目的构建m asp in/pEFIRES-N表达载体,为深入研究m asp in基因抑制肝癌生长、转移、浸润作用和机制奠定基础。方法PCR扩增m asp in基因全长,将表达载体pEFIRES-N用EcoRⅠ+XbaⅠ进行双酶切后,T4DNA连接酶连接成重组质粒,稳定转染到肝癌...目的构建m asp in/pEFIRES-N表达载体,为深入研究m asp in基因抑制肝癌生长、转移、浸润作用和机制奠定基础。方法PCR扩增m asp in基因全长,将表达载体pEFIRES-N用EcoRⅠ+XbaⅠ进行双酶切后,T4DNA连接酶连接成重组质粒,稳定转染到肝癌高转移细胞株mHCC-97中进行表达,检测稳定转染前后m asp in表达的变化。结果重组质粒在大肠杆菌株JM109内扩增。提纯、纯化后用EcoRⅠ、XbaⅠ酶切鉴定及测序鉴定证明m asp in基因已完整、正确的插入到pEFIRES-N表达载体,并在肝癌MHCC-97细胞中上调了m asp in基因mRNA和蛋白水平表达,抑制了肝癌MHCC-97细胞增殖及浸润。结论成功构建了m asp in/pEFIRES-N表达载体,能在真核细胞中表达。展开更多
为交流“基因组医学”最新的前沿研究成果和探讨“基因组医学”时代的新问题新观点,美国华人遗传学家学会(Association of Chinese Geneticists in America,ACGA)与复旦大学生命科学学院、中国优生优育协会、上海市遗传学会将联合于2...为交流“基因组医学”最新的前沿研究成果和探讨“基因组医学”时代的新问题新观点,美国华人遗传学家学会(Association of Chinese Geneticists in America,ACGA)与复旦大学生命科学学院、中国优生优育协会、上海市遗传学会将联合于2005年6月28~30日举办国际基因组医学大会“ACGA International Sympo-sium on Genome Medicine-In honor of Prof.C.C.Tan”。展开更多
荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)是一种通过带有荧光标记的核苷酸片段,经过变性、复性结合到目的基因片段上,用以获得目的基因信息状态的技术。自20世纪80年代中后期建立以来[1],该技术得到了飞速发展,架起了细...荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)是一种通过带有荧光标记的核苷酸片段,经过变性、复性结合到目的基因片段上,用以获得目的基因信息状态的技术。自20世纪80年代中后期建立以来[1],该技术得到了飞速发展,架起了细胞遗传学和分子生物学的桥梁,在血液病、产前诊断和乳腺癌、膀胱癌、子宫颈癌等实体肿瘤的临床诊断和治疗监测中发挥重要作用[2]。尽管相对于其他诊断方法,FISH具有诸多优势如:荧光试剂和探针经济、安全,探针稳定,一次标记后可在2年内使用且实验周期短、迅速得到结果、特异性好、定位准确,但是传统FISH仍需要过夜杂交(>16 h)以促使荧光信号能够达到判读标准[3-6]。展开更多
2023年7月14日,浙江大学张国捷团队与深圳农业基因组研究所阮珏研究员团队和华大生命科学研究院合作在《细胞研究》(Cell Research)上发表了题为“The complete and fully-phased diploid genome of a male Han Chinese”(DOI:10.1038/s...2023年7月14日,浙江大学张国捷团队与深圳农业基因组研究所阮珏研究员团队和华大生命科学研究院合作在《细胞研究》(Cell Research)上发表了题为“The complete and fully-phased diploid genome of a male Han Chinese”(DOI:10.1038/s41422-023-00849-5)的研究论文,攻关了二倍体完整基因组组装解决方案,完成了首个人类“端粒到端粒”二倍体完整参考基因组“CN1”,为我国精准医学研究及应用提供重要参考数据。展开更多
文摘目的构建m asp in/pEFIRES-N表达载体,为深入研究m asp in基因抑制肝癌生长、转移、浸润作用和机制奠定基础。方法PCR扩增m asp in基因全长,将表达载体pEFIRES-N用EcoRⅠ+XbaⅠ进行双酶切后,T4DNA连接酶连接成重组质粒,稳定转染到肝癌高转移细胞株mHCC-97中进行表达,检测稳定转染前后m asp in表达的变化。结果重组质粒在大肠杆菌株JM109内扩增。提纯、纯化后用EcoRⅠ、XbaⅠ酶切鉴定及测序鉴定证明m asp in基因已完整、正确的插入到pEFIRES-N表达载体,并在肝癌MHCC-97细胞中上调了m asp in基因mRNA和蛋白水平表达,抑制了肝癌MHCC-97细胞增殖及浸润。结论成功构建了m asp in/pEFIRES-N表达载体,能在真核细胞中表达。
文摘为交流“基因组医学”最新的前沿研究成果和探讨“基因组医学”时代的新问题新观点,美国华人遗传学家学会(Association of Chinese Geneticists in America,ACGA)与复旦大学生命科学学院、中国优生优育协会、上海市遗传学会将联合于2005年6月28~30日举办国际基因组医学大会“ACGA International Sympo-sium on Genome Medicine-In honor of Prof.C.C.Tan”。
文摘荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)是一种通过带有荧光标记的核苷酸片段,经过变性、复性结合到目的基因片段上,用以获得目的基因信息状态的技术。自20世纪80年代中后期建立以来[1],该技术得到了飞速发展,架起了细胞遗传学和分子生物学的桥梁,在血液病、产前诊断和乳腺癌、膀胱癌、子宫颈癌等实体肿瘤的临床诊断和治疗监测中发挥重要作用[2]。尽管相对于其他诊断方法,FISH具有诸多优势如:荧光试剂和探针经济、安全,探针稳定,一次标记后可在2年内使用且实验周期短、迅速得到结果、特异性好、定位准确,但是传统FISH仍需要过夜杂交(>16 h)以促使荧光信号能够达到判读标准[3-6]。
文摘2023年7月14日,浙江大学张国捷团队与深圳农业基因组研究所阮珏研究员团队和华大生命科学研究院合作在《细胞研究》(Cell Research)上发表了题为“The complete and fully-phased diploid genome of a male Han Chinese”(DOI:10.1038/s41422-023-00849-5)的研究论文,攻关了二倍体完整基因组组装解决方案,完成了首个人类“端粒到端粒”二倍体完整参考基因组“CN1”,为我国精准医学研究及应用提供重要参考数据。