目的研究布地奈德(BUD)对S100钙结合蛋白A4(S100A4)诱导的肥大细胞活化、炎性因子释放及受体表达的影响。方法8~10周龄野生型(WT)的C57BL/6健康雄性小鼠2只,取胫骨与股骨提取骨髓进行骨髓源肥大细胞(BMMCs)培养,将5 mL PBS注射至小鼠腹...目的研究布地奈德(BUD)对S100钙结合蛋白A4(S100A4)诱导的肥大细胞活化、炎性因子释放及受体表达的影响。方法8~10周龄野生型(WT)的C57BL/6健康雄性小鼠2只,取胫骨与股骨提取骨髓进行骨髓源肥大细胞(BMMCs)培养,将5 mL PBS注射至小鼠腹腔,取腹腔灌洗液以获取腹膜来源的肥大细胞(PMCs);采用S100A4蛋白与BUD处理小鼠BMMCs和PMCs,实验分为PBS组、S100A4组、BUD组及S100A4+BUD组;β-己糖胺酶(β-hex)释放实验检测细胞脱颗粒指标β-hex、ELISA测定细胞活化介质类胰蛋白酶、糜蛋白酶及白三烯B4的释放,流式细胞术编码微球芯片技术(CBA)法检测炎性因子(IL-5、IL-6、IL-13和TNF-α)分泌水平以及Toll样受体4(TLR4)和晚期糖基化终产物受体(RAGE)的表达。结果在BMMCs与PMCs中,与PBS组相比,S100A4组培养上清中β-hex、类胰蛋白酶、白三烯B4及相关炎性因子IL-5、IL-6、IL-13和TNF-α的释放增加,细胞上TLR4和RAGE的表达上调(P<0.05);与S100A4组相比,S100A4+BUD组肥大细胞活化及炎性因子分泌明显被抑制,同时TLR4的表达下调(P<0.05),而RAGE的表达无显著变化(P>0.05)。结论BUD能够抑制S100A4介导的肥大细胞活化及炎性因子释放,并下调TLR4的表达,但不影响RAGE的表达,BUD可能通过TLR-4受体发挥其功能,为BUD在过敏性炎症中的应用提供新的理论依据。展开更多
目的 研究三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)原肌球蛋白(tropomyosin,TM) Por t 4的理化性质、二级结构、B细胞和T细胞的线性表位。方法 利用生物信息学软件UniProt数据库、EXPASY、DNAstar软件、SOPMA、Immunomedicine Group、ABCp...目的 研究三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)原肌球蛋白(tropomyosin,TM) Por t 4的理化性质、二级结构、B细胞和T细胞的线性表位。方法 利用生物信息学软件UniProt数据库、EXPASY、DNAstar软件、SOPMA、Immunomedicine Group、ABCpred、IEDB、SYFPEITHI、Net MHCII和Net MHCIIpan在线工具分析Por t 4的理化性质、蛋白二级结构并预测B细胞表位和T细胞表位。结果 Por t 4为亲水性蛋白,二级结构以α-螺旋为主,无复杂的空间结构,潜在的B细胞表位有^(23)NTLEQQN^(29)、^(36)AEKTEEEIRAT^(46)、^(134)SLS^(136)、^(177)ERAEERAE^(184)、^(210)SEEKANQRE^(218)、^(244)RSV^(246)和^(262)NEKEKY^(267),潜在的T细胞表位有^(82)EGEVAALNRRIQLL^(95)和^(222)KEQIKTLANKLKAA^(235)。结论 本研究通过生物信息学软件分析,在Por t 4蛋白中预测得到7个优势B细胞线性表位和2个优势T细胞线性表位,为进一步开展Por t 4的过敏机制研究提供理论依据。展开更多
肥大细胞(mast cells,MC)是广泛存在于全身皮肤和黏膜组织下的固有免疫细胞,当受到外源或内源性物质激活后,能快速将细胞内的细胞因子、蛋白酶和脂质等活性介质释放到胞外,参与抵抗细菌、病毒和寄生虫感染,以及过敏性炎症反应等。NOD样...肥大细胞(mast cells,MC)是广泛存在于全身皮肤和黏膜组织下的固有免疫细胞,当受到外源或内源性物质激活后,能快速将细胞内的细胞因子、蛋白酶和脂质等活性介质释放到胞外,参与抵抗细菌、病毒和寄生虫感染,以及过敏性炎症反应等。NOD样受体家族含pyrin结构域蛋白3(NOD-like receptor family pyrin domain-containing protein 3,NLRP3)炎症小体作为固有免疫的重要组分,在机体抵抗细菌和病毒感染,以及过敏原引起的炎症反应中具有重要作用,也是治疗各种炎症性疾病潜在的新靶点。虽然MC和NLRP3均在过敏性炎症反应中起着关键性的作用,但是MC的活化、NLRP3激活和表达,以及在过敏性炎症反应之间的调控机制尚不完全明确。因此,该研究通过总结和分析MC活化释放活性介质在调控NLRP3激活和表达在过敏性炎症反应中的作用,以期阐明MC在调控过敏性炎症反应中的机制,将有助于全面了解过敏性炎症反应的信号调控机制,为开发抗炎治疗策略和联合治疗提供理论依据。展开更多
文摘目的研究布地奈德(BUD)对S100钙结合蛋白A4(S100A4)诱导的肥大细胞活化、炎性因子释放及受体表达的影响。方法8~10周龄野生型(WT)的C57BL/6健康雄性小鼠2只,取胫骨与股骨提取骨髓进行骨髓源肥大细胞(BMMCs)培养,将5 mL PBS注射至小鼠腹腔,取腹腔灌洗液以获取腹膜来源的肥大细胞(PMCs);采用S100A4蛋白与BUD处理小鼠BMMCs和PMCs,实验分为PBS组、S100A4组、BUD组及S100A4+BUD组;β-己糖胺酶(β-hex)释放实验检测细胞脱颗粒指标β-hex、ELISA测定细胞活化介质类胰蛋白酶、糜蛋白酶及白三烯B4的释放,流式细胞术编码微球芯片技术(CBA)法检测炎性因子(IL-5、IL-6、IL-13和TNF-α)分泌水平以及Toll样受体4(TLR4)和晚期糖基化终产物受体(RAGE)的表达。结果在BMMCs与PMCs中,与PBS组相比,S100A4组培养上清中β-hex、类胰蛋白酶、白三烯B4及相关炎性因子IL-5、IL-6、IL-13和TNF-α的释放增加,细胞上TLR4和RAGE的表达上调(P<0.05);与S100A4组相比,S100A4+BUD组肥大细胞活化及炎性因子分泌明显被抑制,同时TLR4的表达下调(P<0.05),而RAGE的表达无显著变化(P>0.05)。结论BUD能够抑制S100A4介导的肥大细胞活化及炎性因子释放,并下调TLR4的表达,但不影响RAGE的表达,BUD可能通过TLR-4受体发挥其功能,为BUD在过敏性炎症中的应用提供新的理论依据。
文摘目的 研究三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)原肌球蛋白(tropomyosin,TM) Por t 4的理化性质、二级结构、B细胞和T细胞的线性表位。方法 利用生物信息学软件UniProt数据库、EXPASY、DNAstar软件、SOPMA、Immunomedicine Group、ABCpred、IEDB、SYFPEITHI、Net MHCII和Net MHCIIpan在线工具分析Por t 4的理化性质、蛋白二级结构并预测B细胞表位和T细胞表位。结果 Por t 4为亲水性蛋白,二级结构以α-螺旋为主,无复杂的空间结构,潜在的B细胞表位有^(23)NTLEQQN^(29)、^(36)AEKTEEEIRAT^(46)、^(134)SLS^(136)、^(177)ERAEERAE^(184)、^(210)SEEKANQRE^(218)、^(244)RSV^(246)和^(262)NEKEKY^(267),潜在的T细胞表位有^(82)EGEVAALNRRIQLL^(95)和^(222)KEQIKTLANKLKAA^(235)。结论 本研究通过生物信息学软件分析,在Por t 4蛋白中预测得到7个优势B细胞线性表位和2个优势T细胞线性表位,为进一步开展Por t 4的过敏机制研究提供理论依据。
文摘肥大细胞(mast cells,MC)是广泛存在于全身皮肤和黏膜组织下的固有免疫细胞,当受到外源或内源性物质激活后,能快速将细胞内的细胞因子、蛋白酶和脂质等活性介质释放到胞外,参与抵抗细菌、病毒和寄生虫感染,以及过敏性炎症反应等。NOD样受体家族含pyrin结构域蛋白3(NOD-like receptor family pyrin domain-containing protein 3,NLRP3)炎症小体作为固有免疫的重要组分,在机体抵抗细菌和病毒感染,以及过敏原引起的炎症反应中具有重要作用,也是治疗各种炎症性疾病潜在的新靶点。虽然MC和NLRP3均在过敏性炎症反应中起着关键性的作用,但是MC的活化、NLRP3激活和表达,以及在过敏性炎症反应之间的调控机制尚不完全明确。因此,该研究通过总结和分析MC活化释放活性介质在调控NLRP3激活和表达在过敏性炎症反应中的作用,以期阐明MC在调控过敏性炎症反应中的机制,将有助于全面了解过敏性炎症反应的信号调控机制,为开发抗炎治疗策略和联合治疗提供理论依据。
