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云南省1例伯氨喹诱发溶血患者的G6PD基因编码区突变分析及酶蛋白空间结构预测 被引量：5
1
作者 董莹 刘淑萍 +3 位作者 徐艳春 刘言 邓艳 陈梦妮 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期399-405,共7页
目的分析伯氨喹诱发溶血患者的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)基因突变对空间结构形成的影响。方法于2018年5月18日采集1例因服用伯氨喹出现溶血反应、G6PD酶活性下降75%的间日疟病例血样。提取血样的人基因组DNA,通过PCR分别扩增含G6PD基因... 目的分析伯氨喹诱发溶血患者的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)基因突变对空间结构形成的影响。方法于2018年5月18日采集1例因服用伯氨喹出现溶血反应、G6PD酶活性下降75%的间日疟病例血样。提取血样的人基因组DNA,通过PCR分别扩增含G6PD基因exon2、exon3-7、exon8-9和exon10-13等12个外显子的片段并测序。整理获得的DNA序列与G6PD基因野生型、突变型序列比对,以确认12个外显子分别的起止点并拼接成exon2-13外显子的cDNA序列。用MEGA5.04软件分析cDNA序列的错义突变、同义突变和进行氨基酸链转换。采用SWISS-MODEL预测氨基酸链空间结构(www.swissmodel.expasy.org/interactive),PyMOL2.2.0软件修饰空间结构预测图。结果间日疟患者血样基因组经4个PCR反应体系扩增,分别获得含G6PD基因exon2、exon3-7、exon8-9、exon10-13外显子的336、2277、976和1421bp等4种目标产物。由测序结果整理获得12个外显子的cDNA链为1545bp,与野生型序列比对的同义突变、错义突变位点分别为c.1311T>C和c.1376G>T,导致437、459氨基酸呈Y/Y不变和R/L变异,空间位置均未在G6PD与NADP^+、乙醇酸配体的结合区。515aa氨基酸链的二聚体空间结构模型GMQE、QMEAN分别为0.97和0.66,建模质量高,与野生型模型(6eO7.1.A)比对,459氨基酸均处于模型表面,与NADP^+配体的结合区均包括238、357等16个残基;四聚体的建模质量略差,乙醇酸的配体结合区仅为47等6个残基,少于野生型的11个。结论G6PD基因编码区C.1311T>C同义突变与C.1376G>T错义突变同时存在,可能不影响该患者G6PD二个亚基的聚合及其与NADP+配体的结合,但四聚体的形成受到干扰。 展开更多
关键词 云南省 伯氨喹 溶血 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 突变 空间结构
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应用间接荧光抗体试验调查黄淮流域不同媒介地区当前疟疾流行水平的研究 被引量：4
2
作者 郑香 房文 +4 位作者 黄芳 沈毓祖 苏云普 黄光全 周水森 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期417-421,共5页
目的通过对黄淮流域居民进行间接荧光抗体试验(IFAT)调查,评价黄淮流域不同媒介地区疟疾流行水平。方法2006和2007年选择沿黄淮流域单一中华按蚊为媒介的安徽省宿州、怀远和砀山县、河南省永城县,嗜人按蚊与中华按蚊复合媒介地区的河南... 目的通过对黄淮流域居民进行间接荧光抗体试验(IFAT)调查,评价黄淮流域不同媒介地区疟疾流行水平。方法2006和2007年选择沿黄淮流域单一中华按蚊为媒介的安徽省宿州、怀远和砀山县、河南省永城县,嗜人按蚊与中华按蚊复合媒介地区的河南省桐柏县和湖北省广水县,每县分别选择2个自然村,采用重复横向调查方法,连续两年于疟疾流行季节末期对调查点居民(≥1.5岁)采制滤纸干血滴,用IFAT检测人群疟疾抗体水平,计算人群疟疾抗体阳性率与阳性几何平均滴度倒数(GMRT);分别以20岁以下年龄组的抗体阳性率通过可逆催化模型估算这些地区的疟疾感染概率,并与当年疟疾发病率进行比较。结果2006和2007年安徽、河南和湖北等3省6县12个自然村的平均抗体阳性率分别为6.1%(153/2489)和12.0%(295/2458),其中单一中华按蚊媒介地区2007年的平均抗体阳性率12.0%(194/1624)]明显高于2006年的4.1%(69/1670)(χ2=69.9,P<0.01);而嗜人按蚊和中华按蚊复合媒介地区平均抗体阳性率分别为10.3%(84/819)和12.1%(101/834),两年的差异无统计学意义(χ2=0.17,P>0.05)。2007年12个自然村平均阳性GMRT为26.2,略高于2006年的22.7。可逆催化模型估算结果显示,单一中华按蚊媒介地区和复合媒介地区年感染概率均明显高于当地疫情报告的疟疾发病比率,前者平均分别为后者的117.3倍和17.2倍。在抗体阳性者中,有87.8%为疟疾无症状者,表明黄淮流域地区存在一定比例的无症状潜在传染源。结论黄淮流域地区疟疾实际发病远较报告疫情为高,单一中华按蚊为媒介地区疟疾发病呈回升趋势,嗜人按蚊与中华按蚊复合媒介地区疟疾传播相对稳定。 展开更多
关键词 疟疾 间接荧光抗体试验 抗体阳性率 可逆催化模型 感染概率
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甘肃省疟疾流行现状和防治措施 被引量：10
3
作者 李凡 杨俊克 +1 位作者 陈生邦 冯宇 《中国热带医学》 CAS 2012年第10期1261-1262,共2页
目的分析甘肃疟疾流行现状,为制定甘肃省的疟疾防控策略和落实消除疟疾行动计划提供依据。方法收集2000～2011年疟疾防治工作报表,分析2000～2011年甘肃疟疾发病、人群血检和抗体阳性率、疟疾知识知晓率和人员培训情况并进行分析。结果2... 目的分析甘肃疟疾流行现状,为制定甘肃省的疟疾防控策略和落实消除疟疾行动计划提供依据。方法收集2000～2011年疟疾防治工作报表,分析2000～2011年甘肃疟疾发病、人群血检和抗体阳性率、疟疾知识知晓率和人员培训情况并进行分析。结果2000～2011年全省发生疟疾病例163例,其中111例为输入病例,占整个病例数的68.10%,2004年、2011年疟疾血检阳性率分别为0.47%、0%。2011年学生和居民抗体阳性率分别为0.17%、0.33%、疟防知识知晓率分别为46.46%、39.38%。结论加强输入性疟疾的监测和防治,对群众进行健康教育和提高医务人员疟疾诊治水平,做到病例的早发现、早治疗是我省在疟疾防治工作应采取的主要措施, 展开更多
关键词 疟疾 现状 防治措施
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间日疟原虫裂殖子表面蛋白1和环子孢子蛋白基因多态性分析 被引量：1
4
作者 金行一 张玲玲 +5 位作者 朱素娟 徐卫民 陈珺芳 阮卫 姚立农 陈华良 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期323-331,共9页
目的对杭州市间日疟病例感染的间日疟原虫(Plasmodium vivax)裂殖子表面蛋白1(MSP-1)和环子孢子蛋白(CSP)基因的多态性进行描述性分析。方法收集杭州市2008-2019年报告的间日疟病例的血样和流行病学资料。采用全血DNA抽提试剂盒提取疟... 目的对杭州市间日疟病例感染的间日疟原虫(Plasmodium vivax)裂殖子表面蛋白1(MSP-1)和环子孢子蛋白(CSP)基因的多态性进行描述性分析。方法收集杭州市2008-2019年报告的间日疟病例的血样和流行病学资料。采用全血DNA抽提试剂盒提取疟原虫基因组DNA,巢式PCR分别扩增Pvmsp-1和Pvcsp基因的特异性片段,并进行双向测序。应用DNAStar、MEGA 6.0软件对氨基酸序列进行序列比对和遗传进化分析,并采用邻接法构建系统进化树。采用SPSS 17.0统计学软件对基因多态性及感染来源地进行描述性和归纳分析。结果共收集间日疟病例血样56份,巢式PCR扩增的Pvmsp-1和Pvcsp基因片段分别测序成功44份和54份血样。序列分析显示,44条Pvmsp-1序列可分为4种基因型,分别为SalⅠ型18份、Belem型8份、R-Ⅲ型17份和R-Ⅳ型1份;54条Pvcsp序列分为两种基因型,分别为VK210型52份和VK247型2份。对Pvmsp-1基因的分型特征和感染来源地分析发现,SalⅠ型分布广泛,在我国华东地区,东南亚地区,印度,埃塞俄比亚等多个国家或地区存在。我国华东地区的主要分布类型为R-Ⅲ型,此外,R-Ⅲ型在南亚、东南亚地区也有分布。Belem型主要分布在东南亚、南亚和埃塞俄比亚等国家或地区。对Pvcsp基因的多态性特征和感染来源地分析发现,共有4种多态性特征具有一定的地域特征。结论杭州市2008-2019年报告的间日疟病例的Pvmsp-1和Pvcsp基因存在较丰富的多态性特征,部分特征具有一定地域性。 展开更多
关键词 间日疟原虫 裂殖子表面蛋白1 环子孢子蛋白 基因多态性
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间日疟原虫MSP1-19基因的克隆与表达 被引量：1
5
作者 李光友 陈勇 +4 位作者 夏惠 方强 刘丹 买月琴 贺文欣 《蚌埠医学院学报》 CAS 2011年第9期935-937,共3页
目的:构建间日疟原虫MSP1-19(Plasmodium vivax merozoite surface protein-1-19,Pv MSP1-19)基因克隆及表达的载体。方法:将MSP1-19基因克隆入原核表达载体pET28a中,构建重组表达载体。以重组载体转化大肠埃希菌BL21,在IPTG诱导下表达... 目的:构建间日疟原虫MSP1-19(Plasmodium vivax merozoite surface protein-1-19,Pv MSP1-19)基因克隆及表达的载体。方法:将MSP1-19基因克隆入原核表达载体pET28a中,构建重组表达载体。以重组载体转化大肠埃希菌BL21,在IPTG诱导下表达重组Pv MSP1-19蛋白。采用亲合层析纯化重组蛋白,应用SDS-PAG电泳和Western blot对表达产物进行鉴定和分析。结果:成功构建了质粒pET28a/Pv MSP1-19,并在大肠埃希菌中诱导可溶性表达的目的蛋白。表达的蛋白能与间日疟患者血清发生特异性结合反应。结论:成功地原核表达出Pv MSP1-19目的蛋白,为间日疟的疫苗研制提供了实验基础。 展开更多
关键词 间日疟 MSP1-19基因 原核表达 基因表达
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间日疟并重度血小板减少1例 被引量：1
6
作者 张惠 谭玉洁 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期397-398,共2页
患者．男，45岁．贵州省金沙县安落乡人，农民。2014年12月20日无明显诱因出现高热．体温最高达40．3℃。发热过程中伴寒战．盛汗退热．退热后感困倦．伴口渴、多饮（约3000m1）、多尿（同饮水量），发热隔日1次，每次持续约4-6h．多次... 患者．男，45岁．贵州省金沙县安落乡人，农民。2014年12月20日无明显诱因出现高热．体温最高达40．3℃。发热过程中伴寒战．盛汗退热．退热后感困倦．伴口渴、多饮（约3000m1）、多尿（同饮水量），发热隔日1次，每次持续约4-6h．多次就诊于当地诊所，具体诊断不详，予多种抗生素治疗无效、12月25日患者全身出现散托瘀点及皮疹伴皮肤瘙痒． 展开更多
关键词 重度血小板减少 间日疟 发热过程 皮肤瘙痒 金沙县 贵州省 饮水量 抗生素
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河南省信阳市嗜人按蚊传疟作用研究 被引量：23
7
作者 顾政诚 尚乐园 +7 位作者 陈建设 郑香 苏玉杰 李爱民 刘辉 罗曼珍 钱会霖 汤林华 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期221-224,共4页
目的　调查嗜人按蚊的传疟作用 ,为嗜人按蚊分布区媒介监测和制订合理的防治措施提供依据。　方法　在河南省信阳市二十里河村选择 5个自然村作为观察点 ,采用寄生虫学和昆虫学方法进行调查 ,估算嗜人按蚊的媒介能量和临界叮人率。　结... 目的　调查嗜人按蚊的传疟作用 ,为嗜人按蚊分布区媒介监测和制订合理的防治措施提供依据。　方法　在河南省信阳市二十里河村选择 5个自然村作为观察点 ,采用寄生虫学和昆虫学方法进行调查 ,估算嗜人按蚊的媒介能量和临界叮人率。　结果　 1999年 7～ 8月 ,居民带虫发病率为 7.4% ,原虫率为 2 .0 % ,IFAT抗体阳性率为 8.4%。嗜人按蚊密度组成在人房内占优势 ,平均叮人率为 4.9388/(人 /夜 ) ,人血指数为 0 .785 7,媒介能量为 5 .5 2 96 ,是中华按蚊的 6 .2倍。嗜人按蚊临界叮人率为 0 .2 40 7(人 /夜 ) ,而实际叮人率是它的 2 0倍。结论　嗜人按蚊是当地疟疾传播的主要媒介。提示临界叮人率在媒介监测中具有应用的意义。目的　调查嗜人按蚊的传疟作用 ,为嗜人按蚊分布区媒介监测和制订合理的防治措施提供依据。　方法　在河南省信阳市二十里河村选择 5个自然村作为观察点 ,采用寄生虫学和昆虫学方法进行调查 ,估算嗜人按蚊的媒介能量和临界叮人率。　结果　 1999年 7～ 8月 ,居民带虫发病率为 7.4% ,原虫率为 2 .0 % ,IFAT抗体阳性率为 8.4%。嗜人按蚊密度组成在人房内占优势 ,平均叮人率为 4.9388/ (人 /夜 ) ,人血指数为 0 .785 7,媒介能量为 5 .5 2 96 ,是中华按蚊的 6 .2倍。 展开更多
关键词 嗜人按蚊 媒介能量 临界叮人率 疟疾 河南
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缅甸拉咱市氯喹治疗间日疟的敏感性评价 被引量：2
8
作者 梁桂亮 孙晓东 +1 位作者 王剑 张再兴 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期175-176,共2页
缅甸拉咱市单纯间日疟原虫感染者48例分为氯喹A方案组(26例)和B方案组(22例),分别采用成人总剂量1200mg(第1天顿服600mg,第2、3天300mg/d)和1500mg(第1天顿服750mg,第2、3天375mg/d)的三天疗法治疗。于服药当天、服药后第1、2、3、7、14... 缅甸拉咱市单纯间日疟原虫感染者48例分为氯喹A方案组(26例)和B方案组(22例),分别采用成人总剂量1200mg(第1天顿服600mg,第2、3天300mg/d)和1500mg(第1天顿服750mg,第2、3天375mg/d)的三天疗法治疗。于服药当天、服药后第1、2、3、7、14、21和28天采集指血或耳垂血制作厚、薄血涂片检查疟原虫,测量体温和观察药物不良反应。氯喹治疗后,两组病例血内无性体原虫3d内全部阴转。第28天随访治愈率为100%。结果表明,缅甸拉咱市的间日疟病例对氯喹治疗均敏感,该边境地区间日疟病例可采用氯喹进行临床治疗。 展开更多
关键词 缅甸 间日疟原虫 氯喹 敏感性
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云南省间日疟患者G6PD基因编码区的突变分析
9
作者 刘淑萍 董莹 +4 位作者 徐艳春 刘言 邓艳 张苍林 陈梦妮 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期146-151,共6页
目的分析云南省间日疟患者的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)基因编码区突变多态及其与伯氨喹性溶血现象易发的规律。方法收集云南省2018年经"氯喹/伯氨喹八日疗法"治疗的间日疟病例血样。以服用伯氨喹期间患者出现"茶色"... 目的分析云南省间日疟患者的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)基因编码区突变多态及其与伯氨喹性溶血现象易发的规律。方法收集云南省2018年经"氯喹/伯氨喹八日疗法"治疗的间日疟病例血样。以服用伯氨喹期间患者出现"茶色"尿液体征、G6PD酶活性下降判断为伯氨喹诱发急性溶血。提取血样的人基因组DNA,PCR分别扩增含G6PD基因的12个外显子片段并测序。与G6PD基因非突变型序列比对,用DNAStar11.0、BioEdit 7.2.5等软件整理、拼接测序序列获得G6PD基因的cDNA序列。用MEGA 5.04、DnaSP 5.10软件分析cDNA序列的突变多态、选择效应等。计算突变多态与伯氨喹诱发性溶血发生的相关性系数(r)和比值比(OR)。结果共收集间日疟患者血样184份,获得44份血样的G6PD基因完整cDNA链(长度为1545 bp),其中1条来自溶血病例的基因组。44条c DNA链与非突变型序列比对的突变位点包括c.461 T>A、c.574 C>T、c.786 C>T、c.1059 C>T、c.1311 T>C和c.1376 G>T,频率分别为1.5/10万、1.5/10万、1.5/10万、1.5/10万、45.6/10万和1.5/10万。c.1311和c.1376的双位点突变连锁仅存在于溶血病例的基因组,且c.1376位点突变与伯氨喹性溶血的发生为正相关关系(r=1.000,P>0.05)。44条cDNA链定义为6种单倍型(Hap1~Hap6),单倍型期望杂合度(He)、核酸多样性指数(π)、Ka/Ks比值分别为0.493、0.001和0.062;c.1311单点突变的Hap2占比最多,为68.2%(30/44),高频率突变位点c.1311的等位组成亦最复杂,出现非突变半合(9/44,20.4%)、突变半合(16/44,36.4%)、非突变纯合(5/44,11.5%)、突变杂合(10/44,22.7%)、突变纯合(4/44,9.1%)等5种合子。c.1311位点突变与伯氨喹性溶血发生的OR值为0.6879(P>0.05),未显示关联性。Tjima’s中性检验D值为-1.414(P>0.05),且全段的D值均<1,表明研究序列检出的突变不属于定向选择压力下的非中性突变,Ka/Ks比值为0.062,说明研究序列非常保守、错义突变率低于同义突变率。结论云南省间日疟患者中,常见的G6PD基因编码区突变为c.1311位点的T>C碱基替换,但仅c.1376位点的G>T突变与氧化剂突变诱发性溶血的发生呈正相关性。 展开更多
关键词 G6PD基因 编码区 突变 伯氨喹 影响 相关性
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许昌市48年疟疾防治工作回顾 被引量：2
10
作者 温红伟 韩灿宇 +3 位作者 韩庆宇 从克 郭影 赵书锋 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期185-185,共1页
关键词 许昌市 疟疾 防治工作
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