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福建省钩虫感染分布现状及其影响因素分析 被引量：15
1
作者 李燕榕 李莉莎 +4 位作者 程由注 陈宝建 张榕燕 林开铅 方彦炎 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2008年第11期843-846,共4页
目的了解福建省人体钩虫感染的分布,分析其易感因素。方法采用改良Kato-Katz涂片法检查;采用1∶4的个体匹配方法,选择80例钩虫感染者和320例健康的同年龄组同性别的对照组进行病例对照研究,进行条件Lo-gistic回归模型分析。结果共调查20... 目的了解福建省人体钩虫感染的分布,分析其易感因素。方法采用改良Kato-Katz涂片法检查;采用1∶4的个体匹配方法,选择80例钩虫感染者和320例健康的同年龄组同性别的对照组进行病例对照研究,进行条件Lo-gistic回归模型分析。结果共调查20 195人,钩虫感染3 985人,感染率19.73%,女性(21.16%)高于男性(18.21%),轻度感染者占70.44%。感染高峰年龄为成年人。以闽南感染率最高(29.05%)。回归分析表明,家庭人均收入、饮用水源类型、便后洗手、喝生水和赤脚下地劳动等5个因素与钩虫感染有关(P<0.05)。结论福建省钩虫感染率呈总体下降趋势,但种植经济作物为主的地区仍居高不下,是钩虫防治重点;成年人是钩虫感染的主要人群;影响钩虫感染的主要危险因素是家庭人均收入、饮用水源类型、便后洗手、喝生水和赤脚下地劳动。 展开更多
关键词 钩虫 分布 病例对照研究 危险因素 回归分析
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美洲钩虫及十二指肠钩虫细胞色素C氧化酶1基因测序 被引量：7
2
作者 李铁华 詹斌 +5 位作者 JOHN M HAWDON 龚昕 肖树华 单强 冯正 PETER J HOTEZ 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期81-83,共3页
目的：比较美洲钩虫及十二指肠钩虫线粒体细胞色素Ｃ氧化酶１（ＣＯ１）基因序列，确定两种钩虫间ＣＯ１基因差异。方法：现场采集钩虫成虫样本，蛋白酶Ｋ消化抽提线粒体基因组ＤＮＡ，ＰＣＲ方法扩增ＣＯ１基因，ＤＮＡ测序及分析。结... 目的：比较美洲钩虫及十二指肠钩虫线粒体细胞色素Ｃ氧化酶１（ＣＯ１）基因序列，确定两种钩虫间ＣＯ１基因差异。方法：现场采集钩虫成虫样本，蛋白酶Ｋ消化抽提线粒体基因组ＤＮＡ，ＰＣＲ方法扩增ＣＯ１基因，ＤＮＡ测序及分析。结果：ＰＣＲ扩增获得约７００ｂｐ美洲钩虫及十二指肠钩虫ＣＯ１基因片段，其序列比较显示两种钩虫ＣＯ１基因同源性达８９．７％，存在特定的核苷酸差异。结论：ＣＯ１基因可作为鉴别两种人体钩虫虫种标记性基因。 展开更多
关键词 钩虫 DNA序列 美洲钩虫 十二指肠钩虫 CO1
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三苯双脒治疗钩虫感染效果 被引量：6
3
作者 田利光 程国金 +5 位作者 汪峰峰 郭俭 蔡玉春 汪天平 陈家旭 周晓农 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期202-203,共2页
目的了解三苯双脒治疗钩虫感染的效果。方法以横断面调查中发现的钩虫感染者为研究对象,随机分成实验组和对照组,分别给予三苯双脒和阿苯达唑治疗,观察两组钩虫感染转阴率及不良反应情况。结果共调查47例钩虫感染者,实验组23例,对照组2... 目的了解三苯双脒治疗钩虫感染的效果。方法以横断面调查中发现的钩虫感染者为研究对象,随机分成实验组和对照组,分别给予三苯双脒和阿苯达唑治疗,观察两组钩虫感染转阴率及不良反应情况。结果共调查47例钩虫感染者,实验组23例,对照组24例。三苯双脒和阿苯达唑治疗钩虫感染转阴率分别为95.65%和95.83%,不良反应率分别为8.70%和8.33%,差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论三苯双脒治疗钩虫感染的疗效与阿苯达唑相仿。 展开更多
关键词 钩虫 三苯双脒 阿苯达唑 治疗效果
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犬钩蚴固体培养基滤纸培养法 被引量：6
4
作者 许正敏 李智山 +3 位作者 孙莉 武小樱 陶永平 李明华 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期358-358,F0003,共2页
作者采用固体培养基滤纸培养法培养的犬钩蚴检出率高,操作简便、快速,优于传统的试管滤纸培养法。固体培养基由牛肉膏(3g),蛋白胨(10g),氯化钠(5g),琼脂(20g)及蒸馏水配制。该法可用于快速诊断钩虫病。
关键词 犬钩口线虫 体外培养 固体培养基 滤纸
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芬苯达唑对犬钩蚴的杀伤作用观察 被引量：4
5
作者 许正敏 李智山 +3 位作者 孙莉 武小樱 陶永平 李明华 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2008年第6期447-448,I0007,I0008,共4页
目的了解芬苯达唑对犬钩蚴的杀伤作用。方法将染虫犬粪置于固体培养基滤纸上,用竹签轻轻均匀按压,使之与滤纸充分接触,盖上平皿盖,放35℃培养(孵化)箱培养24h后加入药物与犬粪混匀,继续培养,分别与药物作用24、48h后用水洗沉淀法收集虫... 目的了解芬苯达唑对犬钩蚴的杀伤作用。方法将染虫犬粪置于固体培养基滤纸上,用竹签轻轻均匀按压,使之与滤纸充分接触,盖上平皿盖,放35℃培养(孵化)箱培养24h后加入药物与犬粪混匀,继续培养,分别与药物作用24、48h后用水洗沉淀法收集虫体,镜下观察钩蚴生长发育情况。实验设不加药对照组。结果培养24h～72h,对照组钩蚴明显长大,虫体自然弯曲、透明、轮廓明显、结构清晰;药物作用24h、48h后虫体僵直、轮廓模糊不清、内部结构消失。结论芬苯达唑对钩蚴有明显杀伤作用,妨碍虫体生长发育。 展开更多
关键词 犬钩蚴 芬苯达唑 效果
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钩虫抗原组份分析及其免疫反应性的研究 被引量：8
6
作者 闻礼永 邓珊珊 +1 位作者 任苏平 宋昌存 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 2000年第3期187-189,共3页
应用 SDS- PAGE和 EL IB对十二指肠钩虫第三期幼虫和成虫可溶性抗原蛋白组份及免疫反应性进行了比较研究。SDS- PAGE电泳结果显示 ,钩虫幼虫和成虫蛋白区带数分别为 2 1条和 19条。EL IB反应表明 ,钩虫幼虫和成虫特异性抗原组份为 40～ ... 应用 SDS- PAGE和 EL IB对十二指肠钩虫第三期幼虫和成虫可溶性抗原蛋白组份及免疫反应性进行了比较研究。SDS- PAGE电泳结果显示 ,钩虫幼虫和成虫蛋白区带数分别为 2 1条和 19条。EL IB反应表明 ,钩虫幼虫和成虫特异性抗原组份为 40～ 41k Da和 5 4～ 5 6 k Da。 展开更多
关键词 SDS-PAGE 钩虫 抗原 组份分析 免疫反应性
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十二指肠钩虫巨噬细胞迁移抑制因子基因的克隆和表达 被引量：3
7
作者 邵正 邓莉 +1 位作者 何庆丰 彭礼飞 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2012年第5期354-356,346,共4页
目的克隆、表达十二指肠钩虫巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)AduMIF-1基因。方法设计、合成特异引物,以十二肠钩虫成虫cDNA为模板,通过PCR扩增AduMIF-1基因。将获得的AduMIF-1编码序列克隆至原核表达载体pET32a,构建重组表达质粒pET32a/AduMI... 目的克隆、表达十二指肠钩虫巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)AduMIF-1基因。方法设计、合成特异引物,以十二肠钩虫成虫cDNA为模板,通过PCR扩增AduMIF-1基因。将获得的AduMIF-1编码序列克隆至原核表达载体pET32a,构建重组表达质粒pET32a/AduMIF-1。重组表达质粒转入大肠埃希菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达并分离纯化重组AduMIF-1。结果成功扩增到AduMIF-1全长编码序列,完整阅读框长度为360bp,编码119个氨基酸。构建了重组表达质粒pET32a/AduMIF-1,经IPTG诱导表达和分离、纯化,获得了重组AduMIF-1,融和蛋白分子质量单位约为33ku。结论本研究从十二指肠钩虫中分离到MIF基因,并成功进行了重组表达、分离与纯化,为进一步研究AduMIF-1的生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 十二指肠钩虫 巨噬细胞迁移抑制因子 克隆 原核表达
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大肠锯齿状腺瘤与传统腺瘤部分临床特征比较 被引量：3
8
作者 周智勇 韩英 +2 位作者 王鲁平 杨光之 曹建彪 《实用医学杂志》 CAS 2008年第6期923-925,共3页
目的:了解大肠锯齿状腺瘤是否存在不同于传统腺瘤的临床特征。方法:回顾我院病理科自2002年11月至2005年12月期间所有的大肠息肉切片,重新诊断锯齿状腺瘤,然后比较其与传统腺瘤在患者年龄、性别、病变部位、息肉大小及蒂部情况等方面有... 目的:了解大肠锯齿状腺瘤是否存在不同于传统腺瘤的临床特征。方法:回顾我院病理科自2002年11月至2005年12月期间所有的大肠息肉切片,重新诊断锯齿状腺瘤,然后比较其与传统腺瘤在患者年龄、性别、病变部位、息肉大小及蒂部情况等方面有无差异。结果:共检出1200张大肠息肉切片,其中锯齿状腺瘤29例,占全部息肉2.42%。比较传统腺瘤与锯齿状腺瘤的部分临床特征,发现锯齿状腺瘤患者平均年龄较传统腺瘤患者小[(56.0±16.6)岁vs(62.7±13.2)岁,P=0.0336];在直乙结肠,锯齿状腺瘤的发生率要高于传统腺瘤(62%vs35%,P=0.0252),而在降结肠则刚好相反(0vs25%,P=0.0068),其余部位二者构成比差异无显著性;在性别组成及息肉平均直径、蒂部情况二者差异亦无显著性(P>0.05)。结论:锯齿状腺瘤在临床较少见,其与传统腺瘤在发生年龄及发生部位方面存在差异,有必要对其发生的分子机制及预后深入研究。 展开更多
关键词 大肠 锯齿状腺瘤 传统腺瘤 临床特征
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利用COI基因序列鉴别赛加羚羊角与其代用品 被引量：9
9
作者 陈静 蒋志刚 《中国现代中药》 CAS 2013年第7期548-551,共4页
目的：用COI序列作为分子标记鉴定赛加羚羊角与其代用品山羊Capra hircus、绵羊Ovis aries、藏原羚Procapra picticaudata、蒙原羚P. gutturosa、鹅喉羚Gazella subgutturosa和藏羚Pantholops hodgsonii的角，为监管羚羊角市场贸易和控... 目的：用COI序列作为分子标记鉴定赛加羚羊角与其代用品山羊Capra hircus、绵羊Ovis aries、藏原羚Procapra picticaudata、蒙原羚P. gutturosa、鹅喉羚Gazella subgutturosa和藏羚Pantholops hodgsonii的角，为监管羚羊角市场贸易和控制赛加羚羊角走私提供技术支持。方法：从3种不同类型的赛加羚羊角以及藏原羚、蒙原羚、鹅喉羚样品中提取基因组DNA，设计巢式PCR体系，扩增349 bp COI片段，结合从GenBank中下载的序列构建赛加羚羊及其代用品的系统发育树。结果：保存期1～2年的新鲜赛加羚羊角中提取出的基因组DNA浓度比陈旧羚羊角、羚羊角片的高，而陈旧羚羊角不同位置提取出的基因组DNA浓度差别较小。NJ树上，7个物种分别单独聚群，形成独立的分枝，支持率都达到了99%以上。结论：DNA分子鉴定技术结合针对低浓度基因组DNA模板的巢式PCR反应体系客观准确地区分了赛加羚羊角和其易混代用品。本研究不仅为赛加羚羊角的分子鉴定技术建立了操作方法，而且提供了参考序列，简化了实际应用中的鉴定流程，对赛加羚羊贸易监管以及走私监控具有实践参考意义。 展开更多
关键词 羚羊角 贸易 代用品 基因组DNA COI 分子鉴定
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十二指肠钩虫金属蛋白酶组织抑制剂同源物Ad-TIMPL-1基因克隆及其原核表达 被引量：2
10
作者 邓莉 邵正 +2 位作者 许琴英 胡晶晶 彭礼飞 《热带医学杂志》 CAS 2011年第8期866-869,874,共5页
目的克隆十二指肠钩虫金属蛋白酶组织抑制剂同源物(TIMPL)Ad-TIMPL-1基因并进行原核表达。方法分别用3’RACE及RT-PCR技术从十二指肠钩虫成虫cDNA中扩增编码Ad-TIMPL-1的cDNA3’末端及5’末端序列;序列经拼接后进行初步生物信息学分析;... 目的克隆十二指肠钩虫金属蛋白酶组织抑制剂同源物(TIMPL)Ad-TIMPL-1基因并进行原核表达。方法分别用3’RACE及RT-PCR技术从十二指肠钩虫成虫cDNA中扩增编码Ad-TIMPL-1的cDNA3’末端及5’末端序列;序列经拼接后进行初步生物信息学分析;将Ad-TIMPL-1成熟肽编码序列克隆至原核表达载体pET-32a,构建重组表达质粒;重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)后,用IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表达情况。结果成功克隆获得了编码Ad-TIMPL-1的全长cDNA序列并登记到GenBank(accession no.EF495071);Ad-TIMPL-1完整阅读框为396bp,编码132个氨基酸残基组成的蛋白,含16个氨基酸残基组成的信号肽;成功构建了原核表达重组质粒pET-32a/Ad-TIMPL-1,并在大肠杆菌中得到了表达。结论本研究首先从十二指肠钩虫中克隆到了Ad-TIMPL-1基因并进行了原核表达,为进一步研究其生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 十二指肠钩虫 金属蛋白酶组织抑制剂 克隆 原核表达
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中国两种钩虫成虫的PCR虫种鉴定研究 被引量：7
11
作者 郑琪 沈海默 +2 位作者 陈家旭 胡薇 张皓冰 《国际医学寄生虫病杂志》 CAS 2012年第2期94-97,共4页
目的对中国流行的美洲钩虫和十二指肠钩虫进行PCR鉴别。方法通过对中国五省钩虫患者使用双羟萘酸噻嘧啶驱虫获得钩虫成虫，抽提单条美洲钩虫和十二指肠钩虫总DNA（各25条），用美洲钩虫和十二指肠钩虫线粒体DNA细胞色素氧化酶亚基1（mit... 目的对中国流行的美洲钩虫和十二指肠钩虫进行PCR鉴别。方法通过对中国五省钩虫患者使用双羟萘酸噻嘧啶驱虫获得钩虫成虫，抽提单条美洲钩虫和十二指肠钩虫总DNA（各25条），用美洲钩虫和十二指肠钩虫线粒体DNA细胞色素氧化酶亚基1（mitochondrial cytochrome oxidase1，C01）基因特异性引物（NaF—NaR，AdF—AdR）进行PCR扩增。对PCR产物进行电泳、测序。使用相同引物对日本血吸虫、鞭虫、犬钩虫DNA进行PCR扩增。结果25份美洲钩虫和25份十二指肠钩虫均能各扩增出约500bp和700bp的条带，2种PCR产物分别与美洲钩虫C01（GenBank登录号为AF303136．1）和十二指肠钩虫C01（GenBank登录号为AJ417718．1）基因片段序列一致性为99％和98％。但2对引物用于其他虫种DNA则无条带。结论引物NaF—NaR、AdF—AdR能够用于区分在中国流行的美洲钩虫和十二指肠钩虫。 展开更多
关键词 钩虫 分子标记物 鉴别
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犬钩虫核糖体蛋白L36及S4A全长cDNA克隆与蛋白特性分析 被引量：2
12
作者 彭礼飞 邓莉 +3 位作者 吴亚敏 胡晶晶 杨陈 甘伟琼 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2007年第5期353-356,共4页
目的克隆犬钩虫Ancylostoma caninum核糖体蛋白L36(AcaRPL36)及S4A(AcaRPS4A)全长cDNA序列,并对编码的蛋白特性进行分析,探讨它们在研究系统发育中的应用。方法运用3′RACE技术并结合RT-PCR技术先后分别从犬钩虫中克隆核糖体蛋白L36及S4... 目的克隆犬钩虫Ancylostoma caninum核糖体蛋白L36(AcaRPL36)及S4A(AcaRPS4A)全长cDNA序列,并对编码的蛋白特性进行分析,探讨它们在研究系统发育中的应用。方法运用3′RACE技术并结合RT-PCR技术先后分别从犬钩虫中克隆核糖体蛋白L36及S4A的部分序列,经拼接后获得全长cDNA序列。用BlastP搜索相似性序列及保守结构域,所获序列在GenBank中登记,并用Neighbor-Joining(NJ)法构建基于RPL36及RPS4氨基酸序列的系统发育树。结果AcaRPL36全长cDNA序列(GenBank登录号为EF490128)为390 bp,开放阅读框为315 bp,编码104个氨基酸组成的蛋白;AcaRPS4A全长cDNA序列(GenBank登录号为EF490129)为880 bp,开放阅读框为786bp,编码261个氨基酸组成的蛋白。RPL36及RPS4序列较保守,与Caenorhabditis elegans等的亲缘关系较近的生物,在系统发育树中的遗传距离也较近。结论首次获得犬钩虫RPL36及RPS4A,RPL36和RPS4可能作为分子指标应用于研究生物系统发育。 展开更多
关键词 犬钩虫 核糖体蛋白L36(RPL36) 核糖体蛋白S4A(RPS4A) 特性分析
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《钩虫检测及虫种鉴定标准钩蚴培养法》(WS/T 791—2021)解读 被引量：1
13
作者 邓艳 蒋甜甜 +3 位作者 陈伟奇 张雅兰 张红卫 赵东阳 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期279-281,285,共4页
《钩虫检测及虫种鉴定标准钩蚴培养法》(WS/T 791—2021)是我国第一个采用钩蚴培养法对钩虫进行检测和虫种鉴定的推荐性技术标准。该标准于2021年11月23日发布,自2022年5月1日起实施。为使各级疾病预防控制机构和医疗机构专业技术人员... 《钩虫检测及虫种鉴定标准钩蚴培养法》(WS/T 791—2021)是我国第一个采用钩蚴培养法对钩虫进行检测和虫种鉴定的推荐性技术标准。该标准于2021年11月23日发布,自2022年5月1日起实施。为使各级疾病预防控制机构和医疗机构专业技术人员更好地熟悉、掌握和应用该标准,本文从立项背景、编制过程、主要内容、注意事项等方面对该标准进行了详细解读。 展开更多
关键词 钩虫 钩蚴 培养 虫种鉴定 技术标准
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美洲钩虫胃、肠道感染伴重症贫血1例 被引量：1
14
作者 言敢威 舒衡平 +2 位作者 肖桂林 章洁 徐绍锐 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第5期441-441,共1页
关键词 美洲钩虫 肠道感染 重症 贫血 肠道寄生虫病 胃 慢性失血 感染患者 钩虫病 肠道内
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两种人体钩虫感染性幼虫的形态鉴别 被引量：3
15
作者 吴中兴 钱益新 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期359-360,共2页
人体十二指肠钩虫和美洲钩虫感染性幼虫的形态鉴别,对钩虫病流行病学调查及人体寄生虫学教学均具有实践意义。在实际工作中,掌握口矛(咽管矛)和鞘膜横纹的特征,就可以准确鉴别两种钩虫的感染性幼虫。
关键词 十二指肠钩虫 美洲钩虫 感染性幼虫 形态特征
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阿苯达唑 氟苯达唑和吡喹酮对犬钩蚴的作用 被引量：1
16
作者 许正敏 李智山 +3 位作者 孙莉 武小樱 陶永平 李明华 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2008年第4期296-297,321,共3页
目的了解阿苯达唑、氟苯达唑和吡喹酮对犬钩蚴的作用。方法将药物与标本充分混匀,置于固体培养基滤纸上,均匀按压后,盖上平皿盖。置35℃培养(孵化)箱培养24h,分别将药物与培养物钩蚴混匀,用水洗沉淀法镜下分别观察药物作用24、48h的沉... 目的了解阿苯达唑、氟苯达唑和吡喹酮对犬钩蚴的作用。方法将药物与标本充分混匀,置于固体培养基滤纸上,均匀按压后,盖上平皿盖。置35℃培养(孵化)箱培养24h,分别将药物与培养物钩蚴混匀,用水洗沉淀法镜下分别观察药物作用24、48h的沉淀物中钩蚴的生长发育情况。结果药物作用24、48h后,与对照组相比,阿苯达唑效果明显,钩蚴发育停止、轮廓模糊、内部结构不清消失。氟苯达唑几乎无作用。吡喹酮结果与对照组相同,可见钩蚴明显长大,体态自然、虫体透明、轮廓明显、结构清晰。结论阿苯达唑对犬钩蚴发育有明显的抑制作用,氟苯达唑和吡喹酮对犬钩蚴发育无抑制作用。 展开更多
关键词 犬钩口线虫蚴 阿苯达唑 氟苯达唑 吡喹酮
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阿苯达唑对小鼠肌肉内移行的犬钩虫幼虫的作用 被引量：1
17
作者 肖树华 任海南 +5 位作者 尤纪青 强慧琴 金群 赵连栋 李斌 张聪聪 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1994年第3期214-217,共4页
小鼠于接种犬钩虫第３期幼虫１０００条后１ｗｋ，ｉｇ阿苯达唑７５、１５０或３００ｍｇ／ｋｇ·ｄ，连给３ｄ时，自各组小鼠肌肉检获的幼虫数为２．７±１．７、２．０±１．５和１．０±１．０条，较对照组的２０５&... 小鼠于接种犬钩虫第３期幼虫１０００条后１ｗｋ，ｉｇ阿苯达唑７５、１５０或３００ｍｇ／ｋｇ·ｄ，连给３ｄ时，自各组小鼠肌肉检获的幼虫数为２．７±１．７、２．０±１．５和１．０±１．０条，较对照组的２０５±６８为少。小鼠ｉｇ阿苯达唑１５０ｍｇ／ｋｇ·ｄ×３，并于末次给药后不同时间，用高效液相色谱法测定其血浆和肌肉的阿苯达唑及其有效代谢物阿苯达唑亚砜的含量。结果，在血浆和肌肉中仅查见少量阿苯达唑。但是较高浓度的阿苯达唑亚砜（５．４—１０．５μｇ／ｍｌ）除在血浆中查见外，亦在肌肉中测得（２．２—４．６μｇ／ｇ）。肌肉中的阿苯达唑亚砜含量较高，有益于杀死在肌肉中移行的钩虫幼虫。 展开更多
关键词 钩虫幼虫 钩虫 阿苯达唑 小鼠
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pTWIN1-EgAgB8/3自剪切融合蛋白原核表达载体的构建及表达 被引量：1
18
作者 张瑞妮 吾拉木·马木提 +1 位作者 于春洋 法蒂玛·木特力甫 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期154-158,共5页
目的表达获得较纯的细粒棘球绦虫AgB8/3重组抗原(rEgAgB8/3)。方法根据GeneBank登陆号(AF362442)下载目的基因核酸序列,利用DNAman软件设计引物,对EgAgB8/3编码分泌型多肽片段的核酸序列进行PCR扩增,测序鉴定其正确性后定向连入原核表... 目的表达获得较纯的细粒棘球绦虫AgB8/3重组抗原(rEgAgB8/3)。方法根据GeneBank登陆号(AF362442)下载目的基因核酸序列,利用DNAman软件设计引物,对EgAgB8/3编码分泌型多肽片段的核酸序列进行PCR扩增,测序鉴定其正确性后定向连入原核表达质粒pTWIN1上,并转化至大肠杆菌ER2566,IPTG诱导表达CBD-intein1-EgAgB8/3融合蛋白后进行纯化,用SDS-PAGE电泳和western blot分析鉴定融合蛋白与目的蛋白rEgAgB8/3的表达量和纯度。结果成功克隆获得EgAgB8/3基因目的片段和具有蛋白自剪切功能的重组表达载体pTWIN1-EgAgB8/3,并鉴定其表达的融合蛋白主要以可溶形式存在;构建的重组载体中融合标签的几丁质结合域(CBD)和内含肽(intein1)分别使亲和层析纯化和融合标签自剪切一步完成。结论成功的构建重组表达载体pTWIN1-EgAgB8/3,获得高表达融合蛋白CBD-intein1-EgAgB8/3,并经简单后续处理即可获得含极少任何额外氨基酸的可溶性目的蛋白rEgAgB8/3,尽可能保证了其原有的结构和活性,为抗rEgAgB8/3特异性单克隆抗体的快速制备奠定了基础。 展开更多
关键词 棘球绦虫 EgAgB8/3 pTWIN1表达载体 诱导表达纯化 WESTERN BLOT
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犬钩虫C型凝集素AcaCTL-1基因的克隆及表达 被引量：1
19
作者 邓莉 金娴 +3 位作者 何庆丰 许琴英 吴亚敏 彭礼飞 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2010年第12期918-921,共4页
目的分离鉴定犬钩虫C型凝集素AcaCTL-1基因,并在大肠埃希菌中表达。方法根据EST序列设计引物,用RT-PCR及3′(RACE技术扩增获得AcaCTL-1全长cDNA序列,并对其进行初步生物信息学分析;将AcaCTL-1成熟肽编码序列克隆、连接到表达载体pET32a... 目的分离鉴定犬钩虫C型凝集素AcaCTL-1基因,并在大肠埃希菌中表达。方法根据EST序列设计引物,用RT-PCR及3′(RACE技术扩增获得AcaCTL-1全长cDNA序列,并对其进行初步生物信息学分析;将AcaCTL-1成熟肽编码序列克隆、连接到表达载体pET32a,构建重组质粒pET32a/AcaCTL-1;在大肠埃希菌BL21(DE3)中诱导表达重组蛋白,SDS-PAGE分析表达情况,Ni亲和层析纯化可溶性蛋白。结果成功克隆了AcaCTL-1全长cDNA序列,其最大开放阅读框由525 bp组成,预测编码174个氨基酸残基组成的蛋白,含17个氨基酸组成的信号肽,为C型凝集素家族蛋白成员;构建pET32a/AcaCTL-1重组质粒,并在大肠埃希菌中高效表达。表达产物多以包涵体形式存在,小部分为可溶性蛋白。结论成功克隆并表达了犬钩虫C型凝集素AcaCTL-1基因,为进一步了解AcaCTL-1的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 犬钩虫 C型凝集素 克隆 表达
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中药合剂和阿苯达唑对犬钩蚴的作用效果观察 被引量：1
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作者 许正敏 李智山 +3 位作者 温茂兴 孙莉 周乐翔 赵建忠 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2012年第5期357-359,共3页
目的了解中药合剂(贯众、槟榔、全蝎)和阿苯达唑对犬钩蚴的作用。方法将感染钩口线虫犬粪便(含钩虫卵)标本置于固体培养基滤纸上,用竹签轻轻均匀按压,使之与滤纸广泛、紧密接触,盖上平皿盖,放35℃培养(孵化)箱培养24h,水洗沉淀法分离钩... 目的了解中药合剂(贯众、槟榔、全蝎)和阿苯达唑对犬钩蚴的作用。方法将感染钩口线虫犬粪便(含钩虫卵)标本置于固体培养基滤纸上,用竹签轻轻均匀按压,使之与滤纸广泛、紧密接触,盖上平皿盖,放35℃培养(孵化)箱培养24h,水洗沉淀法分离钩蚴。将钩蚴沉淀物与不同药物分别置入青霉素瓶中混匀,为实验组,对照组不加药物。然后放35℃培养(孵化)箱继续培养24h,镜下观察实验组、对照组沉淀物中钩蚴的生长发育情况。结果对照组可见钩蚴明显长大,体态自然、虫体透明、轮廓明显、结构清晰。药物作用24h后,与对照组及全蝎药物组相比,中药合剂组虫体较小、细,且僵直,自然曲线消失,不光滑,无蛋白质的折光性;内部结构不清、粒沙状,可见损伤的虫体与残留的角质层有明显不规则空隙。阿苯达唑组虫体僵直,自然曲线消失,不光滑,无蛋白质的折光性,虫体内部结构不清,团块状,虫体凸凹不一,虫体萎缩。结论贯众、槟榔、全蝎合剂与阿苯达唑对钩蚴发育均有明显的抑制作用。 展开更多
关键词 犬钩口线虫钩蚴 中药合剂 阿苯达唑
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