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尼曼-皮克病1例
1
作者 韩根良 李文海 李六红 《实用全科医学》 2006年第6期715-715,共1页
关键词 尼曼-皮克病 遗传性疾病
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基因变构人白细胞介素-2克隆构建和原核表达 被引量：1
2
作者 郑长青 王斌 +1 位作者 冯国基 钱冬萌 《实用医药杂志》 2005年第1期32-34,共3页
目的构建基因变构IL-2穴88N→R雪的重组克隆熏并将其在原核系统中进行高效表达,为研究基因变构IL-2穴88N→R雪的生物学活性奠定基础。方法分离人体T细胞经PHA刺激活化后,提取细胞的RNA为模板,逆转录构建cDNA文库,经套式PCR扩增出编码IL-... 目的构建基因变构IL-2穴88N→R雪的重组克隆熏并将其在原核系统中进行高效表达,为研究基因变构IL-2穴88N→R雪的生物学活性奠定基础。方法分离人体T细胞经PHA刺激活化后,提取细胞的RNA为模板,逆转录构建cDNA文库,经套式PCR扩增出编码IL-2的基因,插入T-A载体后获得编码天然IL-2的克隆,核苷酸测序证实成功后,自行设计含有突变位点的引物,利用重组PCR技术,进行定点诱变构建基因变构IL-2穴88N→R雪的重组克隆熏DNA测序确认变构成功。将改构后的IL-2基因重组于原核pGEX-4T-2质粒上,转化宿主菌E.coli.DH5α中,经IPTG诱导后表达IL-2变构体,表达产物经SDS-PAGE电泳分析。结果获得了人类天然IL-2的编码基因克隆和基因变构IL-2的编码基因克隆,并将变构IL-2穴88N→R雪在大肠杆菌中获得了高效表达。结论IL-2基因的成功定点变构及其在原核生物中获得稳定高效的表达,为进一步在真核细胞中表达以及研究制备低毒、高效的新型基因变构IL-2药物奠定基础。 展开更多
关键词 白细胞介素-2 基因变构 原核表达 DNA 重组
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严重生精功能障碍患者助孕前遗传学检查的意义 被引量：4
3
作者 周桂香 刘雨生 +3 位作者 骆丽华 童先宏 郭通航 宋影 《中国男科学杂志》 CAS CSCD 2005年第5期26-28,共3页
目的检测严重生精功能障碍患者外周血染色体,为拟行ICSI技术助孕的患者提供遗传咨询。方法按常规方法进行外周血淋巴细胞培养、染色体制备、核型分析。结果61例无精子症患者中有22例染色体核型异常,异常率36.1%;36例严重少精子症患者中... 目的检测严重生精功能障碍患者外周血染色体,为拟行ICSI技术助孕的患者提供遗传咨询。方法按常规方法进行外周血淋巴细胞培养、染色体制备、核型分析。结果61例无精子症患者中有22例染色体核型异常,异常率36.1%;36例严重少精子症患者中有1例染色体异常,异常率2.78%,根据染色体结果及生精功能障碍程度选择不同的诊治方案。结论(1)染色体异常是导致男性生精功能障碍的重要原因之一;(2)ICSI助孕前,夫妇双方须行遗传学检查以避免遗传缺陷后代的出生。 展开更多
关键词 无精子症 严重少精子症 染色体检查 异常核型 单精子卵胞浆内注射术
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玻璃化冷冻对小鼠囊胚线粒体DNA及线粒体相关基因表达影响研究 被引量：1
4
作者 何红梅 蔡炳 +1 位作者 祝文晶 周灿权 《中国实用妇科与产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期588-592,共5页
目的 探讨玻璃化冷冻对小鼠囊胚线粒体DNA（mt DNA）和线粒体相关基因mRNA表达的影响。方法 本研究于2015年6月至2016年1月中山大学北校区实验动物中心完成。将180个小鼠囊胚分成玻璃化冷冻组（n=90）和新鲜组（n=90）,每组30个胚胎用于... 目的 探讨玻璃化冷冻对小鼠囊胚线粒体DNA（mt DNA）和线粒体相关基因mRNA表达的影响。方法 本研究于2015年6月至2016年1月中山大学北校区实验动物中心完成。将180个小鼠囊胚分成玻璃化冷冻组（n=90）和新鲜组（n=90）,每组30个胚胎用于mtDNA D环（D-loop）区测序分析;30个胚胎用于实时荧光定量PCR测mt DNA拷贝数;剩余胚胎用于实时荧光定量PCR检测线粒体转录因子A（Tfam）和DNA聚合酶γ（Polg1和Polg2）的m RNA表达,比较2组碱基突变率和mt DNA拷贝数及线粒体相关基因mRNA表达。结果 对照组和玻璃化冷冻组均未发现碱基突变;对照组和玻璃化冷冻组的胚胎mt DNA平均拷贝数分别为2.9×10^5（s=1.4×10^5）和3.2×10-5（s=1.8×10^5）,差异无统计学意义（P〉0.05）;两组胚胎的3个线粒体相关基因mRNA表达差异均有统计学意义（P〈0.05）,玻璃化冷冻组的3个基因m RNA表达均上调。结论 玻璃化冷冻对小鼠囊胚mtDNA没有影响,但是会引起线粒体相关基因mRNA的表达上调。 展开更多
关键词 玻璃化冷冻 囊胚 线粒体 基因
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