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丙型肝炎病毒E2蛋白结合蛋白的酵母双杂交筛选研究 被引量：7
1
作者 张健 成军 +5 位作者 王琳 邵清 陆荫英 梁耀东 陈天艳 洪源 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第9期766-767,共2页
HCV的包膜蛋白E2 (E2 )的生物学特性与HCV感染的慢性化和抗病毒免疫关系极为密切。为了进一步阐明这个多功能蛋白质与宿主蛋白的关系 ,采用酵母双杂交系统 3,在酵母细胞融合蛋白表达型人肝cDNA文库中进行筛选 ,得到 76个与E2特异性结合... HCV的包膜蛋白E2 (E2 )的生物学特性与HCV感染的慢性化和抗病毒免疫关系极为密切。为了进一步阐明这个多功能蛋白质与宿主蛋白的关系 ,采用酵母双杂交系统 3,在酵母细胞融合蛋白表达型人肝cDNA文库中进行筛选 ,得到 76个与E2特异性结合的阳性克隆 ,包括人类肝细胞癌相关抗原、硒结合蛋白、核苷传送系统、果糖磷酸激酶等 2 6种已知功能蛋白质基因和 14个未知功能基因。本研究结果为阐明E2在HCV致病中的作用提供了重要研究线索。 展开更多
关键词 肝炎病毒 丙型 病毒包膜蛋白质类 酵母双杂交
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丙型肝炎病毒非结构蛋白5B结合蛋白的酵母双杂交筛选研究 被引量：6
2
作者 张健 成军 +5 位作者 王琳 邵清 陆荫英 梁耀东 陈天艳 洪源 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第9期768-770,共3页
目前认为丙型肝炎病毒 (HCV)的非结构蛋白 5B(NS5B)是病毒复制酶 ,但是对其生物学特性还不十分清楚 ,我们应用酵母双杂交系统 3,构建NS5B诱饵质粒 ,转化酵母AH10 9,与含人肝细胞cDNA文库质粒的酵母Y187进行配合 ,于涂有X α gal营养缺... 目前认为丙型肝炎病毒 (HCV)的非结构蛋白 5B(NS5B)是病毒复制酶 ,但是对其生物学特性还不十分清楚 ,我们应用酵母双杂交系统 3,构建NS5B诱饵质粒 ,转化酵母AH10 9,与含人肝细胞cDNA文库质粒的酵母Y187进行配合 ,于涂有X α gal营养缺陷型培养基(SD/ Trp Leu His Ade)上筛选生长。挑选蓝色克隆 ,筛选出 33个与NS5B特异性相互作用的克隆 ,其中有 31个已知功能基因及 2个未知功能基因。所克隆到的基因对以后研究NS5B的功能有一定的提示作用 ,并为研究这些能与NS5B相互作用的基因在肝细胞中的生理功能奠定了基础。 展开更多
关键词 肝炎病毒 丙型 病毒非结构蛋白质类 酵母双杂交
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丙型肝炎病毒非结构蛋白5A结合蛋白37基因的克隆化研究 被引量：2
3
作者 王琳 李克 +7 位作者 成军 张健 邵清 梁耀东 陈天艳 刘妍 钟彦伟 洪源 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第9期771-773,I001,共4页
丙型肝炎病毒 (HCV)非结构蛋白 5A(NS5A)可与多种细胞内蛋白发生结合 ,涉及调节细胞生长、干扰素耐受、脂质代谢和其他细胞内信号转导通路。本实验通过酵母双杂交技术筛选得到一个与NS5A相结合的未知功能蛋白基因 ,命名为NS5ABP37,根据G... 丙型肝炎病毒 (HCV)非结构蛋白 5A(NS5A)可与多种细胞内蛋白发生结合 ,涉及调节细胞生长、干扰素耐受、脂质代谢和其他细胞内信号转导通路。本实验通过酵母双杂交技术筛选得到一个与NS5A相结合的未知功能蛋白基因 ,命名为NS5ABP37,根据Gen Bank数据库推定蛋白编码序列的信息 ,应用反转录聚合酶链反应 (PCR)扩增出该基因序列。连接入酵母和真核细胞表达载体表达成功 ,并经回交实验证实NS5A与NS5ABP37的结合作用 ,为进一步研究奠定基础。 展开更多
关键词 基因克隆化 丙型肝炎病毒NS5A 酵母双杂交
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多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2酵母双杂交载体构建及激活检测 被引量：1
4
作者 沈宏杰 杭赛宇 +2 位作者 孙其昌 马珍妮 吴士良 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2005年第3期195-197,共3页
目的:为探讨O糖基化在肿瘤发生发展及转移中的作用,构建pGADT7/ppGalNAc T2载体,并转化酵母AH109进行激活检测。方法:采用PCR技术从pDONR201T2得到ppGalNAc T2全长编码序列,亚克隆至酵母双杂交载体pGADT7,醋酸锂法转染酵母AH109,并进行... 目的:为探讨O糖基化在肿瘤发生发展及转移中的作用,构建pGADT7/ppGalNAc T2载体,并转化酵母AH109进行激活检测。方法:采用PCR技术从pDONR201T2得到ppGalNAc T2全长编码序列,亚克隆至酵母双杂交载体pGADT7,醋酸锂法转染酵母AH109,并进行激活检测。结果:酶切图谱分析和基因测序证实pGADT7/ppGal NAc T2载体构建成功。并转化酵母AH109,激活检测呈阴性。结论:成功构建了pGADT7/ppGalNAc T2载体,并进行了激活检测,为进一步研究ppGalNAc T2的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 酵母双杂交 载体构建 半乳糖转移酶 ppGalNAc-T2 检测 激活 乙酰氨基 多肽 全长编码序列 酶切图谱分析 O-糖基化 PCR技术 发生发展 基因测序 亚克隆 步研究 转化
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微生物学
5
《中国医学文摘（基础医学）》 CSCD 2005年第4期225-230,共6页
日本脑炎病毒E基因与流感病毒HA基因的串联表达及应用；HCV结构蛋白在昆虫细胞中的表达及病毒样颗粒的组装；SARS冠状病毒M基因的克隆及其表达；肠出血性大肠杆菌O157：H7紧密黏附素免疫保护性片段的基因克隆与表达；甲氧西林耐药的金... 日本脑炎病毒E基因与流感病毒HA基因的串联表达及应用；HCV结构蛋白在昆虫细胞中的表达及病毒样颗粒的组装；SARS冠状病毒M基因的克隆及其表达；肠出血性大肠杆菌O157：H7紧密黏附素免疫保护性片段的基因克隆与表达；甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌耐药性及分子流行病学调查；一株西尼罗病毒株的生物学特征研究；JC病毒样颗粒可直接转运进人细胞核；我国HIV-1流行株gp41抗原表位筛选与串联表达；甲肝减毒活疫苗L-A-1疫苗株的核酸序列测定与比较分析；河南省分离的HIV-1B-Thai亚型流行株全基因组克隆及序列分析；HCV抗体检测试剂对血站HCV抗体初筛试剂的评价；巨细胞病毒感染后晚期mRNA表达与细胞病变相关性的研究；狂犬病北京3aG-V生产株的特性研究；丙型肝炎病毒NS5a高免疫原区人工合成多肽抗原性的研究；反义RNA体外抑制丙型肝炎病毒基因表达的研究；逆转录病毒载体介导的HSVtk基因表达及提高重组逆转录病毒滴度的研究；MMP-2、MT-MMP-2在实验性肝纤维化形成和逆转过程中表达的动态研究；北京地区2株人偏肺病毒的P和M蛋白基因序列分析；丙型肝炎病毒不同基因型NS3蛋白的抗原异质性分析；人УδT细胞TCR分子与结核杆菌多肽抗原特异性结合的证据；霍乱弧菌减毒活疫苗候选株IEM109的构建；问号钩端螺旋体内化过程中细胞内游离Ca^2＋水平变化及细胞凋亡；黏膜免疫戊型肝炎试验性疫苗的研究；表达流行性感冒病毒HA基因非复制型重组腺病毒的构建及免疫效果的研究；O157：H7原噬菌体消除菌株的鉴定与分析；结核分枝杆菌潜伏感染相关蛋白ICL的表达及鉴定；钩端螺旋体OmpL1抗原表位预测、克隆和表达；重组超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素B基因的克隆和序列分析；结核分枝杆菌Rv1884基因的克隆、表达及亲和层析纯化；羊瘙痒因子263K经多种途径感染仓鼠的脑外组织PrP^Sc分子和沉积特点研究；流感病毒血凝素基因HA1区的克隆及其真核表达载体的构建；分枝杆菌融合表达ICL-GFP穿梭质粒的构建及鉴定；5-氟胞嘧啶耐药白色念珠菌的DNA与RNA的随机扩增多态性分析；通用引物检测儿童血和脑脊液的6种疱疹类病毒；人类免疫缺陷病毒1型RNA定量参考品的研制；广东2003年末SARS患者冠状病毒抗原抗体动态特征分析。 展开更多
关键词 肠出血性大肠杆菌O157:H7 丙型肝炎病毒NS5A 微生物学 SARS冠状病毒 分子流行病学调查 细胞内游离CA^2+ 人类免疫缺陷病毒1型 金黄色葡萄球菌 甲肝减毒活疫苗
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丙型肝炎病毒的流行病学：对志愿供血者的初步研究
6
作者 Stev.,CE 刘约翰 《美国医学会杂志（中文版）》 1990年第3期133-136,132,共5页
关键词 丙型肝炎病毒 流行病学
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输血后肝炎病例中丙型肝炎的分析 被引量：1
7
作者 刘建京 林秀玉 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 1995年第2期145-147,共3页
７３例输血后肝炎经血清学检测，乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）表面抗原（ＨＢｓＡｇ）和／或抗ＨＢｃ阳性２１例（２８．７７％），抗丙型肝炎病毒抗体（ＨＣＶ）阳性６２例（８４．９３％），显示输血后肝炎以丙型肝炎为主，在６２例输血后... ７３例输血后肝炎经血清学检测，乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）表面抗原（ＨＢｓＡｇ）和／或抗ＨＢｃ阳性２１例（２８．７７％），抗丙型肝炎病毒抗体（ＨＣＶ）阳性６２例（８４．９３％），显示输血后肝炎以丙型肝炎为主，在６２例输血后丙肝中，８２．２６％的患者输血或输血浆后６个月内血清抗ＨＣＶ阳转；输全血组与输血浆组比较，输注量与输血后丙型肝炎的发生无关。提示血浆比全血更易传播丙型肝炎。部分随访病例说明丙型肝炎慢性化趋势较高。 展开更多
关键词 输血后肝炎 病毒性肝炎 丙型肝炎
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CD81的分子生物学研究进展 被引量：1
8
作者 成军 《国外医学（分子生物学分册）》 CSCD 2000年第3期174-177,共4页
CD81是一种分子量为26kD的四跨膜蛋白分子。在细胞膜上可与CD4、CD8、CD19、CD21、CD82、Leu13、HLA-DR和α3β1整合素等结合,调节跨膜信号转导。最近又证实CD81可与丙型肝炎病毒(HCV)包膜糖蛋白E2结合,可能是HCV感染靶细胞的受体蛋白。
关键词 CD81 丙型肝炎病毒 受体 包膜糖蛋白E2
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