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胰高血糖素样肽-1受体基因多态性的研究进展
1
作者 刘畅 鲍晓雪 +2 位作者 刘辉明 田雅玮 李玉坤 《临床荟萃》 2025年第1期90-96,共7页
胰高血糖素样肽-1受体(glucagon-like peptide-1 receptor, GLP-1R)与胰高血糖素样肽-1特异性结合,参与激素信号接收和受体激活,在不同组织中均起着重要作用。近年来研究发现,GLP-1R单核苷酸多态性与多种疾病有关,在糖代谢、脂代谢、神... 胰高血糖素样肽-1受体(glucagon-like peptide-1 receptor, GLP-1R)与胰高血糖素样肽-1特异性结合,参与激素信号接收和受体激活,在不同组织中均起着重要作用。近年来研究发现,GLP-1R单核苷酸多态性与多种疾病有关,在糖代谢、脂代谢、神经精神调节和骨代谢等方面具有重要作用。本文对主要的GLP-1R单核苷酸多态性(rs6923761、rs3765467、rs1042044和rs10305420)在相关疾病发病机制中的作用进行综述,为疾病的发病机制、基因诊断筛查和治疗提供依据。 展开更多
关键词 基因 多态性 单核苷酸 胰高血糖素样肽-1受体 疾病
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靶向敲低腺苷转运体1通过降低炎症反应对阿尔茨海默病的保护作用研究 被引量：1
2
作者 张效源 马子腾 +1 位作者 贾云芳 贺桂琼 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第23期2588-2598,共11页
目的 通过构建腺苷转运体1(equilibrative nucleotide transporter 1,ENT1)过表达和敲低质粒,观察ENT1对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的影响及可能的机制。方法 利用分子克隆的方式构建ENT1过表达质粒pAAV-ENT1-mCherry和敲... 目的 通过构建腺苷转运体1(equilibrative nucleotide transporter 1,ENT1)过表达和敲低质粒,观察ENT1对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的影响及可能的机制。方法 利用分子克隆的方式构建ENT1过表达质粒pAAV-ENT1-mCherry和敲低质粒pAAV-ENT1shRNA-ZsGreen。将过表达质粒转染入小鼠神经元N2A细胞,将敲低质粒转染入含瑞士家族人APP695的N2A细胞(N2A-APP)。结合real-time qPCR和Western blot分别检测ENT1 mRNA和蛋白表达及炎症因子的变化,通过CCK-8试剂盒检测对细胞活性的影响。结果 测序和real-time qPCR验证结果显示小鼠ENT1过表达和敲低质粒已成功构建。CCK-8检测结果显示,过表达ENT1水平24 h内细胞存活率显著下调(P<0.05),而当敲低ENT1时细胞存活率显著上调(P<0.01)。Real-time qPCR检测进一步发现,ENT1过表达可引起细胞内炎症因子IL-1β、TNF-α、C1q-a和C1q-b水平的显著上调(P<0.05),而敲低ENT1时可逆转N2A-APP细胞内炎症因子水平的上调(P<0.05)。结论 靶向敲低ENT1的蛋白水平可通过降低炎症反应从而减轻AD的病理改变,ENT1可能是AD病理机制的一个潜在靶点。 展开更多
关键词 腺苷转运体1 阿尔茨海默病 炎症因子 细胞活力
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重组腺病毒介导的p53基因对肝癌细胞生长抑制作用的研究 被引量：12
3
作者 张沁宏 王东 +3 位作者 牟江洪 李增鹏 卿毅 杨宇馨 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期121-124,共4页
目的探索p53基因在肝癌基因治疗方面的可行性。方法以人肝癌细胞系SMCC-7721为实验对象,将载有人野生型p53cDNA的重组腺病毒(Ad-p53)感染SMCC-7721细胞及肿瘤组织,体外体内实验观察Ad-p53对SMCC-7721细胞生长的影响。结果Ad-p53对SMMC-7... 目的探索p53基因在肝癌基因治疗方面的可行性。方法以人肝癌细胞系SMCC-7721为实验对象,将载有人野生型p53cDNA的重组腺病毒(Ad-p53)感染SMCC-7721细胞及肿瘤组织,体外体内实验观察Ad-p53对SMCC-7721细胞生长的影响。结果Ad-p53对SMMC-7721细胞的抑制作用与感染浓度有关,MOI值越高,抑制作用越强。当Ad-p53在100MOI效靶比时,SMCC-7721细胞基本达到完全抑制。感染2d后P53蛋白表达达到高峰,SMCC-7721生长受到明显的抑制。瘤内注射Ad-p53后,荷瘤裸鼠的肿瘤体积明显减小。结论Ad-p53转导野生型p53基因可能是一种有效的肝癌基因治疗途径。 展开更多
关键词 肝癌 腺病毒 P53 基因治疗 生长抑制作用
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趋化因子受体CXCR7对人乳腺癌细胞生长、凋亡及细胞周期的影响 被引量：8
4
作者 郑科 厉红元 +4 位作者 苏新良 王小毅 谭金祥 孔令全 任国胜 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第20期2005-2008,共4页
目的通过构建CXCR7短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)序列的真核表达载体,探讨趋化因子受体CXCR7对人乳腺癌细胞MDA-MB-435s增殖、凋亡、周期的影响。方法针对CXCR7构建编码shRNA序列的重组表达载体;分别用RT-PCR和Westernblot检测C... 目的通过构建CXCR7短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)序列的真核表达载体,探讨趋化因子受体CXCR7对人乳腺癌细胞MDA-MB-435s增殖、凋亡、周期的影响。方法针对CXCR7构建编码shRNA序列的重组表达载体;分别用RT-PCR和Westernblot检测CXCR7mRNA及蛋白表达水平;MTT法检测细胞增殖;TUNEL法检测细胞凋亡;流式细胞术检测细胞周期。结果构建针对CXCR7短发夹状RNA序列的表达载体,经酶切及测序证实与设计完全一致;将2个CXCR7shRNA载体(CXCR7-shRNA1;CXCR7-shRNA2)转染MDA-MB-435s细胞后,CXCR7mRNA及蛋白平均降低;抑制CXCR7的表达后,CXCR7-shRNA组细胞增殖率明显下降(P<0.05),细胞凋亡增多(P<0.05),细胞周期无明显改变。结论重组表达载体CXCR7-shRNA1、CXCR7-shRNA2能有效抑制靶基因CXCR7的表达,进而可抑制人乳腺癌MDA-MB-435s细胞的增殖,促进细胞凋亡,而对细胞周期无明显影响。 展开更多
关键词 人乳腺癌细胞 细胞周期 凋亡 CXCR7 SHRNA
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博尔纳病病毒荧光定量套式RT-PCR检测方法的建立 被引量：15
5
作者 徐平 谢鹏 +1 位作者 邹德智 左联 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2003年第6期688-691,696,共5页
目的 :建立博尔纳病病毒 (BDV)荧光定量套式RT -PCR检测方法 ,为快速、准确地定量检测BDV奠定基础。方法 :根据BDVP2 4基因序列 ,设计并合成引物和荧光标记探针。将PCR扩增的BDVP2 4基因片段克隆入载体 ,重组质粒经筛选、鉴定后 ,作为... 目的 :建立博尔纳病病毒 (BDV)荧光定量套式RT -PCR检测方法 ,为快速、准确地定量检测BDV奠定基础。方法 :根据BDVP2 4基因序列 ,设计并合成引物和荧光标记探针。将PCR扩增的BDVP2 4基因片段克隆入载体 ,重组质粒经筛选、鉴定后 ,作为阳性模板 ,用于标准曲线的制定和样品检测。结果 :应用量组质粒制作的定量曲线循环阈值与模板具有良好的线性关系 ,相关系数为 0 .998,建立了检测BDV的荧光定量套式RT -PCR方法。检测 5 8例神经精神病患者及 5 0例健康人外周血单核细胞 (PBMC)中BDVP2 4基因片段 ,3例精神分裂症及l例帕金森病患者呈阳性 ,其余均为阴性。结论 :荧光定量套式RT -PCR方法能够避免PCR后处理导致的假阳性污染 ,并实现准确定量 ,对于研究BDV感染与人类神经精神疾病的关系有很好的应用价值。 展开更多
关键词 博尔纳病病毒 基因 病毒 聚合酶链反应
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人子宫内膜细胞的纯化和培养 被引量：20
6
作者 戈一峰 黄宇烽 +2 位作者 胡毓安 崔英霞 刘琦 《医学研究生学报》 CAS 2005年第6期496-498,i015,共4页
目的:本研究旨在建立一套子宫内膜细胞体外培养和贮存传代的方法,为进一步对其进行抗原组分研究奠定基础。方法:用胶原酶消化和铜网过筛法分离子宫内膜基质细胞和上皮细胞,进行单层培养。结果:子宫内膜上皮细胞和基质细胞分别经角蛋白... 目的:本研究旨在建立一套子宫内膜细胞体外培养和贮存传代的方法,为进一步对其进行抗原组分研究奠定基础。方法:用胶原酶消化和铜网过筛法分离子宫内膜基质细胞和上皮细胞,进行单层培养。结果:子宫内膜上皮细胞和基质细胞分别经角蛋白单抗和波形蛋白单抗组化染色为阳性,腺细胞可持续培养4～6周,传代2～3次。结论:子宫内膜腺体细胞培养方法的建立为减少外科来源的子宫内膜抗原建立了基础。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 子宫内膜细胞 培养
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多重耐药铜绿假单胞菌氨基糖苷类修饰酶基因及qacEΔ1基因检测研究 被引量：10
7
作者 蒋伟 常东 黄志红 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期9-11,共3页
目的探讨多重耐药铜绿假单胞菌(Pa)的耐药机制,为临床使用氨基糖苷类药物治疗Pa感染和消毒灭菌工作提供参考。方法采用琼脂稀释法从临床分离的Pa中筛选出35株多重耐药菌株,用PCR方法检测这些菌株中氨基糖苷类修饰酶编码基因及qacEΔ1基... 目的探讨多重耐药铜绿假单胞菌(Pa)的耐药机制,为临床使用氨基糖苷类药物治疗Pa感染和消毒灭菌工作提供参考。方法采用琼脂稀释法从临床分离的Pa中筛选出35株多重耐药菌株,用PCR方法检测这些菌株中氨基糖苷类修饰酶编码基因及qacEΔ1基因存在状况。结果35株Pa中aac(3)Ⅱ、aa(6′)Ⅱ、ant(3″)Ⅰ和ant(2″)Ⅰ等5种氨基糖苷类修饰酶基因检出率分别为48.6%、40.0%、54.3%、45.7%和60.0%,绝大多数菌株携带2种或2种以上的氨基糖苷类修饰酶基因,而qacEΔ1基因检出率也达到94.3%。结论铜绿假单胞菌产生氨基糖苷修饰酶与该菌的多重耐药有密切关系,临床治疗Pa感染应参考药敏试验结果,慎选氨基糖苷类药物;同时在消毒灭菌工作中,不宜继续使用季铵盐类、双胍类等作为常用消毒剂。 展开更多
关键词 假单胞菌 铜绿 抗药性 多药 耐药 氨基糖苷类修饰酶基因 基因 qacEΔl
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LR3057位基因多态性与2型DM和肥胖及血脂的关系 被引量：8
8
作者 唐晓君 卢仙娥 +2 位作者 张素华 李启富 李萍 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第15期1596-1598,共3页
目的探讨瘦素受体(leptin receptor,LR)基因第20外显子基因变异与2型糖尿病(d iabetes m ellitus,DM)和肥胖及血脂的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性酶切片段长度多态性(PCR-RFLP)方法,对134例血标本检测了瘦素受体基因第20外显子+3 ... 目的探讨瘦素受体(leptin receptor,LR)基因第20外显子基因变异与2型糖尿病(d iabetes m ellitus,DM)和肥胖及血脂的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性酶切片段长度多态性(PCR-RFLP)方法,对134例血标本检测了瘦素受体基因第20外显子+3 057位核苷酸基因多态性,并分析其与2型DM及肥胖的关系。结果对75例2型DM病人和59例血糖正常者检测LR基因+3 057位核苷酸G→A的变异频率,总变异频率为82.09%,其中DM组为87.33%,正常对照组为75.42%(P<0.05),OR=2.25。DM患者中AA型频率显著高于对照组,而GA型频率低于对照组,病例组中未见GG型频率(趋势χ2=6.77,P<0.01),按BM I及WHR划分,未见其基因变异与肥胖的关系。AA基因型组甘油三酯、收缩压、舒张压高于GA型组,而高密度脂蛋白低于GA型组(P<0.05)。结论重庆地区存在LR基因第20外显子+3 057位核苷酸基因变异,它可能是该地区人群2型DM的遗传易感标记,A等位基因与2型DM及高血压、高血脂发病有一定的关系。 展开更多
关键词 2型糖尿病 瘦素受体 基因多态性
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APE1 siRNA表达载体的构建及其对骨肉瘤细胞APE1表达的抑制作用 被引量：4
9
作者 王东 仲召阳 +3 位作者 李增鹏 张沁宏 卿毅 杨宇馨 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期97-100,共4页
目的 构建DNA损伤修复基因脱嘌呤／脱嘧啶核酸内切酶APE1 siRNA表达载体pSilence APE1，观察其对骨肉瘤细胞HOS和9901APE1蛋白表达的抑制作用。方法 设计合成APE1 siRNA cDNA序列与线性化pSilence2．0．U6质粒连接后构建APE1 siRNA表达... 目的 构建DNA损伤修复基因脱嘌呤／脱嘧啶核酸内切酶APE1 siRNA表达载体pSilence APE1，观察其对骨肉瘤细胞HOS和9901APE1蛋白表达的抑制作用。方法 设计合成APE1 siRNA cDNA序列与线性化pSilence2．0．U6质粒连接后构建APE1 siRNA表达载体pSilence APE1，经酶切鉴定和测序确认。应用免疫组化检测骨肉瘤细胞APE1蛋白的表达，同时应用免疫印迹检测其对APE1基因的敲低作用的量效和时效关系。结果 通过双酶切鉴定和测序分析，成功构建了APE1 siRNA表达载体。免疫组化和免疫印迹证实pSilence APE1对骨肉瘤细胞APE1基因具有特异性“敲低”作用，其抑制APE1基因表达效率为72%-95％，而且其抑制作用以3.0μg pSilence APE1转染第3天最为显著。结论 成功构建了APE1 siRNA表达载体pSilence APE1 ，并且该载体能有效地敲低骨肉瘤细胞APE1基因表达。 展开更多
关键词 骨肿瘤 RNA干扰 脱嘌呤 脱嘧啶核酸内切酶 抑制作用
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4种罕见β-地中海贫血基因检测膜条的制备及其临床应用 被引量：8
10
作者 黄海龙 方颖迪 +5 位作者 林娜 陈雪美 郭丹华 王燕 林元 徐两蒲 《中国妇幼保健》 CAS 2016年第1期127-129,共3页
目的建立4个β-地中海贫血基因罕见突变位点反向杂交膜条的基因诊断方法,以用于临床该疾病罕见样本的检测。方法设计并合成8条探针用于检测在中国人中发现的4个β-地中海贫血基因罕见突变位点,将探针点至醋酸纤维膜上,制成反向杂交膜条... 目的建立4个β-地中海贫血基因罕见突变位点反向杂交膜条的基因诊断方法,以用于临床该疾病罕见样本的检测。方法设计并合成8条探针用于检测在中国人中发现的4个β-地中海贫血基因罕见突变位点,将探针点至醋酸纤维膜上,制成反向杂交膜条;通过检测4种罕见临床样本和30份临床阴性标本,对其临床检测效果进行评价。结果共制备了含8条寡核苷酸探针的反向杂交膜条,临床验证结果表明,均能检测出这4种罕见的基因突变位点,而阴性标本未检测出。结论研制的针对4个β-地中海贫血基因罕见突变位点反向杂交膜条敏感度高,特异性好,能准确检测4个β-地中海贫血基因罕见突变的标本,可临床推广应用。 展开更多
关键词 Β地中海贫血 基因检测 膜条
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ERK信号通路阻断剂PD98059对心肺复苏后大鼠远期生存和脑组织活性氧的影响 被引量：5
11
作者 卓晓军 李诺 +3 位作者 覃涛 阮氏芳英 谢露 陈蒙华 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期150-153,共4页
目的探索细胞外信号调节激酶（ERK）信号通路阻断剂PD98059（PD）对心脏骤停／心肺复苏（CA／CPR）后大鼠远期生存和脑组织活性氧（ROS）的影响。方法第一部分：采用经食道交流电刺激的方法诱导大鼠发生心室颤动（VF）、建立CA／CPR模... 目的探索细胞外信号调节激酶（ERK）信号通路阻断剂PD98059（PD）对心脏骤停／心肺复苏（CA／CPR）后大鼠远期生存和脑组织活性氧（ROS）的影响。方法第一部分：采用经食道交流电刺激的方法诱导大鼠发生心室颤动（VF）、建立CA／CPR模型，恢复自主循环（ROSC）的32只大鼠随机分成两组（每组n=16），分别给予PD（0．3mg／kg，干预组）和等体积的生理盐水（对照组）；比较ROSC后72h内两组大鼠的生存情况。第二部分：另选SD大鼠72只随机分为三组（每组n=24），分别为假手术组、对照组和干预组，每组再观察ROSC后12、24、48、72h四个时间点，每个时间点大鼠6只，取脑组织用激光共聚焦显微镜检测ROS水平。结果①干预组生存时间（44．25±23．28）h较对照组（25．31±23．52）h明显延长（P〈0．05）；干预组大鼠在ROSC后12、24、48和72h累积生存率较对照组升高（P〈0．05）。②干预组和假手术组在12、24、48和72h的ROS水平均较对照组明显降低（P〈0．01），全脑缺血再灌注损伤后ROS于24h达高峰。结论ERK信号通路阻断剂PD可延长CPR后大鼠的生存时间，明显降低脑组织ROS水平，对复苏后动物的远期生存状态的改善有促进作用。 展开更多
关键词 心脏骤停(CA) 心肺复苏(CPR) PD98059(PD) 活性氧(ROS) 生存时间
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沉默CXCR4基因表达抑制胰腺癌增殖和侵袭的体外研究 被引量：3
12
作者 王铮 李徐奇 +4 位作者 徐军 仵正 张东 沙焕臣 马清涌 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期279-283,共5页
目的利用RNAi技术构建CXCR4 shRNA表达载体,观察CXCR4基因干扰后胰腺癌细胞增殖及侵袭能力的变化。方法在不同分化程度胰腺癌细胞株中筛选出CXCR4高表达胰腺癌细胞株,RNAi技术构建CXCR4 shRNA表达载体,转染胰腺癌CXCR4高表达细胞Miapac... 目的利用RNAi技术构建CXCR4 shRNA表达载体,观察CXCR4基因干扰后胰腺癌细胞增殖及侵袭能力的变化。方法在不同分化程度胰腺癌细胞株中筛选出CXCR4高表达胰腺癌细胞株,RNAi技术构建CXCR4 shRNA表达载体,转染胰腺癌CXCR4高表达细胞Miapaca-2并应用G418筛选出稳定表达株,Real-time PCR、Western blot实验观察RNAi对CXCR4基因的抑制效率;MTT实验检测CXCR4基因干扰后胰腺癌细胞增殖,应用Transwell侵袭小室观察CXCR4干扰对胰腺癌细胞侵袭转移力的影响。结果胰腺癌细胞株Miapaca-2 CXCR4表达异常增高,特异性CXCR4基因沉默能够在基因和蛋白水平稳定、高效、特异地抑制CXCR4的表达,抑制效率达70%以上。特异性CXCR4 shRNA能够抑制细胞生长,细胞达到对数生长期的时间延长(P<0.05)。Transwell实验证明CXCR4基因干扰后细胞侵袭能力减低(P<0.05),即使SDF-1的刺激也不能够使细胞侵袭能力增加。结论成功构建了针对胰腺癌细胞CXCR4的siRNA载体;CXCR4基因沉默能抑制胰腺癌细胞增殖、侵袭和成瘤能力。 展开更多
关键词 受体 CXCR4 胰腺肿瘤 细胞增殖 肿瘤侵润 肿瘤转移 细胞系 肿瘤
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用单细胞凝胶电泳技术检测甲醛对小鼠睾丸细胞的DNA损伤 被引量：8
13
作者 董杰影 楼哲丰 +1 位作者 郑重 金龙金 《癌变·畸变·突变》 CAS CSCD 2004年第3期148-150,共3页
背景与目的 :研究甲醛对离体和体内小鼠睾丸细胞DNA的损伤作用。材料与方法 :以6、30、60、120μmol/L甲醛浓度处理离体小鼠睾丸生精细胞 ,以0.2、2、20mg/kg的甲醛腹腔暴露小鼠 ,利用单细胞凝胶电泳检测睾丸生精细胞DNA的损伤作用。结... 背景与目的 :研究甲醛对离体和体内小鼠睾丸细胞DNA的损伤作用。材料与方法 :以6、30、60、120μmol/L甲醛浓度处理离体小鼠睾丸生精细胞 ,以0.2、2、20mg/kg的甲醛腹腔暴露小鼠 ,利用单细胞凝胶电泳检测睾丸生精细胞DNA的损伤作用。结果 :甲醛在6μmol/L时就可以使小鼠离体睾丸细胞产生DNA损伤 ,与阴性对照不同(除tailmoment外) ,并随浓度增加DNA迁移也相应增加 ,到30μmol/L时DNA损伤最为明显 ,但随浓度升高DNA迁移反而减少 ,当甲醛浓度为120μmol/L时DNA迁移与阴性对照相似。腹腔注射0.2、2mg/kg的甲醛组小鼠睾丸细胞DNA迁移高于对照组 ,0.2mg/kg组DNA迁移最为明显。结论 :甲醛对小鼠睾丸细胞具有遗传性损伤 ,低剂量时是以细胞DNA断裂损伤为主 。 展开更多
关键词 单细胞凝胶电泳 甲醛 DNA损伤 睾丸
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新基因HA117最佳siRNA的筛选及重组腺病毒构建 被引量：3
14
作者 郑改焕 金先庆 +3 位作者 罗庆 郭玉霞 宿玉玺 徐酉华 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期641-643,共3页
目的验证pSOS-HUS筛选目的基因最佳siRNA的效果,应用pSOS-HUS筛选新基因HA117最佳siRNA,构建携带HA117基因最佳siRNA转录模板DNA的重组腺病毒。方法构建携带HA117基因及其siRNA模板DNA链的双克隆质粒。把双克隆质粒分别转染293细胞,通... 目的验证pSOS-HUS筛选目的基因最佳siRNA的效果,应用pSOS-HUS筛选新基因HA117最佳siRNA,构建携带HA117基因最佳siRNA转录模板DNA的重组腺病毒。方法构建携带HA117基因及其siRNA模板DNA链的双克隆质粒。把双克隆质粒分别转染293细胞,通过镜下观察、流式细胞仪检测比较绿色荧光表达强度,RT-PCR检测HA117基因mRNA表达,筛选鉴定基因HA117最佳siRNA。构建HA117基因RNA干扰重组腺病毒。结果从5对模板DNA链中筛选出最有效片段HAi5,构建携带HAi5的重组腺病毒。结论载体pSOS-HUS可快捷有效地筛选目的基因的最佳siRNA;在5对模板DNA中,HAi5转录的siRNA对新基因HA117干扰效果最强;成功构建携带HAi5的重组腺病毒。 展开更多
关键词 HA117基因 pSOS—HUS RNA干扰 多药耐药
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多重荧光定量PCR快速检测缺失型α地中海贫血 被引量：3
15
作者 彭建明 陈艳玲 +3 位作者 官燕飞 袁春雷 张艳芳 范汉恭 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1195-1196,共2页
目的采用多重荧光定量PCR技术快速检测缺失型α地中海贫血(以下简称α地贫),初步评价其诊断性能,并探讨该体系应用于临床基因诊断的可行性。方法采用多重荧光定量PCR体系检测300份,采用gap-PCR和β地中海贫血(以下简称β地贫)点突变反... 目的采用多重荧光定量PCR技术快速检测缺失型α地中海贫血(以下简称α地贫),初步评价其诊断性能,并探讨该体系应用于临床基因诊断的可行性。方法采用多重荧光定量PCR体系检测300份,采用gap-PCR和β地中海贫血(以下简称β地贫)点突变反向点杂交法确定基因型的正常及地中海贫血标本,其中150例为α地贫标本,100例基因型为αα/αα的正常样本,50例为β地贫标本。结果多重荧光定量PCR在150例α地贫样本及100例正常样本的检测结果与gap-PCR符合率均达到100%,50例β地贫标本,有49例检测结果与gap-PCR一致,有1例gap-PCR报告为αα/αα的标本,多重荧光定量PCR报告为α1以及α2各仅有一个拷贝,经多重连接探针扩增技术证实为--THAI/αα。结论多重荧光定量PCR是一种快速、简便和可靠的缺失型α地中海贫血检测技术。 展开更多
关键词 TAQMAN探针 缺失型 Α地中海贫血 多重荧光定量PCR
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瘦素及其受体系统在小鼠胚泡着床过程中子宫内膜的表达 被引量：3
16
作者 骆明勇 杨戎 +1 位作者 王应雄 刘孝云 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2005年第3期405-408,共4页
目的:探讨瘦素(leptin)及其受体(Ob-Rb)在小鼠胚泡着床过程中子宫内膜的表达规律,以明确其在胚泡着床过程中的可能作用。方法:采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),检测小鼠胚泡着床过程中子宫内膜leptin及其受体(Ob-Rb)的表达。结果:... 目的:探讨瘦素(leptin)及其受体(Ob-Rb)在小鼠胚泡着床过程中子宫内膜的表达规律,以明确其在胚泡着床过程中的可能作用。方法:采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),检测小鼠胚泡着床过程中子宫内膜leptin及其受体(Ob-Rb)的表达。结果:leptin在胚泡着床过程中在小鼠子宫内膜也都有表达,各时期的表达水平差异不明显(P>0.05);Ob-Rb在胚泡着床过程中在小鼠子宫内膜也都有表达,各时期的表达水平差异(P<0.01),且在孕期第4天表达水平最高,在5到7天仍然维持在一定水平。结论:瘦素及其受体(Ob-Rb)可能在胚泡着床过程中发挥作用,同时也可能参与着床后胚胎的生长发育。 展开更多
关键词 瘦素 瘦素受体 瘦素长型受体 子宫内膜 着床 基因表达
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BrdU标记人脐带间充质干细胞及对细胞生物学行为影响的体外研究 被引量：3
17
作者 高黎 祝华 +3 位作者 张荣 王莉佳 邹琳 符州 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1617-1621,共5页
目的:探讨5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-bromo-2-deoxyuridine,Brd U)标记人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,h UC-MSCs)的方法及其对细胞存活、增殖以及凋亡的影响。方法:将h UC-MSCs分离培养并进行细胞表面标... 目的:探讨5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-bromo-2-deoxyuridine,Brd U)标记人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,h UC-MSCs)的方法及其对细胞存活、增殖以及凋亡的影响。方法:将h UC-MSCs分离培养并进行细胞表面标志物及多向分化潜能鉴定,取第5代细胞以终浓度分别为10、15、20、25μmol/L Brd U进行标记,采用空白Brd U作为对照组,分别培养24、48、72 h及96 h后,台盼蓝排斥实验检测细胞活力;MTT法检测细胞增殖能力;Annexin V-FITC检测细胞存活率及凋亡率,免疫组化法检测各组标记率。结果:台盼蓝排斥实验检测细胞活力都在96%以上,实验组与对照组比较均无统计学意义(不同浓度组间比较P=0.89,各时间点比较P=0.61,时间与不同浓度的交互作用P=0.89)。MTT结果显示Brd U对细胞增殖无抑制(P>0.05)。不同浓度标记组间细胞增殖率及凋亡率的差异(增殖率F=12.02,P<0.001,凋亡率F=6.14,P=0.009)。结论:Brd U标记h UC-MSCs是安全可靠的,Brd U标记h UC-MSCs的最佳剂量和时间为20μmol/L、72 h,适于h UC-MSCs在临床前实验研究的体内示踪。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 5-溴脱氧尿嘧啶核苷 增殖 凋亡
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自动化精子分析仪SQA-V与传统手工法精子计数的比较研究 被引量：4
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作者 戈一峰 汪春晖 +5 位作者 邵永 姚兵 吴丹 夏欣一 商学军 黄宇烽 《医学研究生学报》 CAS 2008年第12期1290-1293,共4页
目的:评估自动化精子质量分析仪SQA-V与传统手工法精子计数之间各主要参数的差异性及其在不育和生育男性精子质量分析中的应用。方法:用SQA-V系统和手工法对15例生育志愿者和53例临床不育患者新鲜精液标本以及乳胶质控珠进行检测,分别... 目的:评估自动化精子质量分析仪SQA-V与传统手工法精子计数之间各主要参数的差异性及其在不育和生育男性精子质量分析中的应用。方法:用SQA-V系统和手工法对15例生育志愿者和53例临床不育患者新鲜精液标本以及乳胶质控珠进行检测,分别将精子密度进行相关性分析及准确度评价。结果:不育组和生育组男性各项指标间存在显著差异,两种分析检测方法精子密度(rc=0.870,P<0.01)具有很好的一致性。结论:与传统手工法精子计数比较,SQA重复性更好,主要参数具有较好的一致性,能够反映临床不同组群患者精液的差异性。 展开更多
关键词 精子质量分析仪 不育 精子质量分析
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过氧化物酶增殖体激活受体γ2转基因小鼠的制作及其影响因素分析 被引量：2
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作者 赵四海 楚雍烈 +5 位作者 郑华东 杨鹏辉 陈正兰 朱虹 范江霖 刘恩岐 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期134-137,共4页
目的分析影响转基因小鼠制作的因素,优化转基因动物制作过程,建立适合本实验室的转基因小鼠制作方法。方法利用显微注射方法制作转基因小鼠,对超数排卵的程序、受精卵的收集、外源基因的显微注射、胚胎移植和术后护理等影响因素都进行... 目的分析影响转基因小鼠制作的因素,优化转基因动物制作过程,建立适合本实验室的转基因小鼠制作方法。方法利用显微注射方法制作转基因小鼠,对超数排卵的程序、受精卵的收集、外源基因的显微注射、胚胎移植和术后护理等影响因素都进行了对比研究。结果优化了转基因小鼠的制作过程,减少了影响胚胎移植成功的不利因素,提高了过氧化物酶增殖体激活受体γ2(PPAR-γ2)转基因小鼠的制作效率(2.9%)。结论成功制作了PPAR-γ2转基因小鼠,优化转基因小鼠的制作程序是提高转基因成功率的可行途径。 展开更多
关键词 过氧化物酶增殖体激活受体γ2 转基因 小鼠 影响因素
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