCR检测。将此法试用于临床病例检测，也收到如期结果，初步显示其推广应用前景。 展开更多

关键词 模板DNA 卡氏肺孢子虫 聚合酶链反应

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圆孢子虫肠炎的实验室诊断 被引量：2

9

作者 戈建军 沈京培 马红丽 《上海医学检验杂志》 1998年第1期44-45,共2页

关键词 肠炎 圆孢子虫 实验室诊断

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卡氏肺孢子虫DNA的PCR检测 被引量：1

10

作者 宫玉香 张忠广 +2 位作者 韩敏 孟庆军 张敏 《青岛医学院学报》 1998年第2期114-116,共3页

①目的探讨卡氏肺孢子虫的检测方法及感染状况。②方法收取病人痰液、肺组织及支气管灌洗液，常规方法提取ＤＮＡ，用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测卡氏肺孢子虫ＤＮＡ，并与吉氏染色结果进行比较。③结果８６例住院病人，卡氏肺孢子... ①目的探讨卡氏肺孢子虫的检测方法及感染状况。②方法收取病人痰液、肺组织及支气管灌洗液，常规方法提取ＤＮＡ，用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测卡氏肺孢子虫ＤＮＡ，并与吉氏染色结果进行比较。③结果８６例住院病人，卡氏肺孢子虫ＤＮＡ的ＰＣＲ检出率为４１．９％，卡氏肺孢子虫包囊吉氏染色法的检出率为１４．９％，两种方法的检出率比较，差异有显著性（ｕ＝６．６３８，Ｐ＜０．０５）。尿毒症、肺癌、血液病和肺部炎症病人卡氏肺孢子虫ＤＮＡ的ＰＣＲ检出率分别为３７．５％，６１．５％，５０．０％和２０．８％，差异有显著性（χ２＝９．０１，Ｐ＜０．０５）。痰液、肺组织和支气管灌洗液标本，卡氏肺孢子虫ＤＮＡＰＣＲ的检出率分别为２８．６％，６１．９％和７７．８％，差异有极显著意义（χ２＝１２．３０，Ｐ＜０．０１）。吉氏染色法检测出的１０份卡氏肺孢子虫包囊阳性标本，ＰＣＲ检测皆为阳性；５７份阴性标本，ＰＣＲ检测出１５份为阳性。４份结核标本ＰＣＲ检测皆为阴性。④结论ＰＣＲ技术检测肺组织和支气管灌洗液标本中的卡氏肺孢子虫ＤＮＡ。 展开更多

关键词 DNA 聚合酶链反应 卡氏肺孢子虫

原文传递

诊断隐孢子虫病的实验室方法 被引量：3

11

作者 张月清 黄松如 《首都医学院学报》 1989年第3期216-219,共4页

隐孢子虫病(cryptosporidiosis)是一种人畜共患的寄生虫病,由隐孢子虫(cry-ptosporidium)寄生于人体和动物体的消化道及呼吸道的上皮细胞而引起。隐孢子虫于1911年发现,属于原生动物亚界、孢子虫纲、真球虫目、隐孢子虫属。自1976年美... 隐孢子虫病(cryptosporidiosis)是一种人畜共患的寄生虫病,由隐孢子虫(cry-ptosporidium)寄生于人体和动物体的消化道及呼吸道的上皮细胞而引起。隐孢子虫于1911年发现,属于原生动物亚界、孢子虫纲、真球虫目、隐孢子虫属。自1976年美国首次报告人体病例以来,随着对该病认识的提高和诊断技术的改进,发现病例日益增多,它不仅易发生于免疫功能缺陷的病人,而且在胃肠炎病例和健康人中也屡有发生。本病的主要症状是腹泻。 展开更多

关键词 隐孢子虫病 诊断 实验室方法

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PCR技术检测卡氏肺孢子虫的研究现状 被引量：1

12

作者 郭澎涛 《国外医学（寄生虫病分册）》 1998年第6期256-259,共4页

本文简述了近年来多聚酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)在卡氏肺孢子虫(Pneumocystis carrini,P.c.)检测中的研究现状。重点阐述了PCR的引物、取材对检测结果的影响,同时也探讨了简化样品制备和改良PCR对其在临床广泛应用的促... 本文简述了近年来多聚酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)在卡氏肺孢子虫(Pneumocystis carrini,P.c.)检测中的研究现状。重点阐述了PCR的引物、取材对检测结果的影响,同时也探讨了简化样品制备和改良PCR对其在临床广泛应用的促进作用。 展开更多

关键词 卡氏肺孢子虫 PCR 引物 取材 诊断

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改良四胺银染色法用于卡氏肺孢子虫诊断的研究 被引量：1

13

作者 陈锡慰 《实用寄生虫病杂志》 1993年第2期6-8,共3页

在Grocott改良的果氏四胺银方法中,分别以5％过碘酸钠与5％铬酸作氧化剂,对感染卡氏肺孢子虫的小鼠肺涂片、大鼠及病人的肺切片进行染色。小鼠肺涂片的氧化时间分别为5,15与60min,温度为20℃;银浸时间90min,温度60℃。在较短氧化时间即1... 在Grocott改良的果氏四胺银方法中,分别以5％过碘酸钠与5％铬酸作氧化剂,对感染卡氏肺孢子虫的小鼠肺涂片、大鼠及病人的肺切片进行染色。小鼠肺涂片的氧化时间分别为5,15与60min,温度为20℃;银浸时间90min,温度60℃。在较短氧化时间即15min以下时,卡氏肺孢子虫包囊显示淡褐色或深褐色,部分包囊内清晰可见一对括号状结构;但氧化时间较长时,包囊呈黑色且显示受损。在同一批次小鼠肺涂片氧化时间为5min时,过碘酸钠氧化较之铬酸显示较多的含括号状结构的包囊。在过碘酸钠氧化的大鼠或病人的肺切片中,也可见到该结构。实验结果表明以过碘酸钠作氧化剂进行银染反应优于铬酸,且可省略亚硫酸氢钠处理步骤,这将有利于临床应用。 展开更多

关键词 卡氏肺孢子虫 诊断 四胺银染色法

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卡氏肺孢子虫病的诊断及其进展

14

作者 安春丽 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 1995年第3期173-177,共5页

卡氏肺孢子虫病诊断方面的研究表明，辅助诊断方法缺乏特异性，在确定病人是否有肺感染，感染的程度及疗效的考核上都有一定作用。但ＰＣ感染的最后确诊主要靠病原体检测。取材方法：对于肺感染者应以导痰为首选，其次是ＢＡＬ和ＴＢＬ... 卡氏肺孢子虫病诊断方面的研究表明，辅助诊断方法缺乏特异性，在确定病人是否有肺感染，感染的程度及疗效的考核上都有一定作用。但ＰＣ感染的最后确诊主要靠病原体检测。取材方法：对于肺感染者应以导痰为首选，其次是ＢＡＬ和ＴＢＬＢ。儿童可采用经皮穿刺肺吸引的方法取材。在前述方法无法实施的紧急情况下，才考虑开胸肺活检。肺外感染者可在病变局部穿刺取材。制片法：可用穿刺物或肺组织等做直接涂片，印片，或悬液滴片等简捷方法，也可采用组织切片。染色方法：常用Ｇｉｅｍｓａ、初检、ＴＢＯ或ＧＭＳ法进一步确诊。ＩＦ可提高检出率。ＰＣＲ技术检测孢子虫病更敏感和特异，有操作简便，易于推广应用等优点。 展开更多

关键词 卡氏肺孢子虫病 诊断 孢子虫病

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检测微孢子虫韦伯氏Chromotrop染色法 被引量：4

15

作者 牛安欧 刘红云 +2 位作者 周敏 朱峰 方正明 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2000年第4期94-94,共1页

关键词 微孢子虫 韦伯氏Chromotrop染色法 病原学检测法

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聚合酶链反应技术在隐孢子虫检测中的应用研究 被引量：15

16

作者 郭步平 连德润 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1998年第2期33-35,共3页

根据Laxer等克隆的微小隐孢子虫（C．parvum）核酸序列片断（pHCl）设计并合成一对长度为20hp的寡核苷酸引物。应用聚合酶链反应，对隐孢子虫核酸进行扩增，结果扩增出452hP的特异性条带，阴性对照无扩增。结果表明所合成引物有高度特... 根据Laxer等克隆的微小隐孢子虫（C．parvum）核酸序列片断（pHCl）设计并合成一对长度为20hp的寡核苷酸引物。应用聚合酶链反应，对隐孢子虫核酸进行扩增，结果扩增出452hP的特异性条带，阴性对照无扩增。结果表明所合成引物有高度特异性。用PCR检测隐抱子虫感染动物模型，36份镜检卵囊阳性小鼠粪便均为阳性，18份镜检阴性小鼠粪便17份阴性，一份阳性。 展开更多

关键词 隐孢子虫 聚合酶链反应 检测

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隐孢子虫病的免疫学诊断 被引量：2

17

作者 蒋早立 黄松如 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1993年第1期50-51,共2页

隐孢子虫(Cryptosporidium sp)是Tyzzer于本世纪初(1907)在实验小鼠胃肠道内首先发现的一种能广泛感染脊椎动物的寄生原虫。1976年美国首次报道了人隐孢子虫病(Cryptosporidiosis)。目前隐孢子虫已成为美国引起腹泻的六大病因之一,也是... 隐孢子虫(Cryptosporidium sp)是Tyzzer于本世纪初(1907)在实验小鼠胃肠道内首先发现的一种能广泛感染脊椎动物的寄生原虫。1976年美国首次报道了人隐孢子虫病(Cryptosporidiosis)。目前隐孢子虫已成为美国引起腹泻的六大病因之一,也是旅游者腹泻的重要病原体。发展中国家的腹泻病人中有3～13％属隐孢子虫感染。 展开更多

关键词 隐孢子虫病 免疫诊断

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误诊为一般肠炎的小儿隐孢子虫病

18

作者 戈健军 赵顺珍 《临床误诊误治》 1992年第2期51-52,共2页

隐孢子虫病是新近才被重视的人类腹泻疾病之一。多数隐孢子虫病患儿的临床症状类似一般的肠炎、菌痢、消化不良,易误诊。现将我院1988年7月至1990年10月误诊的小儿隐孢子虫病32例报告如下。一、临床资料本组男22例,女10例,男女之比为2.2... 隐孢子虫病是新近才被重视的人类腹泻疾病之一。多数隐孢子虫病患儿的临床症状类似一般的肠炎、菌痢、消化不良,易误诊。现将我院1988年7月至1990年10月误诊的小儿隐孢子虫病32例报告如下。一、临床资料本组男22例,女10例,男女之比为2.2:1,5月～1岁5例(15.6％),1～2岁20例(62.5％)。2～4岁7例(21.8％)。本组病例均有腹泻,禁食不能使腹泻缓解,并有不同程度的贫血及营养不良。伴有发热7例(21.8％),体温以38℃左右居多,面色萎黄14例(43.7％),食欲增加且消瘦16例(50％)。本组32例分别被误诊为一般肠炎、菌痢、消化不良,发病到确诊的时间分别为15天～2年半不等。 展开更多

关键词 隐孢子虫病 肠炎 误诊

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免疫刺激复合物抗原ELISAs在诊断新孢子虫和弓形虫感染中的应用

19

作者 何猛 《国外医学（寄生虫病分册）》 1999年第6期257-259,共3页

本文对刚地弓形虫和犬新孢子虫的ISCOM作了描述,对基于ISCOM抗原的ELISA迄今在原虫感染诊断方面的应用作了回顾。

关键词 ELISA 新孢子虫 刚地弓形虫 诊断 弓形虫感染

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隐孢子虫病的流行及其检查方法

20

作者 程廷元 余锡三 《实用医学杂志》 CAS 1995年第9期637-638,共2页

隐孢子虫病是由隐孢子虫所致的一种人畜共患病。该虫是婴幼儿腹泻的重要病源之一,目前世界各地均有流行。1987年韩范等在国内首次发现报道人体病例。此后,安徽、福建、山东、内蒙、北京等13个省市均有报道,说明隐孢子虫在我国分布较广,... 隐孢子虫病是由隐孢子虫所致的一种人畜共患病。该虫是婴幼儿腹泻的重要病源之一,目前世界各地均有流行。1987年韩范等在国内首次发现报道人体病例。此后,安徽、福建、山东、内蒙、北京等13个省市均有报道,说明隐孢子虫在我国分布较广,严重威胁到婴幼儿的身体健康。 展开更多

关键词 隐孢子虫病 流行病学 实验室诊断

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