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Biomembrane nanostructure-driven potentiation of bacterial protein vaccines:Mechanisms,platforms,and immunotherapeutic advances
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作者 Yuan-Yuan Chen Hui-Fen Qiang +2 位作者 Jie Gao Ting-Lin Zhang Yan Wu 《Infectious Diseases Research》 2026年第1期13-22,共10页
The global burden of bacterial infections,exacerbated by antimicrobial resistance(AMR),necessitates innovative strategies.Bacterial protein vaccines offer promise by eliciting targeted immunity while circumventing AMR... The global burden of bacterial infections,exacerbated by antimicrobial resistance(AMR),necessitates innovative strategies.Bacterial protein vaccines offer promise by eliciting targeted immunity while circumventing AMR.However,their clinical translation is hindered by their inherently low immunogenicity,often requiring potent adjuvants and advanced delivery systems.Biomembrane nanostructures(e.g.,liposomes,exosomes,and cell membrane-derived nanostructures),characterized by superior biocompatibility,intrinsic targeting ability,and immune-modulating properties,could serve as versatile platforms that potentiate vaccine efficacy by increasing antigen stability,enabling codelivery of immunostimulants,and facilitating targeted delivery to lymphoid tissues/antigen-presenting cells.This intrinsic immunomodulation promotes robust humoral and cellular immune responses to combat bacteria.This review critically reviews(1)key biomembrane nanostructure classes for bacterial protein antigens,(2)design strategies leveraging biomembrane nanostructures to enhance humoral and cellular immune responses,(3)preclinical efficacy against diverse pathogens,and(4)translational challenges and prospects.Biomembrane nanostructure-driven approaches represent a paradigm shift in the development of next-generation bacterial protein vaccines against resistant infections. 展开更多
关键词 biomembrane nanostructures bacterial protein vaccines antimicrobial resistance vaccine delivery IMMUNOMODULATION nanovaccines liposomes EXOSOMES cell membrane coating
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过表达miR-134b抑制CD133^+ U87胶质瘤干细胞增殖及侵袭 被引量:3
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作者 刘义锋 张保朝 +6 位作者 温昌明 闻公灵 周国平 张敬伟 贺海发 汪宁 李巍 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期637-642,共6页
目的探讨微小RNA-134b(miR-134b)在胶质瘤干细胞(GSC)中的作用及相关机制。方法实时定量PCR检测U87胶质瘤细胞系分离出的CD133^+ GSC和CD133^- GSC中miR-134b的表达量;包装慢病毒,构建过表达miR-134b的GSC,实时定量PCR检测其miR-134b、C... 目的探讨微小RNA-134b(miR-134b)在胶质瘤干细胞(GSC)中的作用及相关机制。方法实时定量PCR检测U87胶质瘤细胞系分离出的CD133^+ GSC和CD133^- GSC中miR-134b的表达量;包装慢病毒,构建过表达miR-134b的GSC,实时定量PCR检测其miR-134b、CD133、神经干细胞蛋白(nestin)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9和MMP-12 mRNA表达水平;Western blot法检测过表达miR-134b的GSC中Notch2、MMP-2、MMP-9和MMP-12蛋白表达;Transwell^(TM)侵袭实验检测过表达miR-134b对GSC侵袭能力的影响;建立U87细胞裸鼠成瘤模型,皮下注射过表达miR-134b(实验组)及空载体(对照组)的CD133^+ GSC,定期测量肿瘤大小,70 d后处死裸鼠,测定肿瘤质量,以探讨过表达miR-134b对在体肿瘤生长的影响。结果实时定量PCR检测结果表明,与CD133^- GSC相比,CD133^+ GSC中miR-134b表达显著下调;通过慢病毒包装的方法成功构建过表达miR-134b的GSC,其miR-134b的表达显著高于空载体对照细胞,而MMP-2、MMP-9 mRNA及蛋白表达无显著变化,而MMP-12的mRNA及蛋白表达均显著下降;Transwell^(TM)侵袭实验结果表明,与对照组相比,过表达miR-134b抑制CD133^+ GSC的侵袭能力;实验组裸鼠体内肿瘤体积显著低于对照组,与对照组相比,过表达miR-134b的实验组肿瘤质量也降低了42%。结论过表达miR-134b抑制CD133^+ GSC的生长和侵袭。 展开更多
关键词 微小RNA-134b(miR-134b) 基质金属蛋白酶(MMP) U87胶质瘤
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血浆外泌体源性miR-335-5p可作为三阴性乳腺癌诊断指标并抑制免疫逃逸 被引量:5
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作者 陈涛 董亚萍 吴晓雪 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期347-356,共10页
目的本研究旨在探究血浆外泌体源性miR-335-5p调控泛素特异性蛋白酶22(USP22)对三阴性乳腺癌(TNBC)免疫逃逸的影响。方法收集TNBC患者血浆与健康人血浆,之后分离血浆外泌体,实时定量PCR检测外泌体中miR-335-5p的相对表达。双荧光素酶报... 目的本研究旨在探究血浆外泌体源性miR-335-5p调控泛素特异性蛋白酶22(USP22)对三阴性乳腺癌(TNBC)免疫逃逸的影响。方法收集TNBC患者血浆与健康人血浆,之后分离血浆外泌体,实时定量PCR检测外泌体中miR-335-5p的相对表达。双荧光素酶报告实验验证miR-335-5p与USP22的相互作用。调节外泌体、MDA-MB-436细胞中miR-335-5p与USP22的表达,将其与CD8^(+)T淋巴细胞共培养并将其分为不同组。流式细胞术检测各组细胞中细胞凋亡情况,ELISA检测各组细胞γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平。Western blot法检测细胞中USP22对程序性死亡蛋白1配体1(PD-L1)稳定性的影响。裸鼠成瘤实验检测miR-335-5p与PD-L1在体内对肿瘤生长的影响。结果TNBC外泌体样本中miR-335-5p的表达下调。USP22被证实为miR-335-5p的一个靶基因,此外,USP22可以抑制PD-L1蛋白泛素化。过表达miR-335-5p能抑制TNBC的免疫逃逸。抑制miR-335-5p可以促进TNBC的免疫逃逸,该作用可以通过下调USP22得到部分挽救。敲低miR-335-5p能促进体内肿瘤生长,加入PD-L1抗体后肿瘤生长被抑制。结论外泌体源性miR-335-5p通过下调USP22,促进USP22对PD-L1的泛素化,并抑制PD-L1介导的TNBC免疫逃逸。 展开更多
关键词 miR-335-5p 外泌体 泛素特异性蛋白酶22(USP22) 程序性死亡蛋白1配体1(PD-L1) 泛素化 免疫逃逸
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评估VITEK 2 Compact AST-GN335卡测定铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南药敏结果及高级专家系统修正的可靠性
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作者 高征 李晨辉 +2 位作者 王素宁 朱玲 杨靖娴 《标记免疫分析与临床》 2025年第7期1472-1476,共5页
目的评估当VITEK 2 Compact AST-GN335检测铜绿假单胞菌亚胺培南和美罗培南药敏结果不一致时,现用方法和高级专家系统(AES)修正能力的准确性和可靠性。方法收集航天中心医院2023年12月至2024年8月临床分离的237株非重复经AST-GN335药敏... 目的评估当VITEK 2 Compact AST-GN335检测铜绿假单胞菌亚胺培南和美罗培南药敏结果不一致时,现用方法和高级专家系统(AES)修正能力的准确性和可靠性。方法收集航天中心医院2023年12月至2024年8月临床分离的237株非重复经AST-GN335药敏卡检测为亚胺培南和美罗培南药敏结果不一致的铜绿假单胞菌,以纸片扩散法(KB)和微量肉汤稀释法(BMD)作为参考方法,对AST-GN335检测及AES修正结果进行方法学评价。结果与KB法相比,GN335检测237株铜绿假单胞菌的亚胺培南药敏结果经AES修正后虽降低了VME(11.8%vs 4.2%),并提高了ME(8.0%vs 16.0%),但无论修正前后CA均为71.7%(<90%),为不可接受;而GN335检测美罗培南的结果经AES修正前后无明显差异,且两者CA均<40%,为不可接受。进一步对175例GN335法初始报告美罗培南为I的菌株进行分析,以BMD为参考方法,仅12.0%(21/175)为真正的I,AES仅修正了11例(6.3%,11/175)错误I结果。结论当对铜绿假单胞菌采用VITEK 2 Compact AST-GN335进行药敏检测时,若亚胺培南和美罗培南药敏结果不一致,尤其是美罗培南结果为中介时,提示该药敏结果不可靠,需结合KB法和BMD法进行复核。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 VITEK 2 Compact AST-GN335 高级专家系统 微量肉汤稀释法 纸片扩散法
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重组全人抗PD-L1单克隆抗体N糖谱的定性定量分析在其质量控制中的应用研究
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作者 冯蕊 蔡娜 +3 位作者 查萍萍 汪生 许雷鸣 马陶陶 《安徽医药》 2026年第1期78-82,I0003,共6页
目的采用超高效液相色谱-飞行时间高分辨质谱联用技术,对重组全人抗程序性死亡配体-1(PD-L1)单克隆抗体的N糖谱进行定性和定量分析。方法选取2020年3月至2023年3月共11批次重组全人抗PD-L1单克隆抗体[安徽省食品药品检验研究院生物制品... 目的采用超高效液相色谱-飞行时间高分辨质谱联用技术,对重组全人抗程序性死亡配体-1(PD-L1)单克隆抗体的N糖谱进行定性和定量分析。方法选取2020年3月至2023年3月共11批次重组全人抗PD-L1单克隆抗体[安徽省食品药品检验研究院生物制品(药理)室],其中正常批次3批,6个月加速试验正向和倒向放置分别3批,36个月长期试验正向和倒向放置分别1批。采用2-氨基苯甲酰胺(2-AB)标记法,通过高分辨质谱对样品的N糖类型进行定性分析,通过荧光检测器对N糖含量进行定量检测。结果通过高分辨质谱、葡聚糖标准品以及UNIFI数据库比对,各批次样品中共鉴定出10种N糖类型,主要是F(6)A1、A2、F(6)A2、M5等,10种N糖的色谱峰峰形良好且完全分离。F(6)A2为最主要糖型,在6个月加速试验和36个月长期试验的样品中,正向和倒向放置样品,F(6)A2糖型也均达90%以上,糖型差异小,表明胶塞对全人抗PD-L1单克隆抗体无吸附作用。结论重组全人抗PD-L1单克隆抗体的N糖型主要为F(6)A2,药品的生产工艺质量和药品稳定性良好,且重组全人抗PD-L1单克隆抗体和胶塞具有良好的相容性。 展开更多
关键词 抗体 单克隆 程序性死亡配体1(PD-L1) N-聚糖 重组全人抗PD-L1单克隆抗体 超高效液相色谱-飞行时间高分辨质谱(UPLC-TOFHRMS) 稳定性加速试验 质量控制
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miR-204通过下调Bcl-2和Sirt1表达抑制肝癌细胞生长 被引量:17
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作者 李扩 许秋然 +2 位作者 刘欣 刘青光 王茂德 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期168-172,共5页
目的探讨微小RNA 204(miR-204)在肝细胞癌中的表达、临床意义及可能分子机制。方法收集手术切除的60例肝细胞癌及对应癌旁肝组织,实时定量PCR(qRT-PCR)检测miR-204在肝癌及癌旁组织中的表达,免疫组织化学染色检测miR-204下游潜在靶点Bc... 目的探讨微小RNA 204(miR-204)在肝细胞癌中的表达、临床意义及可能分子机制。方法收集手术切除的60例肝细胞癌及对应癌旁肝组织,实时定量PCR(qRT-PCR)检测miR-204在肝癌及癌旁组织中的表达,免疫组织化学染色检测miR-204下游潜在靶点Bcl-2与组蛋白脱乙酰酶1(Sirt1)的表达;用人工合成的miR-204模拟物转染人SMMC-7721肝癌细胞,MTT法及流式细胞术检测SMMC-7721细胞的增殖、凋亡的情况,qRT-PCR、Western blot法分别检测Bcl-2与Sirt1的mRNA和蛋白表达。结果 miR-204在肝癌组织中表达水平显著低于对应癌旁组织;肝癌组织中miR-204低表达与肿瘤大小、肿瘤个数、肿瘤TNM分期显著相关;miR-204低表达组Bcl-2与Sirt1蛋白表达显著高于miR-204高表达组,相关性分析结果显示肝癌组织中miR-204与Bcl-2、Sirt1蛋白表达呈显著负相关;miR-204可显著抑制SMMC-7721细胞的增殖并促进其凋亡,并下调Bcl-2与Sirt1的mRNA与蛋白表达水平。结论 miR-204在肝癌组织中表达下调并与肝癌恶性临床病理特征有关,miR-204抑制肝癌细胞增殖、促进其凋亡的作用可能与下调Bcl-2和Sirt1表达有关。 展开更多
关键词 miR-204 肝细胞癌 凋亡增殖 BCL-2 SIRT1
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过表达microRNA-7通过下调CGG结合蛋白1的表达抑制人肺癌细胞生长 被引量:17
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作者 胡燕 廖珍媛 +7 位作者 陈超 秦娜琳 郑静 田丹 李永菊 朱顺飞 罗军敏 徐林 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期125-130,共6页
目的探讨过表达microRNA-7(miR-7)对人肺癌细胞体内外生长的作用和可能机制。方法利用真核表达载体pcDNA3.1(-)-pri-miR-7(p-miR-7),体外瞬时转染95D人肺癌细胞,MTT法和克隆形成实验检测95D细胞的增殖变化;免疫荧光技术检测95D细胞Ki-67... 目的探讨过表达microRNA-7(miR-7)对人肺癌细胞体内外生长的作用和可能机制。方法利用真核表达载体pcDNA3.1(-)-pri-miR-7(p-miR-7),体外瞬时转染95D人肺癌细胞,MTT法和克隆形成实验检测95D细胞的增殖变化;免疫荧光技术检测95D细胞Ki-67和CGG结合蛋白(CGGBP1)的表达;建立人肺癌裸鼠肿瘤模型,肿瘤局部注射p-miR-7真核表达载体,测量肿瘤大小并观察小鼠生存时间;实时PCR检测肿瘤组织中miR-7表达水平;免疫组织化学技术检测组织中Ki-67和CGGBP1蛋白的表达。结果过表达miR-7可明显抑制肺癌细胞的体外增殖(P<0.05),Ki-67和CGGBP1的表达显著减少(P<0.05);体内实验结果显示,局部注射p-miR-7组中miR-7表达水平明显增加,同时荷瘤裸鼠的肿瘤生长缓慢,生存时间明显延长(P<0.05)。肿瘤组织中Ki-67和CGGBP1蛋白的表达量均显著减少(P<0.05)。结论过表达miR-7可显著抑制人肺癌细胞的体内外生长,可能与其下调肿瘤生长相关蛋白CGGBP1的表达有关。 展开更多
关键词 肺癌 miR-7 人肺癌95D细胞 细胞生长 CGG结合蛋白1
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miR-101通过抑制DNA甲基转移酶3a抑制乳腺癌细胞的增殖和迁移 被引量:14
8
作者 刘健 庞亚梅 +5 位作者 王黄震 李艳波 孙欣 徐菲 任宏 刘大鹏 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期299-303,共5页
目的研究miR-101对乳腺癌细胞增殖和迁移能力的影响,并分析miR-101影响乳腺癌细胞生物学行为的可能机制。方法采用实时荧光定量PCR检测miR-101和DNA甲基转移酶3a(DNMT3a)在乳腺癌组织和相对应的正常乳腺组织,正常乳腺细胞以及多种乳腺... 目的研究miR-101对乳腺癌细胞增殖和迁移能力的影响,并分析miR-101影响乳腺癌细胞生物学行为的可能机制。方法采用实时荧光定量PCR检测miR-101和DNA甲基转移酶3a(DNMT3a)在乳腺癌组织和相对应的正常乳腺组织,正常乳腺细胞以及多种乳腺癌细胞系中的表达水平,应用慢病毒介导感染的方法分别将miR-101序列及shRNA-DNMT3a转至MDAMB-231人乳腺癌细胞,通过Western blot法检测DNMT3a以及上皮钙黏素(E-cadherin)的表达,分析miR-101影响乳腺癌细胞生物学行为的可能机制。通过MTT法检测乳腺癌细胞的增殖能力,划痕实验检测乳腺癌细胞的迁移能力。结果miR-101在MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-361、HCC70乳腺癌细胞系及乳腺癌组织中表达低于正常乳腺组织及MCF-10A乳腺细胞系,而DNMT3a表达则升高。Western blot实验结果显示过表达miR-101的MDA-MB-231细胞中,DNMT3a的表达明显下降,而E-cadherin的表达升高;应用shRNA-DNMT3a抑制DNMT3a表达后,E-cadherin的表达也明显升高,证实miR-101可能通过抑制DNMT3a而发挥作用。体外实验显示过表达miR-101可明显抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖和迁移能力。结论miR-101抑制乳腺癌细胞增殖和迁移能力可能是通过抑制DNMT3a进而恢复E-cadherin表达来实现。 展开更多
关键词 乳腺癌 miR-101 DNMT3a 上皮钙黏素 增殖 迁移
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非小细胞肺癌原发灶与转移淋巴结中MDR-1、RRM-1、EGFR、ERCC-1的表达差异 被引量:11
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作者 郭楠楠 李珊珊 +4 位作者 张文 于长海 王宏伟 张宜明 俞建琦 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期870-873,共4页
目的研究非小细胞肺癌(NSCLC)原发灶和转移淋巴结中多药耐药蛋白(MDR-1)、核糖核苷酸还原酶M1(RRM-1)、表皮生长因子受体(EGFR)、错配切除修复蛋白1(ERCC-1)表达的差异,并分析这些表达差异性与临床病理类型的关系。方法采用免疫组织化... 目的研究非小细胞肺癌(NSCLC)原发灶和转移淋巴结中多药耐药蛋白(MDR-1)、核糖核苷酸还原酶M1(RRM-1)、表皮生长因子受体(EGFR)、错配切除修复蛋白1(ERCC-1)表达的差异,并分析这些表达差异性与临床病理类型的关系。方法采用免疫组织化学染色观察46例NSCLC原发灶及转移淋巴结中MDR-1、RRM-1、EGFR、ERCC-1蛋白的表达情况,用Wilcoxon秩和检验来比较原发灶和淋巴结转移灶表达是否存在差异,用Fisher检验分析差异性是否与病理类型相关。结果 46例各种病理类型的NSCLC,原发病灶与转移淋巴结均存在MDR-1、RRM-1、EGFR、ERCC-1表达,其中ECRR-1的表达差异在腺癌中具有统计学意义(P=0.026),而MDR-1,RRM-1,EGFR的差异性在各病理类型无统计学意义(P>0.05)。结论 MDR-1、RRM-1、EGFR、ERCC-1在NSCLC的原发病灶和转移淋巴结中均表达,但只有ERCC-1在肺腺癌原发灶与转移淋巴结的表达具有明显差异。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 原发肿瘤 转移淋巴结 多药耐药蛋白 核糖核苷酸还原酶M1 表皮生长因子受体 剪切修复交叉互补基因1
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急性胰腺炎患者循环miR-29a水平升高且与疾病严重程度及预后差正相关 被引量:11
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作者 高明 卞尔保 +4 位作者 李贺 葛魏巍 尹纯林 汪海平 孙远松 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期931-936,共6页
目的明确循环miR-29a在急性胰腺炎(AP)的诊断与监控预后中的应用价值。方法募集轻度急性胰腺炎(MAP30例、中度重症胰腺炎与重度急性胰腺炎(M-SAP)共30例,30例健康成人为对照组。比较一般临床指标,采用实时定量PCR检测外周血miR-29a水平... 目的明确循环miR-29a在急性胰腺炎(AP)的诊断与监控预后中的应用价值。方法募集轻度急性胰腺炎(MAP30例、中度重症胰腺炎与重度急性胰腺炎(M-SAP)共30例,30例健康成人为对照组。比较一般临床指标,采用实时定量PCR检测外周血miR-29a水平并分析与临床评分的相关性。受试者工作特征(ROC)曲线评估miR-29a对AP的诊断价值。以脱氧胆酸(DCA)处理AR42J细胞建立AP细胞模型,Western blot法检测miR-29a及胱天蛋白酶3(caspase-3)表达量,采用慢病毒载体转入miR-29a模拟物或抑制物,Western blot法检测miR-29a及DCA处理后caspase-3的蛋白水平。结果 MAP组与M-SAP组急性期循环miR-29a相对表达量显著升高且M-SAP组高于MAP组,同组内恢复期miR-29a表达量低于急性期,且miR-29a表达量与Ranson评分及APACHEⅡ评分呈正相关。miR-29a用以诊断MAP的受试者工作特征曲线下面积(AUC)为0. 961 (95%CI:0. 921~1. 002),截断点(cut-off)值为1. 460;用以诊断M-SAP的AUC为0. 972 (95%CI:0. 939~1. 004),cut-off值为1. 340。AP细胞模型中,miR-29a与caspase-3水平升高;与空载体对照组相比,过表达miR-29a后caspase-3表达量升高,抑制miR-29a后则caspase-3水平降低。结论 MAP与M-SAP患者循环miR-29a水平明显升高,miR-29a高表达可能与胰腺腺泡细胞凋亡有关,该指标对于AP的诊断与预后监测具有较高的应用价值。 展开更多
关键词 急性胰腺炎 miR-29a 生物学标志物 细胞凋亡
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miR-144通过靶向Atg4a调控卡介苗和雷帕霉素诱导的RAW264.7细胞自噬 被引量:10
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作者 周林林 郭乐 +3 位作者 汤建中 张爱君 刘学英 徐广贤 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期163-167,共5页
目的研究卡介苗(BCG)对RAW264.7细胞中与细胞自噬相关的miRNA(miR-21、miR-181a、miR-155和miR-144)表达的影响,并以miR-144为研究对象,验证miR-144对自噬相关基因Atg4a的靶向调控关系,探究其在结核分枝杆菌感染宿主细胞过程中调控细胞... 目的研究卡介苗(BCG)对RAW264.7细胞中与细胞自噬相关的miRNA(miR-21、miR-181a、miR-155和miR-144)表达的影响,并以miR-144为研究对象,验证miR-144对自噬相关基因Atg4a的靶向调控关系,探究其在结核分枝杆菌感染宿主细胞过程中调控细胞自噬途径的作用机制。方法分别对RAW264.7巨噬细胞进行饥饿处理12 h、50 ng/m L雷帕霉素作用2 h、10 nmol/L 3-甲基腺嘌呤(3-MA)作用12 h;BCG刺激RAW264.7巨噬细胞12 h、24 h、48 h后,收集细胞,提取总RNA;利用实时定量PCR(qRT-PCR)检测miR-21、miR-181a、miR-155及miR-144的表达水平;构建p MIR-Report-Atg4a及p MIR-ReportAtg4a mut重组质粒,利用双萤光素酶报告系统、qRT-PCR及Western blot法验证miR-144与Atg4a的靶向作用关系。结果 BCG刺激RAW264.7巨噬细胞后,可使miR-21、miR-155及miR-144表达上调,miR-181a表达下调;经雷帕霉素诱导的细胞自噬,4种miRNA表达量与正常组相比分别上调约64倍、52倍、14倍、1倍;与正常组相比,3-MA处理细胞组,miR-21、miR-144、miR-155、miR-181a的表达量分别下调1.22倍、1.05倍、1.54倍及12.5倍;双萤光素酶报告系统及Western blot法证实,miR-144可靶向作用于Atg4a-3'UTR并抑制其表达。结论 miR-144可靶向抑制自噬相关基因Atg4a的表达,参与调控RAW264.7巨噬细胞的自噬过程。 展开更多
关键词 miR-144 结核分枝杆菌 细胞自噬 靶向调控
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白藜芦醇通过下调缺氧诱导因子1α(HIF-1α)减少小鼠RAW264.7巨噬细胞的凋亡 被引量:11
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作者 郑海军 邱翠婷 +2 位作者 晋辉 孙亚超 李中东 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期42-48,共7页
目的研究白藜芦醇(Res)对氯化钴(CoCl2)诱导的RAW264.7小鼠巨噬细胞损伤的保护作用及其分子机制。方法巨噬细胞分为对照组、 CoCl2组和Res预处理组, CoCl2组给予500μmol/L CoCl2干预8 h, Res预处理组先用40μmol/L Res预处理2 h,再给予... 目的研究白藜芦醇(Res)对氯化钴(CoCl2)诱导的RAW264.7小鼠巨噬细胞损伤的保护作用及其分子机制。方法巨噬细胞分为对照组、 CoCl2组和Res预处理组, CoCl2组给予500μmol/L CoCl2干预8 h, Res预处理组先用40μmol/L Res预处理2 h,再给予500μmol/L的CoCl2干预8 h。采用CCK-8法检测各组细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡比例;免疫荧光细胞化学染色法观察胱天蛋白酶3(caspase-3)和缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的分布及CoCl2和Res对其表达的影响;相应试剂盒检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量;Western blot法检测各组细胞Bcl2、 BAX、裂解型caspase-3(c-caspase-3)及HIF-1α蛋白水平。结果与CoCl2组相比, Res预处理能提高细胞活力,减少细胞凋亡并增加SOD活性、降低MDA含量;caspase-3主要分布在细胞质中,而HIF-1α主要分布在细胞核;与CoCl2组相比, Res能上调Bcl2的表达,下调BAX、 c-caspase-3及HIF-1α的蛋白水平。结论 Res可减少巨噬细胞凋亡,其机制可能与Res可减少细胞内氧自由基的堆积、增强细胞抗氧化能力以及下调细胞上HIF-1α的表达有关。 展开更多
关键词 白藜芦醇 巨噬细胞 细胞凋亡 缺氧诱导因子1Α
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肝癌组织Bcl-2的检测及小干扰RNA抑制 被引量:7
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作者 刘志奎 宋涛 +3 位作者 窦常伟 郑鑫 姚英民 刘青光 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期221-225,230,共6页
目的探究肝癌组织中Bcl-2的表达与肝癌临床病理特征、患者预后之间的关系;观察siRNA抑制Bcl-2表达后,SMMC-7721增殖能力的变化。方法通过反转录PCR、免疫组织化学SP法以及Western blot法检测68例肝癌组织中Bcl-2的表达;根据Bcl-2表达水... 目的探究肝癌组织中Bcl-2的表达与肝癌临床病理特征、患者预后之间的关系;观察siRNA抑制Bcl-2表达后,SMMC-7721增殖能力的变化。方法通过反转录PCR、免疫组织化学SP法以及Western blot法检测68例肝癌组织中Bcl-2的表达;根据Bcl-2表达水平的高低进行分组,比较不同组中肝癌临床病理特征及患者预后;通过siRNA抑制Bcl-2在SMMC-7721细胞中的表达,应用MTT法检测细胞增殖能力的变化。结果相较于癌旁组织,Bcl-2肝癌中表达明显升高;Bcl-2在肝癌组织中表达水平与肝癌临床病理特征存在明显相关性,Bcl-2表达水平较高的患者预后较差;siRNA抑制SMMC-7721细胞中Bcl-2的表达后细胞增殖能力显著降低。结论 Bcl-2的表达在肝癌组织中异常增高,且与肝癌临床病例特征及患者预后存在相关性;抑制Bcl-2的表达可降低肝癌细胞的增殖能力。 展开更多
关键词 BCL-2 肝细胞癌 增殖 RNA干扰
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强化阿托伐他汀对老年冠状动脉介入后血清MCP-1、hs-CRP和sFas因子的影响 被引量:30
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作者 问海燕 陈宏斌 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期167-168,共2页
目的:探讨阿托伐他汀对老年冠状动脉介入治疗术(PCI)后血清单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)和血浆可溶性Fas(sFas)的影响。方法:52例接受PCI的稳定型心绞痛患者随机分为观察组和对照组,对照组予常规治疗;观... 目的:探讨阿托伐他汀对老年冠状动脉介入治疗术(PCI)后血清单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)和血浆可溶性Fas(sFas)的影响。方法:52例接受PCI的稳定型心绞痛患者随机分为观察组和对照组,对照组予常规治疗;观察组在对照组基础上予口服阿托伐他汀40 mg,qd,治疗47 d后行PCI术。于术前及术后24 h、1周测定患者血清MCP-1、hs-CRP和血浆sFas水平。MCP-1、sFas检测采用酶联免疫吸附法,hs-CRP采用免疫比浊法。结果:两组hs-CRP、MCP-1及sFas水平术后24 h升高,术后1周低于术后24 h,观察组较对照组下降更明显,两组差异有统计学意义(P〈0.05)。结论:老年冠状动脉介入治疗术后应用大剂量阿托伐他汀能促进MCP-1、hs-CRP和sFas水平下降,有利于动脉粥样硬化斑块的稳定,预防再狭窄的发生。 展开更多
关键词 冠心病 经皮冠状动脉介入术 阿托伐他汀 单核细胞趋化蛋白-1 高敏C-反应蛋白 可溶性FAS
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IL-37通过抑制哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的磷酸化而诱导SMMC-7721肝癌细胞凋亡和自噬 被引量:5
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作者 李婷婷 朱迪 +3 位作者 牟童 郭振 蒲俊良 吴忠均 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期440-445,共6页
目的观察白细胞介素37(IL-37)诱导SMMC-7721肝癌细胞凋亡和自噬的机制。方法体外培养SMMC-7721细胞,SMMC-7721细胞分为处理组和对照组,处理组分别予以不同剂量(50、100、200)ng/mL的重组人IL-37(rh IL-37)。CCK-8法检测SMMC-7721细胞增... 目的观察白细胞介素37(IL-37)诱导SMMC-7721肝癌细胞凋亡和自噬的机制。方法体外培养SMMC-7721细胞,SMMC-7721细胞分为处理组和对照组,处理组分别予以不同剂量(50、100、200)ng/mL的重组人IL-37(rh IL-37)。CCK-8法检测SMMC-7721细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot法检测凋亡和自噬相关蛋白Bax、Bcl-2、微管相关蛋白1轻链3(LC3)和beclin 1及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的水平,透射电子显微镜观察自噬体的形成情况。结果 IL-37可抑制SMMC-7721肝细胞癌细胞的增殖、诱导SMMC-7721细胞凋亡和自噬;IL-37处理组Bax、LC3和beclin 1水平增加,Bcl-2水平降低,mTOR的磷酸化被抑制;可见明显自噬体形成。结论 IL-37可诱导肝细胞癌SMMC-7721细胞发生凋亡和自噬,可能与mTOR的磷酸化有关。 展开更多
关键词 白细胞介素37(IL-37) SMMC-7721细胞 凋亡 自噬 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)
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rhTNF-α生物活性测定方法的改进及其对人白血病早幼粒细胞HL-60作用机理研究 被引量:10
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作者 王军志 高凯 饶春明 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1999年第2期141-144,共4页
目的:通过对rhTNF-α生物活性方法的改进,建立了较规范的活性测定方法,避免了人为判定的误差,提高了测定精确性.方法:本研究应用L929鼠结缔组织来源纤维母细胞系,参照国际标准品测定rhTNF-α效价.分别用Northern Dot Blot杂交检测及DNA... 目的:通过对rhTNF-α生物活性方法的改进,建立了较规范的活性测定方法,避免了人为判定的误差,提高了测定精确性.方法:本研究应用L929鼠结缔组织来源纤维母细胞系,参照国际标准品测定rhTNF-α效价.分别用Northern Dot Blot杂交检测及DNA电泳等方法,观察不同效价rhTNF-α对HL-60人白血病早幼粒细胞生长的影响.结果:rhTNF-α对HL-60细胞的生长抑制作用与时间、剂量正相关,核酸水平检测初步发现c-myc基因表达量降低,且rhTNF-α对DNA有损伤作用.结论:rhT-NF-α的测定可用自动分析的方法进行.rhTNF-α抑制HL-60细胞生长,其机理不同于阿霉素. 展开更多
关键词 RHTNF-Α 生物活性 IL-60细胞 白血病
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过表达prohibitin促进NB4-R1急性早幼粒细胞白血病维甲酸耐药细胞凋亡 被引量:4
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作者 刘雁峰 贺鹏程 +2 位作者 刘锋 程小岩 张梅 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期933-936,共4页
目的构建人prohibitin基因真核过表达载体,探讨上调prohibitin对NB4-R1急性早幼粒细胞白血病维甲酸耐药细胞凋亡的影响。方法 PCR钓取目的基因prohibitin,与pEGFP-N1-3FLAG真核载体定向连接,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定。将阳性重组载体pE... 目的构建人prohibitin基因真核过表达载体,探讨上调prohibitin对NB4-R1急性早幼粒细胞白血病维甲酸耐药细胞凋亡的影响。方法 PCR钓取目的基因prohibitin,与pEGFP-N1-3FLAG真核载体定向连接,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定。将阳性重组载体pEGFP-N1-3FLAG-prohibitin转染NB4-R1细胞,以实时定量PCR(qRT-PCR)和Western blot法检测过表达效果,annexin V-FITC/PI染色结合流式细胞术检测prohibitin过表达对NB4-R1细胞凋亡的影响。结果 PCR筛选及测序比对,证明成功构建了prohibitin基因过表达载体;对NB4-R1细胞转染率可达70%以上;qRT-PCR结果显示转染pEGFP-N1-3FLAG-prohibitin过表达载体组(OE)prohibitin mRNA表达水平较空白对照组(CON)和阴性对照组(NC)分别上调(1.64±0.37)倍和(1.58±0.43)倍(P<0.05),Western blot结果显示OE组prohibitin蛋白表达水平较CON组和NC组分别上调(1.91±0.33)倍和(1.99±0.37)倍(P<0.05);流式细胞术结果表明CON组、NC组和OE组NB4-R1细胞凋亡率分别为(5.88±0.43)%、(6.63±0.46)%和(28.22±1.33)%,OE组较CON组和NC组细胞凋亡率分别增加了(3.80±0.24)倍和(3.39±0.30)倍(P<0.05)。结论过表达prohibitin可诱导NB4-R1细胞凋亡。 展开更多
关键词 PROHIBITIN 过表达 NB4-R1细胞 凋亡 急性早幼粒细胞白血病
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猪繁殖与呼吸综合征病毒野毒株与基因缺失弱毒疫苗株TJM-F92一步RT-PCR鉴别方法的建立 被引量:9
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作者 梅林 高英杰 +1 位作者 梁智选 赵建增 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2012年第4期492-494,共3页
目的建立一种猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)野毒株与基因缺失弱毒疫苗株TJM-F92一步RT-PCR鉴别方法。方法基于高致病性PRRSV TJ株及其基因缺失致弱疫苗株TJM-F92的nsp2基因序列设... 目的建立一种猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)野毒株与基因缺失弱毒疫苗株TJM-F92一步RT-PCR鉴别方法。方法基于高致病性PRRSV TJ株及其基因缺失致弱疫苗株TJM-F92的nsp2基因序列设计1对引物,建立可鉴别不同高致病性PRRSV野毒株与基因双缺失弱毒疫苗株的一步法RT-PCR,并进行特异性、灵敏度、敏感性、重复性验证。结果高致病性PRRSV TJ株扩增出1 100 bp的条带,基因缺失弱毒疫苗株TJM-F92扩增出740 bp的条带,可对两毒株作出准确鉴别;建立的一步法RT-PCR可测出101TCID50/ml的PRRSV-TJ疫苗毒株,灵敏度较高;对已知阳性和阴性仔猪血清样品的检测结果100%相符,敏感性较高,且重复性较好。结论建立的一步法RT-PCR可用于接种TJM-F92疫苗猪群中PRRSV野毒感染与疫苗免疫猪的临床鉴别,有助于评价疫苗的免疫效果并及早发现野毒感染。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 nsp2基因缺失疫苗株 野毒株 逆转录聚合酶链反应
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GRIM-19及其靶基因产物STAT3与肺癌相关性的研究 被引量:11
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作者 叶静 赵继京 +1 位作者 刘荣玉 肖卫华 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2008年第6期599-602,共4页
目的观察干扰素/维甲酸联合应用诱导细胞凋亡相关的基因(GRIM-19)蛋白及其靶基因产物转录信号转导子与激活子3(STAT3)蛋白在肺癌组织和癌旁组织中的表达,探讨GRIM-19及其靶基因产物STAT3在肺癌发生、发展中的作用。方法用Western blot... 目的观察干扰素/维甲酸联合应用诱导细胞凋亡相关的基因(GRIM-19)蛋白及其靶基因产物转录信号转导子与激活子3(STAT3)蛋白在肺癌组织和癌旁组织中的表达,探讨GRIM-19及其靶基因产物STAT3在肺癌发生、发展中的作用。方法用Western blot方法检测37例人肺癌及其癌旁组织中GRIM-19蛋白、STAT3蛋白水平的表达,对两组蛋白的表达与相关临床病理特征进行统计学分析。结果①在肺癌组织中GRIM-19蛋白表达明显低于癌旁组织(P<0.01),而STAT3蛋白表达则高于癌旁组织(P<0.01),且GRIM-19与STAT3在肺癌组织中的表达呈负相关(r=-0.327;P<0.05)。②GRIM-19蛋白表达水平与肺癌临床分期相关(P<0.05),而STAT3蛋白表达水平则与肺癌临床分期(P<0.05)及是否有淋巴结转移相关(P<0.05),两者均与患者性别、年龄、组织分型、吸烟指数之间无关联(P>0.05)。结论GRIM-19和STAT3蛋白在肺癌组织中有表达,并与临床分期相关,提示GRIM-19作为一个新的细胞凋亡促进基因,在肺癌的发生发展过程中可能发挥着重要的作用。 展开更多
关键词 肺肿瘤 印迹法 蛋白质 基因
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Rab23在人乳腺癌细胞Bcap-37侵袭迁移中的作用 被引量:4
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作者 赵洁 刘亚莉 +2 位作者 简强 李娟 迟素敏 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期813-817,共5页
目的探讨过表达和敲除Rab23对人乳腺癌Bcap-37细胞侵袭迁移能力的影响。方法应用Western blot法检测乳腺细胞HBL-100及乳腺癌细胞Bcap-37、MDA-MB-231、MCF-7中Rab23的表达情况。慢病毒转染乳腺癌细胞Bcap-37,筛选出稳定过表达和敲除Ra... 目的探讨过表达和敲除Rab23对人乳腺癌Bcap-37细胞侵袭迁移能力的影响。方法应用Western blot法检测乳腺细胞HBL-100及乳腺癌细胞Bcap-37、MDA-MB-231、MCF-7中Rab23的表达情况。慢病毒转染乳腺癌细胞Bcap-37,筛选出稳定过表达和敲除Rab23的Bcap-37细胞。划痕愈合试验、Transwell实验检测过表达和敲除Rab23后Bcap-37细胞侵袭迁移能力的变化。结果 Western blot法结果显示,Rab23在乳腺和乳腺癌细胞系中均有表达,且Bcap-37细胞表达水平最高,与HBL-100细胞相比,差异有统计学意义(P<0.01);与空载体Bcap-37细胞比较,过表达Rab23的Bcap-37细胞侵袭迁移能力明显增强(P<0.01);敲除Rab23的Bcap-37细胞侵袭迁移能力明显减弱(P<0.01)。结论 Rab23在乳腺癌细胞Bcap-37的侵袭迁移中发挥着重要作用。 展开更多
关键词 Rab23 慢病毒转染 乳腺癌 侵袭 迁移
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