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人牙周膜干细胞条件培养液对炎症组织来源牙周膜干细胞增殖及成骨分化的影响 被引量：2
1
作者 刘焱 高翔 +2 位作者 赵晓霞 陈青宇 高俊武 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2021年第13期2005-2010,共6页
背景:富含生物活性物质的条件培养液可以维持干细胞增殖活性和生物学特性的稳定。健康组织来源的人牙周膜干细胞条件培养液能否影响炎症组织来源人牙周膜干细胞的增殖和成骨分化对于牙周组织再生重建意义重大。目的:探讨健康组织来源的... 背景:富含生物活性物质的条件培养液可以维持干细胞增殖活性和生物学特性的稳定。健康组织来源的人牙周膜干细胞条件培养液能否影响炎症组织来源人牙周膜干细胞的增殖和成骨分化对于牙周组织再生重建意义重大。目的:探讨健康组织来源的人牙周膜干细胞条件培养液对炎症组织来源人牙周膜干细胞增殖及成骨分化的影响。方法:由健康成人的正常牙周韧带中分离、纯化人牙周膜干细胞并传代培养,对融合达80%的第3代人牙周膜干细胞进行无血清培养基连续培养24 h,收集上清液即得到人牙周膜干细胞条件培养液。采取有限稀释克隆法培养来源于慢性牙周炎患者牙周韧带中的人牙周膜干细胞,分别在含50%人牙周膜干细胞条件培养液+50%常规培养液(条件培养液处理组)及常规培养液(对照组)2种条件下培养。免疫荧光染色法检测两组细胞中波形丝蛋白、角蛋白和间充质干细胞标志物STRO-1的表达;MTT比色法结合流式细胞术分析细胞增殖活性;经体外成骨诱导后,碱性磷酸酶试剂盒和RT-PCR检测两组细胞碱性磷酸酶活性和成骨相关基因(Runx2,OPN,OCN)的表达水平。结果与结论:①两组细胞均符合成体干细胞的形态特征,呈现长梭形或多角形,倒置相差显微镜下观察其形态无明显差异;②经免疫荧光染色可见两组细胞均呈现波形丝蛋白阳性表达,角蛋白阴性表达,且间充质干细胞标志物STRO-1阳性表达;③MTT结果显示:培养第3,5,7天时,条件培养液处理组的细胞增殖活性均显著高于对照组(P<0.01);④细胞周期分析显示:与对照组相比,条件培养液处理组细胞处于G2/M期及S期的数量明显增多(P<0.05);⑤体外成骨诱导第5,7天时,条件培养液处理组碱性磷酸酶活性高于对照组(P<0.05);⑥成骨诱导21 d后,成骨相关基因Runx2、OPN、OCN在条件培养液处理组的表达量均显著高于对照组(P<0.01,P<0.05);⑦综上,健康组织来源的人牙周膜干细胞条件培养液可以促进炎症组织来源人牙周膜干细胞的增殖及成骨分化。 展开更多
关键词 干细胞 人牙周膜干细胞 条件培养液 炎症 增殖 成骨分化 基因 实验
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三种监测家蝇抗药性方法的比较 被引量：3
2
作者 冯国蕾 《医学动物防制》 1989年第2期140-141,共2页
本次采用三种生物测定方法监测溴氰菊酯、二氯苯醚菊酯、狄氏剂和 DDT 对三个家蝇品系的 LD_(50),LC_(50)和 KT_(50)。从 DDT 和狄氏剂对二个抗性家蝇品系的 KT_(50)表明,其击倒速率有明显的降低,对溴氰菊酯和二氯苯醚菊酯仅有一些降低... 本次采用三种生物测定方法监测溴氰菊酯、二氯苯醚菊酯、狄氏剂和 DDT 对三个家蝇品系的 LD_(50),LC_(50)和 KT_(50)。从 DDT 和狄氏剂对二个抗性家蝇品系的 KT_(50)表明,其击倒速率有明显的降低,对溴氰菊酯和二氯苯醚菊酯仅有一些降低,由此可见 KT_(50)仅仅反映杀虫剂引起家蝇中毒的敏感性,并不能作为监测家蝇抗药性的依据。从二个家蝇抗性种群对四种杀虫剂的 LC_(50)和 LD_(50)的结果表明,二者测定的抗性程序基本上是一致的,LC_(50)测得的抗性倍数稍高,这符合抗性种群的情况,所以用不同浓度的三角瓶药膜法测定 LC_(50),不但方法简单,更能反映抗性种群的抗性程度。 展开更多
关键词 家蝇 抗药性 监测方法
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利用小鼠感染模型筛选与鉴定幽门螺杆菌外膜蛋白抗原
3
作者 陶好霞 王芃 +4 位作者 袁盛凌 展德文 王令春 王艳春 刘纯杰 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期195-200,共6页
目的:利用小鼠感染模型筛选与鉴定幽门螺杆菌SS1株的外膜蛋白抗原。方法:提取SS1株的外膜蛋白进行双向电泳,用幽门螺杆菌感染的小鼠血清作免疫印迹实验,将阳性反应蛋白点进行质谱鉴定分析,将肽质量指纹谱数据输入互联网上的蛋白质数据... 目的:利用小鼠感染模型筛选与鉴定幽门螺杆菌SS1株的外膜蛋白抗原。方法:提取SS1株的外膜蛋白进行双向电泳,用幽门螺杆菌感染的小鼠血清作免疫印迹实验,将阳性反应蛋白点进行质谱鉴定分析,将肽质量指纹谱数据输入互联网上的蛋白质数据库进行检索。结果:获得32种抗原相关蛋白。通过与已有报道的幽门螺杆菌感染人抗原比较分析,发现大部分典型的保护性抗原在本实验中都可以检测到。结论:幽门螺杆菌感染的小鼠模型适用于人用保护性幽门螺杆菌抗原的筛选;而且此研究中得到的相关抗原蛋白对于寻找与鉴定幽门螺杆菌未知保护性抗原也有参考价值。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 动物模型 双向电泳 免疫方法 抗原筛选
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溴氰菊酯的毒力对家蝇子代抗性及生长发育的影响
4
作者 高锦亚 《医学动物防制》 1989年第2期138-139,159,共2页
1ppm 的溴氰菊酯乳剂能使50%的正常家蝇幼龄幼虫死亡,成虫羽化率仅有36%,100ppm 可全部杀死幼虫。成虫羽化率和幼虫存活率与浓度间有明显线性关系。100ppm 的溴氰菊酯乳剂能抑制抗敌百虫家蝇幼虫、蛹及成虫的正常发育,个体大小与对照组... 1ppm 的溴氰菊酯乳剂能使50%的正常家蝇幼龄幼虫死亡,成虫羽化率仅有36%,100ppm 可全部杀死幼虫。成虫羽化率和幼虫存活率与浓度间有明显线性关系。100ppm 的溴氰菊酯乳剂能抑制抗敌百虫家蝇幼虫、蛹及成虫的正常发育,个体大小与对照组有极显著差异(p<0.01)。子代成虫对敌百虫的敏感性提高4.3倍。 展开更多
关键词 家蝇 抗药性 溴氰菊酯
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噬菌体肽库筛选抗人B7-H4中和抗体的模拟抗原表位及其免疫原性鉴定 被引量：1
5
作者 李晓菊 高源 +1 位作者 张旺倩 张存 《生物技术通讯》 CAS 2015年第4期505-509,共5页
目的:用噬菌体呈现随机12肽库筛选能与抗人B7-H4(h B7-H4)中和抗体特异性结合的模拟抗原表位肽,并用其免疫小鼠检测其免疫原性。方法:以抗h B7-H4中和抗体为靶分子,用体外生物淘洗法从噬菌体呈现随机12肽库中筛选与之结合的噬菌体克隆,... 目的:用噬菌体呈现随机12肽库筛选能与抗人B7-H4(h B7-H4)中和抗体特异性结合的模拟抗原表位肽,并用其免疫小鼠检测其免疫原性。方法:以抗h B7-H4中和抗体为靶分子,用体外生物淘洗法从噬菌体呈现随机12肽库中筛选与之结合的噬菌体克隆,用竞争性细胞ELISA鉴定阳性噬菌体克隆;化学合成候选多肽,并与钥孔血蓝蛋白或破伤风毒素偶联鉴定多肽的特异性;进一步用融合蛋白免疫小鼠检测其免疫原性和抗血清的补体依赖的细胞杀伤活性(CDC)。结果:经过3轮体外筛选后随机挑取50个阳性噬菌体克隆,其中20个克隆与抗h B7-H4抗体有较强的结合能力,DNA测序得到6组结构相似的肽序列;竞争性ELISA结果显示1号肽噬菌体能与细胞表面的h B7-H4竞争性地结合抗h B7-H4单抗;点杂交结果显示1号肽能特异性结合抗h B7-H4单抗;小鼠免疫实验结果显示1号肽融合蛋白能诱导高滴度的抗h B7-H4抗血清,并且抗血清具有补体依赖的细胞杀伤活性。结论:筛选得到能与抗h B7-H4中和抗体特异性结合的12肽模拟抗原表位序列并且具有免疫原性,为进一步开发h B7-H4相关的多肽疫苗提供了实验依据。 展开更多
关键词 噬菌体随机12肽库 人B7-H4 单克隆抗体 表位 免疫
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人B7-H3两种异构体基因转染细胞株的建立及对T细胞协同刺激作用的比较 被引量：1
6
作者 邱天宇 陈永井 +4 位作者 张光波 孙静 蒋俊华 周迎会 张学光 《中国血液流变学杂志》 CAS 2011年第3期379-383,共5页
目的 建立2IgB7-H3基因转染细胞株和4IgB7-H3基因转染细胞株,探讨B7-H3两种异构体对T细胞的协同刺激作用.方法 RT-PCR 法从诱导成熟的DC细胞中克隆人B7-H3两种异构体基因2IgB7-H3和4IgB7-H3的编码区,经EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切后插入pIRE... 目的 建立2IgB7-H3基因转染细胞株和4IgB7-H3基因转染细胞株,探讨B7-H3两种异构体对T细胞的协同刺激作用.方法 RT-PCR 法从诱导成熟的DC细胞中克隆人B7-H3两种异构体基因2IgB7-H3和4IgB7-H3的编码区,经EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切后插入pIRES2-EGFP真核表达载体构建pIRES2-EGFP/2IgB7-H3和pIRES2-EGFP/4IgB7-H3重组子,采用脂质体法转染脑胶质瘤细胞株SHG44.经G418抗性筛选,采用免疫荧光标记和流式细胞术分析2IgB7-H3和4IgB7-H3在SHG44细胞上的表达.继而,利用MTT法和酶联免疫吸附测定法（ELISA）分析两种异构体基因转染细胞株对T细胞体外增殖和细胞因子的分泌.结果 成功构建了可以稳定表达2IgB7-H3和4IgB7-H3的基因转染细胞株.体外生物学功能分析表明,与转染空载体的SHG44/mock细胞相比,SHG44/2IgB7-H3和SHG44/4IgB7-H3均能有效抑制T细胞增殖以及对IFN-γ的分泌,且两者的协同抑制作用不存在显著差异.结论 B7-H3两种异构体分子均能负性调控T细胞介导的免疫应答,但两者的生物学功能并不存在显著的差异. 展开更多
关键词 2IgB7-H3 4IgB7-H3 T细胞 协同刺激 T细胞增殖
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分泌IL-22的NK样细胞新亚群:NK-22
7
作者 陈永琳 田志刚 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期869-871,874,共4页
粘膜组织位于外界环境与机体环境的交界处,天然免疫细胞及其分子是粘膜免疫的重要组成部分,对粘膜稳态的维持至关重要。最近,在人和小鼠的粘膜组织(扁桃腺和肠道)中发现了一个分泌IL-22的NK样细胞群体,被命名为NK-22。NK-22细胞与NK细胞... 粘膜组织位于外界环境与机体环境的交界处,天然免疫细胞及其分子是粘膜免疫的重要组成部分,对粘膜稳态的维持至关重要。最近,在人和小鼠的粘膜组织(扁桃腺和肠道)中发现了一个分泌IL-22的NK样细胞群体,被命名为NK-22。NK-22细胞与NK细胞,LTi细胞(lymphtissue inducer)有许多共同之处。NK-22细胞表达多种NK细胞受体,其表型类似于不成熟的NK细胞。但是,NK-22细胞在功能与发育路径方面与NK细胞差异明显。NK-22细胞并不具有传统NK细胞的杀伤功能,在刺激后主要分泌IL-22而不是IFN-γ。目前的观点认为NK-22细胞并不是NK细胞的亚群,而是由LTi细胞发育而来,且发育过程依赖于转录因子RORγt和肠道菌群信号。NK-22细胞参与了抗鼠柠檬酸杆菌感染的免疫保护过程,其分泌的IL-22对上皮细胞在细菌感染后的抗损伤和组织修复中发挥重要作用。 展开更多
关键词 粘膜 NK-22细胞 NK细胞 LTi细胞 IL-22
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云南产主要药用石斛的鉴别研究进展
8
作者 董秋颖 周礼彬 谭文红 《中国民族民间医药》 2017年第1期49-50,共2页
目的:云南境内石斛除了《中国药典》收载品种外,其他品种应用也较广泛,为规范石斛市场,区别药用石斛的良莠。方法:对主产药用石斛已有的性状鉴别、显微鉴别、理化鉴别、DNA分子鉴别等方法进行系统归纳整理,总结综合鉴别方法,为区别石斛... 目的:云南境内石斛除了《中国药典》收载品种外,其他品种应用也较广泛,为规范石斛市场,区别药用石斛的良莠。方法:对主产药用石斛已有的性状鉴别、显微鉴别、理化鉴别、DNA分子鉴别等方法进行系统归纳整理,总结综合鉴别方法,为区别石斛属药材及其混淆品提供有效手段。结果:性状可鉴别伪品,但同科属的近似品种则需用显微鉴别、理化鉴别及DNA分子鉴别。结论:石斛类药材作为重要的药用植物,利用多学科理论知识和技术手段是解决石斛品种混淆的有效方法。 展开更多
关键词 药用石斛 鉴别研究 应用
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干扰素和Toll样受体在重症肌无力发生发展中的研究进展
9
作者 李萌 黄学洙 金丹(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第24期3070-3072,F0003,共4页
重症肌无力是一种由自身产生乙酰胆碱受体抗体(anti-AChR),使得外周神经系统中信号传导异常导致的自身免疫性疾病。免疫系统异常是重症肌无力发病的主要环节。传统认为,重症肌无力与多种特异性免疫系统异常有关,包括:T淋巴细胞和B淋巴... 重症肌无力是一种由自身产生乙酰胆碱受体抗体(anti-AChR),使得外周神经系统中信号传导异常导致的自身免疫性疾病。免疫系统异常是重症肌无力发病的主要环节。传统认为,重症肌无力与多种特异性免疫系统异常有关,包括:T淋巴细胞和B淋巴细胞的协作异常,免疫系统耐受异常以及补体系统的激活等。然而,固有免疫系统在重症肌无力的作用较少被关注。近年来,研究发现干扰素异常表达与Toll样受体激活也参与了重症肌无力的发病过程。干扰素在重症肌无力患者中显著活化,通过诱导细胞因子风暴,加重胸腺细胞尤其是上皮细胞的坏死和凋亡,促进轻症向重症转变。Toll样受体家族亦在重症肌无力患者中显著差异表达,上调α-AChR继而加重胸腺炎症。综上,免疫系统紊乱是重症肌无力发病的主要原因,本文总结了近年来干扰素和Toll样受体在重症肌无力发生发展中免疫学研究进展。 展开更多
关键词 免疫 重症肌无力 治疗
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家蝇抗药性的生化机理
10
作者 袁家珪 《医学动物防制》 1989年第2期134-137,141,共5页
本文对抗性家蝇的生化机理方面进行了讨论。试验结果证明:降低体壁对杀虫剂的穿透性,水解酶、转移酶;多功能氧化酶等解毒酶活性的增强以及乙酰胆碱酯酶的钝化是造成家蝇对有机磷杀虫剂和菊酯类杀虫剂产生抗性的重要原因。不同杀虫剂造... 本文对抗性家蝇的生化机理方面进行了讨论。试验结果证明:降低体壁对杀虫剂的穿透性,水解酶、转移酶;多功能氧化酶等解毒酶活性的增强以及乙酰胆碱酯酶的钝化是造成家蝇对有机磷杀虫剂和菊酯类杀虫剂产生抗性的重要原因。不同杀虫剂造成的抗性生化机制有不同,抗溴氰菊酯家蝇的解毒酶以酯酶为主,而抗二氯苯醚菊酯家蝇的解毒酶则以多功能氧化酶为主。溴氰菊酯抗性家蝇体壁降低澳氰菊酯的穿透性亦是其对澳氰菊酯的重抗要性机制。 展开更多
关键词 家蝇 抗药性 生化机理
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