赖型钩体DNA重组质粒rpDJt及其表达蛋白P68对豚鼠的免疫保护研究 被引量：2

1

作者 戴保民 江南 +14 位作者 李胜富 方之茂 赵慧业 伍卫华 叶丹霓 刘家福 杨耀 张云 刘富先 屠云人 杨洪斌 黄自英 梁莉 胡利贞 赵慕愚 《华西医科大学学报》 CSCD 1998年第3期248-251,共4页

为了进一步鉴定赖型钩体ＤＮＡ重组质粒ｒｐＤＪｔ及其纯化表达蛋白质Ｐ６８的免疫保护作用，采用随机、双盲和对照法对５０只豚鼠进行了３次和６个部位主动免疫接种，并于接种后３０天以强毒力、大剂量活钩体攻击。结果：Ｐ６８组存活... 为了进一步鉴定赖型钩体ＤＮＡ重组质粒ｒｐＤＪｔ及其纯化表达蛋白质Ｐ６８的免疫保护作用，采用随机、双盲和对照法对５０只豚鼠进行了３次和６个部位主动免疫接种，并于接种后３０天以强毒力、大剂量活钩体攻击。结果：Ｐ６８组存活率１００％（７／７）；ｒｐＤＪｔ组存活率７７％（１０／１３）；ｐＴ７－７组（无重组质粒）存活率２５％（３／１０）；全钩灭活疫苗组存活率９３％（１３／１４）。作者认为该质粒的表达蛋白质Ｐ６８可作为钩体基因工程亚单位疫苗的候选抗原。 展开更多

关键词 钩端螺旋体病 重组质粒 rpDJt P68基因

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钩体基因疫苗对豚鼠延髓原癌基因表达的影响 被引量：1

2

作者 张燕华 李峻 吴俊梅 《华西医学》 CAS 1998年第2期166-169,共4页

我们的研究已表明，赖型０１７株钩体外膜疏水蛋白ＯｍｐＬ３９是稳定的免疫原，在此我们分别用ＯｍｐＬ３９与钩体死菌苗和生理盐水对照免疫豚鼠，研究ＯｍｐＬ３９的免疫保护作用和免疫机理，对ＯｍｐＬ３９的抗原特异性刺激引起中枢... 我们的研究已表明，赖型０１７株钩体外膜疏水蛋白ＯｍｐＬ３９是稳定的免疫原，在此我们分别用ＯｍｐＬ３９与钩体死菌苗和生理盐水对照免疫豚鼠，研究ＯｍｐＬ３９的免疫保护作用和免疫机理，对ＯｍｐＬ３９的抗原特异性刺激引起中枢原癌基因（Ｃｆｏｓ基因）表达进行了观察。结果表明，ＯｍｐＬ３９在豚鼠体内能产生高效价的阳性抗体，免疫保护率为１００％。在ＯｍｐＬ３９对中枢Ｃｆｏｓ基因表达的影响中，我们观察到ＯｍｐＬ３９免疫的豚鼠较空白和死菌苗组Ｃｆｏｓ表达明显少于死菌苗组和空白对照组（ｐ＜００５）。提示ＯｍｐＬ３９能特异性地抑制Ｃｆｏｓ基因的表达，减轻强毒钩体对动物体内的病理损伤，有较死菌苗强的免疫保护作用。 展开更多

关键词 钩端螺旋体 免疫保护 基因表达 C-FOS基因

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聚合酶链反应检测致病性钩端螺旋体微量DNA的研究 被引量：1

3

作者 鲍朗 戴保民 《华西医科大学学报》 CAS CSCD 1990年第3期225-229,共5页

作者通过对黄疸出血群钩端螺旋体DNA的分子克隆和筛选,获得了两个重组DNA片段,其中一个具有广泛针对各群致病性构体的特性,另一个仅对黄疸出血群钩体起杂交反应。经DNA序列分析和限制性谱测定,分别合成两对聚合酶链反应寡核苷酸引物—... 作者通过对黄疸出血群钩端螺旋体DNA的分子克隆和筛选,获得了两个重组DNA片段,其中一个具有广泛针对各群致病性构体的特性,另一个仅对黄疸出血群钩体起杂交反应。经DNA序列分析和限制性谱测定,分别合成两对聚合酶链反应寡核苷酸引物——引物B1、2和引物B3、4。以该引物对各群、型钩体微量DNA(0.1 ng)行聚合酶链扩增反应,引物B1、2能引导扩增全部致病性钩体DNA,引物B3、4则特异性地扩增黄疸出血群钩体DNA,非致病性钩体和其他微生物DNA均无扩增反应。结果表明,聚合酶链反应是一种灵敏度极高、针对性很强的DNA扩增技术,可用于钩体病早期诊断和流行病学分类鉴定。 展开更多

关键词 钩端螺旋体 DNA 聚合酶链反应

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钩体病人群自然感染免疫水平与病原阳性问题研究 被引量：1

4

作者 杨文映 李翠芝 +2 位作者 王桂仙 马志明 李军安 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1997年第1期69-69,共1页

关键词 钩端螺旋体病 自然感染 免疫

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广西钩端螺旋体病疫区人群免疫状况与发病情况监测 被引量：1

5

作者 方锦嵩 曾竣 谢镇国 《中国公共卫生学报》 1996年第5期308-308,共1页

广西钩端螺旋体病疫区人群免疫状况与发病情况监测广西壮族自治区卫生防疫站（南宁５３００２１）方锦嵩，曾竣，谢镇国钩端螺旋体（简称钩体）病是我区常见的一种以散发为主的自然疫源性疾病，病例多见于夏收夏种收割稻谷、耙田和插秧... 广西钩端螺旋体病疫区人群免疫状况与发病情况监测广西壮族自治区卫生防疫站（南宁５３００２１）方锦嵩，曾竣，谢镇国钩端螺旋体（简称钩体）病是我区常见的一种以散发为主的自然疫源性疾病，病例多见于夏收夏种收割稻谷、耙田和插秧时，流行形式以稻田型为主．７０年代... 展开更多

关键词 钩端螺旋体病 免疫 发病情况 监测

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补体系统在抗钩端螺旋体感染中的作用

6

作者 吴俊英 陈艺林 +2 位作者 祖莹 蒋惠荷 李英欣 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1997年第3期24-26,共3页

本文报告感染构端螺旋体的豚鼠及正常豚鼠血清补体50％溶血（CH50）及血清对中性粒细胞（PMN）的趋化作用。结果显示感染组CH50明显降低，血清对PMN的趋化能力明显提高（P＜0．01）；经青霉素治疗后补体活性无明显改变（P＞0．05）。提... 本文报告感染构端螺旋体的豚鼠及正常豚鼠血清补体50％溶血（CH50）及血清对中性粒细胞（PMN）的趋化作用。结果显示感染组CH50明显降低，血清对PMN的趋化能力明显提高（P＜0．01）；经青霉素治疗后补体活性无明显改变（P＞0．05）。提示补体系统参与了抗钧端螺旋体的感染，并对变态反应的免疫病理损伤有一定作用。 展开更多

关键词 钩端螺旋体 补体

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钩端螺旋体不同型别外膜菌苗人体免疫效果观察

7

作者 余录根 张锦麟 +7 位作者 朱凤才 秦进才 谢广中 王志高 胡明生 高吉元 陶新民 胡金保 《预防医学情报杂志》 CAS 2000年第3期275-277,共3页

关键词 钩端螺旋体 外膜菌苗 免疫效果

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钩端螺旋体不同型别外膜菌苗人体安全性观察

8

作者 余录根 张锦麟 +7 位作者 朱凤才 秦进才 谢广中 王志高 胡明生 高吉元 陶新民 胡金保 《预防医学情报杂志》 CAS 1999年第4期236-238,共3页

关键词 钩端螺旋体 外膜菌苗 人体安全性

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钩端螺旋体对数生长期的测定 被引量：10

9

作者 黄红垒 徐建国 +2 位作者 蒋秀高 聂一新 肖玉春 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第3期60-63,共4页

目的　了解在实验室条件下钩端螺旋体的生长规律 ,为进一步开展蛋白质组和基因表达谱的研究做准备。方法　使用pH为 7 4的EMJH液体培养基 ,在 30℃条件下置摇床上以 90r/min对该菌进行通气振荡培养 ,记录不同时间点的活菌数和培养物的... 目的　了解在实验室条件下钩端螺旋体的生长规律 ,为进一步开展蛋白质组和基因表达谱的研究做准备。方法　使用pH为 7 4的EMJH液体培养基 ,在 30℃条件下置摇床上以 90r/min对该菌进行通气振荡培养 ,记录不同时间点的活菌数和培养物的光密度。结果　研究发现 ,钩体的生长与其它细菌培养相似 ,也有静止期、对数生长期、稳定期和衰老期。在该培养条件下 ,钩端螺旋体的对数生长期为培养的第 12～ 5 4h。在对数生长期 ,钩端螺旋体复制一代所需的时间约为 11 35h。并且 ,钩端螺旋体活菌计数和光密度值OD60 0 之间有较好的相关性。结论　本文比较详细地描述了钩端螺旋体的生长参数—活菌数和OD60 0 ,并找到了钩端螺旋体生长的对数生长期 ,在严格控制试验条件的情况下 ,可以使用测定液体培养物的OD60 0值的方法来推算菌体数 。 展开更多

关键词 生长曲线 对数生长期 活菌计数 OD600 钩端螺旋体 钩端螺旋体病

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钩端螺旋体抗原研究进展

10

作者 杨东亮 《微生物学免疫学进展》 1989年第1期39-41,共3页

现已知致病性钩端螺旋体(以下简称钩体)有大约19个血清群共180个血清型。如此众多的血清型很难从形态、生化及培养特性上区分开来,但它们具有不同的抗原性,这对钩体的分类,钩体病的血清学诊断及钩体疫苗的研制均有重要意义(1)。本文仅... 现已知致病性钩端螺旋体(以下简称钩体)有大约19个血清群共180个血清型。如此众多的血清型很难从形态、生化及培养特性上区分开来,但它们具有不同的抗原性,这对钩体的分类,钩体病的血清学诊断及钩体疫苗的研制均有重要意义(1)。本文仅就近年来国外有关钩体抗原研究的部分文献作一复习。 展开更多

关键词 钩端螺旋体 抗原

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黄疸出血群赖型017株钩端螺旋体外膜单克隆抗体免疫保护作用的探讨 被引量：4

11

作者 赵慧业 李胜富 +1 位作者 阎蓉华 戴保民 《华西医科大学学报》 CSCD 1990年第3期239-241,共3页

作者采用黄疸出血群赖型017株钩端螺旋体(钩体)外膜免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合等技术,获得单克隆抗体E4B7D5。亚类鉴定为IgG_1,凝集效价为1:25 600。被动免疫保护试验证明:将单克隆抗体E4B7D5腹水稀释100倍,给实验组豚鼠每只每天腹腔... 作者采用黄疸出血群赖型017株钩端螺旋体(钩体)外膜免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合等技术,获得单克隆抗体E4B7D5。亚类鉴定为IgG_1,凝集效价为1:25 600。被动免疫保护试验证明:将单克隆抗体E4B7D5腹水稀释100倍,给实验组豚鼠每只每天腹腔注射1ml,连续6天,能使豚鼠在接受同型017株钩体2ml(每毫升1×10~3条)的攻击后,存活率达80％,且存活20天的豚鼠处死解剖,未见任何病变;3个对照组的存活率分别为10％,20％和10％,该三组仅有4只存活20天,经处死解剖,其中 3只发现较多的陈旧性肺出血。作者认为,单克隆抗体E4B7D5对同型017株钩体有免疫保护作用。 展开更多

关键词 钩端螺旋体 单克隆抗体 外膜 黄疸

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应用分子杂交对钩端螺旋体DNA同源性的研究 被引量：2

12

作者 肖建国 戴保民 《华西医科大学学报》 CAS CSCD 1990年第3期230-233,共4页

作者以^(32)P标记的黄疸出血群赖型017株钩体DNA为探针,分别与2个属5个血清群的6株钩体DNA进行分子杂交。结果表明,黄疸出血群赖型017株与同群、型的56601株同源性较高,与秋季群(56606株)、七日热群(56610株)次之,与双曲钩体patoc型Pat... 作者以^(32)P标记的黄疸出血群赖型017株钩体DNA为探针,分别与2个属5个血清群的6株钩体DNA进行分子杂交。结果表明,黄疸出血群赖型017株与同群、型的56601株同源性较高,与秋季群(56606株)、七日热群(56610株)次之,与双曲钩体patoc型Patoc Ⅰ株、细螺旋体属illini细螺旋体同源性很低;^(32)P标记的钩体DNA探针能检测四川地区流行的致病性钩体。 展开更多

关键词 钩端螺旋体 DNA 分子杂交 探针

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针对问号钩体赖型外膜的抗原分析 被引量：1

13

作者 李亚非 戴保民 赵慧业 《华西医科大学学报》 CAS CSCD 1993年第2期122-126,共5页

作者采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹技术,对黄疸出血群赖型017株和601株、七日热群七日热型156株、澳洲群澳洲型620株以及塞马伦群帕托克型Patoc Ⅰ株等5株钩体外膜进行分析。检测到具有免疫保护作用和抑制钩体粘附作用的单克隆... 作者采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹技术,对黄疸出血群赖型017株和601株、七日热群七日热型156株、澳洲群澳洲型620株以及塞马伦群帕托克型Patoc Ⅰ株等5株钩体外膜进行分析。检测到具有免疫保护作用和抑制钩体粘附作用的单克隆抗体E_4B_7D_5能特异地识别赖型017株和601株钩体外膜的34.5kd和39.5kd两条蛋白带,而同其余3株钩体外膜蛋白无反应。由此提示该两条蛋白带可能为钩体外膜保护性抗原。 展开更多

关键词 钩端螺旋体 单克隆抗体 抗原

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国内钩端螺旋体病的流行特征与外膜菌苗研究进展 被引量：5

14

作者 余录根 《预防医学论坛》 2006年第1期69-71,共3页

关键词 钩端螺旋体病 外膜菌苗 流行特征 弥漫性出血 国内 肝肾功能衰竭 临床表现 急性传染病 死亡病人 不同程度

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钩端螺旋体疫苗大面积接种的流行病学效果 被引量：5

15

作者 严有望 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2000年第3期188-189,共2页

目的　评价钩端螺旋体疫苗大面积人群免疫的流行病学效果。方法　采用队列研究方法对重点疫区乡镇钩体流行年份钩体疫苗的保护率和效果指数进行分析。结果　钩体疫苗的保护率为 85 34%～ 10 0 % ,效果指数为 6 82～ 36 5 9。

关键词 钩体端螺旋体疫苗 人群免疫 流行病学效果

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洪水引发钩端螺旋体病新疫源区的探讨分析

16

作者 胡泊新 汪建平 《湖北预防医学杂志》 1999年第2期13-14,共2页

在无钩端螺旋体的区域内，抽查3个被洪水淹没点，从96人血清中，检出19个钩端螺旋体抗体阳性者，感染率为19．79％，3个点分别为14．28％、22．58％、23．33％。其血清几何平均滴度为1：155．65±2．08，菌群分别为黄疸出血群、秋... 在无钩端螺旋体的区域内，抽查3个被洪水淹没点，从96人血清中，检出19个钩端螺旋体抗体阳性者，感染率为19．79％，3个点分别为14．28％、22．58％、23．33％。其血清几何平均滴度为1：155．65±2．08，菌群分别为黄疸出血群、秋季热群和波摩拉群。提示洪水泛滥打破自然生态链后，可引发新的自然疫源区。 展开更多

关键词 钩端螺旋体 洪水 感染率 钩端螺旋体病 流行病学

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钩端螺旋体内毒素,脂多糖对免疫功能的影响

17

作者 严杰 陆淼泉 等 《中国实验临床免疫学杂志》 1989年第1期37-37,共1页

关键词 钩端螺旋体 脂多糖 内毒素

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赖型钩端螺旋体重组DNApCX7的特异性鉴定和限制性内切酶谱分析 被引量：1

18

作者 沈成义 戴保民 《华西医科大学学报》 CSCD 1994年第4期369-374,共6页

本实验将赖型钩端螺旋体（简称钩体）ＤＮＡ基因库的克隆ｐＣＸ７制备成￣（３２）Ｐ－重组ＤＮＡ探针，对８个不同血清群的１７株问号状钩体、双曲钩体ＰａｔｏｃⅠ株以及细螺旋体３０５５株ＤＮＡ进行打点杂交；同时用１５种ＤＮＡ片... 本实验将赖型钩端螺旋体（简称钩体）ＤＮＡ基因库的克隆ｐＣＸ７制备成￣（３２）Ｐ－重组ＤＮＡ探针，对８个不同血清群的１７株问号状钩体、双曲钩体ＰａｔｏｃⅠ株以及细螺旋体３０５５株ＤＮＡ进行打点杂交；同时用１５种ＤＮＡ片断进行限制性内切酶谱分析。结果表明，该重组ＤＮＡ具有问号状钩体种（Ｓｐｅｃｉｅｓ）特异性，但与不同问号状钩体之间的同源性程度有差别；限制性内切酶谱分析发现ｐＣＸ７重组ＤＮＡ片段长约１．７ｋｂ，具有１个Ｂｇ１Ⅱ识别位点和３个ＢｓｔＢ１识别位点。 展开更多

关键词 钩端螺旋体 DNA 限制性内切酶谱 重组质粒

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钩端螺旋体CPL5x、BMD－3A、BMD－10基因转录表达的初步研究

19

作者 张明 鲍朗 +1 位作者 阎蓉华 李胜富 《华西医科大学学报》 CSCD 1994年第4期365-368,共4页

经氯化锂—脲提取ＲＮＡ的方法提取钩端螺旋体（钧体）赖型０１７株的总ＲＮＡ，用生物素标记的钩体保护基因ＢＭＤ－３Ａ、ＢＭＤ－１０、问号钩体种特异性基因ＣＰＬ５ｘ及赖型钩体０１７株总ＤＮＡ作为探针，分别与所提取的总ＲＮＡ... 经氯化锂—脲提取ＲＮＡ的方法提取钩端螺旋体（钧体）赖型０１７株的总ＲＮＡ，用生物素标记的钩体保护基因ＢＭＤ－３Ａ、ＢＭＤ－１０、问号钩体种特异性基因ＣＰＬ５ｘ及赖型钩体０１７株总ＤＮＡ作为探针，分别与所提取的总ＲＮＡ进行斑点杂交。结果显示：以上探针均出现了不同强弱的杂交信号，证明了ＢＭＤ－３Ａ、ＢＭＤ－１０、ＣＰＬ５ｘ三个特异性基因片段在０１７株钩体中得到了转录表达，提示其可能分别在钩体免疫保护及钩体种特异性鉴定中具有重要作用。 展开更多

关键词 钩端螺旋体 基因 转录表达 斑点杂交 RNA

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幽门螺杆菌菌苗研制

20

作者 史久华 《国外医学（预防．诊断．治疗用生物制品分册）》 1998年第1期14-16,共3页

本文从动物模型、保持性抗原、预防性和治疗性免疫策略、保护性免疫基础、研制更有效的候选菌苗的新策略以及把沙门菌减毒株用作活菌苗载体方面,介绍了幽门螺杆菌菌苗研究进展.

关键词 幽门螺杆菌 菌苗 动物模型 保护性免疫 研制

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