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云南省香格里拉市犬棘球绦虫感染因素分析 被引量:1
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作者 李奔福 肖丹 +9 位作者 陆春花 史帅 严信留 字金荣 彭佳 李建雄 王正青 徐倩 吴方伟 杨亚明 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 北大核心 2025年第2期281-285,共5页
从传染病网络直报系统、医院等收集香格里拉市有既往病例,以本地感染病例为线索,选择患病率高的建塘、小中甸和格咱镇为调查点。根据2019—2021年香格里拉市三个乡镇传染源犬监测数据,行政村的犬粪抗阳性率分为高、中、低3层,每层随机抽... 从传染病网络直报系统、医院等收集香格里拉市有既往病例,以本地感染病例为线索,选择患病率高的建塘、小中甸和格咱镇为调查点。根据2019—2021年香格里拉市三个乡镇传染源犬监测数据,行政村的犬粪抗阳性率分为高、中、低3层,每层随机抽取1~3个自然村作为研究点。2022年6月采用整群随机抽样法,每户采集1条犬粪样,随机采集路边无主犬/流浪犬粪样,每个乡(镇)调查犬200只以上,采用ELISA法犬粪抗原检测,家犬进行感染因素分析。共调查犬1587只,阳性64只,阳性率为4.03%(64/1587),其中家犬和无主犬或流浪犬棘球绦虫抗原阳性率分别为3.16%(35/1107)和6.04%(29/480)(χ^(2)=6.265,P<0.05)。建塘、小中甸和格咱镇阳性率分别为4.60%(41/891)、3.18%(14/440)和3.52%(9/256),各乡镇棘球绦虫粪抗原阳性率差异有统计学意义(χ^(2)=12.030,P<0.05)。家犬感染以及其因素分析中,家犬公母阳性率分别是3.48%和2.68%,犬年龄组10周岁以上阳性率为4.11%,家犬性别和年龄组差异无统计学意义(χ^(2)=1.184、2.384,均P>0.05)。狼狗阳性率为5.56%,放养犬阳性率为36.36%,近3个月内没有驱虫犬阳性率为3.79%,投喂过病变脏器犬阳性率为17.20%。家犬品种、犬饲养方式和近3个月内是否驱过虫的犬和是否投喂过病变脏器的犬阳性率差异有统计学意义(χ^(2)=15.431、49.121、5.291、65.391,均P<0.05),Logistic回归分析显示4个因素均与犬棘球绦虫感染有显著关系。香格里拉市犬棘球绦虫感染率处于较高水平,应当着重强化对传染源犬的防控工作。 展开更多
关键词 棘球绦虫 感染因素 分析 云南省 香格里拉市
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Th9/IL-9轴在促进细粒棘球蚴感染肝脏纤维化中作用机制的研究
2
作者 庞楠楠 邬超 +6 位作者 杨子敬 李文宣 李玉娇 李奇凤 丁剑冰 张振东 张峰波 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第12期1269-1276,共8页
目的 探讨Th9/IL-9、TGF-β和α-SMA在细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus,Eg)感染肝组织的表达及其与肝脏纤维化相关性。方法 共纳入39例细粒棘球蚴病患者(CE患者组)和35例肝血管瘤患者(对照组),采用HE和Masson染色法评估两组的肝脏... 目的 探讨Th9/IL-9、TGF-β和α-SMA在细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus,Eg)感染肝组织的表达及其与肝脏纤维化相关性。方法 共纳入39例细粒棘球蚴病患者(CE患者组)和35例肝血管瘤患者(对照组),采用HE和Masson染色法评估两组的肝脏纤维化程度,通过qRT-PCR检测IL-9、α-SMA mRNA在肝组织中的表达水平。用Percoll法分离肝脏淋巴细胞,与肝星形细胞共同培养,qRT-PCR和Western blot检测培养体系α-SMA和TGF-β的表达,ELISA检测细胞培养上清中IL-9水平;将分离的CD4+T细胞诱导转化为Th9细胞后与肝星形细胞共同培养,用IL-9中和抗体进行体外阻断实验,检测培养细胞中α-SMA mRNA表达水平。结果 活动性CE患者肝组织细胞灶片状坏死、肝小叶结构明显破坏,淋巴细胞大量浸润,病灶周围纤维结缔组织增生;活动性CE患者肝脏中α-SMA和IL-9 mRNA的表达均明显高于对照组和非活动性CE组(P<0.01),Spearman相关分析结果显示活动性CE患者肝脏中α-SMA与IL-9的表达呈正相关(r=0.6,P<0.01);肝星形细胞与活动性CE患者分离的淋巴细胞共培养后血清中IL-9分泌增加,α-SMA和CollagenⅠ的表达明显升高;肝星形细胞加入IL-9重组蛋白,发现IL-9可直接作用于HSC细胞,α-SMA蛋白的表达增高,同时TGF-β分泌量也随之上升,且呈现出剂量依赖性(P<0.05);IL-9中和抗体可以抑制肝星形细胞的活化与增殖。结论 活动性细粒棘球蚴病患者肝脏组织中IL-9、α-SMA和TGF-β表达明显增加,Th9/IL-9轴通过上调α-SMA的表达激活肝星形细胞并参与Eg感染肝脏纤维化进程。 展开更多
关键词 细粒棘球蚴 Th9/IL-9 肝星形细胞 Α-平滑肌肌动蛋白 肝脏纤维化
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细粒棘球绦虫钙网蛋白的原核表达及功能初步鉴定
3
作者 普娜 薄新文 +5 位作者 赵文卿 陈旭珂 张玉霞 张艳艳 孙艳 王正荣 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 北大核心 2025年第2期223-230,共8页
目的原核表达细粒棘球绦虫钙网蛋白,并对其功能进行初步探索。方法以细粒棘球绦虫原头节cDNA为模板,PCR扩增目的基因,连接至pET-28a(+)载体,构建重组质粒pET28a-CRT,将测序正确的重组质粒转化至表达菌BL21诱导表达,经十二烷基硫酸钠聚... 目的原核表达细粒棘球绦虫钙网蛋白,并对其功能进行初步探索。方法以细粒棘球绦虫原头节cDNA为模板,PCR扩增目的基因,连接至pET-28a(+)载体,构建重组质粒pET28a-CRT,将测序正确的重组质粒转化至表达菌BL21诱导表达,经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)电泳以及蛋白质免疫印迹(Westernblotting)分析鉴定rEgCRT;应用在线生物信息学分析软件分析EgCRT表达蛋白理化性质及部分生物学功能;rEgCRT免疫小鼠制备多克隆抗体,并用间接ELISA和Westernblotting检测其抗体效价及反应原性;应用间接免疫荧光分析CRT在原头节和成虫体内的分布以及rEgCRT与犬小肠上皮细胞的结合;应用RT-qPCR方法分析crt基因在虫体不同发育阶段转录水平及rEgCRT(实验组,PBS为对照组)对犬小肠上皮细胞凋亡、焦亡的影响。结果CRT蛋白分子式为C_(2033)H_(3051)N_(511)O_(650)S_(9),预测EgCRT蛋白α-螺旋占24.05%、无规则卷曲占60.00%,延伸链结构占15.95%。EgCRT与多房棘球绦虫和猪带绦虫的CRT在系统进化树上聚在一大分支。成功诱导表达纯化获得纯度较高且相对分子量约为50000的rEgCRT;免疫学特性鉴定表明rEgCRT具有较好的抗原特异性;间接免疫荧光试验发现EgCRT可分别定位于原头节表皮层和成虫表皮层及部分实质组织。RT-qPCR分析结果显示,成虫阶段EgCRT的表达水平(24.83±0)高于原头节阶段(27.05±0.008)(t=45.76,P<0.01)。间接免疫荧光分析结果显示,rEgCRT共孵育的犬小肠上皮细胞有绿色荧光聚集。RT-qPCR结果显示,培养24 h后实验组和对照组Bax相对转录水平分别为31.63±0.001、24.17±0.027(t=7.94,P<0.01),表达上调;Bcl-2相对转录水平分别为34.55±0.070、19.65±0.042(t=15.70,P<0.01),表达下调;IL-18相对转录水平分别为25.62±0.067、20.93±0.014(t=5.05,P<0.01),表达下调;IL-1β相对转录水平分别为28.18±0.001、28.71±0.020(t=0.26,P>0.05),表达下调。结论rEgCRT具有良好的抗原性,EgCRT在细粒棘球绦虫不同虫期均有表达,且其可能在细粒棘球绦虫固着、定植或生长发育中具有重要的作用;此外,rEgCRT与犬SIECs发生黏附并调节细胞的凋亡、焦亡,可能参与感染过程或宿主免疫应答,具有作为潜在疫苗候选分子、药物靶标的应用前景。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 钙网蛋白 克隆表达 免疫荧光 分子功能
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驱出14条亚洲带绦虫的病例报告 被引量:2
4
作者 杨毅梅 刘义 +2 位作者 和康怀 蓝春露 杨钰寒 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期F0003-F0003,共1页
作者于2007年7月在云南省香格里拉县虎跳峡镇宝山村调查带绦虫病,在77人中有1例查出14条亚洲带绦虫(牛带绦虫亚洲亚种),报告如下。
关键词 亚洲带绦虫 病例报告 牛带绦虫亚洲亚种 香格里拉县 带绦虫病 云南省
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阿苯达唑-葡聚糖纳米颗粒对小鼠继发性多房棘球蚴的疗效研究
5
作者 杨海山 李胜学 +5 位作者 张海霞 赵鸿昌 星通川 吴希臣 张翔 刘燕 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第1期15-22,共8页
目的使用阿苯达唑葡聚糖纳米颗粒(ABZ-GPs)和阿苯达唑(ABZ)对继发性泡型棘球蚴病小鼠进行治疗,评价ABZ-GPs对泡型棘球蚴病的体内治疗效果,进一步验证葡聚糖颗粒作为抗包虫药物载体的可行性。方法造模成功的棘球蚴病小鼠随机分为ABZ组、... 目的使用阿苯达唑葡聚糖纳米颗粒(ABZ-GPs)和阿苯达唑(ABZ)对继发性泡型棘球蚴病小鼠进行治疗,评价ABZ-GPs对泡型棘球蚴病的体内治疗效果,进一步验证葡聚糖颗粒作为抗包虫药物载体的可行性。方法造模成功的棘球蚴病小鼠随机分为ABZ组、葡聚糖纳米颗粒(GPs)组、ABZ-GPs组和对照组,各用药组以终浓度50 mg/mL灌胃给药4个疗程后,通过影像学、组织病理变化、超微结构和免疫学等多个角度对ABZ-GPs的治疗效果进行评价。结果成功构建了棘球蚴病动物模型,小鼠经ABZ-GPs和ABZ灌胃给药后,肝脏病灶组织明显坏死,大量淋巴细胞浸润。ABZ-GPs组平均囊肿湿重和ABZ组差异有统计学意义(t=7.83,P<0.05)。影像学显示ABZ-GPs靶向至肝脏组织;病理及超微结构显示对照组和GPs组肝脏上的泡状棘球蚴生长良好,囊泡体积大,半透明或透明状,充满囊液,囊壁张力高,无钙化,角质层和生发层清晰,多见可育囊及囊内不同数量的原头蚴;ABZ组囊腔塌陷,伴部分坏死及淋巴细胞浸润;ABZ-GPs组棘球蚴囊泡角质层和生发层难以识别,大泡状坏死,中心钙化,纤维组织增生,炎性细胞浸润,生发层微绒毛变粗、变短或消失,细胞核固缩、溶解或消失,胞浆微管明显扩展,髓鞘样变或空泡样变。结论ABZ-GPs对继发性泡球蚴病小鼠具有良好的靶向性和体内杀伤活性。 展开更多
关键词 阿苯达唑-葡聚糖纳米颗粒 继发性多房棘球蚴病 靶向性 杀伤活性
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Eg Innexin-unc9重组蛋白的表达纯化及诊断价值 被引量:1
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作者 吴军 范宇 +4 位作者 黎飞海 李军 张文宝 郭宝平 杨梅 《新疆医科大学学报》 2025年第4期421-425,431,共6页
目的构建并表达纯化细粒棘球绦虫缝隙连接通道蛋白(Eg Innexin unc9,Eg Inx)重组蛋白,制备多抗评估其诊断潜力及组织定位,为功能研究和犬用疫苗开发奠定基础。方法通过NdeI/HindⅢ双酶切构建pET-30a-Eg Inx原核表达质粒;将重组质粒转化... 目的构建并表达纯化细粒棘球绦虫缝隙连接通道蛋白(Eg Innexin unc9,Eg Inx)重组蛋白,制备多抗评估其诊断潜力及组织定位,为功能研究和犬用疫苗开发奠定基础。方法通过NdeI/HindⅢ双酶切构建pET-30a-Eg Inx原核表达质粒;将重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3),通过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(Isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)在不同温度下诱导表达,利用镍亲和层析柱纯化重组Eg Inx蛋白(r Eg Inx),并通过蛋白质免疫印迹(Western blotting,WB)验证其特异性;制备多克隆抗体进行免疫组化;采用生物素-亲和素放大系统酶联免疫吸附实验(Biotin-avidin system-enzyme linked immunosorbent assay,BAS-ELISA)检测22份健康人血清及7份囊型棘球蚴病患者血清,初步评估其诊断价值。结果成功表达并纯化r Eg Inx,WB检测显示其可被组氨酸标签抗体特异性识别。免疫组化表明,在胆盐诱导后Eg Inx在原头蚴头节及体表皮层高表达,成虫则表达在生殖系统,主要位于孕节。BAS-ELISA检测敏感度为85.71%(6/7),特异度95.45%(21/22)。结论r Eg Inx具有高诊断特异性,其发育阶段差异性定位提示其参与虫体发育及繁殖调控,可作为囊型棘球蚴病(Cystic echinococcosis,CE)新型诊断标志物及犬用疫苗潜在靶点。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 重组蛋白 免疫诊断
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细粒棘球蚴原头蚴在体内外对小鼠肝癌影响的初步研究
7
作者 蔡克丰 伍希雅 +5 位作者 崔杰 林芷伊 熊梓彤 吴正展 黄延鑫 张宏伟 《石河子大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第4期414-422,共9页
目的基于体外、体内实验探讨细粒棘球蚴原头蚴对小鼠肝癌Hepa1-6细胞直接和间接作用。方法在体外实验中,使用不同数量单位的原头蚴干预肝癌细胞,采用CCK-8法检测肝癌细胞增殖情况,Western-Blotting检测肝癌细胞Bax、Bcl-2、Casepase-3... 目的基于体外、体内实验探讨细粒棘球蚴原头蚴对小鼠肝癌Hepa1-6细胞直接和间接作用。方法在体外实验中,使用不同数量单位的原头蚴干预肝癌细胞,采用CCK-8法检测肝癌细胞增殖情况,Western-Blotting检测肝癌细胞Bax、Bcl-2、Casepase-3凋亡蛋白表达水平,通过划痕实验和Transwell实验观察肝癌细胞的迁移和侵袭能力。体内实验将小鼠随机分为Control组、CE组、Hepa1-6组和CE+Hepa1-6组。CE组及CE+Hepa1-6组小鼠于肝叶上接种原头蚴,30 d后Hepa1-6组于小鼠肝叶上注射Hepa1-6肿瘤细胞,CE+Hepa1-6组于包虫囊肿所在肝叶上注射Hepa1-6肿瘤细胞。20 d后处死小鼠,使用ELISA法检测血浆AFP水平,HE染色观察病理学变化,免疫组化分析CD4及CD8免疫细胞的分布情况。结果体外研究结果显示,CCK-8结果示48 h后1500个·mL-1组增殖能力显著高于空白组(P<0.01),72 h后1000、1500个·mL-1组增殖能力显著高于空白组(P<0.01),96 h后各干预组增殖能力均显著高于空白组(P<0.01)。Western-Blotting分析结果显示,1000个·mL-1、1500个·mL-1组的Bax/Bcl-2相对表达量和casepase-3的表达量均低于空白组(P<0.05)。划痕实验和Transwell实验示1000、1500个·mL-1组迁移能力和侵袭能力均显著高于空白组(P<0.01)。体内研究结果显示,CE+Hepa1-6组小鼠成瘤率显著低于Hepa1-6组成瘤率(P<0.01),ELISA法测得CE+Hepa1-6组的AFP表达量显著低于Hepa1-6组(P<0.01)。免疫组化分析结果显示,CD8主要分布在CE+Hepa1-6组和Hepa1-6组瘤实质内,少量分布在瘤周,CE+Hepa1-6组瘤组织CD8表达显著高于Hepa1-6组(P<0.01)。CD4主要分布在CE+Hepa1-6组瘤实质内,而在Hepa1-6组瘤内及瘤周表达极少,CE+Hepa1-6组瘤组织CD4表达显著高于Hepa1-6组(P<0.01),CE+Hepa1-6组CD4/CD8比值高于Hepa1-6组(P<0.01)。结论原头蚴能在体外促进肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭,同时抑制其凋亡;在体内能显著抑制瘤体形成,且CD4和CD8阳性的相关免疫细胞参与了此过程。 展开更多
关键词 细粒棘球蚴 肝癌 增殖 凋亡 迁移 侵袭
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河南省蛙类中裂头蚴分子检测及系统进化分析
8
作者 张雅兰 蒋甜甜 +7 位作者 王丹 陈伟奇 邓艳 马晓会 朱岩昆 唐振强 蔺西萌 张红卫 《热带医学杂志》 2025年第9期1185-1188,共4页
目的分析河南省不同地区蛙源裂头蚴与国内外其他地区裂头蚴间的遗传学关系。方法采用PCR技术扩增2023年7-10月河南省6株蛙源裂头蚴线粒体细胞色素C氧化酶1亚基(cox1)、线粒体烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶第5亚基(nad5)和核糖体小亚基(rr... 目的分析河南省不同地区蛙源裂头蚴与国内外其他地区裂头蚴间的遗传学关系。方法采用PCR技术扩增2023年7-10月河南省6株蛙源裂头蚴线粒体细胞色素C氧化酶1亚基(cox1)、线粒体烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶第5亚基(nad5)和核糖体小亚基(rrnS)基因,将扩增的序列在NCBI数据库中使用BLAST软件进行同源性比对,使用MEGA 11.0软件构建基因进化树。结果河南省6株蛙源裂头蚴cox1、nad5和rrnS基因序列长度分别约为157、530、325 bp。cox1、nad5、rrnS基因序列与GenBank收录的不同地区或宿主猬迭宫绦虫碱基相似性分别为98.73%~100.00%、95.83%~100.00%和94.53%~100.00%。构建的系统进化树显示,6个地区不同蛙中分离的裂头蚴样本序列相似性极高,与我国不同地区或宿主中分离的欧猬迭宫绦虫(S.erinaceieuropaei)聚为同一枝。cox1基因进化树显示本研究分离的样本与日本分离的曼氏迭宫绦虫(S.mansoni)株聚为同一枝,而波兰分离的S.erinaceieuropaei单独聚为1个细分支。结论迭宫绦虫的分类需进一步厘定,河南省分离的裂头蚴极可能仍属于S.mansoni。 展开更多
关键词 裂头蚴 线粒体细胞色素C氧化酶1亚基 线粒体烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶第5亚基 核糖体小亚基 系统进化分析
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一种多房棘球绦虫亮氨酸氨基肽酶体外荧光底物酶活性检测方法
9
作者 陈嘉瑀 戴瑶 +7 位作者 王顺娟 肖杨 闫鑫宗 刘通 袁智浩 史凯丽 李润乐 汤锋 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第1期23-31,共9页
目的构建多房棘球绦虫亮氨酸氨基肽酶(leucyl aminopeptidase,LAP)体外荧光酶活性检测方法,并与化学发色底物酶活性检测方法进行对比。方法确立荧光底物体外酶活性检测方法的反应条件,并通过分子对接、抑制率、精密度对比荧光底物L-亮氨... 目的构建多房棘球绦虫亮氨酸氨基肽酶(leucyl aminopeptidase,LAP)体外荧光酶活性检测方法,并与化学发色底物酶活性检测方法进行对比。方法确立荧光底物体外酶活性检测方法的反应条件,并通过分子对接、抑制率、精密度对比荧光底物L-亮氨酸-7-氨基-4-甲基香豆素盐酸盐(Leu-AMC)与化学发色底物L-亮氨酸-4-硝基苯氨(Leu-pNA)之间的差异。结果分子对接结果显示荧光底物Leu-AMC与蛋白的亲和力大于化学发色底物Leu-pNA。通过观察改变反应条件对荧光强度的影响,确立荧光酶活性检测方法在反应温度为37℃、反应pH为9.0、蛋白浓度为800 nmol/L、反应时长60 min的情况下该检测方法反应效果明显。Leu-AMC在5μmol/L的底物浓度和底物浓度变化的情况下有明显的反应效果和反应差异,通过加入不同抑制剂,荧光底物检测方法相较于化学发色底物检测方法存在组间差异。结论本研究构建了以Leu-AMC为底物的多房棘球蚴亮氨酸氨基肽酶体外荧光酶活性检测方法,与化学发色底物相比该方法灵敏度更高。 展开更多
关键词 多房棘球蚴 LAP Leu-AMC 酶活性
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RKIP通过抑制PI3K/Akt/NF-κB信号通路诱导细粒棘球蚴囊液致敏的肥大细胞凋亡
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作者 蒲雪莉 李玉倩 +8 位作者 周静茹 王佳玲 王春生 苏比·泰来提 蔺佳英 巴特苏荣·巴一娜 曹力微 古丽给雅·帕热哈提 叶建荣 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第5期508-514,共7页
目的探讨Raf激酶抑制蛋白(Raf kinase inhibitory protein,RKIP)对细粒棘球蚴囊液致敏的肥大细胞凋亡的影响及其作用机制。方法分离提取培养RKIP基因敲除型(KO)与野生型C57BL/6(WT)小鼠股骨及胫骨骨髓来源肥大细胞(Bone marrow derived ... 目的探讨Raf激酶抑制蛋白(Raf kinase inhibitory protein,RKIP)对细粒棘球蚴囊液致敏的肥大细胞凋亡的影响及其作用机制。方法分离提取培养RKIP基因敲除型(KO)与野生型C57BL/6(WT)小鼠股骨及胫骨骨髓来源肥大细胞(Bone marrow derived mast cells,BMMC),分别设置对照组与致敏组,致敏组使用含10%细粒棘球蚴感染小鼠血清的RPMI1640培养基孵育24 h后细粒棘球蚴囊液激活3 h、6 h,对照组加入同等体积的RPMI1640培养基孵育24 h后加入同等体积PBS,收集细胞与上清。流式细胞术检测BMMC表面CD117及FcεRⅠα表达情况;ELISA检测上清中β-氨基己糖苷酶、IL-4、肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量;Western Blot检测BMMC致敏前后RKIP蛋白、凋亡相关蛋白及通路蛋白的表达变化。结果流式细胞仪检测结果显示,诱导培养4周的WT与KO BMMC表面CD117与FcεRⅠα双阳性率均在90%以上;ELISA结果显示与WT致敏组相比,KO致敏组细粒棘球蚴囊液可使肥大细胞β-氨基己糖苷酶释放率(F=16.88,P<0.05)及相关细胞因子IL-4(F=16.51,P<0.05)、TNF-α(F=9.78,P<0.05)释放量增加,差异有统计学意义;Western Blot显示致敏后,与WT对照组相比,WT致敏组3 h后RKIP(F=8.20,P<0.05)和Bcl-2(F=101.40,P<0.01)蛋白表达水平降低,p-PI3K(F=8.04,P<0.05)、p-Akt(F=32.52,P<0.01)、p-P65(F=13.29,P<0.05)、cleaved-caspase-3(F=46.34,P<0.01)蛋白表达水平升高,差异均有统计学意义,与WT致敏组相比,KO致敏组3 h后p-PI3K(F=8.45,P<0.05)、p-Akt(F=8.58,P<0.05)、p-P65(F=11.02,P<0.05)、Bcl-2(F=84.50,P<0.001)蛋白表达水平升高,cleaved-caspase-3(F=15.66,P<0.05)蛋白表达水平降低,差异均有统计学意义。结论RKIP可能通过抑制PI3K/Akt/NF-κB信号通路诱导细粒棘球蚴囊液致敏的肥大细胞凋亡,从而减轻肥大细胞参与的细粒棘球蚴过敏反应,有望为预防和治疗细粒棘球蚴病所致过敏反应开拓新的干预路径。 展开更多
关键词 细粒棘球蚴囊液 肥大细胞 RKIP 细胞凋亡
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乳酸乳球菌介导的结核分枝杆菌ESAT-6重组抗原的构建、表达及鉴定
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作者 李文桂 欧兴坤 何爱琳 《热带医学杂志》 2025年第3期343-346,350,共5页
目的 构建乳酸乳球菌(LL)为载体的结核分枝杆菌早期分泌性抗原靶6(ESAT-6)疫苗,并研究其表达效率,为结核病的防治提供参考。方法 以pGEX-ESAT-6为模板扩增ESAT-6基因,采用XbaⅠ和HindⅢ双酶切后插入pMG36e,构建重组质粒pMG36e-ESAT-6,... 目的 构建乳酸乳球菌(LL)为载体的结核分枝杆菌早期分泌性抗原靶6(ESAT-6)疫苗,并研究其表达效率,为结核病的防治提供参考。方法 以pGEX-ESAT-6为模板扩增ESAT-6基因,采用XbaⅠ和HindⅢ双酶切后插入pMG36e,构建重组质粒pMG36e-ESAT-6,转化大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞,抽提质粒进行双酶切鉴定;电穿孔转化乳酸乳球菌MG1363株,构建结核分枝杆菌重组LL-ESAT-6(rLL-ESAT-6)疫苗,抽提质粒进行PCR鉴定。结果用XbaⅠ和HindⅢ双酶切重组质粒pMG36e-ESAT-6,呈现3 600 bp的载体条带和288 bp的目标条带;PCR显示,rLL-ESAT-6疫苗可以扩增出288 bp的ESAT-6基因;十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳显示,rLL-ESAT-6可表达6×10^(3) Mr的ESAT-6蛋白,表达蛋白约占菌体总蛋白的20%;免疫印迹表明表达蛋白可被结核病患者的血清所识别。结论 成功构建了结核分枝杆菌rLL-ESAT-6疫苗,表达的ESAT-6蛋白具有特异的抗原性。 展开更多
关键词 乳酸乳球菌 结核分枝杆菌 早期分泌性抗原靶6 疫苗
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青海部分地区藏羊感染人兽共患无浆体的分子流行病学调查 被引量:1
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作者 李志 韩元 +5 位作者 付永 张学勇 沈秀英 马怡隽 朵红 郭志宏 《青海大学学报》 2025年第1期78-84,共7页
为了解青海部分地区藏羊无浆体感染情况及其遗传进化特征,为该地区藏羊无浆体病的防控提供科学依据,本研究在青海门源、海晏、天峻、刚察和贵南5个地区共采集204份藏羊血液样本,提取基因组DNA,采用巢氏PCR方法检测藏羊血液样本中蜱传无... 为了解青海部分地区藏羊无浆体感染情况及其遗传进化特征,为该地区藏羊无浆体病的防控提供科学依据,本研究在青海门源、海晏、天峻、刚察和贵南5个地区共采集204份藏羊血液样本,提取基因组DNA,采用巢氏PCR方法检测藏羊血液样本中蜱传无浆体的感染情况。利用DNASP v.6、PopArt和MEGA 7.0软件进行无浆体病原单倍型分析和系统发育树构建,以确定该地区藏羊感染无浆体的遗传进化特征。结果表明:(1)上述5个地区藏羊血液无浆体的平均感染率为38.24%(78/204),其中绵羊无浆体的感染率为29.41%(60/204),牛无浆体的感染率为8.33%(17/204),山羊无浆体的感染率为0.49%(1/204)。(2)根据单倍型和核苷酸多态性分析可知,绵羊无浆体的19个单倍型以Hap1为主,占比为40.00%(24/60),Hap2占比为31.67%(19/60),其他17个单倍型(Hap3~Hap19)均各占1.67%(1/60);而牛无浆体的6个单倍型以Hap2为主(7/17),Hap1占比为23.53%(4/17),Hap3和Hap6各为2个(2/17),Hap4和Hap5各为1个(1/17)。(3)系统发育树表明,青海部分地区藏羊携带的绵羊无浆体、牛无浆体和山羊无浆体分别均与不同宿主的绵羊无浆体、牛无浆体和山羊无浆体处于一支。青海部分地区藏羊感染的无浆体病原在不同地区的感染率各有差异,且其病原呈现多样性特征。 展开更多
关键词 青海 藏羊 无浆体 感染率 单倍型 遗传进化
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青藏高原地区犬棘球绦虫感染的流行病学特征 被引量:43
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作者 刘辉 肖宁 +2 位作者 杨诗杰 王东 彭佳 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期129-138,共10页
青藏高原地区是世界上已知的两型棘球蚴病的高流行区,但其犬细粒棘球绦虫的感染率却与世界其他高流行区无明显区别,大部分地区的感染率低于40%。调查资料显示,与其他流行区犬多房棘球绦虫感染呈零星的点状分布特征不同,位于青藏高原的... 青藏高原地区是世界上已知的两型棘球蚴病的高流行区,但其犬细粒棘球绦虫的感染率却与世界其他高流行区无明显区别,大部分地区的感染率低于40%。调查资料显示,与其他流行区犬多房棘球绦虫感染呈零星的点状分布特征不同,位于青藏高原的四川省甘孜州和青海省的犬多房棘球感染普遍存在,且感染率较高。甘孜州的犬棘球绦虫总感染率在1983-2009年基本保持稳定,青海省的棘球绦虫属总感染率2000-2014年间变化也不大。2006年以来,我国棘球蚴病流行区启动了一系列综合防治措施,取得了一定成效。2009-2013年,四川省棘球蚴病流行区犬棘球绦虫感染率分别为28.10%、15.87%、19.22%、3.28%和1.11%,甘肃省甘南州、青海省部分区域的犬棘球绦虫感染率也出现了下降。本文对青藏高原地区的犬棘球蚴感染规律和特征进行了文献回顾与分析,以期为棘球蚴病的防控提供可借鉴的信息。 展开更多
关键词 包虫病 青藏高原 棘球绦虫 棘球蚴病 感染
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微囊法棘球蚴继发感染小鼠动物模型的建立 被引量:12
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作者 王慧 李军 +2 位作者 郭宝平 温浩 张文宝 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期784-788,共5页
目的通过体外培养原头蚴发育成微囊,经腹腔注射建立稳定的细粒棘球蚴和多房棘球蚴继发感染小鼠动物模型。方法无菌条件下采集羊源细粒棘球绦虫原头蚴和鼠源多房棘球绦虫原头蚴,经胃蛋白酶消化后检测虫体活力并计数,于37℃、5%CO2条件下... 目的通过体外培养原头蚴发育成微囊,经腹腔注射建立稳定的细粒棘球蚴和多房棘球蚴继发感染小鼠动物模型。方法无菌条件下采集羊源细粒棘球绦虫原头蚴和鼠源多房棘球绦虫原头蚴,经胃蛋白酶消化后检测虫体活力并计数,于37℃、5%CO2条件下进行体外培养至发育成微囊,以每鼠50个微囊的剂量经腹腔注射的途径分别接种BALB/c小鼠。接种6个月后,通过腹部解剖大体观察和病理检测分析各组小鼠的感染情况及包虫囊的生长情况。结果原头蚴在体外培养60d时发育成微囊,显微镜下观察Eg具有明显的透明角质层结构,而Em微囊角质层较薄。小鼠细粒棘球蚴和多房棘球蚴的感染率均为100%,Eg包虫囊为游离单囊,成囊率达70%,囊内无原头蚴;Em包虫囊为类似肿瘤的团块状组织,病灶内有生发囊及原头蚴。结论采用微囊法可建立稳定的棘球蚴继发感染小鼠动物模型,为疫苗研制、药物筛选和疗效判定提供研究动物模型。 展开更多
关键词 细粒棘球蚴 多房棘球蚴 原头蚴 微囊 小鼠 感染动物模型
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5种抗原检测囊型包虫病血清学评价 被引量:14
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作者 高春花 汪俊云 +3 位作者 杨玥涛 石锋 朱慧慧 焦伟 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期811-814,共4页
目的评价细粒棘球蚴纯化囊液粗抗原、天然抗原B(nAgB)及其3个重组亚基检测囊型包虫病的效能。方法从新疆源细粒棘球蚴原头节中提取总RNA,通过RT-PCR获得编码AgB8/1、AgB8/2和AgB8/3基因片段并克隆入pGEX-3X表达载体,IPTG诱导表达分别得... 目的评价细粒棘球蚴纯化囊液粗抗原、天然抗原B(nAgB)及其3个重组亚基检测囊型包虫病的效能。方法从新疆源细粒棘球蚴原头节中提取总RNA,通过RT-PCR获得编码AgB8/1、AgB8/2和AgB8/3基因片段并克隆入pGEX-3X表达载体,IPTG诱导表达分别得到重组蛋白rAgB8/1、rAgB8/2、rAgB8/3;羊细粒棘球蚴囊液经透析沉淀获得纯化囊液粗抗原(HCF)、此纯化囊液粗抗原经煮沸离心弃沉淀得到天然抗原B。用制备的5种抗原分别作为包被抗原,以ELISA法检测囊型包虫病人及其它寄生虫病人和健康人血样中抗体。结果 HCF、nAgB、rAgB8/1、rAgB8/2和rAgB8/3应用于ELISA法检测囊型包虫病人血清的敏感度依次为90.8%(79/87),87.4%(76/87),67.8%(59/87),78.2%(68/87)和59.8%(52/87);特异度依次为96.0%,96.0%,96.0%,98.0%和97.0%。纯化HCF、nAgB、rAgB8/1、rAgB8/2和rAgB8/3的诊断效能分别为93.5%,91.9%,82.8%,88.7%和79.6%。纯化HCF和nAgB检测的敏感度高于rAgB8/1、rAgB8/2和rAgB8/3(P<0.05);rAgB8/2检测的敏感度高于rAgB8/1和rAgB8/3(P<0.05);5种抗原检测的特异度之间均无统计学差异(P>0.05)。结论天然抗原应用ELISA法检测囊型包虫病的效能总体优于重组抗原。 展开更多
关键词 囊型包虫病 囊液粗抗原 天然抗原B 重组抗原B亚基 ELISA
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细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31融合基因疫苗构建及鉴定 被引量:28
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作者 周必英 陈雅棠 +1 位作者 李文桂 杨梅 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期502-506,共5页
目的构建和鉴定细粒棘球绦虫(Eg)重组双歧杆菌(Bb)-Eg95-EgA31融合基因疫苗。方法自行设计引物,从细粒棘球蚴包囊中分离原头节,超声粉碎后提取总RNA为模板,通过RT-PCR分别扩增Eg95和EgA31抗原编码基因,然后采用基因拼接法(gene SOEing)... 目的构建和鉴定细粒棘球绦虫(Eg)重组双歧杆菌(Bb)-Eg95-EgA31融合基因疫苗。方法自行设计引物,从细粒棘球蚴包囊中分离原头节,超声粉碎后提取总RNA为模板,通过RT-PCR分别扩增Eg95和EgA31抗原编码基因,然后采用基因拼接法(gene SOEing)剪接Eg95和EgA31,得到Eg95-EgA31融合基因,经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切,定向克隆到大肠杆菌-双歧杆菌穿梭表达载体pGEX-1λT中,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,构建重组质粒pGEX-Eg95-EgA31,抽提质粒进行双酶切鉴定,电穿孔法转化两歧双歧杆菌(Bifidobacteria bifidum,Bb),构建细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31融合基因疫苗,抽提质粒进行PCR扩增鉴定。结果RT-PCR扩增出约1 016bp的Eg95-EgA31融合基因;重组质粒用双酶切鉴定可切出预期大小片段,以具有氨苄青霉素抗性的rBb中抽提的质粒为模板进行PCR扩增可得到约1016bp的Eg95-EgA31融合基因片段。结论成功构建了细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31融合基因疫苗,为该疫苗的开发利用奠定了实验基础。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 重组Bb—Eg95-EgA31融合基因疫苗 构建 鉴定
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我国棘球绦虫及棘球蚴病研究进展 被引量:37
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作者 林宇光 卢明科 洪凌仙 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期616-627,共12页
目的回顾棘球绦虫及其棘球蚴病的当代研究成果,着重论述我国对本虫病原学和流行学的研究贡献。方法评阅有关本虫病的研究资料,分析、讨论、总结本病原虫种、终期和中间宿主动物,病原与宿主之间相互关系及其流行、传播规律。结论当代全球... 目的回顾棘球绦虫及其棘球蚴病的当代研究成果,着重论述我国对本虫病原学和流行学的研究贡献。方法评阅有关本虫病的研究资料,分析、讨论、总结本病原虫种、终期和中间宿主动物,病原与宿主之间相互关系及其流行、传播规律。结论当代全球有7种棘球绦虫,我国有5种,其中石渠棘球绦虫是青藏高原特有的新虫种。全球有20多种食肉兽类作为终期宿主,我国已知自然感染有5种,其中藏狐为宿主新记录。细粒棘球绦虫的中间宿主除大型家畜(牛、马、羊、猪)外,尚有多种鹿类有蹄动物和人体等。多房性棘球绦虫的中间宿主有9科26属46种啮齿类动物,我国已报道有6科10属14种啮齿动物为自然宿主,人体也会感染。此外绵羊、牦牛、猪等家畜虽报道有自然感染多房蚴,但病理学显示病肝组织纤维化,泡囊均无原头节,与人体感染的肝病变相似,拟是不正常的中间宿主或是多囊性的细粒棘球蚴感染。 展开更多
关键词 棘球绦虫 棘球蚴病 人兽共患病 病原学 流行病学 宿主动物
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多浪羊MHC-DQB1基因多态性与包虫病的抗性分析 被引量:11
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作者 申红 杜迎春 +5 位作者 贾斌 陈玉林 彭林泽 曾献存 田永芝 李海 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期17-22,共6页
目的探讨多浪羊MHC-DQB1基因多态性与包虫病的遗传抗性。方法采用PCR-RFLP方法,对101只包虫病(细粒棘球蚴病)阴性和64只阳性多浪羊MHC-DQB1第2外显子遗传多态性进行了检测,将包虫病阴性和阳性多浪羊的等位基因频率和基因型频率分别进行... 目的探讨多浪羊MHC-DQB1基因多态性与包虫病的遗传抗性。方法采用PCR-RFLP方法,对101只包虫病(细粒棘球蚴病)阴性和64只阳性多浪羊MHC-DQB1第2外显子遗传多态性进行了检测,将包虫病阴性和阳性多浪羊的等位基因频率和基因型频率分别进行比较分析。结果多浪羊的MHC-DQB1基因外显子2在MroxⅠ、ScaⅠ、Sac1I、TaqⅠ、HaeIII和MvaⅠ酶切位点存在丰富的多态性,分别检测出2、2、3、2、3、6种等位基因,3、3、5、2、5、14种基因型。结论发现MvaⅠD(P<0.01)可能为多浪羊包虫病的抗性基因,MvaⅠDD和MvaⅠCD(P<0.05)疑似为多浪羊包虫病的抗性基因型,而MvaⅠBZ(P<0.05)与包虫病易感性相关。 展开更多
关键词 多浪羊 MHC—DQB1 PCR-RFLP 多态性 包虫病
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广州市售蛙类裂头蚴感染及溯源调查 被引量:17
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作者 冯洁萍 洪青 +9 位作者 刘海娟 李小敏 龚莉蓉 杨震 杨伟明 梁雄发 郑如江 崔志才 王伟亮 陈代雄 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期88-91,共4页
目的了解广州市肉菜市场蛙裂头蚴感染和市售野生蛙来源地狗猫曼氏迭宫绦虫感染情况。方法从广州肉菜市场采集蛙类检查其肌肉中的裂头蚴,对市售野生蛙栖息地狗猫粪便中的曼氏迭宫绦虫卵进行检查;同时,在1 400名广州市民中开展了与裂头蚴... 目的了解广州市肉菜市场蛙裂头蚴感染和市售野生蛙来源地狗猫曼氏迭宫绦虫感染情况。方法从广州肉菜市场采集蛙类检查其肌肉中的裂头蚴,对市售野生蛙栖息地狗猫粪便中的曼氏迭宫绦虫卵进行检查;同时,在1 400名广州市民中开展了与裂头蚴感染相关的问卷调查。结果本次调查共检查虎纹蛙、沼水蛙、牛蛙、泽蛙4种,其裂头蚴的平均感染率约为11.75%(229/1 949)。其中,野生虎纹蛙感染率最高为51.92%(216/416);而养殖蛙类(包括虎纹蛙和牛蛙)感染率为0%(0/1 382)。狗和猫曼氏迭宫绦虫感染率分别为27.51%(63/229)和40.52%(47/116)。问卷调查结果显示市民对裂头蚴病的认知水平为41.04%,广州居民食用过蛙肉的比例约为59.86%;同时,食用蛙、蛇、猪、鸡、鼠和鸟等动物的肉、内脏或血液时,方式不当可能是市民感染裂头蚴的主要方式。结论广州肉菜市场销售的野生蛙类裂头蚴感染率较高,广东曼氏迭宫绦虫传染源猫狗的感染情况也较为严重,广州市民中亦存在一些与裂头蚴感染相关的生活方式和饮食习惯。 展开更多
关键词 广州 曼氏迭宫绦虫 感染 问卷调查
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《华支睾吸虫病诊断标准》解读 被引量:19
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作者 陈颖丹 诸廷俊 +3 位作者 许隆祺 郑彬 熊彦红 周长海 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期538-540,共3页
华支睾吸虫是被世界卫生组织确认的胆管癌Ⅰ类致癌物。2005年调查显示,我国华支睾吸虫病流行区的标化感染率为0.58%,估算感染人数为1 249万人,且全球华支睾吸虫感染者中有80%分布在中国大陆。原国家卫生部卫生政策法规司于2009年3月13... 华支睾吸虫是被世界卫生组织确认的胆管癌Ⅰ类致癌物。2005年调查显示,我国华支睾吸虫病流行区的标化感染率为0.58%,估算感染人数为1 249万人,且全球华支睾吸虫感染者中有80%分布在中国大陆。原国家卫生部卫生政策法规司于2009年3月13日颁布实施了《华支睪吸虫病诊断标准》(WS309-2009)。该标准由6章组成,包括适用范围、术语和定义、诊断依据、诊断原则、诊断标准和鉴别诊断。另附有3个资料性附录(病原学、流行病学和临床表现、酶联免疫吸附试验及鉴别诊断)和1个规范性附录(病原学检查)。该标准的颁布施行,为全国各级医疗机构和疾病预防控制机构诊断华支睾吸虫病提供了技术规范。本文结合我国华支睪吸虫病的流行情况,对《华支睪吸虫病诊断标准》(WS309-2009)的主要内容进行了解读,以促进该标准的宣传贯彻和实施。 展开更多
关键词 华支睾吸虫病 诊断 标准
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